TGF-β1在AVP诱导的心肌成纤维细胞表型转化中的作用

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在精氨酸加压素(AVP)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化中的作用。方法:用胰酶消化法分离培养SD仔鼠的CFs,将CFs分别与不同浓度的AVP、不同浓度的TGF-β1或添加了不同浓度的抗TGF-β1中和抗体的1×10-6mmol/L AVP共同孵育48 h后,用3H-脯氨酸掺入法检测CFs胶原合成的功能,用Western blot检测CFs中平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)的表达量,用ELISA法检测CFs中TGF-β1的合成。结果:AVP可浓度依赖性地诱导CFs的3H-脯氨酸掺入率和α-SMA的表达量增加,其中1×10-6mmol/L AVP组CFs的3H-脯氨酸掺入率和α-SMA的表达量显著高于对照组(P<0.05)。AVP也可浓度依赖性地诱导CFs中内源性TGF-β1的合成增加,其中在1×10-6mmol/L AVP刺激下,CFs合成显著增加的内源性TGF-β1刚好达到外源性TGF-β1诱导CFs向MFs转化所需要的剂量(>2 ng/ml)。抗TGF-β1中和抗体虽然能够显著抑制在10-6mmol/L AVP诱导下CFs的3H-脯氨酸掺入率和α-SMA的表达量(P<0.05),但却不能将其抑制到与对照组相近的水平(P<0.05)。结论:AVP刺激下CFs中内源性TGF-β1合成的增加可部分地介导AVP诱导的CFs向MFs转化。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β_1表达与心肌肥大的研究

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和转化生长因子β1 (TGFβ1 )在人体超负荷性心肌肥厚发生机制中的作用。方法 :用免疫组织化学及原位杂交技术检测 32例 (左、右室心肌各 16例 )肥大心肌组织中b FGF和 TGFβ1 的表达。结果 :无论是压力还是容量超负荷都可使心肌细胞 b FGF、TGFβ1 表达增加 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1)。结论 :b FGF和 TGFβ1 可能是介导临床超负荷性心肌肥厚发生的因素之一。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1 表达与心肌肥大的研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和转化生长因子β     

心房颤动患者血清TNF-α、TGF-β水平及其对心肌成纤维细胞趋化作用的影响

目的研究心房颤动与非心房颤动患者血清中转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的动态变化及其对心肌成纤维细胞趋化运动诱导能力的差异。方法采用酶联免疫吸附法检测心房颤动与非心房颤动患者血清中TGF-β、TNF-α蛋白含量;培养新生SD大鼠的心肌成纤维细胞,取3~4代细胞采用Transwell装置检测不同浓度(1μg/L、10μg/L、50μg/L)的TGF-β、TNF-α诱导成纤维细胞运动的能力差异。结果血清中TGF-β、TNF-α含量各组均有明显差异,其中持续性心房颤动组最高,非心房颤动房性心律失常组明显高于阵发性心房颤动组,对照组最低;在不同浓度(1μg/L、10μg/L、50μg/L)TGF-β、TNF-α的趋化诱导作用下,迁移至下室的细胞50μg/L组较其它浓度组明显增高,10μg/L组次之,与其它各组比较均具有统计学意义。Logistic回归分析表明,迁移至滤膜下的细胞数与血清中TGF-β、TNF-α含量有相关性。结论各组血清中TGF-β、TNF-α含量不同,说明心房颤动的发生与潜在的炎症状态有关;TGF-β、TNF-α对心肌成纤维细胞具有趋化作用,心房颤动患者心肌成纤维细胞的趋化作用部分是由TNF-α、TGF-β介导的;血清中TNF-α、TGF-β水平变化间接反映了心肌损伤的存在、范围和程度。     

MAPK信号通路在FGF1刺激大鼠原代肝细胞增殖中的作用

目的观察MEK／MAPK信号通路在FGF1刺激体外培养原代大鼠肝细胞增殖中的作用。方法体外培养原代大鼠肝细胞分三组，第二组培养基中加入FGF1，第三组加FGF1和MEK1阻滞剂PD98059，一定时间后检测并分析不同组肝细胞增殖情况。结果FGF1组与FGF1＋PD98059组肝细胞进入S期无差别，但与对照组却有差别。结论本实验条件下Src／Raf／MEK／MAPK通路组分MEK1的特异阻滞剂PD98059不能阻断FGF1促进体外培养的原代大鼠肝细胞增值的作用。     

