老鼠簕对四氯化碳致肝纤维化大鼠Toll样受体4表达的影响

目的研究老鼠簕对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组。除空白对照组外,其余4组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型。秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组分别于4周后给予相应的药物,空白对照组和模型对照组给予等容量的生理盐水,每日1次。8周后处死大鼠。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中TLR4 mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,模型对照组TLR4 mRNA表达增强(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0、2.0 g.kg-1)较模型对照组TLR4 mRNA表达减弱(P<0.05)。结论老鼠簕能够抑制肝纤维化大鼠肝组织TLR4的表达。     

Toll样受体2及Toll样受体4在大鼠实验性变应性鼻炎中的表达

目的 采用动物攻击性行为指标评估实验动物玩具对小鼠福利的影响.方法 60 只 BALB/c雄性小鼠随机分为实验组与对照组,每组 30 只,实验组放置动物玩具,对照组不放置,在 7d 内每天观察记录小鼠受到攻击的伤害程度和攻击数,分析比较第 4、7 天小鼠受到攻击的伤害程度及攻击数,计算第 4、7 天实验组相对对照组的攻击风险系数.结果 第4 、7 天实验组和对照组分别有10%(3/30)、30%(9/30)的小鼠在尾巴、耳朵、身体背部受到不同程度的伤害.第4、7天对照组小鼠受到的攻击风险系数分别是实验组的2.8倍和3.9倍.结论 实验动物玩具对小鼠攻击性行为引起的伤害具有一定的防范效果.     

升降散对脓毒症大鼠肾组织Toll样受体4表达的影响

目的:观察升降散对脓毒症大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型。30只SD大鼠分为对照组、模型组、治疗组,每组各10只。对照组和模型组在造模前72 h开始灌胃0.9%Na Cl溶液,治疗组灌胃升降散浓缩液;造模后24 h采集动脉血检测肌酐(SCr)水平及肾组织检测TLR4 mRNA表达的水平。结果:与对照组比较,模型组和治疗组SCr水平均明显升高(P0.01),但治疗组SCr水平明显低于模型组(P0.01);模型组和治疗组TLR4 mRNA表达水平显著升高(P0.05,P0.01),但治疗组TLR4 mRNA表达水平明显低于模型组(P0.01)。结论:升降散可以通过减少肾脏TRL4 mRNA表达,以减轻脓毒症大鼠肾损伤。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠TGF-β1及Smad3、7表达的影响

目的探讨荔枝核总黄酮(TFL)对胆汁性肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、7表达的影响及其抗肝纤维化可能的作用机制。方法将雄性SD大鼠70只随机分为假手术组、模型组、TFL大剂量组[200mg/(kg.d)]和TFL小剂量组[100mg/(kg.d)]。采用胆总管结扎制备肝纤维化大鼠模型。分别于术后第2、3、4周处死大鼠,留取肝脏组织。HE染色观察大鼠肝组织病理改变;免疫组织化学法检测TGF-β1、Smad3、7在肝组织内的动态表达。结果假手术组肝组织内TGF-β1、Smad3有少量表达,Smad7呈高表达。与模型组比较,TFL大剂量治疗后大鼠肝组织内纤维化程度降低。随着肝纤维化的形成和发展,第2、3、4周TFL大剂量组大鼠肝组织TGF-β1(3.000±1.309、2.000±1.309、1.800±1.649)、Smad3(2.875±1.458、2.000±1.309、1.833±0.753)与模型组TGF-β1(3.750±1.488、4.333±1.211、5.000±0.817)、Smad3(3.375±0.916、4.000±0.894、4.250±0.500)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TFL能有效地减轻胆总管结扎所致肝纤维化大鼠肝损伤及肝纤维化程度,其机制可能与抑制TGF-β1、Smad3高表达,上调Smad7表达有关。     

铝暴露对大鼠成骨细胞Toll样受体4表达的影响

目的通过观察toll样受体4(TLR4)在铝暴露大鼠成骨细胞中的表达,探讨铝的骨毒性分子机制。方法原代培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,分为对照组和铝暴露组,铝暴露组细胞用含有AlCl3(100μmol)的DMEM培养基培养,两组细胞分别培养0、12、24和48 h。Real-time RT-PCR方法检测各时间点成骨细胞中TLR4 mRNA表达;Western blotting检测各时间点成骨细胞TLR4蛋白的表达情况;MTT检测各组各时间点的细胞生存率情况。结果在12、24和48 h时间点,铝暴露各组细胞的TLR4 mRNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05);在铝暴露各组中,与0 h组相比,TLR4 mRNA和蛋白表达随着时间的增加而增强(P<0.05);在12、24和48 h时间点,铝暴露各组细胞的生存率明显低于对照组;在铝暴露各组中,与0 h比较,成骨细胞的生存率随时间的增加而下降,呈时间依赖性(P<0.05)。结论铝暴露抑制成骨细胞生存率,可能与上调TLR4表达相关。     

