用寡核苷酸探针原位杂交分析骨肉瘤p53和MDM2基因的表达

ｐ５３基因是一种抑癌基因，ＭＤＭ２基因的产物是ｐ５３的结合蛋白，可使ｐ５３抑癌基因失活。了解骨肉瘤ｐ５３、ＭＤＭ２基因转录水平上的变化，可促进对肿瘤发生的基因水平变化的了解。作者用生物素标记的ｐ５３寡核苷酸探针及ＭＤＭ２寡核苷酸探针，将２０例骨肉瘤的ｐ５３、ＭＤＭ２肿瘤组织制成细胞悬液，经甩片机制成细胞甩片，４％多聚甲醛固定、蛋白酶Ｋ破坏细胞膜，常规方法进行原位杂交，金标链亲和素染色系统染色，核固红复染。２０例骨肉瘤中，８例有ｐ５３基因的高表达，占４０％；６例有ＭＤＭ２基因的高表达，占３０％；其中２例ｐ５３、ＭＤＭ２基因表达均增高。以上结果表明骨肉瘤存在有ｐ５３、ＭＤＭ２基因表达的异常。     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临…

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７．８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５．６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性病     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临床意义

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性的病例有较高的复发率和死亡率。表明ｐ５３基因突变及其蛋白过度表达在甲状腺癌的发生和发展过程中起重要作用，是预后不良的标志。     

骨肉瘤抑癌基因表达及其增殖活性的临床意义

目的 检测ｐ１６,ｐ５３基因蛋白及增殖细胞核抗原在骨肉瘤中的存在情况,探讨其与骨肉瘤发生,发展和预后的关系。方法 采用改良的免疫组化,ＡＢＣ法,对３２例骨肉瘤手术标本和１５例正常骨组织标本进行ｐ１６,ｐ５３基因蛋白,ＰＣＮＡ的检测。结果 ｐ１６,ｐ５３基因蛋白,ＰＣＮＡ的阳性表达分别为３７．５％,７５．０％,１００％,焉正常对照差异有显著性;     

骨组织恶性肿瘤与癌基因mdm2、c-myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。在１０例骨肉瘤标本中发现ｍｄｍ２扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明：癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ与抗癌基因ｐ５３参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展，其中ｍｄｍ２扩增与骨肉瘤转移密切相关。     

骨肉瘤,骨巨细胞瘤P53基因蛋白表达的定量研究

作者应用流式细胞测量及免疫荧光技术对骨肉瘤和骨巨细胞瘤细胞Ｐ５３基因蛋白表达进行了定量研究，探讨了Ｐ５３蛋白表达与ＤＮＡ倍体、细胞增殖活性和病理学及预后的关系。结果显示，骨肉瘤和Ⅲ级骨巨细胞瘤均为ＤＮＡ异倍体，Ｐ５３蛋白均为高表达，ＤＮＡ含量（ＤＩ值）、ＰＩ值和Ｐ５３蛋白表达量（ＦＩ值）明显高于Ⅰ、Ⅱ级骨巨细胞瘤，并与骨巨细胞瘤组织学分级密切相关。Ｐ５３蛋白的表达量与骨肉瘤、骨巨细胞瘤的预后相关     

人乳头瘤病毒DNA相关序列与p53基因突变对大肠癌生物学行为的影响50例报告

目的探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达的关系及其对大肠癌生物学行为的影响。方法采用ＰＣＲ方法检测大肠癌及癌旁组织、肝转移灶中ＨＰＶＤＮＡ相关序列。并应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化技术分别检测ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达。结果在５０例大肠癌中,检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ相关序列２６例（５２０％）,其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ４例（８０％）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ２２例（４４０％）。ｐ５３基因突变率为５６０％。ｐ５３蛋白表达阳性率为４２０％。ＨＰＶＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达呈正比关系。结论ＨＰＶＤＮＡ相关序列可促进细胞转化、致ｐ５３基因突变、抑制细胞的凋亡,与大肠癌的发生发展有密切关系。     

ras、p53基因突变和蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后的关系

目的　研究ｒａｓ、ｐ５３ 基因突变和蛋白表达及ＤＮＡ 倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。　方法　应用ＰＣＲＳＳＣＰ和流式免疫荧光法检测５２ 例尿路上皮肿瘤Ｋｒａｓ 和ｐ５３ 基因突变及蛋白表达和ＤＮＡ 含量变化。　结果　Ｋｒａｓ、ｐ５３ 基因突变分别为５ 例（９ ．６ ％ ） 和２２ 例（４２ ．３ ％ ） ;ｒａｓ ｐ２１ 、ｐ５３ 蛋白阳性表达分别为３６ 例（６９ ．２ ％ ） 和３３ 例（６３ ．５ ％ ） ;异倍体和二倍体肿瘤分别为２２ 例（４２ ．３ ％ ） 和３０ 例（５７ ．７ ％ ） ;ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达与肿瘤病理分级、分期及预后密切相关（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;异倍体肿瘤其ｐ５３ 基因突变、ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达率均明显高于二倍体肿瘤（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。　结论　ＤＮＡ 倍体异常、ｐ５３ 基因突变及ｒａｓ ｐ２１ 和ｐ５３ 蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后判断有重要意义。     

rasp21和p53基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究

ｒａｓｐ２１和ｐ５３基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究左连富，齐风英，胡俊兰，郭建文，刘江惠本文应用流式免疫分析技术对乳腺良性病变和癌细胞ｐ２１蛋白和ｐ５３蛋白表达进行定量研究，探讨其与病理学分级、ＤＮＡ倍体和预后的关系。１．材料和方法...     

