锰对心室肌电机械活动及窦房结细胞电活动的影响

本实验观察了不同浓度的 Mn~(2+)对豚鼠心肌细胞电机械活动、Ba~(2+)所诱发的心室肌自发电活动以及窦房结电活动的影响。结果表明:低浓度(0.05—0.5mM)的 Mn~(2+)使心肌细胞 APD_(50)、APD_(90)、ERP 延长,但 ERP/APD 比值减小。低浓度的 Mn~(2+)对心肌收缩力抑制不明显,而高浓度的 Mn~(2+)对心肌收缩力有较强的抑制作用。2—4mM 的 Mn~(2+)能使 Ba~(2+)所诱发的心室肌自发电活动消失。0.5mM 的 Mn~(2+)使窦房结细胞 APA、Vmax、SP_4减小,窦搏率减慢.2mM 以上的 Mn~(2+)可使其 AP 消失。提示:Mn~(2+)可抑制心脏自发电活动。     

内皮素对豚鼠心室肌细胞触发电活动的影响

应用玻璃微电极技术和膜片钳全细胞记录，研究出皮素（ＥＴ－１）致豚鼠心室肌细胞早期后除极（ＥＡＤｓ）的作用及发生机制。结果显示：５０ｎｍｏｌ／Ｌ ＥＴ－１灌流能明显延长动作电位时程ＡＰＤ５０，诱发ＥＡＤｓ。产生ＥＡＤｓ基础可能在于促进心室肌细胞Ｌ－型钙内流（Ｌ－Ｉｃａ），使稳态激活曲线左移，其作用呈浓度依赖性。     

维拉帕米对触发活性的影响

本文使用经典细胞电生理方法,观察维拉帕米对后除极电位和触发活性的影响。4mMBa~(2 )灌注后,心肌标本(n=11)膜电位由83.1±4.4mV降至62.1±3.5mV,动作电位幅值也由119.3±10.1mV降至74.0±6.9mV,表现异常自律性占27.3%(3/11),EAD和DAD触发活性分别占45.4%(5/11)、27.3%(3/11)。维拉帕米灌注(1mg/L)后异常自律性明显减慢,EAD、DAD及相关的触发活性随之消失。这提示,异常自律性和触发活性可能与钙内流有关,维拉帕米具抑制作用。     

稳心颗粒对大鼠心室肌细胞跨膜动作电位的影响

目的观察稳心颗粒对大鼠左室壁跨膜动作电位的影响,从组织水平探讨稳心颗粒抗室性心律失常的机制。方法采用标准玻璃微电极技术,记录大鼠心室肌组织心内膜心肌细胞的跨膜动作电位(TAP)。在基础周长500ms刺激下,分别观察1,5,10,15,20g/L稳心颗粒对标准台式液灌流心肌和含哇巴因台式液灌流心肌TAP的影响。结果①不同浓度的稳心颗粒浓度依赖性的延长动作电位时程(APD)、90%复极化时间(APD90);对动作电位幅值(APA)无影响。②含哇巴因台式液灌流之后,各浓度稳心颗粒使APD、APD90延长,对APA无影响,15g/L的延长作用最显著。对于哇巴因诱发的早期后除极和心律失常,各浓度的稳心颗粒均有抑制作用。结论稳心颗粒对心室肌APD的延长和对触发活动的抑制是其抗心律失常作用的电生理基础。     

