GC测定砷(Ⅲ)在小鼠血浆和血细胞中的浓度及药动学研究

目的 建立血浆和血细胞中砷(Ⅲ)的气相色谱测定方法,考察小鼠静脉注射砷(Ⅲ)溶液后血浆和血细胞中的药动学情况.方法 血浆样品经6%高氯酸去蛋白,二巯基丙醇(BAL)衍生化后,苯萃取,浓缩后用苯溶解后进样,血细胞样品则直接衍生化后经苯萃取、浓缩、再溶解后进行GC分析.采用该方法测定给小鼠静脉注射砷(Ⅲ)后血浆和血细胞中砷(Ⅲ)浓度,计算主要的药动学参数.结果 血浆和血细胞中砷(Ⅲ)分别在0.037 5～2.40和0.031 25～1.00 mg·L-1内线性关系良好,两者的t1/2α分别是7.178和2.531 min,t1/2β分别为108.731和146.236 min,AUC0-∞则分别为72.334和112.239 mg·min·L-1.结论 本实验建立的小鼠血样中砷的气相色谱测定法设备简单方便、方法灵敏可靠,砷在小鼠血浆和血细胞中的消除很快,没有蓄积的倾向,而血细胞中砷的浓度要高于血浆中的浓度.     

家兔单剂量静脉注射磺胺嘧啶的药动学

目的 分析磺胺嘧啶在家兔体内药动学过程.方法 20只家兔耳缘静脉快速推注磺胺嘧啶300 mg·kg-1,752紫外分光光度计比色法测定不同时间的血药浓度并计算药动学参数.结果 磺胺嘧啶在家兔体内药-时曲线符合二室模型,并表现为快慢两种速率类型.慢消除型药动学参数为:Vc=(0.24±0.09)L·kg-1,V=(0.62±0.22)L·kg-1,AUC=(0.11±0.05)g·h·mL-1,CL=(3.8±1.5)mL·min,t1/2α=(3.3±1.3)min,t1/2β=(122±21)min.快消除型药动学参数为:Vc=(0.19±0.10)L·kg-1,V=(0.45±0.17)L·kg1,AUC=(0.062±0.022)g·h·mL-1,CL=(6.0±2.4)mL·min-1,t1/2α=(2.1±0.9)min,t1/2β=(53±5)min.与慢消除型比较,快消除型AUC减少,CL增加,P＜0.05;t1/2β缩短,P＜0.001.结论 磺胺嘧啶在家兔体内药动学过程表现为快慢两种速率类型.快消除型AUC减少,CL增加,t1/2β缩短.本实验为磺胺嘧啶的临床给药方案制定提供了实验依据.     

FLU-HPLC测定复方吴茱萸巴布膏中阿魏酸血药浓度及药动学研究

目的 建立大鼠血浆中阿魏酸的FLU-HPLC测定方法,研究大鼠透皮给药复方吴茱萸巴布膏的药物动力学.方法 色谱柱Venusil ASB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(35:65:0.6),流速0.8 mL·min-1,激发波长352nm,发散波长467 nm.采用固相萃取法去除血浆中杂质,荧光检测-高效液相色谱法测定了血样中阿魏酸的浓度,并用3P97软件进行了药动学参数的计算.结果 方法的最低检测浓度为1.5 μg·L-1(S/N=3),绝对回收率范围为87.82%～96.51%.透皮给药后,药-时曲线符合一室模型,主要药动学参数A 457.569 μg·L-1,Ka 0.146 h-1,Ke 0.090 h-1,ρmax 81.581μg·L-1,tmax8.639 h,Lag time 0.290 h.结论 与传统方法比较,本方法灵敏度高、准确,更适用于阿魏酸血药浓度的测定及药动学研究.     

