Serrin B和Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株的毒性作用

目的探讨天然药物Serrin B和Nodosin对人早幼粒白血病细胞株HL60、人胃腺癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株LOVO、人胶质瘤细胞株U87、人肺腺癌细胞株AGZY的毒性作用。方法将对数期生长的HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株接种于96孔板中,细胞贴壁后,分别加入Serrin B或Nodosin,使药物的终浓度分别为0.00、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μmol.L-1,24 h后用四甲基偶氮唑盐法检测细胞株的死亡率。结果 Serrin B对HL60、SGC7901、LOVO、U87和AGZY细胞株均有较强的毒性作用(P<0.01),且其毒性作用呈现剂量-效应关系。Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87细胞株具有较强的毒性作用(P<0.05,P<0.01),而对AGZY细胞株无明显毒性作用。结论 Serrin B和Nodosin是中药溪黄草抗癌作用的有效成分,为人类多种肿瘤治疗的新药研究开发提供新的思路。     

铁树叶提取液对白血病细胞株K562、HL—60增殖抑制作用的实验研究

目的观察铁树叶在白血病细胞株K562及HL-60中的作用.方法细胞培养液中分别加入铁树叶(实验组1和实验组2)及P.B.S(对照组1和对照组2),观察集落细胞数、死活细胞计数及细胞蛋白质含量.实验组和对照组比较,死活细胞计数和细胞蛋白含量P值均＜0.05,集落细胞计数实验组抑制率50%.结果实验组和对照组比较,死活细胞计数和细胞蛋白含量P值均＜0.05,集落细胞计数实验组抑制率＞50%.结论铁树叶提取液对白血病细胞株K562及HL-60细胞的增殖有明显抑制作用.     

羟基磷灰石微晶体对人白血病HL—60细胞株的生长抑制作用

采用体外细胞培养和ＭＴＴ测定等方法，研究羟基磷灰石微晶体（ＨＡＰ－Ｓｏｌ）对人白血病细胞株（ＨＬ－６０）的生长抑制作用。将不同浓度的ＨＡＰ－Ｓｏｌ（０．００１－０．０２ｍｇ／ｍｌ）分别加入ＨＬ－６０细胞（１０＾４／孔），置３７℃，５％ＣＯ２培养４８小时。结果显示：①不同浓度ＨＡＰ－Ｓｏｌ对ＨＬ－６０细胞集落形成可产生影响：在倒置显微镜下，可见全部测定孔细胞集落形成均较对照孔低下，且呈剂量依赖关系，     

姜黄素对急性髓性白血病细胞HL—60增殖和凋亡的影响

为了探讨姜黄素对白血病细胞的杀灭能力,运用细胞培养,流式细胞仪和末端ＴｄＴ酶标记技术系统研究其药理作用和方式。结果表明,姜黄素能选择性抑制急性髓性白血病细胞ＨＬ－６０的增殖,呈时间与剂量依赖曲线,姜黄素体外抑制ＨＬ－６０细胞２４ｈ达到最大峰值。亚Ｇ１凋亡峰出现在１２ｈ后,并随时间延长而逐步增加,２４ｈ可达３４．４％。用末端ＴｄＴ酶标记法进一步证实凋亡的同一时相可达到４１％。结果提示：姜黄素有明确的     

LDL—阿克拉霉素复合物对白血病HL—60细胞的生长抑制作用

选择人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０进行体外培养，以正常人外周血淋巴细胞作为对照细胞，观察低密度脂蛋白对ＨＬ－６０细胞生长的影响，ＬＤＬ与抗癌药物阿克拉霉素复合物的入胞作用以及对ＨＬ－６０细胞株的选择性杀伤作用。     