大蒜素对大鼠心力衰竭模型心室肌细胞迟后除极和触发活动的作用

目的观察大蒜素对大鼠心力衰竭模型细胞迟后除极(DAD)、触发活动(TA)和离子流的作用及机制。方法选取20只SD大鼠利用腹主动脉结扎法制备大鼠心力衰竭模型(模型组),另选取10只SD大鼠制作假手术组作为对照。采用酶解法急性分离2组大鼠心室肌细胞。根据实验设计对模型组是否给以大蒜素干预分为心力衰竭组(未给药)及给药组(200.0μmol/L大蒜素)。膜片钳技术观察心力衰竭组、给药组及对照组细胞DAD和TA的发生,并记录相关离子流(I_(ti),I_(Ca,L),I_(NCX))的改变,以Flou-4AM荧光技术检测细胞内钙离子浓度变化。采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。组间比较采用ANOVA分析及SNK-q检验。结果 (1)对照组、心力衰竭组及给药组细胞上DAD和TA发生率依次为[13.3%(2/15),0.0%(0/15)]、[60.0%(9/15),26.7%(4/15)]和[40.0%(6/15),13.3%(2/15)]。与对照组比较,心力衰竭组细胞DAD和TA发生率显著增加;与心力衰竭组比较,给药组细胞上DAD和TA发生率显著下降,下降幅度分别为20.0%和13.4%,差异均有统计学意义(n=15,P0.01)。(2)与对照组比较,心力衰竭组心室肌细胞上I_(Ca,L)、I_(ti)和I_(NCX)电流密度均增加,而与心力衰竭组比较,给药组上述电流均减少,其中I_(ti)内向峰电流密度从(-1.05±0.06)pA/pF降至(-0.53±0.05)pA/pF(n=10,P0.01),I_(NCX)内向电流密度从(-5.8±0.7)pA/pF降至(-4.2±0.4)pA/pF(n=10,P0.01)。同时,给药组通过大蒜素加速通道电流的稳态失活过程,降低I_(Ca,L),I_(Ca,L)的峰电流密度由(-17.2±0.9)pA/pF降为(-13.5±1.0)pA/pF(n=15,P0.01)。(3)与对照组比较,心力衰竭组细胞静息态钙浓度、钙瞬变幅度和胞内钙最高50%的时间等参数显著升高;与心力衰竭组比较,上述参数在给药组细胞中均显著降低(n=15,P0.01)。心力衰竭组细胞内钙瞬变衰减率与对照组比较显著下降,而应用大蒜素后,得到显著恢复(P0.05)。结论大蒜素可能通过减少心力衰竭大鼠心室肌细胞内的钙离子,阻滞I_(ti)和I_(NCX)电流,从而降低心力衰竭后DAD和TA的发生。     

绝对不应期电刺激对正常豚鼠心室肌细胞舒缩的影响

为探讨绝对不应期电刺激对正常豚鼠心室肌细胞舒缩的影响 ,酶解分离心室肌细胞 ,在 0 .5Hz的基础刺激S1 (脉宽 4ms,电压 60V)的绝对不应期内给予刺激S2 (与S1 延迟 1 0ms,脉宽 1 0ms ,电压 60V) ,应用单细胞收缩动缘检测仪 ,同步观察细胞收缩幅度和钙瞬变的变化。结果 :①心室肌细胞收缩幅值增高 1 5 .45± 6.48% ,收缩速度峰值增加 1 5 .97± 8.37% ,舒张速度峰值增加 2 1 .63± 8.0 6% (n =1 0 ) ;②以荧光强度的比值 (F360 /F380 )反映细胞内Ca2 +浓度变化 ,即钙瞬变。心室肌细胞收缩过程其幅值增加 2 2 .5 5± 9.0 8% ,增高速度与减少速度分别增加36.75± 9.77%和 2 3.62± 4.47% (n =6)。结论 :适宜的绝对不应期电刺激可增强正常豚鼠心室肌细胞舒缩能力。     

普罗帕酮、维拉帕米对豚鼠乳头肌延迟后除极和触发电活动的影响

应用标准玻璃微电极技术，研究哇巴因诱发豚鼠心室乳头肌的延迟后除极（ＤＡＤ）和触发电活动（ＴＡ）的变化规律及特点；探讨普罗帕酮和维拉帕米对ＤＡＤ和ＴＡ的影响。结果表明：①心室肌细胞在高浓度Ｃａ２＋条件下加哇巴因灌流时可以出现ＤＡＤ及ＴＡ，ＴＡ的诱发率为７７．８％（７／９）。②心室肌细胞诱发的ＤＡＤ幅度（ＤＡＤ－Ａｍｐ）、ＤＡＤ偶联间期（ＤＡＤ－Ｃ）和ＤＡＤ升支上升速率（ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ）呈明显的频率依赖性，即刺激频率愈快，ＤＡＤ－Ａｍｐ愈高、ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ愈快，ＤＡＤ－Ｃ则愈短。③上述两种抗心律失常药物均通过降低ＤＡＤ－Ａｍｐ、减慢ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ和延长ＤＡＤ－Ｃ而发挥其抗触发性心律失常作用；两者对哇巴因诱发的ＤＡＤ和ＴＡ的抑制作用无显著性差异，在普罗帕酮或维拉帕米的作用下，哇巴因对ＴＡ的诱发率分别为３３．３％（３／９）和２２．２％（２／９），与哇巴因的诱发率（高钙条件下，７７．８％）比较Ｐ＜０．０１。     

