肝细胞癌组织中HLA-DR,-DQ的表达及其意义

目的探讨人白细胞抗原(HLA)-DR和-DQ分子在肝细胞癌的表达及其意义。方法采用免疫组化法分别检测HLA-DR和HLA-DQ抗原在38例人肝癌组织芯片中的表达情况,并和临床病理资料进行相关性分析。结果肝癌组织中HLA-DR和HLA-DQ抗原信号主要定位于细胞浆。HLA-DR的阳性率为5.3%(2/38),HLA-DQ的阳性率为92.1%(35/38),但在4例伴淋巴结转移的肝癌中,3例无HLA-DQ的表达,HLA-DQ表达与肝癌的淋巴结转移负相关(P<0.0001)。HLA-DR和HLA-DQ表达与年龄和肝癌的组织分化无相关性(P>0.05)。结论 HLA-DQ的表达在肝癌组织中很常见,无HLA-DQ的表达可能提示与淋巴结转移有关。     

HLA-DR抗原在胃癌组织中的表达

目的探讨HLA-DR在胃癌组织中的表达及其意义,为胃癌的免疫治疗和预后判断提供实验依据。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应检测36例胃癌及正常胃黏膜上皮中HLA-DR抗原的表达情况,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系。结果HLA-DR蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(58.3%)显著高于正常胃黏膜上皮(5.60%,P<0.05),并且其在胃癌组织中的阳性表达率随分化程度的降低而显著降低(P<0.05);HLA-DR蛋白的表达与胃癌患者的浸润深度无明显关系(P>0.05);HLA-DR蛋白在有淋巴结转移者中的阳性表达率(43.5%)显著低于无淋巴结转移者(84.6%)(P<0.05)。HLA-DR mRNA在胃癌组织中的阳性表达率(52.9%)及表达水平(0.760±0.158)均显著高于正常胃黏膜上皮(8.30%,0.551±0.027,均P<0.05);HLA-DRαmRNA的表达与与胃癌患者的分化程度和浸润深度无关(P>0.05)。结论HLA-DR的表达可能与胃癌的发生发展有关,并对判断胃癌患者的生物学行为具有一定意义。     

巨细胞病毒在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达

目的探讨巨细胞病毒(CMV)在慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中表达意义。方法采用免疫组化以抗-CMV单克隆抗体对76例CHB患者肝组织进行检测,然后用抗-HBcAg多克隆抗体和抗-CMV单克隆抗体双标记技术在CHB患者同一张肝组织切片上显示两种病毒分布特点。结果轻度和重度慢性肝炎患者CMV检出率无显著差异(P=0.444),而重度CHB患者中CMV表达阳性细胞明显多于轻度患者(P=0.012)。双标记染色显示CMVAg和HBcAg多数表达于肝小叶内同一区域肝细胞甚至同一肝细胞内,也可见于肝小叶中不同部位。结论CHB患者更易重叠CMV感染,并且其感染程度与肝组织的活动性病变密切相关。     

慢性乙型肝炎肝硬化淋巴细胞亚群及HLA-DR抗原的表达

目的 检测慢性乙型肝炎和肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群和T细胞活化抗原HLA-DK的表达,探讨其免疫功能变化及临床意义.方法 研究对象为慢性乙型肝炎和肝硬化患者,共127例,其中慢性乙型肝炎61例(轻度17例,中度25例,重度19例),肝硬化66例(脾切除28例,非脾切除38例),同时设立健康对照组22例.采用流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群和T细胞活化抗原HLA-DR.结果 慢性重度乙型肝炎患者CD8+细胞高于健康对照组,慢性轻度和中度乙型肝炎CD8+细胞与健康对照组无差异;肝硬化脾切除及非脾切除患者CD3+和CD8+细胞低于健康对照组,肝硬化脾切除患者同时有CD4+细胞下降.肝硬化脾切除患者CD3+、CD4+和CD8+细胞低于非脾切除组;肝硬化脾切除及非脾切除患者CD19+高于健康对照组;肝硬化脾切除组HLA-DK抗原与健康对照组无差异,其余各组均高于健康对照组.肝硬化脾切除患者CD3+DR+和CD8+DK+抗原低于肝硬化非脾切除组.结论 慢性乙型肝炎和肝硬化患者存在一定的免疫功能紊乱现象.主要表现为T细胞数量失衡和活化异常,以肝硬化脾切除患者最为明显.     

