维药神香草提取物体外抗炎作用的谱效关系研究

目的:为阐明维药神香草抗炎作用的药效物质基础提供参考。方法:采用高效液相色谱法建立神香草8个不同极性提取物的指纹图谱;以巨噬细胞RAW264.7为研究对象,考察神香草不同极性提取物对细胞培养上清液中炎症因子一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的抑制作用,比较其体外抗炎活性的差异性;采用灰色关联分析法分析指纹图谱共有峰的峰面积与抗炎活性的谱-效关系。结果:神香草8个不同极性提取物的指纹图谱具有明显的差异。体外抗炎结果提示,神香草30%乙醇提取物对体外炎症因子的抑制作用最强。对其建立的HPLC指纹图谱有共有峰14个,与体外炎症因子的抑制作用关系密切的5个共有峰分别为8、6、5、10、13号,其中8号峰为迷迭香酸。结论:所建立的指纹图谱及其与体外抗炎活性的谱效关系可为该药材的药效物质基础研究提供一定参考。     

一枝蒿不同溶剂提取物抗病毒作用的谱效关系研究

目的:研究一枝蒿不同溶剂提取物抗病毒作用的谱效关系。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法构建一枝蒿不同溶剂提取物的指纹图谱;进行体外抗流感病毒、乙肝病毒试验,比较其生理活性的差异;采用灰色关联度分析其谱效关系。结果:在构建的一枝蒿不同溶剂提取物的HPLC指纹图谱中确定了9个共有特征峰;各特征峰所代表的各化学成分(以特征峰编号作为该特征峰所代表的化学成分名称)在抗流感病毒中作用的大小顺序依次为9>4>8>6>1>3>7>2>5;在抗乙肝病毒中作用大小顺序依次为7>9>5>8>4>2>1>6>3。结论:一枝蒿不同溶剂提取物的HPLC指纹图谱具有明显的差异,其抗病毒活性与指纹图谱具有一定的相关性。     

掌叶大黄不同炮制品指纹图谱与其止血作用的灰关联度分析

目的确定掌叶大黄不同炮制品指纹图谱特征峰所代表的化学成分对其止血作用贡献大小顺序,为建立“指纹图谱与药效关联”的中药质量控制模式提供理论依据和数据支持。方法用HPLC法研究掌叶大黄不同炮制品水提取物指纹图谱;用小鼠剪尾尖法研究其止血作用;用灰关联度分析方法研究其谱效关系。结果掌叶大黄不同炮制品的止血作用是其所有化学成分共同作用的结果,各特征峰所代表的各化学成分（以特征峰编号作为该特征峰所代表的化学成分名称）对其止血作用贡献的大小顺序为：4〉1〉8〉2〉31〉29〉18〉39〉17〉15。结论掌叶大黄不同炮制品指纹图谱与其止血作用之间有一定的对应关系。     

赤芍不同提取物抑制ras突变的肿瘤活性谱效关系研究

目的： 建立赤芍不同提取部位高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,探讨其抑制ras突变肿瘤活性的谱效关系,为明确其抗肿瘤作用及物质基础提供参考。方法： 分别用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇对赤芍水煎液进行萃取,并采用HPLC法对提取物进行分析,建立色谱图;采用秀丽隐杆线虫检测各有效部位的急性毒性及抗肿瘤活性;采用偏最小二乘（PLS）回归分析研究其谱效关系。结果： 赤芍醋酸乙酯部位的急性毒性高于正丁醇部位和石油醚部位;赤芍3个部位均不同程度地提高了线虫的野生型比例,且正丁醇部位效果最好;谱效关系研究表明,色谱峰7、5（芍药苷）、1所对应化合物对抑制ras突变的肿瘤活性有重要作用。结论： 赤芍抑制ras突变的抗肿瘤活性是多种化学成分共同作用的结果,为赤芍作为抗肿瘤药物的开发研究提供了一定思路。     

不同批次四逆汤提取物指纹图谱与其抗心肌缺血的谱效学研究

目的:以大鼠心肌缺血模型为对象,研究四逆汤对大鼠心肌缺血的保护作用的谱效关系,为建立“指纹图谱与药效关联”的中药质量控制模式提供理论依据.方法:对10批四逆汤提取物进行HPLC指纹图谱研究;以大鼠心肌酶CK和LDH为指标研究抗心肌缺血作用:丹参复方滴丸(0.1g·kg/d)为阳性对照组,大鼠灌胃四逆汤药液7d(80g·kg/d);采用灰色关联度分析方法研究谱效关系.结果:四逆汤抗心肌缺血作用是其所有化学成分共同作用的结果,对CK和LDH作用贡献的大小顺序(按特征峰编号)P12＞P17＞P11＞P18＞P4＞P10＞P16＞P20＞P2＞P15＞P14.结论:通过谱效关系研究直接获得药效活性物质,建立了四逆汤谱效关系评价的新方法,为后期的研究提供基础.     