氯化铯诱发在体心脏触发性心律失常的实验研究

心内膜单相动作电位研究表明,单相动作电位的复极进程能够正确反映心肌细胞动作电位复极时程。狗静脉注射氯化铯后早期后除极电位(EAD)的发生率为100％,单相动作电位90％复极时程明显延长(224.4±50.6ms VS 368.4±34ms),与QT间期延长相一致。氯化铯诱发的室性心律失常发生于EAD顶峰,触发心律联律间期与EAD联律间期密切相关。硫酸镁使EAD和室性心律失常同时消失。提示该心律失常为EAD触发活性所致。     

苯肾上腺素对乳兔心室肌细胞电生理特征的影响

目的 探讨苯肾上腺素诱导兔心室肌细胞肥大过程中心肌细胞电生理特性的改变及意义.方法将24只新西兰乳兔随机分为苯肾上腺素组和正常对照组各12只.体外原代培养乳兔心室肌细胞,苯肾上腺素组给予10 μmol/L苯肾上腺素持续作用48 h后,应用全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞膜电容、动作电位时程和快激活延迟整流钾电流的变化,并与对照组比较.结果 苯肾上腺素作用48 h后,心室肌细胞膜电容较正常对照组增加36.4%（P＜0.01）;心室肌细胞动作电位复极达90%时限较对照组延长18.8%（P＜0.01）;心室肌细胞快激活延迟整流钾电流尾电流密度较对照组下调24.1%（P＜0.05）.结论 苯肾上腺素长期持续刺激可诱导心室肌细胞肥大并发生电重构,可能是导致室性心律失常发生的一个重要机制.     

左右心室间复极异质性的研究进展

左右心室间存在复极异质性 ,主要表现为左右心室的动作电位时程 (APD)不同、早期后除极 (EADs)的振幅及发生率不同 ,而且病理生理因素和某些药物可增加或减小这种异质性。心室间复极异质性的产生机制与不同部位心肌细胞离子流性质不同有关。心室间复极异质性在某些室性心律失常如 :尖端扭转型室性心动过速和多形性室性心动过速的发生中具有重要作用。     

小檗碱对豚鼠门静脉平滑肌膜电位及收缩特性的影响

用跨膜电位及收缩同步记录方法，观察小檗碱（Ｂｅｒ）对豚鼠门静脉平滑肌细胞膜电位及收缩特性的作用。Ｂｅｒ（２４．５μｍｏｌ／Ｌ）能引起平滑肌细胞膜静息电位较小的去极化，抑制紧张性（ｔｏｎｉｃ）收缩及自发性收缩频率，增加相性（ｐｈａｓｉｃ）收缩幅度。高钾对照组平滑肌细胞膜迅速去极化，紧张性收缩增加，相性收缩消失。Ｂｅｒ能部分对抗Ｋ＋收缩平滑肌的作用。     

犬实验性心肌梗塞后心电出现碎裂电位的观察

本文采用窦性心律下心内膜标测及心室程序刺激的方法,对实验性心肌梗塞犬梗塞后7天、14天及2月检测记录的碎裂电位(FEA)进行观察。12只实验犬于不同时期可分别记录到FEA。对这些实验犬采用心室程序刺激可诱发室性心动过速(VT)。同步心肌病理学观察FEA与心肌的坏死有关,推测心肌的坏死和修复过程导致心肌纤维排列紊乱,缓慢和非同步传导电生理现象可能为产生FEA及局部折返的病理依据。     