二甲基亚砜对HL—60细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

探讨二甲基亚砚（ＤＭＳＯ）对ＨＬ－６０细胞端粒酶活性和细胞周期的影响。采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测二甲基亚砜处理前后的ＨＬ－６０细胞粒酶活性的改变,以流式细胞分析细胞周期的改变。二甲基亚砚作用于ＨＬ－６０细胞后,其端粒酶活性明显受到抑制,且细胞周期明显改变,Ｓ期细胞数显著减少。二甲在亚砜可抑制ＨＬ－６０细胞的端粒酶活性,防止细胞周期的进程。     

HL—60和抗分化HL—60细胞的基本生物学和细胞遗传学特征比较

对本实验室克隆的人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０及其抗维甲酸分化亚系ＨＬ－６０／ＲＡ进行细胞增殖、细胞周期、分裂中期细胞染色体分布和Ｇ－显带核型分析。发现两者在倍增时间和细胞形态上基本一致。     

几种抗癌药对HL—60细胞在小鼠肾囊膜下生长的抑制作用

以纤维蛋白凝块为HL-60细胞支持物,将其接种于正常和免疫抑制小鼠肾囊膜下,观察其增殖特性和生长特点。结果HL-60细胞纤维蛋白凝块在免疫排斥反应出现前的正常小鼠肾囊膜下,体积增殖5倍左右;在免疫抑制小鼠肾囊膜下,增殖15倍左右。组织切片发现,在肾囊膜下生长6d细胞密度明显增加,生长细胞沿肾囊膜向四周侵润,肿瘤细胞切面面积明显扩大,且生长细胞仍保持HL-60细胞的形态特点。维甲酸(RA)、维胺酸(RⅡ)及三尖杉酯碱等药物可明显抑制HL-60细胞的生长。     

异搏定逆转HL—60／ADR细胞株耐药机理的初步探讨

深入了解异搏定对鬼臼乙叉甙耐药逆转作用的机制。方法：以多药耐药相关蛋白高表达的耐阿霉素人急性髓性白血病细胞株ＨＬ－６０／ＡＤＲ为研究对象,应用ＤＮＡ电泳、流式细胞仪观测细胞凋亡现象,用Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔｔｉｎｇ方法测定凋亡相关蛋白ＢＣＬ－２表达水平。     

不同方法制备的蝌蚪提取液对HL-60细胞的作用

为探讨不同方法制备的蝌蚪提取液对ＨＬ６０细胞作用的差异，利用水提法、醚提法、醇提法制备不同的蝌蚪提取液，依次称为Ｔ８７１１、Ｔ８７１２（此二者均为水提法制备，区别在于前者在水提的基础上用盐酸沉淀去除酸性蛋白）、Ｔ８７１３、Ｔ８７１４，分别将其以不同浓度与ＲＰＭＩ１６４０培养基混合，以培养ＨＬ６０细胞。结果显示：几种蝌蚪提取液对ＨＬ６０细胞的生长均有抑制作用，且在一定范围内呈浓度依赖性，其中以Ｔ８７１３的抑制效应最显著。经蝌蚪提取液作用后，Ｗｒｉｇｈｔ染色显示ＨＬ６０细胞的形态表现为向单核／巨噬样细胞分化的特征，细胞还原硝基蓝四氮唑盐（ＮＢＴ）的能力和酸性非特异性酯酶（αＮＡＥ）的活力均显著提高。提示蝌蚪提取液可抑制ＨＬ６０细胞增殖，并且诱导其向成熟的单核／巨噬样细胞分化，其中以醚提法制备的提取液作用效果最好     

