ABCG2在胶质瘤组织中的表达及意义

背景与目的:三磷酸腺苷结合盒转运体成员ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member 2)是源于造血干细胞的标志物之一,其在神经胶质瘤发生发展相关组织和细胞中的表达情况还不清楚.本研究检测ABCG2在不同恶性程度人脑胶质瘤组织标本、裸小鼠移植瘤标本、体外细胞系球体和胶质瘤干细胞球体中的表达情况并分析其意义.方法:制作布有不同恶性程度人脑胶质瘤组织标本、裸小鼠移植瘤标本、体外细胞系球体和胶质瘤干细胞球体等的组织芯片,用免疫组化方法检测ABCG2在组织芯片中的表达情况.结果:在71例人脑胶质瘤组织标本中ABCG2的阳性率为26.8%,其中Ⅰ级11.1%,Ⅱ级8.0%,Ⅲ级43.5%,Ⅳ级42.9%;Ⅰ～Ⅱ级与Ⅲ～Ⅳ级相比差异具有统计学意义(X2=10.710,P=0.001).在神经干细胞、裸小鼠移植瘤、胶质瘤干细胞球体表达率为100%.在多种正常组织中亦有不同程度的表达.在胶质瘤临床标本中ABCG2阳性细胞呈亲血管分布.结论:ABCG2在胶质瘤干细胞、恶性程度高的胶质瘤组织标本和移植瘤组织中高表达,并且呈亲血管分布.     

高密度组织微阵列(组织芯片)技术及其在胶质瘤研究中的应用

高密度组织微阵列(high-density tissue microarrays，TMAs)又称组织芯片(tissue chips)，是近几年发展起来的新技术，它能将数十个、数百个乃至上千个组织标本按预先的设计整齐地排列在某一载体上而成的微缩组织切片，可使科研人员同时对几百甚至上千种正常或疾病以及疾病发展不同阶段的组织样本进行研究。     

应用组织芯片技术研究抑癌候选基因NDRG2在甲状腺肿瘤组织中的表达及其意义

目的:应用组织芯片技术分析抑癌候选基因NDRG2在人类甲状腺癌组织、甲状腺正常组织及甲状腺良性病变组织中的表达情况.方法:采用小鼠抗NDRG2单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究NDRG2在不同甲状腺组织的表达,并分析NDRG2在不同甲状腺组织中的表达差异.结果:免疫组化结果显示,甲状腺癌组织与甲状腺良性病变组织中DNRG2的表达相比较呈显著性差异(P＜0.05),甲状腺癌组织与正常甲状腺组织中DNRG2的表达相比较呈显著性差异(P＜0.05).甲状腺良性病变组织与正常甲状腺组织中DNRG2的表达相比较呈显著性差异(P＜0.05).结论:NDRG2在甲状腺癌组织中呈低表达,提示其可能对甲状腺癌的发生或发展有重要作用,这不仅为研究甲状腺癌的发病机制进一步提供了线索,而且对甲状腺癌的诊断和治疗具有重要意义.     

HDAC6与P21WAF1在胃癌组织中表达及意义

  目的   探讨HDAC6与P21WAF1在胃癌发生、发展中的作用及其相关性，为胃癌的早期诊断、治疗和判断预后提供依据。  方法   应用SP免疫组化法分别检测40例胃癌、30例癌前病变组及32例正常胃黏膜组中HDAC6及P21WAF1蛋白的阳性表达情况。  结果   HDAC6组织表达阳性率在胃癌，癌前病变及正常对照组依次降低，分别为65.0%，43.3%，15.6%（P < 0.01），P21WAF1组织表达阳性率在胃癌，癌前病变及正常对照组依次升高，分别为45.0%，63.3%和81.3%（P < 0.01）。HDAC6的表达在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著升高（P < 0.05）；P21WAF1蛋白阳性表达则相反，在分化程度越低、分期越高和淋巴结转移胃癌组织中显著降低（P < 0.05）。胃癌组织中HDAC6与P21WAF1的表达呈负相关（r=-0.495，P < 0.01）；癌前病变黏膜组织中HDAC6与P21WAF1的表达呈负相关（r=-0.451，P < 0.05）。  结论   HDAC6与P21WAF1的异常表达可能与促进胃癌的发生、发展和浸润转移有关。HDAC6可能通过下调P21WAF1的表达，导致并促进胃癌的发生发展。HDAC6和P21WAF1可能作为胃癌诊断和预后判断的指标及胃癌治疗的新靶点。      