大鼠口服菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素测定方法的研究

目的 建立大鼠血浆中木犀草素和芹菜素总浓度的HPLC测定方法,并研究大鼠口服菊花提取物(CME)后其效应成分--木犀草素、芹菜素的药动学参数.方法 大鼠血浆在2 mol·L-1盐酸酸性条件下于80℃水浴水解1.5 h,水解液经乙酸乙酯萃取,萃取液减压抽干后溶解,经HPLC分析.采用Diamonsil ODS C18色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸(55:45)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温30 ℃.应用建立的方法测定大鼠口服200 mg·kg-1菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素质量浓度,并以3P87软件计算其药动学参数.结果 本法木犀草素和芹菜素的定量下限(LOQ)分别为0.045 5和0.145 mg·L-1;两者分别在0.045 5～8.09和0.145～25.7 mg·L-1内呈良好线性关系,r分别为0.995 7及0.997 4;两者低、中、高质量浓度的绝对回收率及方法回收率均在89%～107%内.日间及日内精密度RSD均小于＜11%.大鼠口服CME后木犀草素与芹菜素的Ka分别为1.72和0.237 h;t1/2(Ka)分别为0.440和3.21 h;t1/2α分别为0.774和4.82 h;t1/2β分别为6.64和8.65h;tmax分别为0.730和2.91 h;ρmax分别为2.43和9.00 mg·L-1;AUC分别为21.40和143 mg·h·L-1.结论 本研究建立的方法准确可靠、,操作简便重复性好,适用于测定血浆中木犀草素及芹菜素浓度.     

人血浆中吡柔比星HPLC测定方法及其在药动学研究中的应用

目的 建立人血浆中吡柔比星的HPLC测定方法,并用于吡柔比星化疗病人的药动学研究.方法 取血浆300 μL,以柔红霉素为内标,采用甲醇-氯仿(1:3)作为提取溶剂提取,有机相氮气吹干,残渣溶于60 μL流动相进样分析.色谱柱:Shimpack CLC-ODS柱(6 mm×15 cm,5 μm);流动相:乙腈-磷酸盐-冰醋酸(35:65:0.5);流速1 mL·min-1;荧光检测,激发波长480nm,发射波长560nm.乳腺癌化疗病人15 min内静注吡柔比星60 mg·m-2,在注射开始0,5,10 min、注射结束时、结束后5,10,30 min,1,2,4,8,12,24,48 h取血测定浓度,使用WinNonlin软件拟合,计算药动学参数.结果 本方法在5～500 μg·L-1内线性良好,相关系数r=0.999 4(n=6).高、中、低3个质量浓度质控样品批内误差的RSD为3.01%一4.87%,批间RSD为1.49%～4.39%,最低定量限为5 μg·L-1;药物代谢为三室模型,半衰期分别为(0.034±0.01),(0.858±0.416)和(18.81±4.47)h.结论 本方法采样量小,操作简便,为药动学和生物等效性研究提供了方法学基础.     

HPLC测定健康人体内齐多夫定的浓度及药动学研究

目的 建立HPLC-紫外检测方法测定健康人体中齐多夫定含量的方法,并用该法研究齐多夫定在健康人体内的药动学.方法 色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为水-乙腈(75∶25),检测波长265 nm.以替硝唑为内标,血样以固相萃取法进行预处理.结果 血浆样品线性范围20～4 000 μg·L-1(r=0.999 9),血浆样品萃取回收率均在90%以上,日内、日间的RSD皆小于3%.应用该法研究12名健康受试者po 400 mg齐多夫定胶囊后的药动学,其体内过程符合二室模型,其药动学参数为:tmax为(0.73±0.13)h,ρmax为(2 234.50±853.87)μg·L-1,用梯形法计算所得的AUC0-t为(3 358.75±572.97)μg·h·L-1,t1/2β为(1.43±0.49)h.结论 此方法准确,灵敏,适于药物分析,其药动学参数为临床合理用药提供理论依据.     

HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

目的 建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究.方法 以氟康唑为内标.血浆样品经预处理后,选用HypersilODS2色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),甲醇-水(49:51)为流动相,流速1.0 mL·min-1,室温260 nm处测定.结果 黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L-1,最低定量浓度为5μg·L-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均＜12%.黄豆苷元药动学参数t1/2为(3.863±0.983)h,ρmax (192.261±115.077)μg·L-1,tmax(0.900±0.409)h,AUC0～12(490.839±162.855)μg·h·L-1,AUC0～∞(535.279±163.190)μg·h·L-1.结论 本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究.     

