他罗利姆对癫痫持续状态大鼠海马的影响及脑保护作用

目的研究免疫抑制剂他罗利姆（FK506）对癫痫持续状态（SE）大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响及其脑保护作用。方法随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只。采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型,FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1?h 2次腹腔注射FK506,对照组注射等体积生理盐水;采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性;采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达;采用HE染色观察神经元形态变化。结果与癫痫组相比,FK506干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低（P均＜0.01）,SOD活性在癫痫发作后12?h以内降低（P＜0.05）,在3?d之后升高（P＜0.01）;海马nNOS的表达降低（P＜0.01）,存活神经元增加。结论FK506可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用。     

他克莫司的药物相互作用研究进展

目的介绍他克莫司和其他临床常用药物的相互作用,为临床安全应用提供参考。方法主要以国外发表的论文为基础,对他克莫司和各种药物的相互作用分别进行归纳和分析。结果他克莫司的药物相互作用包括药动学、药效学两个方面,从而使药物血药浓度或免疫抑制作用发生改变。结论他克莫司与各种药物联合应用时应尽量避免有害相互作用的产生,以达到安全、有效的治疗目的。     

他克莫司对慢性湿疹小鼠的治疗作用

目的 考察他克莫司软膏对小鼠慢性湿疹的治疗作用。方法 用2,4?鄄二硝基氯苯（DNCB）诱导小鼠背部慢性湿疹模型,模型小鼠随机分组,分别用他克莫司软膏、卤米松、凡士林治疗。观察各组小鼠皮损炎症程度及组织病理切片中炎性细胞数量改变。结果 他克莫司软膏能有效减轻慢性湿疹小鼠背部皮损炎症程度,减少组织病理切片中炎性细胞数量。结论 他克莫司软膏对慢性湿疹有明显的治疗作用。     

他克莫司对大鼠血糖的影响及其作用机制

目的 观察不同浓度的他克莫司对大鼠血糖的影响。方法选取雄性SD大鼠30只,体重70～85 g,随机等分为三组。 A组大鼠为他克莫司加五脂胶囊组,每日给予他克莫司(普乐可复 Astellas Ireland Co., Ltd生产)2 mg/kg和五酯软胶囊(四川光大制药有限公司生产)0.2粒/kg; B组为他克莫司组,每日给予他克莫司2 mg/kg; C组为对照组,每日给予同等量生理盐水,三组大鼠均在空腹时灌胃给药,用药1h后喂食。用药时间为5个月。每月监测大鼠他克莫司血药浓度和空腹血糖。结果在用药的1~5个月期间,A组大鼠他克莫司血药浓度均明显高于B组。在用药的第1个月和第2个月,三组大鼠空腹血糖无明显差异(P>0.05),用药第3个月后,A、B两组大鼠血糖均明显高于对照组(P<0.01),A组大鼠血糖略高于B组,二者之间差异并无统计学意义(P>0.05);用药第4、5个月后A、B两组大鼠的血糖持续升高,并且A组大鼠血糖明显高于B组(P<0.01);A组的胰岛素分泌指数和敏感指数均明显低于C组(P<0.01)。 结论他克莫司通过减少胰岛素的分泌、增加胰岛素抵抗导致大鼠血糖升高,这种升血糖作用呈时间依赖性和浓度依赖性。     

HPLC检测他克莫司软膏剂中他克莫司的含量

目的 建立并验证高效液相色谱法检测他克莫司软膏中他克莫司的含量.方法 Ultimate(R) XB-Diol色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为正己烷-正丁基氯-乙腈;检测波长 225 nm;流速 1.7 mL/min;温度:室温.结果 他克莫司的线性范围Y=2 600.7X-583.82,相关系数...     