槲皮素对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞的影响

目的研究槲皮素(Que)对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法采用酶消化法和差速贴壁法获得纯化的CFB,应用MTT法测定CFB增殖,羟脯氨酸法测定胶原蛋白含量,化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活力含量,实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测CFB的Ⅰ型胶原(ColⅠ)、转化生长因子(TGF)-β1基因的mRNA表达。结果槲皮素在10⁴0μmol/L浓度范围内可明显抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原蛋白合成增加,同时可升高SOD含量、降低MDA活力,可以降低ColⅠ、TGF-β1蛋白的mRNA表达。结论槲皮素可抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原蛋白合成的作用,从而延缓心肌纤维化的发展。     

单核细胞趋化蛋白-1对高血压心肌纤维化的作用及其与转化生长因子-β的关系

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 1（MCP 1）和转化生长因子 β（TGF β）对高血压心肌纤维化的影响 ,探讨炎性反应在高血压心肌纤维化发生发展中的作用。方法 :用左旋硝基精氨酸甲酯 （L NAME）喂饲建立高血压模型。用组织学的方法评估心肌纤维化的程度和RT PCR测定大鼠心脏组织内MCP 1与TGF β的mRNA水平。 结果 :①慢性阻断一氧化氮合酶 （NOS）活性显著升高大鼠尾动脉血压。②慢性阻断NOS活性可引起心脏间质纤维化和血管周围纤维化。 7d组、14d组和 2 8d组的胶原容积分数 （CVF）与对照组比较均有显著性差异 （P <0 .0 5 ） ;7d组、14d组和 2 8d组的血管周围胶原面积 （PVCA）与对照组比较均有显著性差异 （P <0 .0 5 ）。③MCP 1mRNA水平在给药后第 3d有明显升高 ,随后逐渐下降。 3d组、7d组 ,14d组和 2 8d组的的MCP 1mRNA的水平与对照组比较均有显著性差异 （P <0 .0 5 ）。④TGF βmRNA水平在慢性阻断NOS后 7d显著升高 ,随后维持于较高水平直至第 2 8d。 7d组、14d组和 2 8d组TGF βmRNA的水平与对照组比较均有显著性差异 （P <0 .0 5 ） ,3d组TGF βmRNA的水平与对照组比较无显著性差异 （P >0 .0 5 ）。结论 :①MCP 1和TGF β均参与高血压心肌纤维化的发生发展。②MCP 1可能是高血压心肌纤维化的启动因素 ,TGF β可能对?     

人心肌肥大时碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子表达的变化及其意义

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因了（bFGF)和转化生长因子β1（TGFβ1)在人体超负荷性心肌肥厚发生机制中的作用。方法：用天狼猩红、免疫组织化学及原位杂交技术检测了32例肥大心肌（左、右心室心肌各16例）组织中胶原、bFGF和TGFβ1mRNA和蛋白的表达情况。结果：压力和容量超负荷都可使心肌组织胶原增生,bFGF、TGFβ1 mRNA和蛋白表达水平显著增加。bFGF、TGFβ1 mRNA和蛋白表达水平与心肌细胞横径增加呈显著正相关,TGFβ1 mRNA和蛋白表达水平与心肌胶原总量也呈显著正相关。结论：bFGF和TGFβ1表达可能是介导人体超负荷性心肌肥厚发生的因素之一。     

