多聚酶链反应检测骨组织中结核分枝杆菌的临床研究

关于骨关节结核的ＰＣＲ诊断报道甚少。本文介绍用ＰＣＲ技术检测手术取检骨组织４５例，并与病理学诊断和临床诊断进行比较。结核分枝杆菌阳性２１例，阳性率为４６．６％，病理学诊断１０天例骨关节结核，阳性率为２２．２％，临床诊断２０例，ＰＣＲ阳性１６例与临床诊断的符合率为８０．０％。结果提示，ＰＣＲ技术用于骨组织结核分枝杆菌的诊断与临床诊断有较好的符合率，对于骨关节结核早期诊断、鉴别诊断具有特异性敏感性高的     

乙型肝炎病毒核酸探针压电晶体传感器的初步研究

核酸探针压电晶体传感器，即由特异的单链ＤＮＡ片断与压电晶体镀膜电板交联固定制成探针，并与标本中待测的变性ＤＮＡ杂交成双链，杂交前后ＤＮＡ量的变化，可通过压电晶体振荡频率的改变判定。从含ｐＢＲ３２２－ＨＢＶ ＤＮＡ的大肠杆菌ＨＢ１０１中提取纯化重组质粒ＤＮＡ，制成乙型肝炎病毒核酸探针压电晶体传感器，检测１２例乙型肝炎感染者血清标本，结果显示５例阳性，与ＰＣＲ检测结果一致，提示其具有良好的特异性与第三     

太原地区妇女儿童淋球菌感染调查及基因快速诊断

改进并建立快速检测淋球菌基因的聚合酶链反应，同时用涂片染色筛查和培养法作鉴定比较，对太原地区１９８６￣１９９５年妇女儿童淋球菌感染状况作调查分析，对９２０４例妇女儿童生殖道感染者作直接涂片染色检菌，阳性率为２６．５％，其中１２２０例同时用培养与ＰＣＲ法检测，阳性率为１２．４％和２１．０％，用ＰＣＲ直接检测临床标本ＮＧ－ＤＮＡ，具有简便，快速、敏感特异之优点。     

基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值,以及不同类型标本检出率的差异。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,进一步对结核分枝杆菌阳性标本进行耐药性分析。结果 900份临床样本的鉴定结果总阳性率为10.6%,洗肉水、穿刺物、脓液等阳性率较高;进一步对40份结核阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼kat Gi、nhA基因检测,共有9例检测到了突变的耐药基因。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,适用于不同类型标本,简便快速,灵敏度高,特异性好。     

rRNA扩增直接检测艾滋和结核共感染的结核分枝杆菌的初步研究

目的 建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法 应用间接转录扩增技术,以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标,扩增片段被特异性DNA探针结合（杂交）,再经杂交保护分析法筛选,最后以化学发光仪检测被标记的rRNA.用该法检测62例临床标本.结果 62 例艾滋合并结核患者痰标本检出阳性9例.结论 rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌方法作为结核病诊断的一项新的分子生物学检测方法,具有重要的临床应用价值.     

嗜肺军团菌聚合酶链反应检测方法及其应用研究

根据嗜肺军团菌基因组ＤＮＡ的种特异性ＤＮＡ片段序列，合成一对引物进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）。经琼脂糖凝胶电泳、ＥＢ染色结果表明，一条８７０ｂｐ的核苷酸区带为嗜肺军团菌１～１４血清型菌株所共有。ＰＣＲ检测水中军团菌，其敏感性为３５０ｃｆｕ／ｍｌ，而用同位素标记探针、斑点杂交法检测，其敏感性为４３ｃｆｕ／ｍｌ。ＰＣＲ检测人工感染嗜肺军团菌的豚鼠组织标本，阳性率为８３．３％，而细菌分离培养的阳性率仅为２６．６％。在现场调查中，用ＰＣＲ法初步验证了一起由Ｌｐ１０引起的军团菌病爆发。上述结果表明，ＰＣＲ法能快速、敏感、特异性检测嗜肺军团菌感染。     

PCR-RDB和SAT与改良罗氏培养法检测临床标本分枝杆菌研究

目的对比研究PCR-反向点杂交技术(PCR-RDB)与RNA恒温扩增法(SAT)快速检测临床标本中分枝杆菌菌种的应用价值。方法选取2016年7月-2017年6月医院2 069份活动性肺结核、疑似非结核分枝杆菌感染、肺外结核感染等患者的临床标本,采用PCR-反向点杂交技术进行分枝杆菌菌种检测。同时随机选择临床标本200份行SAT检测;437份行改良罗氏培养法(L-J法)培养和菌种初步鉴定,明确PCR-RDB法临床应用价值。结果 PCR-RDB、SAT法阳性率分别为38.5%(796/2069)、41.5%(83/200),高于L-J法的33.0%(144/437)(P0.05);PCR-RDB法不仅阳性率高,而且还可以鉴定分枝杆菌菌种,其中检出结核分枝杆菌群(MTC)682份,占分枝杆菌阳性率85.7%(682/796),非结核分枝杆菌(NTM)114份,占分枝杆菌阳性率14.3%(114/796)。结论PCR-RDB法阳性率远高于培养法,略低于SAT法,但PCR-RDB方法简便、结果准确,且能够快速检测临床标本中分枝杆菌菌种,具有良好的临床应用价值。     