荔枝核总黄酮预防大鼠肝纤维化的初步研究

目的观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)预防大鼠肝纤维化作用及活化肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)凋亡的变化,从细胞凋亡角度研究二者之间的关系。方法以二甲基亚硝胺腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,同时以秋水仙碱为阳性对照,TFL[100、200 mg/(kg.d)]灌胃给药,6周后处死大鼠,放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)蛋白水平,取肝脏同一部位行HE、Masson染色观察大鼠肝纤维化程度,采用α-SMA及TUNEL免疫组化双重染色标记活化HSC凋亡。结果 TFL高剂量组和秋水仙碱组血清肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ)均明显低于模型组(P<0.05)。与模型组比较,TFL高剂量组可明显增加活化的HSC凋亡指数,改善大鼠肝纤维化程度(P<0.05)。结论荔枝核总黄酮可抑制肝纤维化大鼠HA、LN、PCⅢ表达,诱导HSC凋亡并改善二甲基亚硝胺所致肝纤维化程度,且具有一定量效关系。     

Toll样受体对肝纤维化的调控作用进展

感染、物理、化学、免疫等因素导致的各种损伤,均可引起细胞内环境发生变化,形成新的分子模式,模式识别受体(PRRs)通过识别改变后的分子模式,触发特异性应答进行组织功能修复,其中包括炎症和创伤修复[1].Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)属于模式识别受体家族,且高度保守,能识别外源性配体——病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)和内源性配体——损伤相关分子模式(damage-associated molecular patterns,DAMPs),被认为是多种慢性疾病导致炎症反应的触发器[2].     

布地奈德对哮喘模型大鼠肺组织Toll样受体4和5表达的影响

目的观察布地奈德对哮喘模型大鼠肺组织Toll样受体4（TLR4）和TLR5表达的影响,探讨TLR在哮喘炎症机制中的作用。方法 27只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、布地奈德组,每组9只。制备哮喘大鼠模型,免疫组织化学法检测各组大鼠肺组织TLR4和TLR5表达。结果哮喘组大鼠肺组织TLR4光密度值与对照组比较,差异无统计学意义（P〈;0.05）;布地奈德组大鼠肺组织TLR4光密度值显著低于对照组和哮喘组（P〈0.05）。哮喘组大鼠肺组织TLR5光密度值显著高于对照组（P〈0.05）;布地奈德组TLR5与对照组及哮喘组比较,差异均无统计学意义（P〈0.05）。肺组织TLR4和TLR5蛋白表达水平无相关性（r=0.246,P＆gt;0.05）。结论 OVA致敏的哮喘模型大鼠肺组织TLR5表达升高,TLR4无变化,TLR5在哮喘中可能起到促炎作用。布地奈德能下调哮喘模型大鼠肺组织TLR4和TLR5表达。     

尿毒清颗粒对单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠肾脏Toll样受体4表达的影响

目的观察尿毒清颗粒对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨TLR4在导致肾间质纤维化中的作用。方法将24只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、手术组和尿毒清组,每组6只。14 d后处死大鼠,检测各组大鼠的肾功能及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)水平。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达水平。采用免疫组化半定量法分析TLR4表达,并观察肾脏病理变化。结果 4组大鼠尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、T-SOD、MDA水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01);4组大鼠TGF-β1mRNA和TLR4的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。其中,假手术组与手术组、手术组与尿毒清组的TGF-β1mRNA和TLR4表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论单侧输尿管梗阻可以诱导大鼠肾间质纤维化,氧化应激可能通过TLR4途径参与肾间质纤维化的形成,尿毒清治疗可明显改善大鼠的肾间质纤维化程度。     

肝纤维化过程中Toll样受体4在肝脏的表达分布及意义

目的动态观察大鼠肝纤维化过程中Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)蛋白在肝脏的表达,探讨TLR4与肝纤维化发生发展的关系。方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组和模型1周组、2周组、4周组、6周组。常规HE染色和天狼猩红胶原染色观察肝脏病变;检测肝组织羟脯氨酸和血浆内毒素含量;免疫组化和Western blot检测TLR4在肝组织中的表达,检测α-SMA观察活化的肝星状细胞(HSCs)。结果与正常对照组比较,CCl4作用2周时,肝组织羟脯氨酸含量开始明显增多(P0.01);模型组各组血浆内毒素含量呈梯度上升(P0.01),且与肝组织羟脯氨酸含量呈显著正相关关系(P0.01);CCl4作用1周后肝组织TLR4的表达即明显增强(P0.01),4周时和6周时有所下降(与2周组相比,P0.05),但仍高于正常对照组(P0.01)。TLR4阳性细胞包括枯否细胞、活化的HSCs及少量的肝细胞和内皮细胞。结论内毒素及其受体TLR4的改变可能在肝纤维化中起重要作用。     