他克莫司对肝移植患者血药浓度安全性的影响

目的:探究他克莫司对肝移植患者血药浓度及安全性的影响。方法:选取43例肝移植患者随机分为研究组和对照组。研究组患者23例,选择小剂量他克莫司治疗;对照组患者20例,选择大剂量他克莫司治疗;观察两组患者术后并发症、移植肝功能等情况。结果:术后第3和6个月时,两组患者移植肝的总胆红素和谷丙转氨酶有统计学差异(P<0.05),第1、2及12个月移植肝的总胆红素和谷丙转氨酶无统计学差异(P>0.05);两组患者在胆管、血管并发症及急性排斥反应上无统计学差异(P>0.05);研究组患者的糖尿病的发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:小剂量他克莫司在减少肝移植患者肝功能不全、糖尿病并发症方面其安全性优于大剂量他克莫司。     

他克莫司对全血细胞因子分泌的影响

目的研究免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,FK506)在体外对全血细胞因子分泌的影响。方法健康志愿者全血加入不同浓度FK506,经佛波酯(PMA)和离子霉素(IONO)刺激后,用Bio-Plex悬浮蛋白芯片系统检测上清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF以及G-CSF的水平。结果同对照组相比,高浓度组FK506(20ng/ml)能显著抑制IL-2、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF和G-SCF的分泌(P<0.05);中浓度组FK506(5ng/ml)能有效抑制GM-CSF的分泌,两组之间的差异有显著性(P<0.05)。结论FK506对全血细胞促炎症细胞因子IL-6,IFN-γ和TNF-α的分泌有较强的抑制作用,同时对IL-2,IL-12,IL-17以及集落刺激因子因子GM-CSF,G-CSF也有明显抑制作用。因此FK506发挥免疫抑制功能可能通过抑制免疫细胞分泌各类细胞因子来实现。同时,由于FK506与细胞因子的分泌有剂量依赖关系,有望可以通过FK506浓度水平与细胞因子的抑制水平的依赖关系来评估临床病人FK50...     

他克莫司对糖尿病大鼠肾小管间质转分化的影响

目的探讨他克莫司(FK506)对糖尿病大鼠肾小管间质转分化的影响。方法应用链脲佐菌素(65 mg/kg)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型。分别给予FK506 0.5、1.0 mg/kg.d灌胃,共4周。随机分对照组、模型组、FK506(0.5,1.0 mg/kg)组。4周后观察大鼠肾重/体重(RKW)与尿白蛋白排泄率(AER),并行肾小管-间质病理形态学分析。应用免疫组化法检测肾组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与波形蛋白(Vimentin)的表达。结果FK506 1.0 mg/kg给药组大鼠相对肾重、肾小管-间质损伤指数明显低于模型组(P<0.05,P<0.01),FK506 0.5、1.0 mg/kg给药组大鼠AER水平明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。免疫组化显示模型组肾小管间质E-cadherin表达阳性面积明显低于对照组(P<0.01),FK506 0.5、1.0 mg/kg给药组表达阳性面积明显高于模型组(P<0.01),模型组肾小管α-SMA与Vimentin表达明显高于对照组(P<0.01),FK506 0.5、1.0 mg/kg给药组表达明显低于模型组(P<0.01)。结论 FK506可部分上调E-cadherin及下调α-SMA与Vimentin在肾小管间质中的表达,抑制糖尿病大鼠肾小管-间质转分化,从而起到肾脏保护作用。     

外用他克莫司软膏在皮肤科的应用

<正>近年来国内外对新型外用钙调磷酸酶抑制剂他克莫司(FK506)在皮肤科的临床研究,证明了其在治疗异位性皮炎方面效果显著。现综述如下。1作用机制和药理学他克莫司是从土壤真菌链霉菌的肉汤培养基中分离出来的一种大环内酯类抗生素,具有极强的免疫抑制作用,其分子量较CsA小,为822,故局部外用较CsA具有更好的透皮性。与CsA相似,FK506     

他克莫司对大鼠减体积肝移植后肝再生的影响

目的:观察他克莫司对大鼠减体积肝移植后肝再生的影响.方法:建立大鼠部分肝(65%)移植模型,并随机分为对照组、他克莫司大剂量组(0.1 mg·kg-1·d-1)和他克莫司小剂量组(0.05 mg·kg-1·d-1),每组各24只.受体于术前3 d起肌注给药,每天1次,直至术后.观察术后第1、2、3、5天肝细胞有丝分裂指数(MI)、增殖细胞核抗原标记指数(PCNA LI),速率法检测血清胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)等指标.结果:肝移植术后的肝细胞有丝分裂的高峰期出现在术后48 h,他克莫司显著提高了大鼠减体积肝移植术后48 h MI及PCNA LI(P＜0.05,P＜0.01);大剂量实验组术后48 h PCNA LI高于小剂量组(P＜0.05);两种剂量组的TB、ALT没有明显改变.结论:他克莫司对大鼠减体积肝移植后肝再生有促进作用,且该作用有剂量依赖性,同时肝脏毒性较小.     