Notch3表达下调在诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用

目的:探讨Notch3在心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化中的作用。方法:用胶原酶消化法分离培养SD仔鼠的CFs,将其于不同浓度的转化生长因子-β1(TGF-β1)孵育24 h。用Western blot检测CFs中平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)及Notch3的表达量,用ELISA法检测细胞上清羟脯氨酸含量,用Real-Time PCR检测Notch3 mRNA表达量;利用RNAi法干扰CFs中Notch3的表达,用实时PCR及Western blot检测干扰效果;Western blot检测α-SMA蛋白表达量,ELISA检测各组细胞上清羟脯氨酸含量。结果:TGF-β1可浓度依赖性地诱导CFs细胞上清羟脯氨酸含量增加和α-SMA表达增加,同时使Notch3表达下降,其中2 ng/ml,5 ng/ml,10 ng/ml 3个浓度组与对照组相比有统计学差异(P0.05)。RNAi法干扰Notch3后,干扰组与对照组相比,Notch3 mRNA及蛋白表达均下降(P0.05),同时,干扰组细胞上清羟脯氨酸含量及α-SMA表达均增加(P0.05)。结论:Notch3表达下调能诱导CFs向MFs转化。     

老年大鼠肺成纤维细胞表型改变和转化生长因子-β1水平变化

目的 对比观察老年大鼠和成年大鼠肺脏成纤维细胞表型的改变和转化生长因子(TGF)-β1水平的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增长而增高的可能机制.方法 免疫组化法测定大鼠肺组织内α-平滑肌肌动弹白(α-SMA)含量,观察成纤维细胞表型的改变.ELISA法测定TGF-β1蛋白水平.荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定TGF-β1 mRNA表达量的变化.结果 老年大鼠肺脏较成年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加(P＜0.01),TGF-β1蛋白水平升高[分别为(999.54±246.11)pg/g和(755.7±160.38)pg/g](P＜0.05),TGF-β1 mRNA(P＜0.01)表达水平降低.结论 老年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加和TGF-β1蛋白水平升高可以构成肺间质纤维化随年龄增长发病率增高的基础,老化肺脏内TGF-β1水平升高是受到mRNA转录后调控机制的影响.     

成纤维细胞激活蛋白和转化生长因子-β1在小鼠肝纤维化组织中的表达及相关性

目的探讨成纤维细胞激活蛋白（FAP）、α-SMA和TGF-β1在小鼠肝纤维化组织中的表达和三者之间的关系。方法建立四氯化碳诱导的小鼠实验性肝纤维化模型,应用免疫组织化学技术检测小鼠肝纤维化组织中FAP、α-SMA和TGF-β1的表达。结果FAP、α-SMA和TGF-β1与小鼠肝纤维化程度呈正相关（rs分别为0.753,0.762,0.834,P〈0.0001）;且FAP与α-SMA、FAP与TGF-β1的表达均呈正相关（rs为0.825和0.814,P〈0.0001）。结论FAP可作为判定肝纤维化程度的指标之一,且可能与TGF-β1共同促进肝纤维化进展。     

促红细胞生成素对心脏成纤维细胞表型转化的影响及其信号机制

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导培养的乳鼠心脏成纤维细胞(CF)表型转化的影响,以及其可能的信号通路(TGF-β1-TAK1-p38MAPK)在其中的作用.方法 体外分离培养乳鼠心脏成纤维细胞,用10-6 mol/L的AngⅡ诱导培养心脏成纤维细胞表型转化,加入20 kU/L的EPO进行预干预,同时加或不加15 μmol/L的SB203580进行处理,以平滑肌肌动蛋白(SMA)表达作为心脏成纤维细胞表型转化的观察指标,应用免疫组织化学观察心脏成纤维细胞内SMA表达情况;采用实时荧光定量PCR方法检测细胞内信号分子转化生长因子β1(TGF-β1)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK) mRNA的表达情况;采用蛋白免疫印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、转化生长因子激活性激酶1(TAK1)、p38MAPK以及磷酸化的TAK1(p-TAK1)和p-p38MAPK的表达情况.结果 20 kU/L的EPO能有效抑制AngⅡ诱导的CF细胞表型转化,减少CF细胞内α-SMA蛋白的沉积,降低CF表型转化相关信号分子TGF-β1、p-TAK1、TAK1、p-p38MAPK和p38MAPK的活化或表达,且加入SB203580后该作用增强.结论 EPO可抑制AngⅡ诱导的乳鼠心脏成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞,减轻心肌纤维化,并可降低相关信号分子mRNA及蛋白的表达,初步考虑EPO抑制心肌纤维化,减轻心室重构的作用是通过TGF-β1-TAK1-p38MAPK进行的.     