RP-HPLC测定人血浆中卡托普利浓度及其药动学

目的 建立测定人血浆中卡托普利的反相高效液相色谱法,研究其在人体内的药动学规律及特点.方法 采用美国Waters公司高效液相色谱仪.色谱柱Hypersil柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸(45:55:0.2),流速1.0mL·min-1;检测波长:257 nm.结果 卡托普利血药浓度线性范围为6.25～800μg·L-1,最低检出浓度为6.25μg·L-1;方法回收率为105.8%;日内、日间RSD分别为4.40%～7.88%和2.87%～9.34%.结论 本法灵敏、准确,可用于卡托普利临床药动学研究.     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中阿立哌唑的浓度

目的 建立测定人血浆中阿立哌唑的HPLC-MS,并用于研究阿立哌唑在精神分裂症患者体内的药动学.方法 血浆样品中加入内标艾司唑仑,用叔丁基甲醚萃取.色谱柱为Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液-甲酸(42∶58∶0.1),流速0.35 mL·min-1.采用电喷雾电离源正源(ESI+),选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z 448,450(阿立哌唑)和m/z 295(内标).结果 阿立哌唑在19.90～1 119.60 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低定量质量浓度为1.00 μg·L-1(S/N=10),方法回收率在97.2%～103.5%之间,日内与日间RSD均小于8.0%(n=5).结论 该方法灵敏度高,结果准确,适用于治疗剂量阿立哌唑体内药动学的研究.     

苦参素固体脂质纳米粒的药动学和体内分布

目的 研究苦参素固体脂质体纳米粒(SLN)的动物体内行为,探讨苦参素SLN作为肝靶向给药系统的可行性.方法 采用“乳化蒸发-低温凝固“法制备苦参素SLN,平均粒径104 nm,表面电位-32.6 mV,包封率为81.0%.将苦参素SLN悬液与苦参素水溶液分别大鼠尾静脉注射100 mg·kg-1,于不同时间尾静脉取血,测定血中苦参素浓度,提取药动学参数.将苦参素SLN悬液与苦参素水溶液小鼠尾静脉注射100 mg·kg-1,于不同时间取血、心、肝、脾、肺、肾,测定各组织中药物浓度,计算靶向指数、靶向效率及相对靶向效率等参数.结果 大鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素SLN悬液100 mg·kg-1后,药动学结果显示,体内过程符合二室开放模型,与苦参素水溶液相比,苦参素SLN的t1/2β延长5.5倍,AUC增加了3.9倍.小鼠尾静脉注射苦参素水溶液和苦参素SLN悬液100 mg·kg-1后,体内分布结果显示:苦参素SLN给药后在肝和血中的分布较水溶液有明显提高,30 min时药物在肝中的浓度是水溶液的12倍,相对靶向效率为360%.结论 SLN明显改变了苦参素的药动学行为,使消除变慢,生物利用度增加.苦参素SLN具有明显趋肝性,可靶向于肝,延长药物在血和肝中的滞留时间.     

LC/MS/MS法测定兔血浆中的盐酸伪麻黄碱及美敏伪麻溶液的药动学研究

目的建立兔灌胃美敏伪麻溶液后血浆中的盐酸伪麻黄碱的LC/MS/MS测定方法,并研究该制剂的药动学。方法兔灌胃给药后采集各时点血样,经甲醇沉淀蛋白法处理,应用HPLC-ESI-三级四极杆串联质谱测定盐酸伪麻黄碱的浓度,采用统计矩分析方法计算药动学参数。结果盐酸伪麻黄碱的线性范围为1～300 ng.mL-1（r=0.995 5）,回收率为97.5%～108.5%,RSD均小于10%;药动学参数：t1/2为（1.8±0.4）h,Cm ax为（26.6±9.6）μg.L-1,Tm ax为（0.6±0.3）h,AUC0-t为（82.8±24.6）μg.h.L-1。结论建立的方法灵敏、准确、快速、特异性强,适用于盐酸伪麻黄碱的血药浓度测定和药动学研究。     