外用他克莫司治疗特异性皮炎

特异性皮炎(atopic dermatitis,AD)是现代皮肤病学中最具挑战性的难题之一.近年来,AD的发病率有所上升,最新资料表明其发病率已接近20%[1].现在,AD已被认为是一种严重影响公众健康的疾病.传统使用皮质类固醇治疗AD,但因其潜在的严重不良反应限制了其使用.目前,选择一种安全有效、适于长期治疗的药物已成为临床研究的重要课题.近年来,随着分子细胞免疫学的快速发展,出现了新的外用治疗药物.本文就外用他克莫司治疗AD的进展进行综述.     

异亮氨酸对他克莫司发酵的影响

研究了前体氨基酸对发酵合成他克莫司的影响,结果显示:在发酵初期添加2.5 g/L的异亮氨酸(Ile),他克莫司产量提高约59%。有机酸分析和丙酰CoA合成酶与丙酰激酶活性测定的结果显示:异亮氨酸的加入显著增加了丙酸(Pro)的浓度,在产物合成期丙酰CoA合成酶的最大酶活提高到600 U/g。由此表明该前体氨基酸促进他克莫司发酵合成的原因可能是其促进了丙酰CoA等前体物质的合成,从而增进了内酯环的形成。     

肾移植术后他克莫司血药浓度监测

目的监测他克莫司的血药浓度,分析肾移植术后他克莫司血药浓度与疗效及毒性的关系。方法采用微粒子酶免分析法监测116例肾移植术后患者他克莫司血药浓度,结合临床疗效进行统计、分析。结果他克莫司在肾移植术后<1,2～6,7～12,>12个月治疗浓度分别为(10.16±4.36),(7.99±2.87),(6.21±2.31),(5.15±2.05)μg/L;发生排斥反应时的浓度为(7.10±3.46)μg/L;出现肝或肾中毒反应时浓度为(24.92±7.34)μg/L。结论监测肾移植术后患者他克莫司血药浓度,有助于提高他克莫司的安全有效性。     

他克莫司对大鼠肝脏组织蛋白磷酸酶2A和P-AKT表达的影响

目的 通过观察他克莫司对大鼠血糖、胰岛素水平、肝脏组织蛋白磷酸酶2A和磷酸化AKT表达的影响,进一步探究他克莫司导致血糖升高的机制。方法 将60只雄性SD大鼠（89.83?.44g）随机均分为他克莫司组和对照组,他克莫司组（n=40）,每日空腹（禁食水8小时）灌胃给药,剂量为4mg/kg?d;对照组（n=20）,每日空腹灌胃给予等量生理盐水,每月测量大鼠体重、空腹血糖, 5个月后处死大鼠,心脏穿刺取血,;取胰腺组织和肝脏组织,测大鼠血清胰岛素水平,行胰腺组织病理组织学观察,并对肝脏行组织处理和免疫组织化学技术检测肝细胞浆质中蛋白磷酸酶2A和磷酸化AKT的表达。结果 用药2个月后,他克莫司组大鼠的血糖水平明显高于对照组（P＜0.05）,他克莫司组大鼠的胰岛素分泌指数、胰岛素敏感指数和均明显低于对照组（P＜0.05）;胰岛素抵抗指数明显增高（P＜0.05）。他克莫司组大鼠与对照组相比,其肝细胞浆质内PP2A表达明显增加,磷酸化的AKT表达明显减少。结论 他克莫司导致胰岛细胞坏死,胰岛细胞数量减少,胰岛素的分泌降低、胰岛素敏感性下降、胰岛素抵抗增加,从而导致大鼠血糖升高。他克莫司增加大鼠肝脏组织PP2A的表达,减少肝脏组织磷酸化的AKT的表达,可能通过PI3K/AKT信号转导途径参与胰岛细胞凋亡和胰岛素抵抗,引起血糖的升高。     