p53基因和C—erbB—2基因在胃癌中的表达

为探讨ｐ５３基因和Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因与胃癌组织分型、浸润深度、淋巴结转移、肝转移、腹膜种植及预后关系，应用免疫组化方法检测了胃癌组织中的ｐ５３基因和Ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达情况，结果发现ｐ５３阳性染色率为２４／７２（３３．３％），Ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性染色率２０／１０６（１８．９％）。ｐ５３阳性染色与胃癌淋巴结转移、胃癌组织分型及Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达呈高度相关。Ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性染色与胃癌腹膜种植、肝转移以及肿瘤组织分型呈正相关。ｐ５３阴性表达５年生存率（４８．９％）显著高于阳性表达（１７．６％）（Ｐ＜０．０５）。Ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性表达５年生存率（３８．６％）高于阳性表达（２１．７％），但无统计学差异。单因素和多因素分析显示ｐ５３表达是一个独立的预后因素。单因素分析Ｃ－ｅｒｂＢ－２表达对预后无影响。     

乳腺癌中p53基因DNA水平突变与核蛋白水平突变的比较

目的研究ｐ５３基因ＤＮＡ水平和蛋白水平的突变。方法分别采用多聚酶链反应单链构象多态分析银染方法和链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物（ｓｔｒｅｐａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ,ＳＡＢＣ）免疫组化方法,检测了５４例乳腺浸润性导管癌标本。结果２２例在ＤＮＡ水平突变阳性,突变率为４１％;３２例在核蛋白水平突变,突变率５７％。其中２２例ＤＮＡ突变阳性者,核蛋白突变均阳性;而３２例ＤＮＡ水平突变阴性者,核蛋白突变阳性者９例,占２８％。ｐ５３ＤＮＡ突变与核蛋白突变之间有显著相关性,并且两者都与患者的淋巴结转移以及雌、孕激素受体表达有关（Ｐ＜００１）。结论免疫组化是一种快速检测ｐ５３是否存在异常的有效方法。但是在蛋白水平突变阳性者中存在一定的假阳性。ｐ５３突变阳性患者预后较差     

抗癌基因p53在肾癌组织的异常表达及其意义

研究表明，ｐ５３基因缺失或突变与众多肿瘤有关。我们采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法对肾癌组织的ｐ５３ｍＲＮＡ进行了检测。结果显示，在２１例肾癌组织中，１２例（５７％）ｐ５３ｍＲＮＡ表达异常，其中７例明显增高，５例缺失或表达明显低于正常对照。ｐ５３基因发生改变的多数是晚期和分化较差的肾癌组织，包括１例肾癌转移病灶和３例有肾静脉癌栓或肾门淋巴结转移的肾癌组织。这提示ｐ５３基因失活与肾癌密切相关，可能是肿瘤细胞向恶性发展或具有转移倾向的潜在因素之一。     

影响胰腺癌预后的因素分析

目的　探讨影响胰腺癌预后的决定因素。 方法　应用流式细胞仪检测胰腺癌ＤＮＡ倍体６２ 例,采用免疫组织化学法检测ｐ２１ 、ｐ５３ 在胰腺癌中的表达,应用Ｃｏｘ 比例风险模型对其预后因素进行分析。 结果　本组共有６２ 例经手术和病理学检查证实的胰腺癌病人,其中胰腺癌患者二倍体２５ 例,四倍体１１ 例,预后较好,平均生存期分别为２８ 个月和３０ 个月,非四倍体异倍体者２６ 例平均生存期仅为５ 个月。胰腺癌组织ｐ２１ 阳性率为８９％ ,ｐ５３ 阳性率为５１％ 。二者表达均与临床分期密切相关;单因素分析发现,ＤＮＡ倍体、后腹膜浸润、手术方式、肝转移、临床分期、ｐ２１ 表达、十二指肠浸润等与预后密切相关,多因素分析中仅ＤＮＡ倍体和临床分期是独立预后决定因素。 结论　ＤＮＡ倍体和临床分期是胰腺癌独立预后的决定因素     

ras和p53在甲状腺癌中的表达

目的 探讨ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达在甲状腺癌发生中的相互作用,以及甲状腺癌的临床病理标准与ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达的关系。方法 采用ＬＳＡＢ免疫组化法检测了ｒａｓ和ｐ５３在８０例甲状腺病变中的表达,其中５４例为甲状腺癌,２６例为良性甲状腺结节性病变。结果 ｒａｓ和ｐ５３在甲状腺癌和良性甲状腺结节性病变中的表达阳性率分别为９０．７％及２３．０％和５５．５％及３０．７％,两者相比较,差异有显著性意     

