胰岛素样生长因子-Ⅰ和骨形态发生蛋白-2对人牙周膜细胞增殖的作用

目的：重组人胰岛素样生长因子－Ｉ（ｒｈＩＧＦ－Ｉ）、重组人骨形态发生蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）分别或联合应用对人牙周膜（ＰＤＬ）细胞增殖的影响。方法：采用组织块法体外培养人ＰＤＬ细胞,ＭＴＴ法测定ＰＤＬ细胞在不同生长因子刺激下的增殖情况。结果：ｒｈＩＧＦ－Ｉ、ｒｈＢＭＰ－２都可促进人ＰＤＬ细胞的增殖,这种促增殖作用呈一定的浓度依赖性,ｒｈＩＧＦ－Ｉ与ｒｈＢＭＰ－２联合应用对人ＰＤＬ细胞的增殖有协同作用,且与单独应用相比相差显著。结论：ｒｈＩＧＦ－Ｉ、ｒｈＢＭＰ－２可望作为牙周再生的生物活性介质,ｒｈＩＧＦ－Ｉ与ｒｈＢＭＰ－２联合应用对ＰＤＬ细胞的促增殖作用更强。     

转化生长因子—β和胰岛素对人牙周膜细胞增殖的影响

为了评价转化生长因子－β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）和胰岛素单独或联合应用，对人牙周膜（ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔ，ＰＤＬ）细胞增殖的影响，并以两者的最佳效应浓度观察其作用的时间效应。作者采用体外细胞培养技术和ＭＴＴ［３－（４，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）－２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａ－ｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ］比色法进行观察。结果：ＴＧＦ－β浓度在０．１～１０μｇ／Ｌ、胰岛素浓度在１０～１０００Ｕ／Ｌ时，对人ＰＤＬ细胞有非常显著的促增殖作用（Ｐ＜０．０１），从第３天起增殖最为显著（Ｐ＜０．０１），并持续到第５天以后。两者的联合应用较单独用时作用显著（Ｐ＜０．０１）。结论：在牙周组织引导性再生技术中，若能同时结合ＴＧＦ－β和胰岛素的应用，可望提高治疗的效果。     

胰岛素样生长因子1对牙周膜细胞胶原合成的调节及其机理的研究

目的探讨胰岛素样生长因子（ＩＧＦ１）对人牙周膜细胞（ＰＤＬｃｅｌｓ）胶原合成的调节及ＩＧＦ１作用的细胞内分子机理，特别是多聚腺嘌呤二磷酸核糖（ＰＡＤＰＲ）反应在ＩＧＦ１调节胶原合成中的意义。方法用体外培养的人牙周膜细胞（８～１０代），观察不同浓度的ＩＧＦ１（１０～１００μｇ／Ｌ）作用１６小时后牙周膜细胞胶原合成以及细胞内乳酸代谢、ＰＡＤＰＲ合成和ＰＡＤＰＲ合成酶活性的关系。结果ＩＧＦ１能明显刺激牙周膜细胞胶原合成，同时伴随乳酸产生的增加和ＰＡＤＰＲ合成酶活性下降、ＰＡＲＰＲ合成减少。结论ＩＧＦ１可能通过影响ＰＡＤＰＲ合成而调节牙周膜细胞胶原合成。     

胰岛素样生长因子和碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的影响

目的：探讨重组人胰岛素样生长因子(rhIGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)单独及联合应用对人牙周膜细胞（PDLC）增殖的影响。方法：采用细胞培养技术,噻唑盐比色测定（MTT）法。结果：rhIGF-1和bFGF对PDLC的促增殖效应较对照组有明显提高,rhIGF-1在浓度为3.125μg/L时对PDLC作用非常显著。bFGF浓度在1－10μg/L之间时对PDLC有较强的促进增殖作用,其起效浓度是1μg/L。rhIGF和bFGF联合作用时其促增殖作用较两种因子在相同浓度时单独应用相差显著。结论：rhIGF和bFGF单独或联合应用时有促进PDLC的增殖的作用。     

