新生儿高胆红素血症117例病因分析

目的 探讨湖南省株洲地区新生儿高胆红素血症患儿的常见病因,并进行相关UGT1A1基因分析,为临床诊治提供参考依据.方法 选取2018年9月 ～2020年12月笔者医院诊断新生儿高胆红素血症的患儿117例(病例组),完善常规检查调查其病因,并全部进行UGT1A1基因检测;选取同期笔者医院未达新生儿高胆红素血症诊断标准的新...     

UGT1A1基因突变与新生儿黄疸的研究进展

新生儿病理性黄疸中以未结合胆红素(nuconjugatedhyperbilirubiiemia)升高为主占绝大部分,而其病因除了常见的母婴血型不合溶血病,感染,红细胞酶缺陷,红细胞形态异常,红细胞增多症,体内出血等,临床仍有不少病例其病因不明确。近年来对UGT1A1进行了很多研究和探索,目前的研究主要关注于UGT1A1基因多态性与新生儿黄疸的关系。本文对国内外UGT1A1基因突变与新生儿黄疸的关来进行综述,为进一步研究和防治提供理论依据。     

UGT1A1基因多态性与新生儿高胆红素血症的相关性

目的观察尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1 A1 (UGT1A1)基因的单核苷酸多态性与新生儿高胆红素血症的相关性。方法随机选取2014年9月至2016年9月在昆明市儿童医院新生儿病房住院的新生儿高胆红素血症患儿样本300例为观察组,同时随机选取无高胆红素血症的对照组样本300例。抽取静脉血2 mL,进行测定血清总胆红素值,另外,抽取静脉血2～3 mL提取基因组DNA,采用Sequenom-特定SNP位点分型检测对样本进行UGT1A1位点:rs34993780;rs35350960;rs873478;rs34946978;rs4148323检测。分析病例组与对照组之间的UGT1A1遗传多态性。结果 UGT1A1位点:rs34993780; rs873478;rs34946978;rs4148323位点检出的病例组等位基因突变率高于对照组,统计学分析,差异有统计学意义(P<0.05)。而UGT1A1rs35350960位点的等位基因突变频率为病例组1.5%和对照组1%,等位基因频率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论云南省新生儿UGT1A1rs34993780;rs873... 更多     

胆红素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因突变类型对广西新生儿高胆红素血症发病的影响

目的：从胆红素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT1A1）角度探讨新生儿黄疸的遗传学基础,探讨UGT1A1基因编码区G71R、P229Q突变型与广西地区新生儿高胆红素血症的关系。方法：33例病因不明的高胆红素血症新生儿作为病例组,27例生理性黄疸新生儿作为对照组。采用聚合酶链反应结合等位基因特异性寡核苷酸探针点杂交法（PCR-ASO）检测总共60例UGT1A1基因编码区G71R、P229Q基因突变。结果：高胆红素血症组与生理性黄疸组G71R等位基因频率分别为21.21％及5.56％,高胆红素血症组G71R基因频率显著高于生理性黄疸组,差异有统计学意义（X^2=5.9872,P〈0.02）,高胆红素血症组及生理性黄疸组共60例样本均未发现P229Q突变型。结论：G71R突变型与广西新生儿高胆红素血症的发生密切相关,P229Q突变型可能与广西新生儿黄疸发生无关。     

新生儿高胆红素血症与易感基因-UGT1A1TATA盒多态性相关性研究

目的探讨高胆红素血症与易感基因-UGT1A1 TA-TA盒的多态性相关性,进一步明确新生儿高胆红素血症的发病机制。方法实验分为高胆红素血症组(A组)和健康新生儿对照组(B组)。分别抽取患儿及健康新生儿外周静脉血,提取两组基因组DNA,PCR扩增UGT1A1基因。PCR产物纯化后直接测序找出相应的突变点。结果两组的孕龄、体质量、性别及喂养方式比较差异均无统计学意义。A、B两组基因型分布:A组基因型分布差异有统计学意义(P<0.01),A组38例杂合子A(TA)6TAA/A(TA)7TAA型基因突变占15.8%,B组占0%;A、B组均无纯合子A(TA)7TAA/A(TA)7TAA型基因突变;A组基因型突变率明显高于B组。结论易感基因-UGT1A1 TATA盒多态性与新生儿高胆红素血症具有明显的相关性。     