慢性乙型肝炎肝组织HBsAg和HBcAg的表达

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg和HBcAg的表达与血清HBV-DNA含量、肝组织中HBV-DNA含量、肝组织病理及临床之间的关系。方法选择慢性乙肝患者83例,检测血清HBV-DNA的含量,并行肝穿刺取肝组织,用免疫组化法检测乙肝患者肝组织中HBsAg和HBcAg的表达并检测肝组织中HBV-DNA的含量,同时行常规肝组织病理染色。结果在慢性乙型肝炎患者肝组织内HBsAg和HBcAg阳性表达率分别为81.9%和53%。HBsAg 98.5%是浆膜型;HBcAg浆膜型占62.8%、胞核型占37.2%,浆膜型的肝组织炎症、纤维化较胞核型明显。HBsAg表达强度与血清HBV-DNA定量、肝组织HBV-DNA定量及肝组织炎症和纤维化之间均无相关性。HBcAg表达强度随着血清HBV-DNA定量的增加而增加,呈正向关联（r=0.291,P=0.008）,与肝组织HBV-DNA定量呈现明显的正向关联（r=0.664,P〈0.001）,与肝组织炎症、纤维化分级也呈正相关（r=0.611,0.841,P〈0.001）。结论慢性乙肝患者肝组织免疫损伤发生的免疫应答的主要抗原是HBcAg。将肝组织中HBcAg的表达结合HBV-DNA载量作为抗病毒治疗指标更可靠。     

平滑肌肌动蛋白在乙型肝炎肝组织中的表达

目的：探讨平滑肌肌动蛋白在乙型肝炎肝组织中的表达及其与肝病变的关系。方法；各型乙肝肝标本２７０例，对照组１０例，ＳＭＡ免疫组化标记。结果；在正常肝组织，ＳＭＡ仅在原有的肝内动静脉及胆管壁表达。在乙肝肝标本中，ＳＭＡ还在血管病变区阳性或强阳性表达，且ＳＭＡ表达的强弱及分布部位与肝病变密切相关。结论：ＳＭＡ在乙肝的病理发生和发展过程中有重要的参考价值。     

慢性乙型肝炎肝组织HBsAg和HBcAg的免疫组化检测及其意义

应用PAP和ABC法分别对54例慢性乙肝肝组织中HBaAg和HBcAg进行检测,分析了两种抗原在肝组织中的存在状态与肝脏病理变化及血清HBV复制指标间的关系。发现肝组织中HBV抗原检出率与肝炎病变程度呈负相关(P<0.05)。三种病理类型肝组织中,HBsAg均以胞浆型为主;膜型HBsAg主要见于CAH.ASH和CPH时,HBcAg以核型表达为主,面CAH时以浆膜型为主。膜型HBsAg和浆膜型HBcAg表达区易见到肝细胞坏死及炎性细胞浸润。还发现肝组织中HBcAg的检出与血清HBcAg和HBV-DNA密切相关(P<0.005)。上述结果提示:①肝细胞损伤可能并非HBV直接作用,而是机体针对HBV的免疫反应所致;膜型HBsAg和浆膜型HBcAg可能是肝细胞免疫损伤的靶抗原。②肝组织内HBcAg的存在是HBV复制标志。     

Fas在慢性乙型肝炎肝组织中表达的意义

目的 通过检测慢性乙型肝炎患者肝组织Fas的表达,探讨Fas-FasL系统在慢性乙型肝炎发病机制中的作用及其临床意义.方法 62例慢性乙型肝炎患者肝脏穿刺取肝组织做病理活检.免疫组织化学法检测肝组织中Fas的表达,分析肝组织中Fas表达与肝组织炎症、纤维化及临床分型间的关系.结果 慢性乙型肝炎患者肝组织细胞中Fas表达随着肝脏炎症活动度和肝纤维化进展程度加重而增加(P均<0.01),随着临床病情的加重而增加(P<0.01).结论 Fas-FasL系统与慢性乙型肝炎患者肝组织的炎症和纤维化有关,Fas-FasL系统介导的肝细胞凋亡可能是慢性乙型肝炎发病机制之一.     