应用组织芯片技术研究抑癌候选基因NDRG2在甲状腺肿瘤组织中的表达及其意义

目的：应用组织芯片技术分析抑癌候选基因NDRG2在人类甲状腺癌组织、甲状腺正常组织及甲状腺良性病变组织中的表达情况。方法：采用小鼠抗NDRG2单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究NDRG2在不同甲状腺组织的表达,并分析NDRG2在不同甲状腺组织中的表达差异。结果：免疫组化结果显示,甲状腺癌组织与甲状腺良性病变组织中DNRG2的表达相比较呈显著性差异（P〈0．05）,甲状腺癌组织与正常甲状腺组织中DNRG2的表达相比较呈显著性差异（P〈0．05）。甲状腺良性病变组织与正常甲状腺组织中DN—RG2的表达相比较呈显著性差异（P〈0．05）。结论：NDRG2在甲状腺癌组织中呈低表达,提示其可能对甲状腺癌的发生或发展有重要作用,这不仅为研究甲状腺癌的发病机制进一步提供了线索,而且对甲状腺癌的诊断和治疗具有重要意义。     

脑胶质瘤组织中Survivin细胞核表达与预后的关系

背景与目的:凋亡抑制蛋白Survivin与肿瘤的侵袭、放化疗抵抗及预后不良有关。Survivin蛋白具有细胞核和细胞浆两种表达形式;最新研究显示survivin细胞核表达对判断肿瘤的预后可能有更重要的意义。本研究旨在探讨脑胶质瘤中Survivin细胞核表达与肿瘤临床病理学特征及预后的相关性。方法:应用免疫组织化学方法和组织芯片技术,检测Survivin在88例胶质瘤组织中的核表达情况,结合临床资料进行统计学分析。结果:88例胶质瘤中,有24例(27.3%)出现Survivin细胞核阳性表达,其中病理Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中的阳性率分别为12.1%(4/33)和36.4%(20/55)(P=0.013),而Survivin细胞核表达与患者的年龄(P=0.053)、性别(P=0.376)、治疗前卡氏评分(Karnofskyperformancestatus,KPS)(P=0.486)以及临床分期(P=0.359)均不相关。Survivin细胞核表达阳性组与阴性组的5年总生存率分别为22.7%、47.7%(P=0.005),3年无瘤生存率为分别为13.7%、39.5%(P=0.015),Survivin细胞核高表达组的中位生存时间为14.9个月,低表达组为20.2个月(P=0.089)。结论:Survivin细胞核表达与胶质瘤的病理学分级有关,而且是胶质瘤预后的不利因素。     

Ras蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的 探讨Ras蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及与脑胶质瘤发生发展的关系.方法 应用免疫组化法检测56例脑胶质瘤组织中Ras蛋白的表达情况,并以正常脑组织和胶质细胞反应性增生组织作对照.结果 Ras蛋白在脑胶质瘤组织中高表达,且在高级别的脑胶质瘤组织中表达更高,而在正常脑组织和反应性胶质细胞增生组织中不表达.结论 Ras蛋白可能在脑胶质瘤的发生发展过程中起促进作用.     