聚合酶链反应标记输血传播病毒(TTV)地高辛素探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针，并与巢式ＰＣＲ法（ｎＰＣＲ）比较。结果该探针具有ＴＴＶ特异性，其灵敏度为１０ｐｇＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲～庚型肝炎病人的血清标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为１８５％（２０／１０８）；检测２２份病人的粪便标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为２７３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率为９６９％（１２６／１３０）。结论：用ＰＣＲ法直接制备地高辛素标记ＤＮＡ探针简便、快速、灵敏度高，特异性好。应用该法从６名病人的粪便中检出ＴＴＶＤＮＡ，提示ＴＴＶ有可能通过粪口途径传播。     

利用基因芯片检测结核分支杆菌及其利福平耐药性的研究

目的 探讨结核杆菌耐利福平(RFP)检测基因芯片在结核病诊断及其耐药性检测中的应用价值。方法 采用结核杆菌耐RFP芯片对35株RFP耐药的临床分离菌株，102例肺结核患者、27例非结核病的其他患者的痰标本中的结核杆菌及其RFP耐药性进行了检测，基因芯片检测结果与痰涂片、细菌培养及结核杆菌标准化药敏试验结果比较。结果结核杆菌耐RFP检测芯片检测35株耐药株，有33株判定为RFP耐药株，与传统药敏试验结果的符合率为94．29％。对27份其他患者的痰液标本进行结核杆菌检测，特异性为92．59％。对102份结核患者痰标本中结核杆菌进行检测，痰涂片法阳性率35．29％(36／102)，细菌培养法阳性率28．43％(29／102)，基因芯片法阳性率77．45％(79／102)。传统的药敏试验报告102份痰标本仅29份培养出结核分支杆菌，其中8份RFP耐药株，而基因芯片法检测102份痰标本中发现20份耐RFP结核杆菌。主要基因突变位点为531、526和516。结论 采用结核杆菌耐RFP检测芯片检测结核杆菌及RFP耐药性具有快速简便、特异性高的特点。     

聚合酶链反应标记输血传播病毒（TTV）地高辛霉探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针,并与巢式ＰＣＲ法比较。结果 该探针具有ＴＴＶ特异性,其灵敏度为１０ｐｇ ＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲￣庚型肝炎病人的血清标本,应用该法检测１０８份非甲￣庚型肝炎病人的血清标本,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为１８．５％（２０／１０８）;检测２２份病人的粪便标本,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为２７．３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率     

液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的应用比较

[目的]比较液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的临床应用效果，并探讨液相蛋白芯片应用于临床检验的可行性。[方法]分别用液相与固相蛋白芯片方法检测45例临床送检样本的AFP、CA125、CA242及CEA，对两种方法的操作步骤、有效检测范围、参考临界值及检测结果进行比较。f结果1与固相蛋白芯片相比，液相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的操作至少节省1h，标本用量节省80μl，线性范围至少增大1倍；两种方法检测AFP、CA125、CA242及CEA的参考临界值相同，阴阳性判断结果的符合率分别为97．78％（44／45）、86．67％（39／45）、88．89％（40／45）、86．67％（39／45）。统计学分析表明两种方法检测的阴阳性结果无明显差异。[结论]液相蛋白芯片检测多肿瘤标志物具有操作简便、标本用量少、线性范围广、准确度高的优点，可推广应用于临床检验。     

应用于血液检测的微流控芯片制造工艺及应用研究现状

阐述了微流控技术的基本原理和优势,介绍了微流控芯片制造工艺的研究现状,综述了微流控芯片在血液分型和血液疾病的初步筛查、肿瘤细胞快速筛查以及新型冠状病毒核酸快速检测等领域的研究现状和临床试验创新成果,分析了目前微流控芯片技术存在的不足及发展趋势.指出了随着新材料、新技术的不断涌现,基于微流控芯片的血液检测技术必将不断完善...     

阿特拉津抗体芯片制作条件的优化

目的探讨制备阿特拉津抗体蛋白芯片的影响因素,优化制备的实验条件,为采用蛋白芯片技术检测阿特拉津打下基础。方法固定在醛基化玻片的兔抗阿特拉津单克隆抗体质量浓度分别为1.27、0.635、0.254、0.0127mg·mL-1,封闭液选择多种不同浓度的卵清蛋白和胎牛血清,缓冲液选择不同pH值的PBS,温度始终选择37℃,抗原抗体反应时间为15、30、60、120min,采用竞争法进行阿特拉津样品检测,GenePixTm4000B扫描仪进行扫描,分析荧光信号强度。结果荧光信号强度随阿特拉津抗体浓度的增加、反应时间的延长而增强。选择2%OVA封闭、pH7.2稀释样品溶液时背景值最低。结论当阿特拉津抗体质量浓度为1.27mg·mL-1、2%OVA封闭、pH值7.2～9.0,抗原抗体反应时间60～120min时,可以得到较理想的检测结果。     