Beagle犬血浆中齐墩果酸浓度的测定

目的 建立测定Beagle犬血浆中齐墩果酸的HPLC-MS测定法,以进行齐墩果酸滴丸的生物利用度和药动学研究.方法 采用HPLC-MS,以Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为20 mmoL·L-1醋酸铵-乙腈(24∶76),流速0.3 mL·min-1,检测波长为210 nm.结果 Beagle犬血浆内源性物质不干扰样品的测定,血浆中齐墩果酸浓度在3.88～240.00 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测浓度为3.88 μg·L-1;方法平均回收率大于85%;平均提取回收率大于80%;日内和日间RSD均小于10%.结论 所建立的测定方法准确可靠,符合生物样品分析要求.     

α细辛脑巴布剂在家兔体内药动学研究

目的 建立测定α细辛脑巴布剂中α细辛脑在家兔体内血药浓度的HPLC方法并考察其在家兔体内的药动学参数.方法 采用消炎痛为内标,血浆经乙醚提取,采用C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以醋酸盐缓冲液(pH 4.5)-乙腈-四氢呋喃(40∶60∶5)为流动相,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为313 nm,所得数据用3P97软件中的统计程序处理,求出有关的药动学参数.结果 血浆中α细辛脑在0.05～2 mg·L-1内线性关系良好(r2=0.995 4).平均方法回收率均大于90%,日内、日间精密度均小于5%.结论 本方法简便、准确灵敏、重现性好,可用于α细辛脑的血药浓度分析及药动学研究.     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中水苏碱

目的 应用LC/ESI-ITMS检测大鼠血浆中水苏碱的含量.方法 取血浆样品0.2mL,经3 mL乙腈-甲醇(90:10)混合液沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-水-甲酸(70:30:1,pH 3.5)为流动相,用Agilent zorba Extend-C18色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测检测.用于定量分析的离子反应分别为m/z 144→m/z 84(水苏碱)和m/z166→m/z 148(内标,麻黄碱).结果 水苏碱线性范围为0.02～5.00 mg·L-1,定量限20 μg·L-1,最低检测限为1 μg·L-1,日内、日间测定值RSD小于5.4%.在大鼠体内药动学研究中,应用此法测定了6只大鼠给予盐酸水苏碱后血浆中水苏碱的浓度.结论 该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内水苏碱的药动学研究.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦

目的 建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度.方法 50μL血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理后,以乙腈-水-甲酸(90:10:0.25)为流动相,Zorbax SB C18柱分离,通过电喷雾离子源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行检测.结果 测定血浆中厄贝沙坦方法的线性范围为2.0～5 000 μg·L-1定量下限为2.0 μg·L-1.日内、日间精密度(RSD)均小于8.3%,准确度(RE)在±4.1%以内.厄贝沙坦和内标替米沙坦的回收率分别为90.9%和90.4%;每个样品测试时间仅为3.6 min.应用此法研究了18名健康受试者单剂量po 150 mg厄贝沙坦片后的药动学特点.结论 该法选择性强,灵敏度高,适用于厄贝沙坦的临床药动学研究.     

山楂叶总黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的 建立HPLC同时测定大鼠血浆中山楂叶总黄酮(HLF)的两个主要有效成分4“-O-牡荆素葡萄糖苷(GLV)和2“-O-牡荆素鼠李糖苷(RHV)的浓度,并用此方法对HLF在大鼠体内的药动学进行研究.方法 大鼠尾静脉注射HLF,于不同时间点断尾取血,甲醇直接沉淀蛋白,HPLC测定GLV和RHV的血药浓度.色谱柱为DiamonsilTMC18(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(19.4∶1∶1∶78.6),检测波长为330 nm.结果 样品中GLV和RHV被成功分离,线性范围分别为0.23～138.42 mg·L-1(r=0.999 0)和0.36～218.49 mg·L-1(r=0.999 5).在测定浓度范围内,GLV和RHV的日内精密度(n=5)分别为0.69%～3.91%和0.51%～3.89%;日间精密度(n=5)分别为1.09%～5.03%和1.45%～2.16%;平均方法回收率(n=5)分别为(96.70±5.29)%～(102.20±1.15)%和(96.39±1.44)%～(103.64±2.23)%;平均提取回收率(n=5)分别为(92.68±2.19)%～(95.74±1.19)%和(93.45±1.85)%～(99.26±2.85)%.结论该分析方法简便快速,专属灵敏,精密度和回收率高,可满足药动学研究需要.静注HLF 10～40 mg·kg-1,GLV和RHV在大鼠体内药动学特征相似,均符合三室开放药动学模型.     

盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶在兔眼房水内的药动学

目的 研究盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的药动学行为,考察该制剂的释药特征.方法 以高效液相色谱法测定盐酸左氧氟沙星即形凝胶给药后不同时间兔眼房水中的药物浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数.结果 盐酸左氧氟沙星即形凝胶在兔眼内的吸收和消除过程呈线性动力学特征,其t1/2(ke),MRT,tmax,ρmax,AUC0-T和AUC0-∞分别为(118.76±7.21)min,(208.40±13.46)min,(34.07±5.02)min,(2.56±0.14)mg·L-1,(432.05±13.55)mg·min·L-1及(501.52±25.24)mg·min·L-1.结论 盐酸左氧氟沙星眼用即形凝胶显著延长药物在眼部的滞留时间,可用之实现长效治疗的目的.     

石杉碱甲微球注射剂动物体内释药模式和改善记忆的药效学研究

目的 建立石杉碱甲微球的体内释药模式,并经动物体内试验验证其药效持续作用.方法 采用HPLC检测法测定给药后动物皮下注射部位微球残余药量,间接检测微球的体内释药速度;采用小鼠记忆获得障碍和记忆再现障碍研究药物改善学习记忆的作用.结果 测定方法的平均回收率为99.3%,日内、日间RSD小于2.74%,在0.5～20 mg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为5 μg·L-1.石杉碱甲微球首日释药16.7%后能缓慢释放14 d.药效学结果显示,在由东莨菪碱所致的小鼠记忆获得障碍和体积分数45%乙醇所致的小鼠记忆再现障碍的研究中,石杉碱甲微球制剂显示与药动学有效期内相吻合的改善学习记忆的作用.于给药24 h后即显示明显疗效,其作用维持至给药后14 d,至16～19 d时作用明显减弱.100 μg·kg-1·d-1的石杉碱甲微球注射剂的药效强度与需每天用药的石杉碱甲口服制剂相当.结论 石杉碱甲微球制剂可采用一次给药的方式,通过每日恒量释放维持有效血药浓度达14 d,发挥其药效作用.     

莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学研究

目的研究莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学。方法采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度。色谱柱:L ichrospher-5-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-5%醋酸水(45∶55);体积流量:1 mL/m in;检测波长:420 nm。结果姜黄素在6.5~104μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5)。平均回收率为98.5%,RSD为2.41%(n=5)。采用药动学计算程序处理,姜黄素的药动学参数:ka为0.53/h、ke为0.10/h、t1/2ka为1.32 h、t1/2k为6.89 h、tpeak为3.89 h、Cm ax为93.15 ng/mL、AUC为1 369.38 ng/mL。结论本法稳定、简单、可靠,可用于姜黄素的血药浓度分析及其药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定人血浆和尿中丹皮酚浓度

目的 建立测定血浆、尿样本中丹皮酚含量的反相高效液相色谱法.方法 血浆样品经沉淀蛋白,尿样经稀释后,以乙腈-0.1%磷酸pH 3.5(55:45)为流动相,经Diamonsil C18柱分离,进行色谱分析.结果 本方法丹皮酚的血浆浓度在20～1 000μg·L-1,尿中浓度在20～800μg·L-1内线性关系良好,方法回收率在81.0%～85.0%之间,日内、日间RSD均小于11.0%.结论 本方法简便、快速、灵敏度高,可用于丹皮酚的药动学研究.