GM-CSF耦联米托蒽醌脂质体的制备及体外抑瘤作用的实验研究

目的 制备粒-巨噬细胞集落刺激因子 (granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)耦联米托蒽醌脂质体(liposome-entrapped mitoxantrone,LEM),比较其与LEM和米托蒽醌(dihydroxyanthraquinone,DHAQ)对HL60/ADM细胞的体外杀伤作用.方法 用逆向蒸发法制备LEM,高速离心法纯化LEM,比色法测定包封率,透射电镜下观察LEM的结构和粒径,以戊二醛交联法制备出LEM-GM-CSF,紫外分光光度法测定耦联率,流式细胞术测定LEM-GM-CSF中GM-CSF的活性保留率.通过MTT法检测所制备LEM-GM-CSF 、LEM 及DHAQ对HL60/ADM细胞的杀伤作用.结果 LEM粒径分布均匀,为170～220 nm,包封率为80%,GM-CSF与LEM有较高的耦联率及活性保留率,分别为42.3%及74.6%;LEM-GM-CSF 、LEM 及DHAQ对HL60/ADM细胞具有杀伤作用,且LEM-GM-CSF的杀伤作用显著强于LEM和DHAQ.LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞作用24 h的IC50分别是8.73、12.42、27.31 μg/ml;作用48 h的IC50分别是:0.62、8.25、12.44 μg/ml.结论 本研究制备的LEM-GM-CSF对 HL60/ ADM细胞具有明显的杀伤作用,有望成为良好的抗白血病药物新剂型.     

罗格列酮对人HL60细胞诱导凋亡作用的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPARγ)配体罗格列酮(rosiglitazone,ROZ)对人急性髓性白血病细胞诱导凋亡作用的分子机制.方法 体外培养人急性髓性白血病HL60细胞,流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检测细胞凋亡,West blot法检测药物处理后PPARγ、Bcl-2、Bax、NF-KB 蛋白表达的改变. 结果ROZ(50,100 μmol/L)可诱导HL60细胞凋亡.ROZ(2,10,50 μmol/L)处理后,HL60细胞PPARγ、Bax蛋白表达上调,Bcl-2、NF-KB蛋白表达下调.ROZ(10 μmol/L)处理HL60细胞6、12、24小时后PPARγ、Bax蛋白表达上调,Bcl-2、NF-KB蛋白表达下调.呈浓度依赖性和时间依赖性.结论 过氧化物酶增殖因子活化受体PPARγ配体罗格列酮诱导HL60细胞凋亡.使PPARγ、Bax蛋白表达上调,Bcl-2、NF-KB蛋白表达下调.     

高三尖杉酯碱诱导HL60细胞端粒酶活性的变化

目的研究高三尖杉酯碱(Homohrringtonine,HHT)对HL60细胞端粒酶活性的影响.方法不同浓度HHT作用于HL60细胞12 h及0.02 mg/L HHT作用HL60细胞不同时间后,采用TRAP-PCR-ELISA检测HL60细胞端粒酶活性.结果HHT浓度增加至0.04 mg/L和0.05 mg/L时,HL60细胞端粒酶活性与0 mg/L组相比明显下降(P均＜0.05).0.02 mg/L HHT作用HL60细胞18 h、24 h、30 h后,HL60细胞端粒酶活性明显低于0 h组(P均＜0.05),且低于空白对照(P均＜0.05).结论HHT是一种有效的端粒酶活性抑制剂,其对端粒酶活性的抑制呈时间和浓度依赖性.     

溪黄草抗乙肝及抗肿瘤活性成分的体外筛选

目的 对溪黄草抗乙肝抗肿瘤活性部位进行初步筛选,为进一步分离活性成分奠定基础.方法 首先在HepG2.2.15细胞模型上对三种不同方法萃取所得的溪黄草提取物进行抗乙肝活性筛选,以用于进一步分析提纯.用MTT实验检测细胞毒性,ELISA和实时定量PCR检测细胞上清液中HBsAg、HBeAg的分泌及乙肝病毒DNA含量.然后,用硅胶柱色谱法进一步提取分离活性最大的提取物,用MTT和ELISA检测所分离各组分的抗乙肝活性.最后,在MCF-7,BGC-823和HepG2细胞中检测细胞毒性最大的三个组分的抗肿瘤活性.结果 乙酸乙酯萃取分离所得的提取物抗乙肝活性最大,可显著降低HepG2.2.15细胞的HBsAg、HBeAg抗原的分泌,并抑制乙肝病毒DNA的复制,被用来进一步分离提纯.从乙酸乙酯提取物中分离出14个组分,其中A3和A5组分对HBsAg有较好的抑制作用,A9组分对HBeAg有较好的抑制作用,并均存在明显的量效关系,且治疗指数均比乙酸乙酯提取物的要高.A6,A7和A11组分细胞毒性大,对不同的肿瘤细胞有不同的抑制活性.结论 溪黄草的乙酸乙酯提取物及其分离成分具有很强的抑制乙肝病毒复制的作用,从而具有很好的抗乙肝病毒活性,进一步提取分离有利于有效成分的纯化而具更强的活性.此外,一些分离成分对不同的肿瘤细胞还有很高的细胞毒性,具一定的抗肿瘤作用.本实验为溪黄草在临床的使用及其作为潜在的高效抗乙肝和肿瘤药物的进一步研究开发工作提供了理论基础.     