组织芯片/免疫组化检测CDC2/CyclinB1在胶质瘤中的联合表达及意义

目的:探讨CDC2/CyclinB1在胶质瘤组织芯片中的表达及意义。方法:构建布有各级别人脑胶质瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞和相应的对照标本共118例的组织芯片,进行CDC2、CyclinB1的EnVision法免疫组化染色,分析其表达率、表达强度及联合表达情况。结果:CDC2、CyclinB1表达阳性率在71例人脑胶质瘤组织中分别为54.9%和52.1%。11例正常成人脑组织中分别为18.2%和9.0%,两者比较P<0.05。CDC2和CyclinB1的联合表达率为89.7%,两者表达呈正相关(r=0.90,P<0.01)。CDC2、CyclinB1的表达在不同级别人脑胶质瘤中也有差异(P<0.05),与病理级别分别呈正相关(r=0.982,P=0.018;r=0.959,P=0.041)。在体外培养的胶质瘤细胞球体、裸鼠皮下移植瘤、人胚胎脑和裸小鼠骨髓中均高表达,而脑肿瘤干细胞和神经干细胞球体未见表达。结论:CDC2和CyclinB1,随着脑胶质瘤恶性度增高而表达量增加;在神经干细胞、脑肿瘤干细胞低表达,而在SHG44和GBM细胞球体中高表达,表明其在肿瘤细胞分化抑制中起作用。这对进一步研究胶质瘤分子病因有重要价值。     

HDAC6在胃癌组织中的表达及意义

目的 检测胃癌及胃良性病变组织中组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）的表达及其与胃癌的发生及各种临床病理因素之间的关系。方法 采用免疫组织化学方法,检测40例胃癌组织及36例胃良性病变组织中HDAC6的表达,分析其与临床病理因素间的关系。结果 在40例胃癌组织中HDAC6呈高表达的有25例,而在36例胃良性病变组织中呈高表达的仅有10例,两者相比差异均有统计学意义（χ²=9.915,P=0.003）。HDAC6在胃癌组织中的表达与分化程度（χ²=7.116,P=0.022）、临床分期有相关性（r_s=0.442,P=0.001）,相反,HDAC6的表达和其他的临床病理因素无关,如年龄、性别、浸润深度、淋巴结转移。结论 HDAC6在胃癌组织中呈过表达状态,其表达水平可以作为判断胃癌患者恶性程度的一个潜在指标,也可以作为一个预后指标。     

应用组织芯片技术研究人脑胶质瘤中β-Catenin、p53、Ki-67的表达及其相互关系

目的:探讨人脑胶质瘤中β-Catenin、p53的表达及与细胞增殖的相关性。方法:利用组织芯片技术及免疫组化方法检测β-Catenin、p53、Ki-67在正常脑组织、低/高级别星形细胞瘤中的表达,并分析其相关性。结果:正常脑组织中β-Catenin、p53、Ki-67表达均为阴性。β-Catenin、p53、Ki-67表达均随胶质瘤级别增高而增高,与组织分级密切相关(P<0.01),β-catenin在Ⅰ级胶质瘤中阳性率33.3%(2/6),阳性部位为胞质;Ⅱ级阳性率28.6%(8/28),阳性部位为胞质;Ⅲ级阳性率60.0%(18/30),阳性部位为胞质,其中3例出现核阳性;Ⅳ级阳性率78.3%(18/23),其中8例出现核阳性。β-Catenin与p53表达呈正相关(P<0.01)。结论:β-Catenin的异常表达与胶质瘤的增殖活性增高有关,其与p53异常积聚可能相互协调促进胶质瘤的发生发展。应用组织芯片进行胶质瘤分子病理学研究较常规免疫组化方法有高通量、大样本以及经济快速等优势。     