两种生长因子对牙周膜细胞表达骨保护因子的影响

目的观察胰岛素样生长因子一II (IGF- II)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对牙周膜细胞增殖及分泌骨保护因子(OPG)的影响。方法培养牙周膜细胞并形成单细胞克隆,培养基中加人bFGF和IGF- I(, MIT法检测牙周膜细胞增殖水平,Sandwich ELJSA测定培养上清液中OP(;含量。结果IGF- II促进牙周膜细胞增殖但降低细胞OPG的表达量(P < 0.05) a bFGF也促进牙周膜细胞增殖(P < 0.05),但对细胞表达OPG的影响作用不明显(P> 0.05)。结论应用细胞因子促进牙周再生时应考虑其对牙周骨组织平衡的影响。     

胰岛素样生长因子-Ⅱ对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

目的：研究ＩＧＦ－ＩＩ对培养人牙周膜成纤维细胞（ＰＤＬＦ）生物学活性的影响,方法：接种一定量培养至第５代的人ＰＤＬＦ,用ＭＴＴ法和碱性磷酸酶比色法观察ＩＧＦ－ＩＩ作用下,ＰＤＬＦ的增殖和碱性磷酸酶活性的变化。结果：ＩＧＦ－ＩＩ在实验浓度范围内,对ＰＤＬＦ有较明显的促增殖作用,对ＰＤＬＦ的ＡＬＰ活性具有较强的促进作用。结论：ＩＧＦ－ＩＩ对ＰＤＬＦ的生物学活性有一定的影响,揭示其可能通过ＰＤＬＦ发挥其     

体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞表型特征的研究

目的 对体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞的表型特征进行研究探讨。方法 组织块 法培养人牙周膜细胞,放射免疫法检测条件培养基中碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和骨钙素（ＯＣＮ）的分泌活性,免疫 组化法检测非分泌型的ＡＬＰ和ＯＣＮ的表达,原位杂交方法检测二者的ｍＲＮＡ水平的表达。结果 人牙 周膜细胞具有成骨细胞的部分表型,碱性磷酸酶在蛋白水平包括分泌和非分泌型及基因转录水平都有一 定的表达,随培养时间的变化不大;而不具有成熟的成骨细胞的表型特征——骨钙素的表达,其无论是在 基因和蛋白水平都没有表达二这一结果为进一步研究人牙周膜细胞在机械力作用下参与骨改建打下基础。     

胰岛素样生长因子-I对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

胰岛素样生长因子(IGF)可通过直接作用于成骨细胞或通过甲状旁腺素间接影响骨代谢过程而参与骨的改建。本文利用细胞培养技术观察了IGF-I对培养人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性变化以及蛋白质含量改变的影响。结果显示,IGP-I对PDLFs有明显的促增殖作用,对PDLFs的ALP活性、蛋白质合成也具有较强的促进作用,表明IGF-I可能通过PDLFs发挥其调节牙槽骨改建的作用,从而在牙齿移动过程中起重要作用。     

胰岛素和转化生长因子-β对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和总蛋白含量的影响

目的：探讨胰岛素和转化生长因子－β（TGF－β）对体外生长的人牙周膜（PDL）细胞生物学特征的影响,方法：通过体外细胞培养技术,酶动力学法和考马斯亮蓝法,检测胰岛素和TGF－β单独或联合应用时对人PDL细胞碱性磷酸酶（ALPase)活性和总蛋白含量的影响。结果：单独应用时,胰岛素浓度1．0－100U／L,TGF－β浓度0．1－100ug/L,明显促进人PDL细胞的ALPase活性和总蛋白含量,最佳浓度分别为10U／L和1ug/L,以二者的最佳浓度联合应用时,作用更为显著（P＜0．01）,结论：胰岛素和TGF－β均能促进人PDL细胞的分化和总蛋白合成功能,二者联合应用有协同效应。β     