丝裂原活化蛋白激酶在醛固酮诱导心室成纤维细胞增殖中的作用

目的:探讨醛固酮诱导心肌成纤维细胞(CFs)增殖的信号转导机制.方法:用胰酶消化法分离、培养新生大鼠CFs,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法、western-blotting技术从DNA合成、蛋白表达等方面观察MAPK活化与醛固酮促CFs增殖的关系.结果:①醛固酮剂量依赖性促CFs DNA合成,10-5mol/L PD98059 [(782±152)个·min-1] 可逆转 10-7mol/L醛固酮 [(1879±169)个·min-1]的作用;②10-7mol/L醛固酮对活化MAPK蛋白表达有显著增强作用,在4 h达峰作用(8.11±0.46),10-7mol/L 醛固酮的作用(8.11±0.46)被10-5mol/L PD98059 (1.21±0.10, P<0.01)阻断.结论:醛固酮能激活CFs的MAPK,MAPK表达及活化参与醛固酮诱导的CFs增殖.     

单核细胞趋化蛋白-1对高血压心肌纤维化的作用及其与转化生长因子-β的关系

目的研究单核细胞趋化蛋白-1(mononuclear chemotaxis protein-1,MCP-1)和转化生长因子-β(transforming growthfactor-β,TGF-β)对高血压心肌纤维化的影响,探讨炎性反应在高血压心肌纤维化发生发展中的作用.方法左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)喂饲建立高血压模型.用组织学的方法评估心肌纤维化的程度.RT-PCR测定大鼠心脏组织内MCP-1和TGP-β的mRNA水平.结果(1)慢性阻断一氧化氮合酶活性显著升高大鼠尾动脉压.(2)慢性阻断一氧化氮合酶活性可引起心脏间质纤维化和血管周围纤维化.7 d组、14 d组和28d组的胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)分别为4.45%±0.20%、5.42%±0.68%和7.02%±0.82%,与对照组3.12%±0.08%比较均有显著性差异(P＜0.05);7 d组、14 d组和28 d组的血管周围胶原面积(perivascular collagen area,PVCA)分别为0.85%±0.09%、1.18%±0.16%和1.52%±0.20%,与对照组(0.51%±0.05%)比较均有显著性差异(P＜0.05).(3)MCP-1 mRNA水平在给药后第3天即有明显升高,随后逐渐下降.3 d组、7 d组、14 d组和28d组的MCP-1 mRNA的水平分别为0.82±0.12、0.38±0.06、0.31±0.05和0.22±0.02,与对照组(0.11±0.01)比较均有显著性差异(P＜0.05).(4)TGF-β mRNA水平在给处理后7 d显著升高,随后维持于较高水平直至第28天.7 d组、14 d组和28 d组TGF-β mRNA的水平分别为1.13±0.08、1.52±0.17和1.46±0.12,与对照组(0.18±0.02)比较均有显著性差异(P＜0.05),3 d组TGF-β mRNA和水平为0.21±0.03,与对照组0.18±0.02比较无显著性差异(P＞0.05).结论(1)MCP-1和TGF-β均参与高血压心肌纤维化的发生发展.(2)MCP-1可能是高血压心肌纤维化的启动因素,TGF-β可能对促进和维持高血压心肌纤维化起重要作用.     