乳腺癌组织CK5／6的表达及与预后关系的研究

目的：分析乳腺癌组织细胞角蛋白5／6（cytokeratin5／6,CK5／6）表达及其与患者预后的关系。方法：收集北京协和医学院肿瘤医院2000-01-01-2000-12-31手术的乳腺癌石蜡组织标本共307例,制作成乳腺癌组织芯片。采用免疫组织化学MaxVision二步法检测乳腺癌组织cK5／6蛋白的表达,应用SPSS15．0统计软件分析cK5／6与乳腺癌患者的年龄、月经、妊娠、哺乳、肿瘤大小、TNM分期、ER、PR和HER-2等因素之间的关系及在乳腺癌患者预后中的价值。结果：乳腺癌组织CK5／6阳性表达率为23．9％（68／285）。单因素生存分析显示,CK5／6蛋白的表达与患者的总生存率和无病生存率有关,P值分别为0．022和0．023;将分期、ER、PR、HER-2和CK5／6等指标进行Cox多因素生存分析,显示CK5／6是与总生存相关的独立的预后因素（P=0．023）,乳腺癌组织CK5／6蛋白高表达提示有较差的临床预后。结论：CK5／6高表达的乳腺癌患者较低表达患者有较差的预后,CK5／6是与乳腺癌总生存相关的独立预后因素。     

应用组织芯片技术研究人类胰腺癌中钙周期蛋白表达的生物学意义

目的 探讨钙周期蛋白（calcyclin）在胰腺癌中的表达及生物学意义。方法 用组织微阵列技术构建包含51例导管腺癌,6例慢性胰腺炎病人,6例正常胰腺组织的63点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中钙周期蛋白的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果 51例胰腺癌病人中,calcyclin阳性表达率为76．5％（39／51）（44/62）,与正常组比较calcyclin表达与胰腺癌显著相关（x^2=9．714,P=0．007）,而慢性胰腺炎时calcyclin亦有表达,但慢性胰腺炎组与正常组比较无明显相关性,同时胰腺癌组及慢性胰腺炎组间亦无明显相关性,calcyclin表达与年龄、性别、组织分化程度及TNM分期无明显相关性。结论calcyclin与胰腺癌发生发展有密切关系,对胰腺癌的早期诊断有益。     

组织芯片技术检测蛋白激酶C-α蛋白在肺癌组织中的表达

背景与目的:蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在癌变过程中的作用使其成为肿瘤治疗的潜在重要靶点,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中存在PKC-α的异常表达和活性增高。本研究探讨组织芯片技术检测PKC-α蛋白在肺癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学SP方法检测肺癌组织芯片中PKC-α蛋白的表达,其中肿瘤组织182例,癌旁组织18例。182例肿瘤组织中,NSCLC为160例,SCLC为22例;Ⅰ期102例,Ⅱ～Ⅲ期80例。结果:PKC-α蛋白在182例肺癌组织中的表达率为48.3%(88/182),而18例癌旁组织的表达率为16.7%(3/18)(P<0.01);PKC-α蛋白在NSCLC组织中的表达率(53.1%)明显高于在SCLC中的表达率(13.6%),差异有显著性(P<0.01);而PKC-α的表达在腺癌及鳞癌之间无明显差异(P>0.05);PKC-α的表达与患者的性别、年龄等因素无明显相关;PKC-α的表达与NSCLC特别是腺癌的临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与SCLC的临床分期、淋巴结转移无明显相关;PKC-α的表达与腺癌的分化程度密切相关(P<0.01),而与鳞癌的分化程度无明显相关。结论:在NSCLC组织中存在PKC-α的高表达,PKC-α的表达在NSCLC特别是腺癌的浸润、转移和发展中具有重要作用。     

应用组织芯片技术研究人类胰腺癌中PSCA的表达

目的检测PSCA在胰腺癌中的表达情况,探讨PSCA在胰腺癌发病中所起的作用。方法用组织芯片技术构建包含78例导管腺癌,12例慢性胰腺炎病人,10例正常胰腺组织的100点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中PSCA的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果78例胰腺癌病人中,PSCA阳性表达率为79．5％（62／78）,与正常组比较PSCA表达与胰腺癌显著相关（χ^2=15．81,P〈0．005）,与慢性胰腺炎比较PSCA亦与胰腺癌显著相关（χ^2=11．33,P〈0．005）;PSCA表达与年龄、性别、组织分化程度及TNM分期无明显相关性。结论PSCA阳性表达与胰腺癌相关,可能与胰腺癌的发生发展有着密切关系,但与胰腺癌的临床病理特型无关。     