骨形成蛋白—2和成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的联合效应

目的：探讨重组人骨形成蛋白－2（rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 单独或联合作用对人牙周膜细胞（PDLCs)增殖的影响。方法：体外培养人PDLCs,分别用不同浓度的rhBMP-2和bFGF单独或联合作用,用四唑盐比色法（MTT法）进行观察。结果：rhBMP-2和bFGF单独作用后PDLCs的增殖较对照组有明显的升高;而rhBMP-2与bFGF联合作用后PDLCs的增殖较各自单独作用有更明显的升高（P＜0．05）。结论：rhBMP-2与bFGF联合应用对于促进人PDLCs的增殖具有协同作用。     

三维培养模型中胰岛素样生长因子-I对人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响

目的 了解胰岛素样生长因子-I(IGF-I)在三维培养条件下对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法 通过组织块法分离培养hPDLCs.采用旋转细胞培养系统(RCCS)建立三维培养环境.将细胞分为4组,分别为阴性对照组、阳性对照组(三维培养组、IGF-I组)、实验组(三维培养加IGF-I...     

胰岛素样生长因子—Ⅰ对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性？…

胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）可通过直接作用于成骨细胞或通过甲状腺素影响骨代谢过程而参与骨的改建。本文利用细胞增养技术观察了ＩＧＦ－Ｉ对培养人牙周膜成纤维细胞（ＰＤＬＦｓ）增殖、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性变化以及蛋白质含量改变的影响。结果显示，ＩＧＦ－Ｉ对ＰＤＬＦｓ有明显的促增殖作用，对ＰＤＬＦｓ的ＡＰＬ活性、蛋白质合成也具有较强的促进作用，表明ＩＧＦ－Ｉ可能通过ＰＤＬＦｓ发挥其调节牙槽骨改建的作用，从     

IGF-1对人牙周膜干细胞成骨能力的影响

目的探讨IGF-1是否影响人牙周膜干细胞的成骨能力。方法分离、培养牙周膜干细胞,实验分为两组：对照组和实验组（经IGF-1诱导）,进行矿化能力检测、实时定量RT-PCR检测、ALP活性检测。结果实验组人牙周膜干细胞体外矿化能力明显强于对照组。实验组人牙周膜干细胞Runx2,Collagen type I,Osteocalcin的表达以及ALP活性明显高于对照组。结论 IGF-1影响人牙周膜干细胞在体外的成骨能力。     

胰岛素对人牙周膜细胞DNA合成和细胞周期的影响

目的 :观察胰岛素对体外培养的人牙周膜 (periodontalligament ,PDL)细胞DNA合成和细胞周期的影响 ,探讨胰岛素促进PDL细胞增殖的可能机制。方法 :采用体外细胞培养技术、3H TdR掺入法和流式细胞术 ,检测胰岛素对人PDL细胞DNA合成和细胞周期的影响。结果 :胰岛素浓度在 1～ 10 0 0U /L之间时明显增加人牙周膜细胞的3H TdR掺入率 ,当浓度大于 10U/L时效应维持在稳定状态。在胰岛素作用下 ,细胞G1%较对照组降低 ,而S %和G2 M %增高。结论 :胰岛素能促进人PDL细胞的DNA合成 ,刺激细胞由G1期向S期转化     

内毒素对人牙周膜细胞Toll样受体2和Toll样受体4表达的影响

目的:观察内毒素(LPS)刺激后人牙周膜细胞Toll样受体2和Toll样受体4的表达,探讨牙周膜细胞作为免疫活性细胞在牙周炎局部免疫反应中的作用。方法:组织块法原代培养人牙周膜细胞,经来源鉴定后,取生长良好的第4代细胞用LPS进行刺激,分别于刺激0、4、8、12、24 h,运用免疫细胞化学染色法检测TLR2和TLR4在牙周膜细胞中的表达;利用多功能真彩色细胞分析管理系统进行图像分析,对TLR2和TLR4进行免疫组化评分(IHS)。结果:无LPS刺激的对照组(刺激O h)TLR2和TLR4的表达均为弱阳性,加入LPS后,染色增强,且随着刺激时间的延长而增加(P<0.05),LPS刺激后各时间点TLP2和TLR4的IHS分值与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:内毒素的刺激可以使牙周膜细胞TLR2和TLR4表达增多,提示牙周膜细胞参与牙周局部免疫反应。     