Caspase-3在慢性乙型肝炎中的表达及意义

目的通过对照观察正常人与慢性乙型肝炎患者肝组织Caspase-3及血清谷丙转氨酶水平,探讨Caspase-3在慢性乙型肝炎发病中的意义。方法应用免疫组化方法对66例CHB患者和15例正常肝组织进行Caspase-3检测,并检测CHB患者血清谷丙转氨酶水平。结果乙型肝炎患者Caspase-3表达显著高于正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Caspase-3表达与CHB炎症分级显著正相关(P<0.05),与血清ALT和CHB纤维化程度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Caspase-3表达的活性随肝炎炎症程度增高而增强,从而对慢性乙型肝炎患者肝细胞凋亡产生影响作用。     

慢性乙型肝炎病人MANF蛋白的表达及意义

目的:探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子（MANF）蛋白水平与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性。方法:选取慢性乙型肝炎病人87例和健康志愿者80名,采用酶联免疫吸附法检测外周血MANF蛋白水平,同时对慢性乙型肝炎病人进行肝脏穿刺病理学检查。结果:87例慢性乙型肝炎病人中,肝纤维化程度S0～S1有21例,S2有35例,S3～S4有31例;炎症活动度G1有20例,G2有25例,G3有23例,G4有19例;慢性乙型肝炎病人外周血MANF蛋白水平为（2.51±0.56） mg/mL,显著高于健康志愿者的（1.43±0.32） mg/mL （P<0.01）;肝纤维化程度S3～S4患者外周血MANF蛋白明显高于S2和S0～S1病人（P<0.01）;炎症活动度G2、G3和G4病人外周血MANF蛋白明显高于G1病人（P<0.05～P<0.01）;慢性乙型肝炎病人外周血MANF蛋白与肝纤维化程度、炎症活动度呈显著正相关（r_s=0.448和r_s=0.324,P<0.05）。结论:MANF蛋白水平与慢性乙型肝炎病人肝纤维化程度呈正相关。     

重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的表达及意义

目的 研究人纤维介素基因(hfgl2凝血酶原酶／墟皿)在重型乙型肝炎患者肝组织内蛋白及mRNA水平的特异性表达,hfgl2表达的细胞类型及其与纤维蛋白沉积、微血栓及肝细胞坏死形成之间的关系。方法采用免疫组化法研究了23例重型乙型肝炎、13例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者的肝组织及重型乙型肝炎患者的肝外组织中蚓2的表达,同时制备hfgl2cDNA探针并对上述组织进行原位杂交以了解其在mRNA水平的表达。对枯否氏细胞表面标志CD68、纤维蛋白进行了检测。进一步对在重型肝炎肝组织中hfgl2凝血酶原阳性标本进行了hfgl2凝血酶原酶和纤维蛋白双染色。结果21例重型乙型肝炎患者肝组织中可见hfgl2表达,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者的肝组织、重型乙型肝炎肝炎的肝外组织均无hfgl2表达。重型乙型肝炎肝组织枯否氏细胞明显增生活化,主要分布于炎性坏死区,表达hfgl2之细胞主要为活化枯否氏细胞和血管内皮细胞,邻近组织发现有纤维蛋白的沉积和微血栓的形成。结论hfgl2在重型乙型肝炎肝组织活化枯否氏细胞中的异常表达,激活凝血酶原,启动局部的凝血过程,导致纤维蛋白的沉积、微血栓的形成、微循环障碍和局部炎性反应,并最终引发肝细胞大量坏死,提示hfgl2高表达是重型肝炎肝细胞坏死重要分子机制之一。     