乳腺癌组织芯片中BAG-1和p73及p16的表达及其意义

目的:检测BAG-1、p73和p16在乳腺癌、癌旁组织和正常组织中的表达,并讨论其意义。方法:利用组织芯片采用免疫组化DAKO Envision法检测乳腺癌、癌旁组织、正常组织中BAG-1、p73和p16的表达。结果:组织芯片中BAG-1、p73和p16在胞核、胞质均有表达,在正常组织中以胞质为主,但随着病变表达逐渐增加。在乳腺癌组织中的表达比乳腺癌癌旁组织、正常组织中高,差异有统计学意义,P<0·01;而p16的表达正好相反,差异亦有统计学意义,P<0·01。BAG-1、p73和p16的阳性率在Ⅰ级和Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌之间差异无统计学意义,P>0·05。结论:BAG-1、p73和p16表达的变化提示它们可能参与了乳腺癌的发生。     

Metalloproteinase expression and prognosis in soft tissue sarcomas

Background:Degradation of extracellular matrix bytumor-associated proteases can promote cell invasion and metastasis. Thisstudy assessed the prognostic role of MMP2, MMP9 metalloproteinases, and ofthe metalloproteinase inhibitor TIMP2, related to disease-free survival (DFS),in soft tissue sarcoma (STS) patients. Materials and methods:Level and distribution of MMP2, MMP9, andTIMP2 expression were evaluated on 73 biopsies by immunohistochemistry andimmunoblotting. Biopsies included 29 liposarcomas, 29 synovial sarcomas, and15 malignant peripheral nerve sheath tumors (MPNST).Association between DFS and overall survival with different variables wasassessed. Results:In terms of DFS, increased MMP2 reactivity and lack ofTIMP2 expression were significant for poor prognosis in all samples(P = 0.0005 and P = 0.006 respectively). MMP2correlated to histologic grade (P = 0.005). Lack of TIMP2expression was a poor prognostic factor for DFS in synovial sarcoma(P = 0.009), while MMP2 and MMP9 correlated with metastasis(P = 0.008 and P = 0.005, respectively) and grade(P = 0.001 and P = 0.04 respectively) inliposarcoma. Conclusions:These prognostic markers that influence growth andspread of tumor cells might be useful to define tumor aggressiveness and riskof the metastasic event.     

S100 A6蛋白在胃癌组织中的表达及生物学意义

目的：探讨钙结合蛋白S100A6在胃癌组织中的表达及生物学意义。方法：用组织微阵列技术构建包含51例胃癌、15例慢性萎缩性胃炎、15例正常胃黏膜组织的81点阵的石蜡组织芯片。免疫组化SP 法检测该芯片中S100A6蛋白的表达并测定其灰度值,分析其与胃癌的关系。结果：51例胃癌组织中,S100A6蛋白阳性表达率为80．4％（41／51）,平均灰度值为125．84±13．05;15例正常胃黏膜组织中未见表达;15例慢性萎缩性胃炎中阳性率为20．0％（3／15）,平均灰度值为115．86±3．00。胃癌组与正常胃黏膜组比较,P ＝0．001;胃癌组与慢性萎缩性胃炎组比较,P＝0．049;正常胃黏膜组与慢性萎缩性胃炎组比较,P＝0．14。S100A6蛋白的表达与年龄、性别及肿瘤组织分级、分期无明显关系。结论：S100A6蛋白与胃癌相关,可能与胃癌的发生及发展有密切关系。     