基于灰色关联分析的藤茶提取物体外抗炎作用的谱-效关系研究

目的： 研究藤茶不同极性部位高效液相色谱（HPLC）图谱与其体外抗炎作用的谱效关系。方法： 建立藤茶不同极性部位的HPLC图谱;采用脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,检测藤茶不同提取部位对一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）释放的影响,考察其抗炎活性;采用灰色关联度法分析不同极性部位HPLC特征峰与其抗炎药效之间的谱效关系。结果： 藤茶不同极性部位HPLC图谱有明显差异,共确定了5个共有峰。谱-效分析结果显示,5个共有峰对药效贡献均较大。结论： 建立了藤茶不同极性部位的HPLC图谱及其体外抗炎活性的谱-效关系,为该药材的抗炎药效物质基础研究提供参考。     

板蓝根乙酸乙酯提取物HPLC指纹图谱及体外抑菌活性的相关性分析

目的考察板蓝根乙酸乙酯提取物的HPLC指纹图谱及体外抑菌活性的相关性。方法HPLC法建立十批不同来源板蓝根的乙酸乙酯提取物的指纹图谱采用微量量热法记录大肠杆菌在板蓝根乙酸乙酯提取物作用下生长代谢的热谱图。运用系统聚类分析法考察不同来源板蓝根之间的差异，结合体外抑菌活性进行相关分析。结果不同来源板蓝根乙酸乙酯提取物的HPLC指纹图谱与体外抑菌活性之间存在很好的相关性。结论采用HPLC指纹图谱和体外抑菌活性相关性分析的方法，可以发现板蓝根乙酸乙酯部位抑菌活性有效成分。     

虎杖的功效成分组研究Ⅳ-纤维蛋白原谱效分析的研究

目的在HPLC指纹图谱和降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效的基础上进行谱效分析,以此确定虎杖降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效的"药效成分组"。方法采用偏最小二乘回归法(partial least squares regression,PLSR),对虎杖HPLC指纹图谱数据和降低急性血瘀大鼠纤维蛋白原药效数据之间的内在联系进行谱效分析。结果指纹图谱上的X1、X2(白藜芦醇苷)、X4、X5、X7、X12、X14、X15这8个成分组成的"药效成分组"对虎杖降低纤维蛋白原药效的贡献最大。结论中医用药基于正确的辩证沦治,是根据中药的功效对患者进行治疗,因此,反映中药功效的"功效成分组"是评价中药质量的关键,"功效成分组"需最终得到药效验证才具有代表性。     

枸杞类胡萝卜素指纹图谱的建立及其抗氧化活性谱效关系研究

目的 建立枸杞类胡萝卜素高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并考察其共有峰与抗氧化活性的谱效关系.方法 采用HPLC法进行检测,根据《中药指纹图谱相似度评价系统》(2012版)建立34批不同产地枸杞类胡萝卜素的指纹图谱,并进行相似度评价和共有峰指认.以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率为指标,考察枸杞...     

甘草HPLC指纹图谱及抗氧化活性的谱效关系

目的:建立甘草药材的HPLC指纹图谱,并研究其与抗氧化活性之间的谱效关系。方法:采用HPLC法建立甘草的指纹图谱;在与对照图谱相似度评价均大于0.915的基础上,结合聚类分析(hierarchical cluster analysis, HCA)和主成分分析(principal component analysis, PCA),对其中的25个共有峰进行评价;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法,铁离子还原能力(FRAP)法及水杨酸法评价甘草抗氧化活性;灰色关联度分析(grey relational analysis, GRA)和偏最小二乘回归分析(partial least squares regression analysis)研究谱效关系。结果:建立了甘草的HPLC指纹图谱,确定了其中26个色谱峰为共有峰,相似度均在0.915以上,通过对照品比对法指认了其中9个色谱峰。HCA结果表明,全部样品被聚为4类,与PCA结果基本一致,25批甘草均有不同程度抗氧化活性。谱效关系表明2、7、10、13、18、21、23号峰是与抗氧化活性关联较大的正相关峰。结论:甘草抗氧化活性是多组分联...     