他克莫司对难治性肾病综合征患者临床疗效的影响

目的:探讨他克莫司(FK506)治疗难治性肾病综合征疗效及安全性。方法:肾穿刺活检诊断为难治性肾病综合征患者60例,随机分为治疗组(A组)和对照组(B组)各30例,A组FK506起始剂量为0.05 mg/(kg.d),B组环磷酰胺(CTX)1 g/月,同时口服泼尼松1 mg/(kg.d),治疗6个月,观察两组24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血肌酐水平、FK506血药浓度的变化、出现的不良反应及其疗效。结果:A组治疗6个月24 h尿蛋白定量下降程度及血清白蛋白升高程度均优于B组(P<0.01),血肌酐水平两组差异无统计学意义(P>0.05);治疗期间FK506平均血药浓度保持在4.17～7.18μg/L,A组不良反应较B组少而轻,A组总有效率90.0%(27/30),B组总有效率60.0%,差异有显著性(P<0.01)。结论:FK506是治疗难治性肾病的有效药物,并具有保护肾功能的作用,毒副作用少。     

他克莫司对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的实验性治疗

目的:研究新型免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus,FK506)对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用和作用机制,并与已论证的传统治疗方法甲基泼尼松龙对EAE实验治疗做临床对比其疗效.方法:豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制成的混合液诱导SD大鼠建立EAE模型,免疫10 d后将FK506分别以1 mg/kg,0.5 mg/kg剂量给予每日腹腔注射EAE大鼠,连续给药10 d,观察其发病情况,外周血T淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、NK细胞比率,免疫后30 d,观察脑、脊髓组织病理变化,免疫组织化学生长相关蛋白43(Growth associated protein 43,Gap-43)显示神经再生的形态学证据.结果:FK506能减轻EAE的临床症状,促进EAE的临床缓解和恢复;减轻中枢神经系统的炎症浸润;减轻髓鞘和轴突损伤,促进轴突再生作用,且停药后未见动物复发.结论:FK506对实验性变态反应性脑脊髓炎有一定的实验性治疗作用.     

他克莫司血药浓度的方法学评价

目的:探讨使用反相高效液相色谱法测定他克莫司血药浓度的可行性。方法:采用DiamonsilC色谱柱,以为乙腈:0.2%磷酸溶液:四氢呋喃(55:40:5)为流动相,流速1.0ml/min,柱温30℃。计算方法:相对回收率、绝对回收率、日内精密度以及日间精密度。结果:他克莫司血药浓度在1.32～16.0mg/ml范围内线性关系良好,平均加样回收率为103.2%。结论:本法简便、迅速、准确、易行,适用于临床他克莫司血药浓度的监测,同时为基础研究提供基础。     

癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合的变化

目的 探讨癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合的变化。方法 将50只Wistar大鼠随机分为正常对照组和癫痫组,癫痫组分为癫痫持续状态后4、8、24和72h组,观察癫痫持续状态后不同时间点大鼠海马线粒体分裂、融合的变化。Western blotting、PCR分析海马线粒体中Drp1、hFis1、 Mfn1、Opa1的表达;免疫组化分析海马CA3区神经细胞Drp1、Opa1的表达。结果 Drp1、 hFis1在癫痫持续状态后4h时开始升高,24h达高峰,72h仍处于较高水平;Mfn1、Opa1在癫痫持续状态后4h时出现短暂的升高,随即表达下降,并于24h时达最低水平。癫痫持续状态后24h时,大鼠海马CA3区Drp1阳性神经元数目显著高于对照组(P＜0.05),Opa1阳性神经元数目显著低于对照组(P＜0.05)。结论 癫痫持续状态大鼠海马线粒体分裂、融合失衡,主要表现为线粒体分裂增强、线粒体融合抑制。