SLCO1 B1基因多态性与新生儿高胆红素血症的关系

目的：探讨有机阴离子转运体1B1（SLCO1B1）基因多态性与新生儿高胆红素血症的关系。方法收集121例病因不明高胆红素血症新生儿（病例组）和87例正常新生儿（对照组）外周血，用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性（ PCR-RFLP）技术测定 SLCO1B1 c．388A／G、c．521T／C、c．571T／C 及 c．597C／T 基因型。结果（1）病例组与对照组SLCO1B1 c．388A／G、c．521T／C、c．571T／C、c．597C／T 各突变位点基因型分布及等位基因频率比较，差异均无统计学意义（P＞0．05）；（2）SLCO1B1 c．388A／G、c．521T／C、c．571T／C、c．597C／T突变位点与新生儿高胆红素血症发生无相关性（P＞0．05）；（3）高胆红素血症新生儿SLCO1B1同一位点的不同基因型的总胆红素、未结合胆红素、结合胆红素水平比较，差异均无统计学意义（ P＞0．05）。结论单一存在的SLCO1B1 c．388A／G、c．521T／C、c．571T／C及c．597 C／T可能与本地区新生儿高胆的发病无关。 SLCO1B1同一突变位点的不同基因型可能对患儿血清胆红素水平影响不大。     

Research of the correlation between the polymorphism of predisposing genes-UGT1A1 TATA box and neonate hyperbilirubinemia

目的 探讨高胆红素血症与易感基因-UGT1A1 TATA盒的多态性相关性,进一步明确新生儿高胆红素血症的发病机制.方法 实验分为高胆红素血症组(A组)和健康新生儿对照组(B组).分别抽取患儿及健康新生儿外周静脉血,提取两组基因组DNA,PCR扩增UGT1A1基因.PCR产物纯化后直接测序找出相应的突变点.结果 两组的孕龄、体质量、性别及喂养方式比较差异均无统计学意义.A、B两组基因型分布:A组基因型分布差异有统计学意义(P＜0.01),A组38例杂合子A(TA)6TAA/A(TA)7TAA型基因突变占15.8%,B组占0%;A、B组均无纯合子A(TA)7TAA/A (TA)7TAA型基因突变;A组基因型突变率明显高于B组.结论 易感基因-UGT1A1 TATA盒多态性与新生儿高胆红素血症具有明显的相关性.     

遗传性非结合性高胆红素血症研究进展

遗传性非结合性高胆红素血症是由尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（uridine diphosphate glucuronosyl transferase 1A1,UGT1A1）基因突变所致的以非结合胆红素升高为主的高胆红素血症,临床以不同程度的黄 疸为主要表现,没有溶血性疾病指征或肝功能异常指标。根据 UGT1A1 酶缺乏程度及血清非结合胆红素水平, 分为 Gilbert 综合征、Crigler–Najjar 综合征Ⅰ型及Ⅱ型。本文将对非结合性高胆红素血症 UGT1A1 基因研究进 展、临床诊断、治疗和预后等方面进行综述     

表达UGT1A1重组腺相关病毒载体的构建

目的 获得表达胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸酶（UGT1A1）基因；构建UGT1A1重组腺相关病毒载体，制备腺相关病毒。方法 设计、合成引物，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）从HepG2细胞总RNA中扩增UGT1A1基因，最终连接于pAAV—MCS．双酶切、PCR鉴定阳性重组质粒。并在HEK293T细胞表达，制备高滴度重组腺相关病毒。结果 成功扩增了人类UGT1A1基因．构建表达UGT1A1基因重组腺相关病毒载体。并成功表达于HEK293T细胞。结论 本实验构建的人类UGT1A1重组腺相关病毒将为因UGT1A1活性不足导致的高胆红素血症的基因治疗奠定基础。     

新生儿严重高胆红素血症的危险因素

亚洲新生儿严重高胆红素血症发生率比白种人高。笔者用病例对照研究来调查已知的8个危险因素[母乳喂养、ABO溶血、早产、感染、头颅血肿、窒息、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏、变异的鸟苷二磷酸-葡萄苷酸基转移酶1A1(UGT1A1)基因]及在台湾地区新生儿严重高胆红素血症中一个可疑的危险因素[有机阴离子输送物2(OATP2)基因]对该病的影响。病例组由72例血清胆红素水平≥342μmol/L的新生儿组成,对照组由医院内血清胆红素水平<256.5μmol/L 的100例新生儿组成。用PCR-限制性片段长度多态性     

A new frame-shifting mutation of UGT1A1 gene causes type I Crigler-Najjar syndrome

We present a case of severe persisting unconjugated hyperbilirubinemia in a Uigur infant boy, eventually diagnosed as Crigler-Najjar syndrome type I. DNA analysis of his blood of the UGT1A1 gene sequence demonstrated that he was homozygous for an insertion mutation causing a change of the coding exons with a frame-shift, resulting in the substitution of 27 abnormal amino acid residues in his hepatic bilirubin uridine diphosphoglucuronyl transferase enzyme. Both of his parents were heterozygous for the same mutation. A novel frame-shifting mutation of the UGT1A1 gene was found, confirming the diagnosis of Crigler-Najjar syndrome type I for this patient.