HOXC6在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨鼻咽癌患者组织中同源盒基因C6(HOXC6)的表达水平与临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测127例鼻咽癌患者的石蜡组织标本中HOXC6蛋白的表达,分析其表达与患者临床特征及预后的关系。在GEO公共数据库中下载鼻咽癌基因芯片数据集GSE12452和GSE13597,分析HOXC6基因在鼻咽癌和正常鼻咽组织间在转录水平上的表达差异;进一步采用GSEA分析方法探讨HOXC6基因在鼻咽癌中可能的作用机制。结果:HOXC6在鼻咽癌组织中表达上调,其水平表达与鼻咽癌的T分期、N分期和临床分期有显著的相关性(P<0.05),且高表达与鼻咽癌的不良预后显著相关(P<0.05)。COX多因素分析显示:N分期（P=0.022）和HOXC6表达水平（P=0.038）是影响鼻咽癌患者预后的独立危险因素。在基因芯片数据集中,HOXC6 mRNA在鼻咽癌组织中的表达水平明显高于正常鼻咽组织(P<0.05);GSEA分析提示,HOXC6基因高表达样本主要富集了细胞凋亡、TNF-α信号通路、IL6/JAK/STAT3信号通路等基因集,影响鼻咽癌的生物学过程。结论:HOXC6基因的表达与鼻咽癌患者的预后存在密切相关性,可作为其独立预后危险因素。     

CD44v3 levels in primary cutaneous melanoma are predictive of prognosis: assessment by the use of tissue microarray

Despite the use of sentinel node biopsy techniques, the search continues for other strategies to improve the accuracy of estimating prognosis in melanoma patients. Various biomarkers have previously been studied for use in this role, but none has yet achieved acceptance in routine practice. We have applied the novel technology of tissue microarray for the high throughput screening of a cohort of 120 primary cutaneous melanoma specimens for expression of the transmembrane glycoprotein CD44, splice variant 3 (v3), which has previously been implicated in tumor progression. A highly significant correlation between CD44v3 expression and Breslow thickness, Clark's level and patient age was demonstrated (Spearman correlation p < 0.001). Regarding clinical outcome, CD44v3 expression was shown to be significantly associated with better outcome (chi(2) = 7.2219, p = 0.0072). Furthermore, subgroup analysis revealed a sequentially improved survival probability associated with the intensity of CD44v3 staining (chi(2) = 12.5162, p = 0.0058). Analysis in a Cox multivariate model, however, did not show CD44v3 to be independently predictive of prognosis. The implications of these findings are considered, and the use of CD44v3 as a potential prognostic marker or a target for therapeutic manipulation are discussed.     

组织芯片应用于原发性鼻咽癌中p53表达的高通量分析

目的 :通过对不同临床分期鼻咽癌(NPC)中 p5 3蛋白表达的进一步研究 ,探讨高通量组织微阵列技术 (high throughputtis suemicroarray)应用于大规模临床标本高效筛查的可行性。方法 :用组织阵列仪 (tissuearrayer)制备连续系列分区排列的组织芯片 ,然后用 p5 3单抗免疫组织化学法检测一张组织芯片上 3 2 0例各类型的鼻咽活检组织标本中 p5 3蛋白表达 ,并分析 p5 3表达在不同鼻咽组织的分布状况及其与临床分期的相关性。结果 :在正常鼻咽黏膜组织、癌旁组织及癌组织中 p5 3蛋白的检出率分别为 0 ( 0 / 2 9)、16 7% ( 4 / 2 4)及 61 4% ( 164 /2 67) ,NPC组织中 p5 3蛋白表达率明显高于其他鼻咽非癌组织 ,P <0 0 0 1,其中癌旁 4例全为弱阳性 ,癌组织中 164例中弱阳性为112例 ,占 41 9% ( 112 / 2 67) ,而强阳性为 5 2例 ,占 19 5 % ( 5 2 / 2 67) ;p5 3表达与鼻咽癌的临床分期无显著相关性 ,P =0 0 78,而p5 3过表达 (强阳性 )却与鼻咽癌的临床中晚期密切相关 ,P =0 0 0 71。结论 :鼻咽癌中 p5 3蛋白的高频核积累提示p5 3蛋白功能的抑制在鼻咽癌的发生发展中起重要作用 ;应用组织芯片 (tissuechip)大规模高效筛查临床组织标本是可行性的 ,具有快速、方便、经济的特点