Toll样受体与肝纤维化关系的研究进展

Toll样受体(TLRs)是细胞表面信号转导跨膜受体,能够识别作为配体的病原相关的分子模式。作为细胞膜上的跨膜信号传递分子,TLRs通过信号转导参与配体介导的肝脏内多种细胞的激活及多种细胞因子的分泌,参与肝纤维化的发生及发展过程。肝免疫细胞和肝星状细胞上被激活的TLRs在肝纤维化形成过程中具有重要作用。现就TLRs与肝纤维化关系予以综述。     

Toll样受体4在脓毒症大鼠心肌中的表达

目的 观察Toll样受体4(TLR4)在脓毒症大鼠心肌组织中的表达,探讨其在脓毒症心肌损伤发生机制中的作用.方法 将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SH组,n=20)及脓毒症组(CLP组,n=20),采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症动物模型,24 h后,检测各组的血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)的水平,观察心肌组织病理变化及心肌组织肿瘤坏死因子(TNF-α)和TLR4的表达水平.结果 CLP组大鼠出现明显的心肌损伤(心肌水肿及炎性细胞浸润,心肌细胞结构松散、紊乱),CLP组大鼠血清BNP和cTnI水平分别为(5.33±0.26)ng/mL、(3.89±0.13)ng/mL,均高于SH组的(1.05±0.19)ng/mL和(0.87±0.07)ng/mL,差异均有显著统计学意义(P<0.01);CLP组大鼠心肌组织的TNF-α和TLR4表达水平分别为(23.71±1.59)ng/mL、(38.03±5.02),均高于SH组的(8.99±0.52)ng/mL和(11.32±2.51),差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 TLR4在脓毒症大鼠心肌组织中表达上调,TLR4可能在脓毒症心肌损伤发病机制中起重要作用.     

结核病患者中性粒细胞表面Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。     

参芍口服液对2型糖尿病心肌病大鼠心肌Toll样受体4表达的影响

目的 通过观察参芍口服液对2型糖尿病大鼠心肌组织Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其保护机制.方法 将30只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只.模型组和治疗组采用高脂饲耪喂养加小剂量链脲佐茼素(25mg/kg)腹腔注射的方法制作2型糖尿病心肌病大鼠模型,治疗组给予250mg·kg-1·d-1参芍口服液干预.采用左心室插管对大鼠心功能进行评估,免疫组织化学法和免疫印迹法检测心肌组织的TLR4和NF-κB蛋白表达.结果 心功能检测中,模型组较对照组,左室舒张未期压(LVEDP)明显升高,左室收缩压(LVSP)和左室压力上升或下降最大速度(士dP/dtmax)降低(P＜0.05).治疗组较模型组LVEDP降低,LVSP和土dP/dtmax升高(P＜0.05);免疫组织化学和免疫印迹显示,模型组较对照组TLR4和NF-κB蛋白表达量明显升高(P＜0.05),治疗组较模型组TLR4和NF-κB蛋白表达量明显降低(P＜0.05).结论 参芍口服液能有效改善2型糖尿病心肌病大鼠的心功能,其心肌保护作用可能与调控TLR4及其下游炎性因子水平有关.     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎大鼠肺组织Toll样受体4表达的影响

目的 研究乌司他丁对急性坏死性胰腺炎肺组织Toll-样受体4(TLR4)表达的影响及其意义.方法 56只SD大鼠经逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠(TAC)制作大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤动物模型,大鼠分为对照组(n=8)、急性坏死性胰腺炎组(n=24)和治疗组(n=24).对照组和急性坏死性胰腺炎组给予尾静脉注射生理盐水,治疗组给予尾静脉注射乌司他丁.分别测定各组血清淀粉酶和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,计算肺组织学评分和肺损伤指数以评价肺损伤程度,荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组不同时间点肺组织TLR4 mRNA表达.结果 与对照组比较,急性坏死性胰腺炎组大鼠各时点肺组织TLR4 mRNA表达明显增高(均P＜0.01),并在12 h达到峰值,同时肺组织MPO活性增高,肺损伤加重(P＜0.05或P<0.01).与急性坏死性胰腺炎组相比,治疗组肺组织TLR4 mRNA表达明显降低,肺损伤减轻,MPO活性降低(均P＜0.05).结论 急性坏死性胰腺炎时,肺组织内TLR4 mRNA表达明显上调,肺部炎症反应及肺损伤加重;乌司他丁可以降低急性坏死性胰腺炎大鼠肺组织TLR4 mRNA表达,减轻肺部炎症和肺损伤.     

