GM2神经节苷脂沉积症发病的分子机理研究

目的：探讨GM2神经节苷脂沉积症发病的分子机理。方法：培养患者皮肤成纤维细胞，进行酶学、Western印迹杂交和免疫细胞化学分析。结果：4例GM2神经节苷脂沉积症患者成纤维细胞内β-氨基已糖苷酶（hexosaminidase,Hex）活性均显著降低，分别为正常人的12％、3％、15％和6％；两例Sandhoff病Hex成熟的α、β-亚基（αm、βm）明显减少，但婴儿型与成年型减少的程度不同，1例Tay-Sachs病只有αm明显减少，1例GM2激活蛋白缺陷症αm、βm与正常人无差异；4例患者成纤维细胞内均有不同程度的GM2神经节苷酯的堆积。结论：GM2神经节苷脂沉积症的发病与HEXA、HEXB、GM2A基因突变引起相应蛋白表达、成熟障碍有关。     

神经节苷脂在神经系统发育过程中的作用

1935年，Klenk首先在大脑灰质的Ganglionzellen细胞中发现了一种新物质，命名为ganglioside-神经节苷脂，其种类繁多，至今已分离鉴定出70余种。神经节苷脂是一组含有唾液酸的鞘糖脂，分子由疏水的神经酰胺和亲水的含唾液酸的寡糖链组成，广泛分布于脊椎动物各组织的细胞膜上，其中以神经系统含量最为丰富。通常根据唾液酸数目不同分为GM(单唾液酸神经节苷脂)、GD(二唾液酸神经节苷脂)和GT(三唾液酸神经节苷脂)等。又根据糖基数目不同将GM分为GMl(含4个糖基)、     

神经节苷脂（GM1）治疗新生儿胆红素脑病疗效观察

目的观察应用神经节苷脂治疗新生儿胆红素脑病的疗效。方法观察新生儿胆红素脑病63例,其中Ⅰ型（亚临床型）18例,分为治疗Ⅰ组（10例）和对照Ⅰ组（8例）,Ⅱ型（临床型）45例核黄疸中,死亡6例,放弃治疗4例,剩下的35例又分为治疗Ⅱ组19例和对照Ⅱ组16例,其中治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组急性期给予神经节苷脂GM1治疗,剂量20mg/d,每日一次,10天为一疗程,与给予脑蛋白水解物的对照Ⅰ组和对照Ⅱ组比较,住院期间进行疗效判断,出院后由儿童保健专人进行随访,对各组后遗症率进行统计分析。结果神经节苷脂GM1治疗组的有效率与后遗症发生率均优于对照组。结论神经节苷脂使用对新生儿胆红素脑病可增加干预效果,减少后遗症的发生。     

微生物法制备单唾液酸四己糖神经节苷脂的机制和方法

<正>单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)是含有单个唾液酸的酸性鞘糖脂,被认为是除脑源性神经生长因子和层粘蛋白外,对神经系统损伤具有显著临床疗效的生物药物。GM1主     

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合蛋白表达的研究

目的：获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位（HspA）的融合蛋白。方法：PCR扩增ltB和hspA基因，依次构建至表达载体pIM-1，转化大肠杆菌，SDS-PAGE、免疫印迹分析目的蛋白表达情况。采用GM1ELISA和D( )-半乳糖亲和层析方法检测重组LTB-HspA融合蛋白LTB组分与GM1神经节苷脂结合活性。结果：重组LTB-HspA融合蛋白表达量最高可达细菌总蛋白的25％。免疫印迹检测结果证实为重组LTB-HspA融合蛋白。GM1ELISA和D( )-半乳糖亲和层析方法检测结果证实重组LTB-HspA融合蛋白具有与GM1神经节苷脂结合的活性。结论：LTB-HspA融合蛋白的表达研究，为研制幽门螺杆菌分子内佐剂疫苗打下了基础。     

空肠弯曲菌HB9313及galE变异株抗血清诱导周围神经病变的差异

格林 巴利综合征(Guillain Barrésyndrome, GBS)是一种常见的周围神经病。其发生机制尚未阐明,较多资料显示 GBS病人血清中存在多种神经节苷脂抗体,并发现轴索型GBS与空肠弯曲菌感染及抗神经节苷脂三者间存在密切关系〔1〕,故空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni, CJ)感染介导的自身体液免疫反应在轴索型GBS发病中的作用已引起广泛关注。我们前期研究发现,经全身免疫,亲代株 CJHB9313(血清型O∶19)可诱导动物产生高滴度GM1抗体及坐骨神经病理损伤(待发表);galE 变异株因脂寡糖(lipo oligosaccharide,LOS)上丧失神经节苷脂样表…     