     

UGT1 A1基因多态性与伊立替康治疗晚期胃肠道肿瘤不良反应和疗效的相关性分析

目的:探讨尿苷二磷酸葡糖苷酸转移酶1A1(UGT1A1)基因多态性与伊立替康治疗晚期胃肠道肿瘤不良反应和疗效的关系.方法 :在62例含伊立替康方案化疗的晚期胃肠道肿瘤病人化疗前,使用PCR-HRM法获取研究对象的外周血并检测UGT1A1基因型,分析UGT1A1基因多态性与化疗不良反应、疗效的相关性.结果 :UGT1A1*28位点野生型(TA6/6)、杂合突变型(TA6/7)、纯合突变型(TA7/7)分布频率分别是77.4%、11.3%、11.3%;UGT1A1*6位点野生型(G/G)占79.1%,杂合突变型(G/A)占16.1%,纯合突变型(A/A)占4.8%.UGT1A1*28和UGT1A1*6突变型均较其野生型增加了病人发生3级以上腹泻和中性粒细胞减少的风险(P<0.05~P<0.01).UGT1A1各基因型之间的疗效差异均无统计学意义(P>0.05).结论 :在含伊立替康方案治疗的晚期胃肠道肿瘤中,UGT1A1*28和UGT1A1*6的突变可以作为伊立替康相关严重延迟性腹泻和中性粒细胞减少的预测指标.未发现UGT1A1基因多态性与疗效之间存在相关性.     

台州市新生儿遗传性耳聋流行病学调查

目的 调查台州市新生儿遗传性耳聋流行病学并分析影响因素。方法 选取台州市2018年6月至2019年6月行新生儿遗传性耳聋筛查的465例新生儿作为研究对象，采用听力筛选、基因筛选方法筛选遗传性耳聋新生儿。收集所有复筛未通过新生儿及遗传性耳聋新生儿一般资料，分析新生儿遗传性耳聋发生单因素、遗传性耳聋基因突变情况以及新生儿遗传性耳聋发生多因素Logistic回归分析。结果 新生儿遗传性耳聋的发生与耳别、早产、外耳畸形、新生儿窒息、新生儿肺炎、高胆红素血症、家族耳聋史、遗传性耳聋基因突变相关，差异均有统计学意义（P<0.05）。复筛未通过的新生儿中89例携带遗传性耳聋基因，其中64例遗传性耳聋新生儿遗传性耳聋基因发生突变，以GJB2、SLC26A4基因突变为主。新生儿遗传性耳聋多因素Logistic回归分析数据显示，耳别、早产、外耳畸形、新生儿窒息、新生儿肺炎、高胆红素血症、家族耳聋史、遗传性耳聋基因突变与新生儿遗传性耳聋相关，其中家族耳聋史、遗传性耳聋基因突变为新生儿遗传性耳聋发生的主要影响因素，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 新生儿遗传性耳聋的发生与家族耳聋史、遗传性耳聋基因突变相关，其中以GJB2、SLC26A4基因突变为主。     

UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因多态性与伊立替康不良反应的关系

目的探讨UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因多态性在中国人中的分布,并评价其与伊立替康不良反应之间的关系。方法收集2011年3月－2012年3月在我科住院治疗的158例恶性肿瘤患者的外周血,检测其UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因型,其中132例使用伊立替康方案化疗,比较不同基因型患者的不良反应差异。结果158例中,UGT1A1＊28野生型TA6／6者126例（79．7％）,杂合突变型TA6／7者30例（19．O％）,纯合突变型TA7／7者2例（1．3％）;64例进行UGT1A1＊6基因检测,G／G野生型40例（62．5％）,G／A杂合突变型23例（35．9％）,A／A纯合突变型1例（1．6％）。UGT1A1＊28基因突变可增加2～4级迟发性腹泻发生率（TA6／6者15．0％、TA6／7者34．8％、TA7／7者50．0％,P=0．000）;联合UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因型,野生型（TA6／6且G／G）患者发生2～4级迟发性腹泻和3～4级中性粒细胞减少的概率明显低于单点变异型和双点变异型（13．0％、22．2％、100．0％,P=0．004;8．7％、25．9％、66．7％,P=0．045）。结论UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因突变患者使用含伊立替康化疗方案时不良反应发生率较高。与单一检测一个位点相比,联合检测UGT1A1＊28和UGT1A1＊6基因型能更准确地预测伊立替康不良反应。     