显示器电源故障的排除

简要地描述了一次罕见的监视器电源电路故障的排除     

运用基因芯片技术检测三种寄生虫方法的研究

目的:利用基因芯片技术建立高效、特异的检测食品中绦虫、弓形虫和旋毛虫的方法。方法:本文选用弓形虫B1基因、旋毛虫SB2基因、绦虫12SrDNA上的可变区设计引物及探针,点样于玻片制成基因芯片。寄生虫DNA经过引物扩增后与芯片上的探针杂交,然后通过扫描图象对结果进行判断。对基因芯片检测的特异性、灵敏性进行了评价,并对模拟污染样本进行了检测,以验证所建立的方法。结果:设计的引物能够扩增三种寄生虫,而且探针的特异性很高。本体系的基因芯片杂交检测敏感度约为15 ng/m l。以食品中旋毛虫为例,可以检测出1条旋毛虫/200 mg。实际检测模拟污染的样本的正确率达到100%。结论:成功制备了检测弓形虫、旋毛虫和绦虫的基因芯片,具有快速、灵敏、特异等特点。     

通过基因表达谱芯片检测寻找德国小蠊抗药性的相关基因

目的通过比较德国小蠊野外抗性品系与敏感品系的基因表达差异,以筛选出抗性相关基因。方法根据NCBI数据库公布的德国小蠊所有已知序列信息,设计、合成oligo探针并点制基因芯片,利用该芯片对野外抗性品系与敏感品系德国小蠊进行表达谱检测,筛选与抗性相关的差异表达基因,并用实时定量RT-PCR进行确认。结果共筛选出差异表达基因5个,其中上调（ratio≥2）基因3个,分别为CYP6K1、alpha—amylase mRNA和aspartic protease precursor;下调（ratio≤0．5）基因2个,即allergen Blag 6．0101 mRNA和allergen Bla g 8 mRNA。结论通过自制的德国小蠊基因芯片能够筛选出差异表达基因,其中CYP6KI可能与抗性密切相关。     

分型基因芯片检测疟原虫的研制及应用

目的 研制快速检测间日疟原虫和恶性疟原虫等并可进行分型的基因芯片。方法 筛选疟原虫高度保守而且具有种属特异性的瓣RNA基因片断为探针，制备疟原虫诊断和分型的基因芯片；检测时提取标本中的疟原虫核酸，用不对称PCR技术进行扩增和荧光标记，然后与检测芯片杂交，进行扫描和分析。结果 建立的疟原虫检测芯片能特异和敏感的对间日疟原虫和恶性疟原虫诊断及分型。结论 成功制备用于疟原虫快速侦检和分型的基因芯片，对疟疾的预防和控制具有重要意义。     

基因芯片快速检测常见水中致病菌的初步应用研究

目的：利用基因芯片技术，尝试对从实际样品中分离的几种常见致病菌进行快速检测鉴定。方法：通过PCR扩增检测靶基因，采用基因芯片与扩增产物在一定条件下进行杂交，杂交结果通过ScanArray 3000芯片扫描仪读取并与标准杂交图谱比较，从而判定样品中细菌的种属。结果：对分离的20株细菌进行了基因芯片的杂交检测，并用传统方法对这些菌株进行了鉴定，基因芯片检测结果与传统方法鉴定结果的一致性为95％(19／20)。结论：基因芯片技术检测水中常见致病菌具有快速、准确、易于操作等优越性，值得推广应用。     

热疗过程中体温监测器的研制

目的研制一种主要用于热疗过程中的体温监测器,可提供实时体温显示,并根据设置的参考体温值及时发出报警,为安全热疗提供保障。方法采用温度传感器检测体温,通过对信号进行线性处理和放大,经模数转换和单片机AT89C52处理,最终通过液晶对体温进行显示。结果该温监测器能够在误差小于±1%的条件下对热疗过程中的体温进行测量。结论该体温监测器能够实时、连续地对热疗过程中的体温进行准确监测。     

HD-2001A多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的临床应用

目的：研究HD-2001A生物蛋白芯片检测系统及其多肿瘤标志物蛋白芯片对肿瘤诊断的临床应用价值。方法：使用HD-2．001A多肿瘤标志物蛋白芯片检测仪检测496例健康体检者、163例已知的各期各种肿瘤患者和29例肿瘤术后监测患者的12种肿瘤标志物，并对其中的223项指标使用AXSYM全自动免疫分析仪进行比对分析，相符率为98．65％。65例具有病理分型。结果：被检测496例健康体检者中，超出参考值范围的结果有6例，后经随访均证实确诊为早期肿瘤患者，占1．209％；163例肿瘤患者中，133例结果异常，占81．236％。另有29例为术后监测，26例结果正常，3例结果异常。结论：多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统具有较高灵敏度和特异性，对肿瘤早期诊断有巨大潜力，可以广泛用于临床肿瘤的早期筛查、预后及疗效观察。