兔髁突细胞与可吸收明胶海绵复合培养的研究

目的: 研究明胶海绵作为颞下颌关节组织工程支架材料应用的可行性.方法: 采用胶原酶阶段消化法获取兔髁突软骨中的纤维软骨细胞,取经碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)扩增的第3代细胞与已用多聚赖氨酸修饰的明胶海绵复合培养,进行噻唑蓝(MTT)比色及光镜、扫描电镜观察.结果: 纤维软骨细胞于明胶海绵孔壁内牢固粘附,5 d开始增殖,4 W时有大量细胞生长于明胶海绵上.结论: 明胶海绵表现出良好的亲水性、细胞吸附性和体外生物相容性,可作为组织工程细胞培养支架材料用.     

明胶海绵与人胚半月板细胞构建复合物的研究

目的：研究明胶海绵作为半月板组织工程支架材料应用的的可行性。方法：采用胶原酶阶段消化法获取人胚半月板纤维软骨细胞，取经胰岛素样生长因子I(IGF—Ⅰ)扩增的第3代细胞与已用多聚赖氨酸修饰的明胶海绵复合培养，进行MTT、光镜、扫描电镜观察。结果：纤维软骨细胞于明胶海绵上牢固粘附，4d开始增殖，3周时已有大量细胞生长于明胶海绵上。结论：明胶海绵表现出良好的亲水性、细胞吸附性和体外生物相容性，适于作为组织工程细胞培养支架材料用。     

壳聚糖-胶原支架的降解性及生物相容性的研究

目的:将壳聚糖(Chi)与胶原(Col)制备成复合支架作为牙周组织工程材料,研究支架降解情况及生物相容性,探讨Chi-Col支架作为引导牙周骨组织再生材料的可行性,为临床治疗牙周骨组织缺损提供实践依据。方法:采用冷冻干燥法制备Chi-Col支架,将支架植入兔背部皮下,分别于2、4、6、8周后处死,取出支架及切除支架周围组织分别进行扫描电镜和HE染色,观察支架超微结构变化和周围组织变化,同时经溶菌酶体外降解实验测定其体外降解率,计算质量损失百分率。结果:扫描电镜观察可见,Chi-Col支架具有良好的多孔网状结构,孔径100μm左右,支架的孔与孔之间相互联通构成了通孔。在体内经过一段时间后支架孔径逐步表现为增多增大,结构破坏,部分降解,经体外降解计算质量损失百分率在2、4、6、8周时分别为17.52%、29.13%、40.49%、52.68%。HE染色周围组织早期可见炎症反应,继而炎症逐渐减轻,未见不良反应。结论:通过冷冻干燥法制备的Chi-Col支架,其生物学行为符合牙周组织工程的要求。Chi-Col支架可发生降解,没有观察到组织排斥反应,生物相容性好,因此有可能成为牙周组织工程的支架材料。     

脱细胞基质与颌下腺细胞体外复合培养的实验研究

目的:颌下腺细胞与脱细胞生物衍生支架材料复合培养,观察细胞在支架材料上的生长情况.方法:用传代培养第2代的颌下腺细胞与颌下腺脱细胞基质在体外复合培养,扫描电镜下观察不同时间细胞在支架材料上的生长情况.结果:颌下腺细胞多数附着在支架材料的孔隙内或其边缘,细胞大小不等、形态各异,部分细胞之间分泌基质相互连接,细胞表面凸凹不平、突起丰富、数目不等、长短不一,表面结构似"银耳"状.结论:颌下腺脱细胞基质支架材料具有良好的生物相容性,是一种较为理想的颌下腺组织工程用支架材料.     

家猪脱髓核细胞基质的制备及其生物相容性评价

目的:制备家猪脱髓核细胞基质并评价其生物相容性。方法:分离家猪脊柱髓核组织,并逐步经过胰酶、核酶及TritonX-100处理,得到脱髓核细胞基质,DAPI染色观察脱细胞效果及扫描电镜观察脱髓核细胞基质的物理形态特点,将脱髓核细胞基质溶于醋酸,制备成脱细胞基质膜,将大鼠骨髓间充质干细胞接种于基质膜上培养。在第1～5天采用CCK-8检测骨髓间充质干细胞在脱髓核细胞基质膜上的增殖情况,并计算细胞相对增殖率(RGR)来评价其生物相容性。结果:制备出的家猪脱髓核细胞基质肉眼呈白色糜状,DAPI染色发现无细胞残留。扫描电镜下观察发现,脱髓核细胞基质由无序排列的胶原纤维组成。通过CCK-8检测,5 d内细胞毒性分级在0级与2级之间。结论:家猪正常髓核组织能够进行脱细胞处理,且脱细胞后由无序的胶原纤维组成。脱髓核细胞基质具有很好的生物相容性,符合生物工程支架选材标准。     