神经节苷脂GM1及其脑保护机制

神经节甘脂是一组含有唾液酸的鞘糖脂,神经节甘脂GM1(即单唾液酸四已糖神经节甘脂)是哺乳类神经节甘脂的主要种类.神经节甘脂GM1具有一定的脑保护作用,关于探讨其脑保护作用及可能机制的研究很多,本文仅就目前较为公认的脑保护机制作一简述.     

神经节苷脂对损伤胎鼠背根神经节的保护作用

目的观察神经节苷脂(GM1)对受损伤胎鼠背根神经节(DRG)神经元形态改变的影响,探讨其可能的保护作用。方法选择胎龄为15d的SD大鼠为研究对象,获取DRG神经元并进行体外分散培养,培养48h后,随机分为对照组、谷氨酸损伤组和谷氨酸损伤+GM1保护组,继续培养12h。终止培养后,观察各组神经元的形态结构改变,用MTT法鉴定细胞的存活率。结果对照组DRG神经元细胞贴壁呈单层散在分布,少部分出现细胞聚集现象,突起较长且互相交织形成网状。谷氨酸损伤组DRG神经元细胞聚集现象明显,神经元突起变短、断裂甚至消失。谷氨酸损伤+GM1保护组DRG神经元细胞部分呈簇状聚集,部分呈单个散在分布,突起仍然相互交织。MTT结果显示谷氨酸损伤+GM1保护组细胞存活率高于谷氨酸损伤组。结论神经节苷脂可以影响损伤胎鼠DRG神经元的形态改变,对胎鼠背根神经节神经元具有一定的保护作用。     

神经节苷脂的研究及临床应用

神经节苷脂是存在于细胞质膜表面的一种含唾液酸的神经鞘糖脂分子，与细胞的多种功能密切相关。本文主要综述了神经节苷脂的分子结构特点、分类、生物学作用，尤其是对神经系统促生长作用和营养作用的动物实验研究、临床应用研究成果。     

waaF空肠弯曲菌变异株神经节苷脂表位的改变

目的:探索waaF空肠弯曲菌(CJ)变异株是否失去神经节苷脂模拟结构,不再能诱导抗神经节苷脂抗体产生,为CJ诱发Guillain-Barr啨综合征的分子腄饫砺厶峁┲ぞ荨7椒?将26只日本大耳兔随机分为CJ亲代株组(10只)、waaF变异株组(10只)、对照组(6只),分别用弗氏佐剂加入亲代株CJ、waaF变异株及生理盐水,对三组动物皮下注射免疫。ELISA动态检测三组动物免疫前及免疫后2周和4周血清中CJ脂寡糖(LOS)及多种神经节苷脂(GM1、GD1a、GD1b、GD3、GT1b)抗IgG抗体水平的变化。结果:免疫后2周,亲代株及waaF变异株组动物血清抗LOS-IgG抗体滴度(0.758±0.136及0.744±0.125)较免疫前(0.250±0.101及0.226±0.083)明显增高(P0.05),4周进一步增高为(0.971±0.214及0.975±0.172),亲代株及waaF变异株两组间无明显差异(P0.05),对照组免疫前后LOS-IgG抗体水平无明显改变;免疫后2周,亲代株组动物血清抗GM1-IgG、GD1a-IgG及GT1b-IgG抗体水平(0.661±0.290、0.487±0.041及0.457±0.071)较免疫前(0.173±0.081、0.151±0.038及0.182±0.101)明显增高(P0.05),4周进一步增高为(0.984±0.025、0.541±0.178及0.574±0.156),waaF变异株组及对照组免疫后未见神经节苷脂抗体增高。结论:CJ的LOS外核上神经节苷脂样结构是诱导抗神经节苷脂抗体产生的关键结构,为CJ感染后GBS的分子模拟机制提供证据,waaF变异株丧失了多种神经节苷脂模拟的抗原表位,但保留LOS免疫原性,可能成为安全减毒活菌苗的候选株。     