穿孔素在乙肝相关性肾炎的表达及意义

目的:通过探测PFP在HBV相关性肾炎的肾组织的表达,以了解PFP介导的细胞毒作用在HBV-GN发病中的意义. 方法: 10例HBV-GN活检肾组织,冰冻切片采用免疫组化法(Elivision)的方法检测HBV-GN肾活检组织中的perforin的表达. 结果: 在HBV-GN肾组织内perforin在2/10的肾小球表达, 3/10在肾小管阳性表达,7/10肾间质表达. Perforin在肾小球与肾间质的表达差异有统计学意义(P=0.014,P＜0.05). 肾间质病变轻,中,重度间得Perforin表达差异无统计学意义(P＜0.05). 结论: HBV-GN的发病过程中,CD8 CTL介导的perforin途径,可能起到一定的作用.     

慢性乙型肝炎患者HBV基因型及其临床意义

目的 了解广东地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型特点及其临床意义。方法 用特异性引物扩增乙型肝炎病毒S基因区,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型方法,对该地区55例慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者感染的HBV进行基因分型,并与其临床生化结果、病毒定量和肝组织病理进行相关性分析。结果 B基因型28例(51.0%),C基因型18例(32.7%),D基因型4例(7.3%),B+C型4例(7.3%),未分型1例(1.8%)。其中年龄大于30岁的26例患者B和C基因型的丙氨酸转氨酶水平分别为(190.9±270.3)IU和(141.0±83.0)IU(t=0.532,P>0.05),肝脏病理炎症分级的平均秩次为10.4和11.8(Z=0.561,P>0.05),肝脏病理纤维化分期的平均秩次为10.5和11.7(Z=0.483,P>0.05),HBVDNA含量分别为106.8±1.4和108.5±1.1(t=2.989,P<0.05),HBeAg阳性数分别为2/12和8/9(Fisher’s精确概率P=0.002)。结论 广东地区HBV基因型主要为B型和C型;两种基因型感染者丙氨酸转氨酶水平、病毒复制水平、HBeAg表达水平以及肝脏病理炎症和纤维化程度无显著性差异;然而在年龄大于30岁的CAH患者中,感染C基因型的HBV病毒复制水平和HBeAg表达水平比感染B基因型者显著增高。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞受体β链V区家族的表达及意义

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血T淋巴细胞受体β链V区(TCR BV)各家族谱系的表达及其临床意义方法选择32例CHB患者(CHB组)及20例健康体检者(健康对照组),分别采集其外周血、肝素钠抗凝,分离单个核细胞,提取RNA并应用RT-PCR扩增TCR RV的24个家族,进行两组间扩增产物定量分析结果 CHB组△Ct5、△Ct7、△Ct15、△Ct22、△Ct23值与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)结论 CHB组TCR BV 24个家族BV5、BV7、BV15、BV22、BV23的扩增产物含量均较健康对照组下降,提示T淋巴细胞免疫应答可能参与CHB的发病过程     

Genotyping of hepatitis B virus and its clinical significance in patients with chronic hepatitis B]

OBJECTIVE: To investigate the distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes in Guangdong and explore its clinical significance. METHODS: Fifty-five patients with chronic active hepatitis (CAH) from Guangdong province were included in this study. HBV surface gene amplified by PCR was analyzed by restriction fragments length polymorphism (RFLP) for HBV genotyping, and the relationship of HBV genotype with clinical, serological and histological data of the patients was analyzed. RESULTS: Twenty-eight out of 55 patients were infected with HBV strains of genotype B (51.0%), 18 with genotype C (32.7%), 4 with genotype D (7.3%), 4 with HBV classified as genotype B+C (7.3%), and 1 (1.8%) with HBV that did not conform to any of the genotypes from A to G. No significant differences in clinical, histological, or serological data of HBV DNA loading were detected between genotypes B and C. But in patients older than 30 years, the genotype C was accompanied by significantly higher HBV DNA loading and serum HBeAg level than genotype B (Fisher's exact test, P=0.002). CONCLUSIONS: HBV genotype B and C are the major genotypes prevalent in Guangdong Province. Genotype C is associated with the longer duration of HBeAg and higher HBV DNA level in patients older than 30 years, suggesting the higher risk of HBV genotype C infection to progress into chronic liver disease.