豚鼠气道上皮对钾通道开放剂Rp52891作用的影响

为了观察气道上皮对钾通道开放剂Ｒｐ５２８９１作用的影响，将正常豚鼠和致敏豚鼠的气管螺旋条随机分成完整上皮组和去除上皮组，用组胺诱发收缩后，分别加入Ｒｐ５２８９１、氨茶碱及异丙肾上腺素，测定气管螺旋条对组胺及上述三种物质的反应。结果发现，正常豚鼠和致敏豚鼠气管螺旋条对组胺的反应性在两组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５），Ｒｐ５２８９１对去除上皮组的舒张作用明显弱于完整上皮组（Ｐ＜０．０５），氨茶碱和异丙肾上腺素的舒张作用在两组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。提示Ｒｐ５２８９１可直接舒张气道平滑肌，气道上皮参与介导其舒张作用。     

槟榔碱对大鼠门静脉和钙通道电流的剂量与效应关系

目的探讨槟榔碱(Arecoline,Are)对大鼠门静脉和钙通道电流(Ica)的剂量与效应的关系,阐明Are灭螺增效的作用机制.方法采用离体大鼠门静脉自发性收缩活动的实验方法和全细胞膜片钳记录技术,研究Are的剂量与效应关系,及其对Ca2+和Ic.的影响.结果不同浓度的Are对大鼠门静脉的收缩力呈双相反应.10-7～3×10-7mol/LAre使门静脉的收缩力增强;10-5～10-4mol/L则使收缩力逐渐抑制,均呈浓度依赖性.Are3×10-8～10-4mol/L对单个心室肌细胞钙通道电流的作用与门静脉一致,亦呈浓度依赖性的双相反应.门静脉收缩活动和全细胞记录钙通道电流的结果证明,不同浓度的Are对Ca2+和Ica均显示有剂量与效应关系,低浓度有促Ca2+及增加Ica作用,高浓度有阻Ca2+内流及降低Ica作用.结论阻钙作用可能是Are降低钉螺上爬附壁率、灭螺增效作用的理论依据.     

低浓度槟榔碱对钉螺足跖平滑肌收缩和对豚鼠心室肌细胞钙内流作用的实验研究

目的研究槟榔碱对钉螺足跖平滑肌影响及其机制。方法采用离体钉螺足跖平滑肌收缩活动的实验方法和全细胞膜片钳技术，探讨槟榔碱的作用特点和对Ｃａ~(２＋)通道的影响。结果３μｍｏｌ／Ｌ槟榔碱可增加足跖平滑肌的收缩力和收缩频率。 ３０ ｎｍｏｌ／Ｌ～１μｍｏｌ／Ｌ摈榔碱直接开放豚鼠单个心室肌细胞钙通道，使Ｉ～Ｖ曲线峰值增大，激活曲线左移。结论较低浓度的槟榔碱可增加钉螺足跖平滑肌的收缩活动，此作用可能与该药直接开放该通道，促使Ｃａ~(２＋)内流有关。     

犬心肌梗塞后程控刺激诱发室性心律失常与再缺血引发室颤

本文以犬复制心肌梗塞后猝死模型并进行心脏电生理检查。结果表明,程控刺激诱发的室速对再缺血室颤具有一定的预见性。心室不应期离散性(VDR)和梗塞范围(IS)与梗塞后快速室性心律失常的发生及猝死关系密切。VDR与IS呈正相关。     

LAK细胞对不同靶细胞的杀伤作用及其意义

我们研究了重组白细胞介素２（ｒＩＬ２）活化的杀伤细胞（ＬＡＫ）对Ｋ５６２细胞、Ｒａｊｉ细胞、ＨｅｐＧ２细胞和２．２．１５细胞的杀伤活性。结果表明：ＬＡＫ细胞对不同靶细胞，其杀伤活性不同。在诱导早期（３小时），对Ｋ５６２细胞有明显的杀伤活性；在诱导晚期（３天和７天），对Ｒａｊｉ、ＨｅｐＧ２和２．２．１５细胞则有杀伤活性。揭示ｒＩＬ２诱生的ＬＡＫ细胞可能由不同的免疫杀伤细胞组成，在不同的诱导时期，活化不同的杀伤细胞。我们还建立ＨｅｐＧ２、２．２．１５细胞的靶细胞系统，可以在体外测定ＬＡＫ细胞对ＨＢＶ感染细胞的杀伤活性，亦可在体外筛选增强免疫杀伤细胞杀伤ＨＢＶ感染细胞活性的药物。     