人肝细胞癌神经节苷脂及其单克隆抗体的制备

以正常人肝、肝细胞癌及癌周肝组织为样品,制备神经节苷脂并经唾液酸定量和高效硅胶薄板层析分析发现:人肝癌组织中GM1、GD3、GD1a和GQ1b的比例增高数倍,而正常主要组织的GM3相对减少,样品的个体差异明显。采用混合肝癌组织膜片     

神经节苷脂对APP/PSI双转基因AD小鼠海马caspase-3和iNOS表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂对AD小鼠学习记忆能力及海马caspase-3与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂(GM1)组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法Western blot方法检测各组小鼠海马caspase-3与iNOS的表达变化。结果 AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显低于对照组(P0.05),而GM1组小鼠明显高于AD模型组(P0.05)。AD模型组小鼠海马caspase-3与iNOS蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于GM1组小鼠和对照组小鼠(P0.05)。结论下调AD小鼠海马区caspase-3与iNOS的表达可能是GM1改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

神经节苷脂对体外培养一氧化碳损伤少突胶质细胞Nogo-A的影响

背景：Nogo-A蛋白是表达于少突胶质细胞的神经元轴突生长抑制因子,推测其可能与一氧化碳中毒后迟发性脑病关系密切。单唾液酸四己糖神经节苷脂可改善一氧化碳中毒所致的神经系统损害,其作用是否与少突胶质细胞上Nogo-A蛋白有关目前尚无报道。 目的：从少突胶质细胞Nogo-A的角度探讨神经节苷脂对神经细胞一氧化碳损伤后保护的机制。 方法：体外培养大鼠视神经少突胶质细胞。实验分为3组：对照组、一氧化碳组、单唾液酸四己糖神经节苷脂组。后两组在含有体积分数1%一氧化碳的密室中培养,单唾液酸四己糖神经节苷脂组预先在培养液中加入5 mg/L单唾液酸四己糖神经节苷脂。采用RT-PCR及细胞免疫组织化学观察6,24,48 h少突胶质细胞Nogo-A mRNA及其蛋白质的表达。 结果与结论：一氧化碳组6,24及48 h各间点Nogo-A mRNA积分吸光度比值、Nogo-A蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P < 0.05);一氧化碳处理后24 h,单唾液酸四己糖神经节苷脂组Nogo-A mRNA积分吸光度比值、蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P < 0.05),但低于一氧化碳组(P < 0.05);Nogo-A mRNA水平与蛋白质表达具有线性相关性(r = 0.95)。提示一氧化碳本身可使少突胶质细胞进入活跃的功能状态,提高Nogo-A的转录和翻译水平;Nogo-A蛋白质表达的增加为其mRNA水平水平提高所致;单唾液酸四己糖神经节苷脂对神经细胞急性一氧化碳损伤的保护作用与抑制少突胶质细胞Nogo-A表达有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

神经节苷脂M_1对兔子运动神经再生影响的实验研究

目的研究局部应用神经节苷脂M1(GM1)对兔子运动神经-面神经损伤的修复作用,为临床早期应用神经节甘脂M1,促进面神经损伤再生提供理论和实验依据。方法将18只健康成年新西兰大白兔按随机原则分为实验组(神经节苷脂M1组)和空白对照组。建立兔面神经损伤后再生的实验模型,实验组于面神经吻合处滴注2.0μL(10μg)GM1溶液,空白对照组于面神经吻合后未作任何处理,分别在术后2周、4周、8周观察面神经的传导速度及组织学变化。结果术后2周、4周神经传导速度,实验组分别为(5.35±0.74)m/s,(14.25±1.3)m/s,空白对照组分别为(3.32±0.30)m/s,(8.10±0.92)m/s,实验组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),术后8周神经传导速度,实验组与空白对照组比较差异无统计学意义(P0.05),光学显微镜观察术后2周、4周实验组神经再生状况优于空白对照组,光学显微镜观察术后8周实验组与空白对照组神经再生状况差别不大。结论兔面神经横断伤后立即应用神经节苷脂M1对面神经损伤后早期(2周,4周)再生恢复有明显的促进作用。     