台湾林檎叶提取物不同极性部位抑菌活性高通量筛选及其谱效相关性分析

目的 实现台湾林檎叶醇提物不同极性部位抑菌活性快速、高效筛选和评价,研究不同极性部位HPLC指纹图谱与抑菌作用谱效关系,以期明确台湾林檎叶抑菌物质基础。方法 采用HPLC建立台湾林檎叶醇提物不同极性部位指纹图谱,采用金黄色葡萄球菌刃天青高通量抑菌筛选模型,对台湾林檎叶醇提物不同极性部位样品进行抑菌活性评价,计算不同浓度各极性部位的抑菌率,筛选台湾林檎叶抑菌活性部位。运用最小二乘拟合法来建立各极性部位共有峰与抑菌活性间的谱效分析,寻找对抗金黄色葡萄球菌作用贡献较大的成分;采用UPLC-Q-TOF/MS²技术对高贡献度的共有峰进行识别分析。结果 在台湾林檎叶醇提物不同极性部位指纹图谱中共确定15个共有峰,不同极性部位抑菌活性为乙酸乙酯部位>正丁醇部位/二氯甲烷部位>石油醚部位>萃余液。共有峰8、峰9、峰10、峰15等显示有较高的抑菌活性贡献度,分别鉴定为槲皮素-7-O-葡萄糖苷、异槲皮苷、根皮苷和白杨素。结论 台湾林檎叶抑菌活性部位为乙酸乙酯部位,谱效分析提示槲皮素-7-O-葡萄糖苷、异槲皮苷、根皮苷和白杨素4个成分为抑菌活性成分,是否存在其他微量抑菌活性成分还有待进一步研究。     

鲜虎杖在储藏过程中白藜芦醇苷及苷元含量变化

目的研究鲜虎杖药材在储藏过程中白藜芦醇苷及苷元含量的变化。方法使用HPLC对储藏中的鲜虎杖药材样品进行含量测定。结果鲜虎杖药材中白藜芦醇苷及苷元含量受时间影响很大。结论鲜虎杖储存时间不宜过长。     

Comparative analysis of bioactivities of four Polygonum species

Many species of Polygonum are rich in bioactive constituents, which contribute to a wide range of medicinal properties. In this study, we assessed the scavenging activity against ABTS.+ and hydroxyl radicals, chelating activity against Fe2+, xanthine oxidase inhibition, antimicrobial activity, and total contents of phenolics and flavonoids in the extracts of leaves and stems or whole plants from four medicinal Polygonum species. Total antioxidant capacities and phenolic contents of Polygonum capitatum, Polygonum Chinensis, Polygonum cuspidatum, and Polygonum multiflorum were 74.60, 53.66, 56.22, and 14.34 mmol trolox/100 g dry weight (DW), and 8.69, 4.15, 6.33, and 1.27 g gallic acid/100 g DW, respectively, significantly higher than those of five dietary vegetables, fruits and spices (spring onion, broccoli, orange, carrot, and ginger). Major bioactive constituents in the tested plant extracts were also investigated using LC-MS. They were mainly phenolic compounds, e. g., flavonoids, phenolic acids and their derivatives, tannins, stilbenes, and anthraquinones. This study shows that, in addition to their roots, the leaves and stems of P. cuspidatum and P. capitatum also exhibit potent antioxidant properties and are a potential resource of natural bioactive antioxidants.     

不同产地虎杖中总黄酮含量的比较

目的 对虎杖总黄酮进行测定，并比较不同产地虎杖中总黄酮含量。方法 用70％乙醇超声提取虎杖总黄酮，亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量，平均加样回收率为：100．4％，RSD为1.8％（n=9）。结果 来源于南京、徐州、灌县、宜宾、阿坝、榆林、南昌、深圳、佛山、阳江、广州、洛阳、安庆、桂林、南宁、昆明、武汉、长春、涟源的虎杖药材中，总黄酮含量分别为：10．98％、10．10％、9．60％、10．01％、9．14％、10．94％、8．92％、9．32％、12．34％、11．99％、7．19％、10．21％、16．73％、9．06％、9．29％、12．44％、13．95％、7．34％、14．10％。结论 测得不同产地虎杖的总黄酮含量是有差别的。     