生物降解输尿管支架材料丙交酯/乙交酯共聚物的生物相容性及体内外降解特性

目的：探讨国产生物降解输尿管支架材料丙交酯/乙交酯共聚物（PLGA 80∶20）的生物相容性及体内、体外降解特性。 方法：体内实验采用PLGA试件埋植在Wistar大鼠脊柱两侧肌肉内,体外实验采用PLGA试件浸泡于流动的尿液中,分别于观察时间内取出,通过组织病理学切片观察材料周围组织反应,利用扫描电镜检查和分子量、质量检测了解材料在体内、体外的降解情况。 结果：PLGA材料在6～7周内可降解为随尿液流动的细小颗粒;材料的体内、体外降解趋势相 同,体内降解速度略快于体外;埋植材料周围肌肉组织无脓肿形成和组织坏死发生,局部组织反应为非细菌性炎症反应。 结论：PLGA材料生物相容性良好,降解时间适宜,适用于制备输尿管支架。     

真皮支架材料的组织相容性研究

目的 探讨不同真皮材料的体内组织相容性,筛选合适的真皮支架材料.方法 将胶原、硫酸软骨素、透明质酸和甲壳糖按一定比例制备成复合凝胶,将其同胶原海绵、明胶海绵3种真皮支架材料埋植入129小鼠皮下,术后3,7,10 d;2,3,4,5,6周取材,形态学观察材料在体内的反应、血管化进程和降解速度等,评价其组织相容性.结果 复合凝胶和胶原海绵体内引起轻微的炎症反应,以创伤性修复为特征,约4周降解.明胶海绵的组织反应以淋巴细胞和巨噬细胞浸润为主,降解周期约5周.结论 3种材料均无明显毒性,组织反应低,易于血管化,相容性好.     

组织工程猪膀胱无细胞基质的制备

目的探讨猪膀胱无细胞基质制备的方法及其作为生物支架材料应用于组织工程膀胱构建的可行性。方法分别采用酶消化法和去污剂洗涤法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理并进行HE染色及电镜检查。应用MTT法进行细胞毒性测定。对5只新西兰兔行大部分膀胱切除术后,采用异种膀胱无细胞基质修补,6周后取材观察修复组织再生情况。结果两种方法均能去除膀胱中细胞成分,光镜及电镜观察无细胞成分残留,细胞毒性测定为1级,细胞相容性好。兔膀胱修补后6周支架材料上有移行上皮及肌肉组织生长。结论经脱细胞处理的猪膀胱无细胞基质具有良好的组织相容性,有作为组织工程膀胱支架材料的应用前景。     

儿童脂肪干细胞与多种尿道生物支架相容性的对比研究

目的:比较儿童脂肪干细胞与多种尿道生物支架的相容性。方法:将儿童脂肪干细胞与膀胱脱细胞基质、小肠粘膜下层组织、脱细胞尿道海绵体基质分别体外复合培养,运用倒置相差显微镜观察干细胞在这3种支架上的生长、增殖情况,并且测定细胞活性与细胞黏附率。结果:脂肪干细胞能够在3种支架上生长良好,生物活性无统计学差异(P>0.05),膀胱脱细胞基质细胞黏附率高于脱细胞尿道海绵体基质(P<0.05)。结论:脂肪干细胞与3种生物支架均有较好的相容性,膀胱脱细胞基质或是最好的选择。     

豚鼠海马神经干细胞与两种不同载体材料的生物相容性

目的:评价豚鼠海马神经干细胞与2种不同载体材料(胶原蛋白海绵和明胶海绵)的生物相容性,探讨它们作为周围神经组织工程载体材料的可行性.方法:体外培养新生豚鼠海马神经干细胞,传至第3代,将密度为1×1010/L细胞分别与2种载体材料联合体外培养,1wk后取材,进行细胞计数,倒置相差显微镜及扫描电镜观察,并测定2种材料与细胞的吸附率.结果:神经干细胞可以在胶原蛋白海绵和明胶海绵上生长,逐渐黏附,细胞吸附率分别为37.17%和14.87%,统计学分析有显著差异;各实验组与对照组之间细胞总数统计学分析无显著差异.结论:胶原蛋白及明胶2种材料尤其是胶原蛋白,具有良好的神经干细胞相容性,可以作为周围神经组织工程的支架材料应用于临床.