抗菌药物对酒精性肝病创伤弧菌脓毒症大鼠肝组织Toll样受体及髓样分化蛋白2表达的影响

目的 探讨酒精性肝病大鼠创伤弧菌(VV)脓毒症肝组织Toll样受体及髓样分化蛋白2的表达及其动态变化.方法 制作酒精性肝病大鼠VV脓毒症模型和酒精性肝病VV脓毒症抗菌药物治疗模型.大鼠随机分为正常对照组(N组)、酒精性肝病对照组(A组)、酒精性肝病抗菌药物对照组(AA组)、酒精性肝病VV脓毒症组(AV组)和酒精性肝病VV脓毒症抗菌药物治疗组(AVA组).采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组大鼠不同时间点肝组织TLR2、TLR4、MD-2mRNA表达及其动态变化.结果 AV组大鼠在染菌后2 h,TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达开始升高(0.56±0.08、0.70±0.08±0.59±0.05),12 h达峰(0.85±0.18、0.92±0.13、0.83 ±0.11),染菌后24 h下降.染菌后各时间点TIJR2、TLR4、MD-2 mRNA表达较N组及A组显著升高(P<0.05或P<0.01),AVA组TLR2、TLR4、MD-2 mRNA与各相同时间点AV组相比,表达量明显降低(6 h:0.48 ±0.10、0.60±0.06、0.56±0.07;12 h:0.45 ±0.13、0.59±0.11、0.57±0.12;24 h:0.45 ±0.13、0.51±0.12、0.45±0.14)(P<0.05或P<0.01).结论 酒精性肝病大鼠VV脓毒症肝组织TLR2、TLR4、MD-2 mRNA表达水平随脓毒症病情的进展而升高,其与脓毒症的发生、发展密切相关.应用足量头孢哌酮钠和乳酸左氧氟沙星能显著降低肝组织TLR2、TLR4、MD-2mRNA的表达,对酒精性肝病VV脓毒症大鼠有明显的治疗作用.动态监测TLR2、TLR4、MD-2mRNA改变对VV脓毒症发病及治疗过程具有一定的意义.     

布地奈德对大鼠哮喘肺组织Toll样受体4和5表达的调控作用

目的: 观察布地奈德对哮喘大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR4)和TLR5表达的影响, 探讨TLRs在哮喘炎症机制中的作用。方法: 采用哮喘大鼠模型, 随机分成哮喘组、对照组和布地奈德组,免疫组织化学法检测肺组织TLR4和TLR5的表达。结果:哮喘组( 0.1960.045 OD值)肺组织TLR4的光密度值与对照组(0.1720.025 OD值)差异无统计学意义(P>0.05);布地奈德组( 0.1380.026 OD值)均显著低于对照组和哮喘组 (均P<0.05)。哮喘组(0.1850.029 OD值)肺组织TLR5的光密度值显著高于对照组(0.1380.014 OD值)(P<0.05);布地奈德组(0.1520.024 OD值)与对照组及哮喘组差异均无统计学意义(均P>0.05)。肺组织TLR4和TLR5蛋白的表达水平无显著相关性( n = 26, r =0.246,P> 0.05)。结论: OVA致敏的哮喘大鼠肺组织TLR5的表达升高,TLR4没有变化,TLR5在哮喘的炎症中可能起了促炎作用。布地奈德能下调TLR4和TLR5的表达,其抗炎作用可能通过下调TLR4和TLR5的途径。     

荔枝核总黄酮对活化大鼠肝星状细胞的增殖抑制作用及TLR4表达的影响

目的：研究荔枝核总黄酮( TFL)在体外对活化的大鼠肝星状细胞( HSC-T6)的增殖抑制作用及 Toll 样受体4(TLR4)表达的影响。方法使用转化生长因子β1(TGF-β1)(5 ng/ml)激活HSC-T6,显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态变化;CCK8试剂盒( CCK8)法观察 TFL 作用24、48、72 h后活化的HSC-T6的增殖情况;逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)检测HSC-T6中TLR4的表达;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态有明显变化;CCK8结果显示TFL可以抑制HSC-T6的增殖( P<0．05),并且随着TFL浓度和作用时间增加,HSC-T6增殖明显下降,呈浓度依赖性;RT-PCR结果显示随着TFL浓度增加,HSC-T6中TLR4表达下降,与实验对照组比较差异有统计学意义( P<0．05);流式细胞仪检测结果表明TFL阻滞细胞于S期,G0/G1期细胞减少( P<0．05),S期细胞增加(P <0．05),促进细胞的凋亡(P <0．05),呈浓度依赖性。结论 TFL可以抑制 HSC-T6的增殖,其作用机制可能是通过降低TLR4在HSC-T6中的表达,阻滞其细胞增殖和诱导细胞凋亡,达到抗肝纤维化效果。