DAILY EXERCISE ATTENUATED THE SYMPATHETIC COMPONENT OF THE SPONTANEOUS ARTERIAL BAROREFLEX CONTROL OF HEART RATE IN HYPERTENSIVE RATS

The influence of daily spontaneous running on the sympathetic and parasympathetic components of the spontaneous arterial baroreflex control of heart rate was examined in 22 female spontaneously hypertensive rats [12 sedentary and 10 daily spontaneous running]. Following 8 weeks of sedentary control or daily spontaneous running, animals were chronically instrumented with an arterial catheter. Daily spontaneous running resulted in an increased heart weight/body weight ratio (5.2±0.27 vs 4.3±0.01 g/kg) and a resting bradycardia (321±8 bpm vs 360±6). The spontaneous changes in arterial pressure and the reflex responses of heart rate were examined under three experimental conditions: 1) pre-blockade, 2) following β₁-adrenergic receptor blockade, and 3) following muscarinic-cholinergic receptor blockade. Daily spontaneous running attenuated the spontaneous gain of the arterial baroreflex control of heart rate (56%). After muscarinic-cholinergic receptor blockade, the spontaneous gain remained reduced in daily spontaneous running rats (57%). In contrast, after β₁-adrenergic receptor blockade the spontaneous gain was not different between sedentary control and daily spontaneous running animals. Results demonstrate that daily spontaneous running decreased the sympathetic component resulting in an apparently greater influence of the parasympathetic component on the spontaneous arterial baroreflex control of heart rate.     

GROWTH FACTOR INDUCTION OF CYTOSOLIC PROTEIN TYROSINE KINASE ACTIVITY IN HUMAN HAEMOPOIETIC PROGENITOR CELLS ISOLATED BY FLOW CYTOMETRY

We employed a highly sensitive method to assay protein tyrosine kinase activity in extracts of subpopulations of CD34⁺ bone marrow progenitor cells isolated by fluorescence activated cell sorting in an attempt to better define how growth-factor induction of enzymatic activity relates to progenitor cell maturation. FACS analysis confirmed that, under the conditions employed, essentially all of the CD34⁺ cells in adult human marrow that lacked the CD38 antigen were devoid of the myeloid maturation marker CD33 as well as the lineage antigens: CD10, 13, 14, 15, 16, 19, 71 and glycophorin A. A variable portion (50–90%) of these CD34⁺, CD38^? progenitor cells expressed HLA-DR. CD34⁺, CD38^? cells that did not express HLA-DR were found to lack detectable levels of either membrane or cytosolic tyrosine kinase activity. HLA-DR⁺ progenitor cells that lacked CD38 possessed elevated levels of cytosolic tyrosine kinase activity but only low levels of plasma membrane activity. In contrast, CD34⁺ cells that expressed CD38 (and HLA-DR) possessed high levels of membrane-associated tyrosine kinase activity. A cocktail of haemopoietic growth factors that included IL-3, IL-6 and stem cell factor effectively induced tyrosine kinase activity in CD34⁺, CD38^?, HLA-DR^? progenitor cells. Growth factor induction of tyrosine kinase activity in these cells was not inhibited by actinomycin D or cyclohexamide. Most of the tyrosine kinase activity induced by these growth factors was recovered from the cytosolic fraction of disrupted cells. Thus, induction of cytosolic tyrosine kinase activity is an early event in the response of uncommitted haemopoietic cells to haemopoietic growth factors. Subsequent activation of membrane tyrosine kinases may initiate key transduction processes as these cells begin to differentiate.