结直肠癌中p53基因缺失的研究

目的 了解中国人结直肠癌ｐ５３基因缺失的情况。方法 应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术检测２４例结直肠癌ｐ５３基因缺失。结果 发现２４例结肠癌中１０例（４１．７％）存在ｐ５３基因缺失，且发生淋巴结扩散和远处转移的结直肠癌中，ｐ５３基因缺失率较高（分别为６０％和６６．６７％）结论 ｐ５３基因缺失是结直肠癌的一种常见的结构改变，可能在结直肠癌的发生和发展中起重着的作用。     

甲状腺肿瘤中Bcl—2及p53基因产物的表达及意义

Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因可以调控细胞凋亡。我们应用Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因产物单克隆抗体，标记５３例甲状腺腺瘤及４１例甲状腺癌。结果发现，甲状腺癌和部分甲状腺腺瘤有Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因产物表达。阳性产物分别定位于肿瘤细胞浆和细胞核。在甲状腺癌、二种基因产物阳性表达率在恶性度较高的未分化癌和滤泡状癌或临床ＴＮＭ分期Ⅲ、Ⅳ期的病例增高显著。提示Ｂｃｌ－２及突变型ｐ５３基因产物与甲状腺肿瘤的发生，发展及预     

p53变异与结肠癌肝转移肝部分切除术后病人生存期的关系

目的 了解ｐ５３基因及其蛋白在结肠癌发生、转移过程中的动脉变化以及ｐ５３变异与生存期的关系。方法 ｐ５３基因ｅｘｏｎ５－９以ＤＧＧＥ及自动ＤＮＡ序列分析来检测。结果 ４１例大肠癌病人中,２６例呈ｐ５３变异（６３％）,其中６例公在肝转移灶发现ｐ５３变异,其余均为原发灶、转移灶一致性的变异。另有３例原发灶即有ｐ５３变异的病人,在转移灶出现了新增加的变异。生存分析显示,在肝转移灶含变异型ｐ５３的病人比含野生型Ｐ５３者具有更长的术后生存期。结论 在结肠癌肝转移过程中,ｐ５３变异主要开始于肠癌原发灶,并被保持于转移至肝脏的癌细胞内,小部分ｐ５３变异也可以始发于转移灶。对于实施肝部分切除术的病人,术后生存期在转移癌灶含变异型ｐ５３者长于含野生型ｐ５３者。     

骨肉瘤p－糖蛋白表达水平与肺转移

目的 研究骨肉瘤多药耐药性的表达与预后，证实ｐ－糖蛋白（ｐ－ｇｐ）介导骨肉瘤的ＭＤＲ现象，明确ｐ－ｇｐ表达与一年肺转移的关系。方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ法，检测８４例骨肉瘤中ｐ－ｇｐ表达，半定量化计量ｐ－ｇｐ的着色强度及阳笥率，通过多因素相关分析和生存分析，探讨骨肉瘤预后的相关因素和高危因素。结果 （１）８４例骨肉瘤ｐ－ｇｐ表达阳性５５．１％，其中以低表达为主，占６５．２％，高表达占３４．８％；（     

甲状腺肿瘤中Bcl-2及p53基因产物的表达及意义

Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因可以调控细胞凋亡。我们应用Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因产物单克隆抗体．标记５３例甲状腺腺癌及４１例甲状腺癌。结果发现，甲状腺癌和部分甲状腺腺瘤有Ｂｃｌ－２及ｐ５３基因产物表达。阳性产物分别定位于肿瘤细胞浆和细胞核。在甲状腺癌，二种基因产物阳性表达率在恶性度较高的未分化癌和滤泡状癌或临床ＴＮＭ分期Ⅲ、Ⅳ期的病例增高显著。提示Ｂｃｌ－２及突变型ｐ５３基因产物与甲状腺肿瘤的发生、发展及预后有关。     

骨肉瘤组织中多药耐药基因mdr—1 mRNA和p—糖蛋白的表达及其与临 …

目的 研究多药耐药基因ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ与ｐ－糖蛋白（ｐ－ｇｐ）在骨肉瘤的表达及与临床的关系。方法 ４０例骨肉瘤及１０例正常组织冰冻切片,以地高辛ｍｄｒ－１;寡核苷酸探针及ｐ－ｇｐ单克隆抗体Ｃ２１９分别进行原位杂交及免疫组化染色,并对有关临床及病理指标综合分析。结果 骨肉瘤组ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ和ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为８５％和８０％,正常骨组织相应值为１０％和０,两组间比较差异有显著性差异。