心肌成纤维细胞分泌生长因子在心肌重塑中的作用

本文论述心肌成纤维细胞在一些理化因素刺激下，多种生长因子分泌的变化及生长因子网络失衡在心肌重塑中的作用。     

转化生长因子β1/Smad通路调控糜酶诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad(线虫Sma分子和果蝇Mad分子的组合)信号通路对糜酶诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响。方法:用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs。采用氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定CFs的DNA合成,Westernblot检测TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3及Smad7的蛋白的表达。结果:①糜酶可以浓度依赖的方式增加CFs的3H-TdR掺入率。15、30和60μg/L组3H-TdR的掺入率分别为(319±29)、(372±43)和(401±47)cpm/孔,均高于对照组[(252±35)cpm/孔,P0.01]。②随着糜酶作用浓度的增加,CFs中TGF-β1蛋白的表达呈递增趋势。15、30和60μg/L组的TGF-β1蛋白的表达水平分别为0.968±0.069、1.782±0.058和2.656±0.085,均较对照组(0.333±0.023)显著升高(P0.05或P0.01)。③糜酶可以浓度依赖的方式上调p-Smad2/3蛋白的表达、下调Smad7蛋白的表达,15、30和60μg/L组的p-Smad2/3蛋白表达的水平均较对照组显著升高(P0.01),Smad7蛋白表达的水平均较对照组明显降低(P0.05或P0.01)。不同浓度的糜酶对Smad2/3蛋白的表达均无明显影响。结论:糜酶具有促进CFs增殖的作用,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。     

成纤维细胞生长因子在心血管损伤中的保护作用

<正> 近十年来,人们对成纤维细胞生长因子(FGFs)进行了深入研究,发现在心血管损伤中,FGFs具有一系列有益作用,如促进动脉球囊成形后内皮的再生及其功能的恢复;增加冠脉阻塞后侧支血管的形成;保护侧支循环内皮依赖性松驰反应,更有人提出,尿中碱性FGF(bFGF)水平的升高可作为临床上提示心肌缺血发作的一项生化标志.本文主要就FGFs在心血管损伤中的一系列保护作用做一介绍.     

碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1与肝纤维化的研究

碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)是肝纤维化促进因子,是激活肝星状细胞(HSC)并促进其表达细胞外基质(ECM)关键因子,在肝纤维化的发展中具有重要作用。现就其二者与肝纤维化关系的研究进展做一综述。1碱性成纤维细胞生长因子的特征、合成及表达1·1 BFGF的特征成纤维细胞生长因子(FGF)是体内分布广泛的生长因子之一,1974年首次从牛脑垂体中分离纯化而来,目前研究较多的有酸性FGF(AFGF),碱性FGF(BFGF)等[1]。BFGF是Bohlen等1984年从牛脑垂体中分离纯化而来,主要分布于脑、肝、肾、骨、软骨等组织,及…     

转化生长因子β1与心肌纤维化

心肌纤维化（MF）是高血压左室重构的主要表现之一，转化生长因子β1（TGF-β1）是这一过程中的重要生物活性因子，体内和体外实验都表明，TGF-β1的过度表达与心脏肥大和MF密切相关，TGF-β1上调Ⅰ、Ⅲ型胶原合成并抑制胶原酶的释放，促进MF的发生。多种药物可对TGF-β1的表达产生抑制，血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂和TGF-β拮抗剂在降低TGF-β1表达和减轻MF方面显示良好作用。     

p38 MAPK和JNK信号通道在TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞上皮-间质转化中的意义

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）和c-Jun氨基端激酶（JNK）信号通道在转化生长因子β1 （TGF-β1）诱导的人肺泡上皮细胞上皮-间质转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）中的意义,从而进一步揭示肺纤维化的发病机制.方法 使用TGF-β1诱导A549细胞EMT,分别在蛋白水平（使用p38 MAPK抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125）和RNA水平（RNA干扰）抑制p38 MAPK和JNK信号通道,检测抑制后A549细胞的p38 MAPK和JNK的蛋白和mRNA,以及间质细胞表型蛋白包括结蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和上皮细胞表型蛋白包括E-钙黏素、紧密连接蛋白-1、水通道蛋白-5的表达.结果 TGF-β1可以诱导A549细胞EMT,表现为间质细胞表型蛋白表达的增加和上皮细胞表型蛋白表达的减少,这一过程p38 MAPK和JNK通道表达也增加,无论蛋白水平抑制或基因沉默p38 MAPK和JNK均可减轻A549细胞的EMT.结论 p38 MAPK和JNK信号通道在TGF-β1诱导的A549细胞EMT过程中起重要作用.