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马ARMS与CrkL表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对脑缺血再灌注大鼠海马ARMS与CrkL表达的影响。方法96只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham,32只)、神经节苷脂治疗组(GM1,32只)、缺血再灌注组(I/R,32只)。GM1治疗组和I/R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为6 h、12h、24 h、3 d 4个组。应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠海马ARMS与CrkL蛋白的表达。结果免疫组织化学方法及Western blot检测发现,假手术组大鼠海马有微量ARMS与CrkL表达,而经过脑缺血再灌注处理后,ARMS与CrkL表达水平在6 h已显著升高,在24h时达到峰值最高,3d时表达较假手术组仍显著升高;与同一时间点的缺血再灌注组大鼠比较,GM1治疗组的ARMS与CrkL蛋白阳性表达亦显著升高(P0.05)。结论GM1对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能与上调ARMS与CrkL蛋白的表达相关。     

骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化前后基因及Ca2+浓度的变化

背景：单唾液酸四己糖神经节苷脂(Monosialotetrahexosylganglioside,GM1)在神经细胞的生长发育、分化、再生和细胞内外信息传递等多种生理过程中发挥重要作用。 目的：探讨GM1对骨髓间充质干细胞按照Woodbury经典诱导方案将其诱导分化为神经元样细胞前后基因方面和细胞内游离Ca2+浓度的变化。 方法：分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞进行传代培养,传至第5代时,待细胞融汇成致密单层后,加入50 mmol/L神经节苷脂设为GM1组,预培养24 h后按照Woodbury经典诱导方案进行诱导,设置对照组,采用免疫组化和Realtime PCR技术分别检测诱导前后生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白的蛋白和mRNA表达的变化,采用激光扫描共聚焦显微镜检测诱导前后细胞内游离钙离子浓度的变化。 结果与结论：①加入GM1组诱导分化后较对照组生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白表达水平增高(P < 0.05),GM1能够促骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞。②更换诱导液后,两组细胞内荧光强度逐渐增加,到100 s 达高峰值,其后逐渐减弱,但20 min 时细胞荧光强度仍高于诱导前,加入GM1组,细胞内游离Ca2+浓度较对照组有所增加(P < 0.05)。说明GM1能够促进细胞内Ca2+浓度增加,游离Ca2+在诱导过程中可能有促进作用。③诱导后生长相关蛋白43、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白和神经巢蛋白基因表达改变不显著,说明Woodbury经典诱导方案可能为转录后水平即蛋白水平的调控。     

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马IL-6表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂（GMl）对脑缺血再灌注大鼠海马白介素-6（IL-6）表达的影响。方法72只sD大鼠随机分为：假手术组（Sham,8只）、神经节苷脂治疗组（GM1,32只）、缺血再灌注组（I／R,32只）。GM1治疗组和I／R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为6、12、24和3d4个小组。应用免疫组织化学方法和Westernblot方法检测各组大鼠海马IL-6蛋白的表达。结果免疫组织化学方法检测时发现,IL-6在假手术组大鼠的海马即有微量表达,而在脑缺血6h时表达迅速升高,24h时表达最高;与相同时间点的缺血组比较,GM1治疗组的IL-6表达则明显降低（P〈0．05）;Westernblot方法也得到了相同的结论。结论GM1很可通过减少IL-6的表达参与脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。     

神经节苷脂对APP/PS1双转基因AD小鼠海马CREB表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂(GM1)对AD小鼠学习记忆能力及海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element binding protein,CREB)表达的影响。方法 PP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马CREB的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(0.05);相比于AD模型组小鼠,GM1组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,GM1组小鼠和对照组小鼠海马CREB蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于AD模型组(0.05)。结论 GM1改善AD小鼠学习和记忆功能可能与上调AD小鼠海马区CREB的表达相关。     

辣根过氧化酶标记神经节苷脂免疫测定法检测霍乱肠毒素、类毒素和破伤风毒素、类毒素

Heymlngen(1974)报道了神经节苷脂(Gauglloslde)能结合破伤风毒素,但仅能延缓其毒性,不久,又报导霍乱肠毒素也能与Gm结合,并被灭活。随之许多学者,利用神经节苷脂建立了各种体外测定细菌毒素的方法,如琼脂双扩散,Gm1神经节苷脂酶联免疫吸附法等。     

一例GM1-神经节苷脂贮积症患儿的临床与 GLB1基因变异分析

目的:探讨一例GM1-神经节苷脂贮积症患儿的基因型与表型的关系。方法:采用全外显子测序(whole-exome sequencing, WES)对患儿家系进行检测,并应用Sanger测序对可疑变异位点进行验证。取患儿外周血白细胞利用荧光法进行β半乳糖苷酶活性分析。结果:先证者为一名2岁3个月女性患儿,临床表现为精神运动...