不同产地虎杖中白藜芦醇与白藜芦醇苷含量测定

目的建立测定广西不同产地虎杖药材中白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱：迪马C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相A：乙腈;流动相B：0.3%磷酸;梯度洗脱（15%～40%A,0～25 min）;检测波长：254 nm;柱温：25 ℃;流速：1.0 mL•min－1。结果测得广西产虎杖药材中白藜芦醇和白藜芦醇苷最高含量分别为1.998 3%和2.776 1%,最低含量分别为0.356 1%和0.370 5%。结论所建立的方法简便可靠,快速,重复性好,结果稳定,便于对虎杖药材进行质量控制。不同产地虎杖药材中白藜芦醇和白藜芦醇苷含量差异明显。     

虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠保护作用的研究

目的观察虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠的保护作用。方法通过测定血清ALT、AST及TNF-α、肝匀浆SOD、MDA,评价其对肝脏的保护作用。结果虎杖提取物高剂量组明显降低ConA诱导肝损伤小鼠模型的血清ALT、AST、TNF-α、肝匀浆MDA,提高肝匀浆SOD（P〈0.01）。结论虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠具有一定的保护作用。     

不同产地虎杖中总黄酮含量的比较

目的对虎杖总黄酮进行测定,并比较不同产地虎杖中总黄酮含量。方法用70%乙醇超声提取虎杖总黄酮,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量,平均加样回收率为:100.4%,RSD为1.8%(n=9)。结果来源于南京、徐州、灌县、宜宾、阿坝、榆林、南昌、深圳、佛山、阳江、广州、洛阳、安庆、桂林、南宁、昆明、武汉、长春、涟源的虎杖药材中,总黄酮含量分别为:10.98%、10.10%、9.60%、10.01%、9.14%、10.94%、8.92%、9.32%、12.34%、11.99%、7.19%、10.21%、16.73%、9.06%、9.29%、12.44%、13.95%、7.34%1、4.10%。结论测得不同产地虎杖的总黄酮含量是有差别的。     

酶法提取虎杖中的白藜芦醇

目的研究酶法提取虎杖中的白藜芦醇的工艺条件。方法以白藜芦醇的提取率为指标,考察不同因素对提取率的影响规律,并在此基础上运用均匀设计和优化算法选出优化的因素组合。结果最佳提取工艺为:提取温度45℃,酶解pH值3.0,酶解时间8.13 h,植物水解酶的用量为29.7%(w/w),与传统不加酶的提取工艺相比,酶处理后提取率提高了近5倍。结论酶处理后,可显著提高虎杖中白藜芦醇的得率。     

利用基因转化提高虎杖毛状根中活性成分的含量

通过转白藜芦醇合酶(resveratrol synthase，RS)基因提高虎杖毛状根中主要活性成分——白藜芦醇(resveratrol，RE)和白藜芦醇苷(polydatin，PD)的含量。用改进的高盐低pH法提取葡萄基因组DNA，通过PCR扩增获得RS基因序列，构建表达载体pCAMBIA1300-35S-RS，然后采用冻融法转化发根农杆菌ATCC11325，继而浸染划伤的虎杖无菌幼苗叶片，PCR和RT-PCR法鉴定RS基因在虎杖毛状根中的整合与表达，高效液相色谱(highly effective liquid chromatography，HPLC)法测定转基因毛状根中RE及PD的含量。首次成功诱导获得转RS基因虎杖毛状根，经鉴定该基因已在虎杖毛状根中得到整合与表达，RE和PD的含量分别为17～187 μg·g^-1 DW和836～1 970 μg·g^-1 DW，而未转基因虎杖毛状根中RE和PD的含量分别为0～130 μg·g^-1 DW和190～320 μg·g^-1 DW。在所选取的不同根系中，转基因毛状根PD的含量均得到显著提高，最高含量是未转基因毛状根的5倍，而RE含量提高不显著。     

星点设计-效应面法优化虎杖姜炙炮制工艺

目的：采用星点设计-效应面法对姜炙虎杖的炮制工艺进行优化,为姜炙虎杖炮制规范提供科学依据。方法：以姜汁用量、炒制温度、炒制时间为自变量,以虎杖苷、白藜芦醇、大黄素的综合评分作为指标,采用Design Expert进行二次项回归拟合,优选最佳工艺并验证。结果：效应面优化后,姜炙虎杖的最佳炮制工艺为姜汁用量17%,炒制温度240℃,炒制时间11 min。结论：优化姜炙虎杖炮制工艺时采用星点设计-效应面法,得到的模型具有较高拟合度,预测性良好。