小鼠重组OSF-2对人牙周膜细胞附着和伸展的影响

目的：观察小鼠重组牙周膜细胞特异性因子2（OSF-2）对牙周膜细胞附着和伸展的作用。方法：采用固相结合分析实验及四唑盐比色等细胞生物学技术,观察牙周膜细胞在OSF-2基质上的附着能力和伸展率。结果：牙周膜细胞在OSF-2基质上附着和伸展良好,当浓度在20ug／ml以上时,作用尤其显著（P〈0．01）,与在FN基质的生长结果相似。结论：小鼠重组OSF-2可有效促进牙周膜细胞的附着和伸展。     

骨形成蛋白—2和碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的联合效应

目的了解重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)单独和联合作用对人牙周膜细胞（PDLC）碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法体外培养人PDLC,分别用不同浓度的rhBMP-2和bFGF单独或联合作用,用酶动力学方法检测PDLC的ALP活性。结果50～200μg/L浓度的rhBMP-2可显著增强人PDLC的ALP活性（P<0.01）,而10μg/L浓度的bFGF可显著抑制人PDLC的ALP活性(P<0.01),rhBMP-2和bFGF联合作用仍可较明显地增强人PDLC的ALP活性（P<0.05）。结论rhBMP-2和bFGF联合应用可增强人PDLC的ALP活性。     

机械牵张力对人牙周膜细胞成骨样细胞功能的影响

目的 观察机械力作用下牙周膜细胞成骨样细胞特性的改变，以深入探讨正畸牙齿移动的机理。方法 利用自行研制的细胞加力装置对体外培养的人牙周膜细胞施加间歇性机械牵张力，检测其成骨样细胞表型蛋白碱性磷酸酶（alkaline phosphotase,ALP)、骨桥蛋白（osteopontin,OPN)和骨钙素（osteocalcin,OCN)表达的改变。结果 人牙周膜细胞在受到机械牵引力刺激后表现为ALP分泌活性的影响，而且24h的时段内波动，2、4h和24h出现2个显著增高期（P＜0．01）；OCN受机械牵张力影响出现较缓慢和晚期的表达增强，加力4h后缓慢增高，在12h最为明显（P＜0．05）；非分泌型ALP、OPN随观察时间延长蛋白表达水平，如ALP、OCN和OPN都增强，具有时序性。提示人牙周膜细胞在机械力诱导下向成骨样细胞分化成熟，从而可能在机械力介导的骨改建中起作用。     

胰岛素对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性和总蛋白含量的影响

目的：探讨胰岛素作用下，牙周膜（ＰＤＬ）细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性和总蛋白含量的变化。方法：细胞生物学法、酶动力学法和考马斯亮蓝法。结果：胰岛素浓度超过１０－４Ｕ／ｍｌ时，明显增加ＰＤＬ细胞的ＡＬＰ活性和总蛋白含量（Ｐ＜０．０１）。其中，在１０－４～１０－１Ｕ／ｍｌ之间，效应随浓度增加而增加，超过１０－１Ｕ／ｍｌ效应趋于稳定，此时效应最大，ＡＬＰ活性和总蛋白含量分别比对照组增加１．４倍和１．２倍。结论：胰岛素明显促进ＰＤＬ细胞分化及蛋白合成功能。胰岛素作为骨代谢的重要调节因子，可能对牙周组织的再生修复有调节作用。