三尖杉酯碱对HL60和L1210细胞核DNA结构的影响

用国产抗肿瘤药物三尖杉酯碱处理HL60 和L12 10 细胞 ,探讨药物对两种不同的白血病细胞以及在不同条件下培养的同种白血病细胞核DNA结构的影响。DNA凝胶电泳结果表明 :(1) 0 2 μg/mlHT作用 2h的HL60 细胞和HT作用 2～ 2 4h的L12 10 细胞有明显的DNAladder。 (2 )HT处理 6～ 2 4h的HL60 细胞、在DBA/ 2纯种小鼠体内培养的被HT处理不同时间的L12 10 细胞及所有对照细胞无DNAladder。 (3)HT处理 2 4h的HL60 细胞和HT处理 12h的白血病小鼠体内的L12 10 细胞核DNA断裂成碎片 ,在琼脂糖凝胶上呈弥散状分布。     

二甲基亚砜对HL-60细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

探讨二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对ＨＬ－６０细胞端粒酶活性和细胞周期的影响。采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法检测二甲基亚砜处理前后的ＨＬ－６０细胞端粒酶活性的改变,以流式细胞仪分析细胞周期的改变。二甲基亚砜作用于ＨＬ－６０细胞后,其端粒酶活性明显受到抑制,且细胞周期明显改变,Ｓ期细胞数显著减少。二甲基亚砜可抑制ＨＬ－６０细胞的端粒酶活性,阻止细胞周期的进程。     

水蛭提取物对人白血病HL60细胞体外抑制作用研究

目的：研究水蛭提取物对人白血病HL-60细胞的体外抑制作用.方法：用液氮快速冻融法制备水蛭提取物,将不同浓度提取物作用HL-60细胞,观察提取物对HL60生长与增殖的影响、诱导调亡效应、并计算出水蛭提取物作用HL-60的半数抑制浓度（IC50）.结果：浓度高于0.1mg/mL的水蛭提取物对HL60有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性;水蛭提取物作用HL60细胞48h的IC50为1.4mg/mL;另外水蛭提取物也具有诱导HL60细胞凋亡作用.结论：水蛭提取物可抑制HL60细胞增殖并诱导调亡.     

p53和血管内皮生成抑素基因共转染对HL60细胞生长的影响

目的 观察p53和血管内皮生成抑素基因(AS)共转染对HL60细胞生长和血管内皮生长因子(VEGF)、bax、bcl-2表达水平的影响,探讨联合基因治疗急性白血病的可能性.方法 选用脂质体将p53 AS转染HL60细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达.通过细胞集落形成实验、MTT试验及流式细胞仪观察p53 AS转染后对HL60细胞生长的影响.采用RT-PCR及免疫组织化学检测p53 AS转染后HL60细胞的VEGF、bcl-2与bax表达的改变.结果 p53 AS转染成功并在HL60细胞中稳定表达,明显抑制细胞的生长,协同促进凋亡,使细胞的VEGF和bcl-2表达下降,bax表达升高.结论 p53 AS转染对HL60细胞生长具有明显的抑制作用,两者存在协同效应,其机制可能是影响bcl-2/bax.