新生儿高间接胆红素血症77例病因探讨

目的: 探讨新生儿高间接胆红素血症(简称高胆)的病因及预防措施。方法: 对77例高胆的病因进行分析,对不同病因引起的高胆采取相应的治疗。结果: 病因依次为感染因素53例次,围生因素24例次,母乳性黄疸11例次,新生儿溶血病3例次。同一高胆患儿可存在2~3种致病因素,多因素发生率为16.88%。预后较好,77例中痊愈64例,好转12例,放弃治疗1例。结论: 做好围生期保健对预防新生儿高胆,降低其发病率有重要意义。     

An ultra-sensitive and easy-to-use assay for sensing human UGT1A1 activities in biological systems

The human UDP-glucuronosyltransferase 1A1 (UGT1A1), one of the most essential conjugative enzymes, is responsible for the metabolism and detoxification of bilirubin and other endogenous substances, as well as many different xenobiotic compounds. Deciphering UGT1A1 relevance to human diseases and characterizing the effects of small molecules on the activities of UGT1A1 requires reliable tools for probing the function of this key enzyme in complex biological matrices. Herein, an easy-to-use assay for highly-selective and sensitive monitoring of UGT1A1 activities in various biological matrices, using liquid chromatography with fluorescence detection (LC-FD), has been developed and validated. The newly developed LC-FD based assay has been confirmed in terms of sensitivity, specificity, precision, quantitative linear range and stability. One of its main advantages is lowering the limits of detection and quantification by about 100-fold in comparison to the previous assay that used the same probe substrate, enabling reliable quantification of lower amounts of active enzyme than any other method. The precision test demonstrated that both intra- and inter-day variations for this assay were less than 5.5%. Furthermore, the newly developed assay has also been successfully used to screen and characterize the regulatory effects of small molecules on the expression level of UGT1A1 in living cells. Overall, an easy-to-use LC-FD based assay has been developed for ultra-sensitive UGT1A1 activities measurements in various biological systems, providing an inexpensive and practical approach for exploring the role of UGT1A1 in human diseases, interactions with xenobiotics, and characterization modulatory effects of small molecules on this conjugative enzyme.     

稳定靶向干扰候选抗药基因UGT1A9鼻咽癌细胞株建立

目的构建针对UGT1A9基因的shRNA慢病毒干扰表达载体;建立稳定UGT1A9干扰鼻咽癌细胞株,测定干扰效率。方法应用荧光定量PCR法检测UGT1A9 mRNA在鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F和成瘤非转移细胞株6-10B之间的差异表达水平。构建重组UGT1A9 shRNA表达质粒pLentiU6/UGT1A9,经293FT细胞包装后,产生的慢病毒感染5-8F细胞,荧光定量PCR检测干扰效率。结果 UGT1A9在鼻咽癌细胞株中明显高表达。PCR、测序验证pLentiU6/UGT1A9-shRNA重组质粒构建成功;经293FT细胞病毒包装,感染5-8F细胞后,与阴性对照组和未干扰组相比,可明显抑制UGT1A9 mRNA水平。结论成功构建了稳定靶向干扰候选抗药基因UGT1A9的鼻咽癌细胞株,为研究UGT1A9可能参与介导鼻咽癌抗药的分子机理奠定了基础。     

UGT1A1 TATA基因突变对母乳性黄疸发病的影响

【目的】探讨葡萄糖醛酸转移酶UGT1A1 TATA基因突变对母乳性黄疸发病的影响。【方法】收集病例共96例,分为母乳性黄疸组和对照组。用单链构象多态性分析（PCR-SSCP）检测TATA突变。通过全自动生化分析仪测定胆红素水平。【结果】56例母乳性黄疸婴儿中,TATA突变杂合子10例、野生型46例。等位基因频率为8.93％。40例对照婴儿中,TATA突变杂合子6例、野生型34例。等位基因频率为7.50％。等位基因频率在母乳性黄疸组及对照组间无统计学差异。X^2=0.12,P=0.72。存在TATA突变杂合子的新生儿发生母乳性黄疸的OR值为1.23,95％CI为（0.41,3.71）,结果显示存在TATA基因突变杂合子的状态与母乳性黄疸的发病无关。【结论】UGT1A1 TATA基因突变对母乳性黄疸的发病无明显影响。