显示尼氏体方法的尝试

选用Bouin固定液固定新鲜脊髓,石蜡包埋切片,采用普通的苏木素一伊红染色,清晰地显示了神经细胞胞浆内的嗜碱性物质一尼氏体,而且较特染简单、经济、不易退色.1材料与方法取狗新鲜脊髓颈膨大固定于Bouin液24小时.(1)苦味酸75份(饱和),甲醛25份,冰醋酸5份(用前临时配制);(2)常规脱水包埋;(3)石蜡切片5μm; (4)HE染色;(5)中性树胶封片.2结果尼氏体呈兰色粒状和块状,清晰可见,背景呈浅红色(附图).     

采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片

采用犀牛牌双面不锈钢刀片制作石蜡切片 ,比普通石蜡切片刀的切片效果好 ,操作简便、快捷、省时、经济适用。光镜下组织结构完整无损 ,清晰透明 ,具有推广和应用价值 ,本切片技术目前国内未见文献报导。1 .材料和方法　 1 .1　材料　沈勒公司产犀牛牌双面不锈钢刀片 ;日本羽毛公司产Microtome Holder;美国产 AO型滑动式切片机 ;人体和各类实验动物不同组织 ,1 0 %甲醛固定 ,常规脱水、石蜡包埋。 1 .2　方法　1 )先将刀架固定在滑动式切片机上 ,将固定刀片的压盖螺丝松开 ,取一双面刀片顺刀刃方向从中间剪断或折断 ,平行分开同时夹在刀架…     

地高辛标记的cRNA探针在胰岛素mRNA原位分子杂交中的应用

采用雄性成年Wistar大鼠胰腺,用地高辛标记的cRNA探针进行原位分子杂交,以检测胰岛B细胞的胰岛素基因表达产物mRNA;同时用免疫组织化学PAP法显示相邻切片胰岛素免疫反应阳性细胞,进行原位比较。1.标本制备:大鼠经4%多聚甲醛灌流固定,取胰尾,入Bouin液固定20h,常规石蜡包埋,切片厚6μm,裱在用铬矾明胶处理的载片上。2.探针标记:用RNA标记试剂盒(Boehringer Mannheim     

慢性酒精中毒对大鼠腺垂体LH细胞的影响

本实验选用 Wistar大鼠 ,实验组饮用 2 0 %医用酒精 ,对照组正常饮水。分别于喂养 3个月、6个月和 18个月时麻醉下经心脏用 4%多聚甲醛行全身灌流。取脑垂体 ,Bouin液固定、脱水、石蜡包埋 ,5μm厚切片常规脱蜡处理。用鼠抗人L H抗体 (1∶ 40 0 0 ) ,SP系列试剂盒免疫组织化学方法染色。40倍接物镜下用测试网格分别计数免疫染色阳性细胞总数、强阳性细胞数。选择细胞轮廓完整、没有重叠的细胞 ,用镜下测微尺测量阳性细胞的最长径及最短径 ,取其平均值作为细胞的直径。结果如下 :1对照组免疫染色阳性细胞的直径随年龄增长无明显变化。 3个…     

慢性酒精中毒对大鼠腺垂体ACTH细胞影响的研究

本实验选用 Wistar大鼠 ,实验组饮用 2 0 %医用酒精 ,对照组正常饮水。分别于喂养 3个月、6个月和 18个月时麻醉下经心脏用 4%多聚甲醛行全身灌流后取脑垂体 ,Bouin液固定、脱水、石蜡包埋 ,5 μm厚切片常规脱蜡处理。用兔抗鼠 ACTH抗血清工作液 ,SP系列试剂盒免疫组织化学方法染色。 40倍物镜下用测试网格分别计数免疫染色阳性细胞总数、强阳性细胞数。选择细胞轮廓完整、没有重叠的细胞 ,用镜下测微尺测量阳性细胞的最长径及最短径 ,取其中间值作为细胞的直径。结果如下 :16个月实验组免疫染色阳性细胞的直径大于其对照组。而 18个月…     

显色原位杂交技术在乳腺癌HER-2/neu原癌基因检测上的应用及意义

对于检测常规甲醛固定的乳腺癌石蜡组织切片中HER-2／neu原癌基因的核苷酸序列技术方法而言,荧光原位杂交法（FISH）一直是公认比较敏感和经典的检测方法。而显色原位杂交法（chromogenic in situ hybridization,CISH）作为一种核酸原位分子杂交技术方法,也可用于常规甲醛固定的乳腺癌石蜡组织切片中的HER-2／neu原癌基因的检测。     

石蜡包埋全喉大切片的制备及特殊染色

我们参考王德田等[1] 的方法 ,采用石蜡包埋、普通轮转式切片机 ,制成全喉大切片 ,并对其进行特殊染色。得到较好的效果。一、材料与方法1 把尸检切取的全喉和手术切除的喉癌标本根据需要在水平、冠状和矢状三个方向切开 ,选用 5 4%的甲醛固定。2 取材时应用刀锋锐利的解剖用刀 ,对已有钙化的甲状软骨用 5 %的硝酸水溶液进行脱钙 ,限 72ｈ为宜 ,脱钙后流水充分冲洗去除脱钙液。3 切片过程 :( 1)制片 :将切取的全喉组织放在适当有盖容器内依次进行脱水、透明和浸蜡。 75 %、85 %乙醇各脱水12ｈ ;95 %乙醇和 2次无水乙醇各脱水 12ｈ ;3次二…     

对脱水剂的改进及应用

不论是组织学还是病理学的实验教学都离不开石蜡切片。为保证切片的质量包埋前的组织脱水很关键。常规的脱水方法为酒精逐级脱水 ,此法的不足是步骤多且常引起组织的硬化。特别是对于组织学的观察非常不利。我们通过制作大量教学及临床活检切片对常规脱水剂进行改进 ,将正丁醇、乙醇两种单独使用的脱水剂按不同比例混合后用于组织脱水。1　具体方法是固定后依次投入 ( 1)脱水 A液 :正丁醇与无水乙醇按 3∶ 1混合 ,时间 1～ 4小时 ,( 2 )脱水 B液 :正丁醇与无水乙醇按 1∶ 1混合 ,时间 1～ 4 8小时 ,( 3)脱水 C液 :正丁醇液 ,时间 1～ 4小…     

改进石蜡切片脱水制作方法

改进石蜡切片脱水制作方法王翠兰在长期的病理检验工作中，为了缩短病理组织脱水时间，简化手续，提高工作效率。我们在传统的病理组织脱水基础上进行了改进，并报道如下。１方法与步骤１．１组织经混合固定液固定。１．２直接进入９０％酒精Ⅰ１５～２０ｍｉｎ。１．３９...     

蒸馏水修复抗原法

抗原修复是做好免疫组化（ＰＲ、ＥＲ等）染色的重要步骤之一，目前进行的常规石蜡切片标本，一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞，免疫组化标记敏感性明显降低，其原因为：（１）在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇；（２）甲醛在保存过程...     

石蜡切片显示大脑神经细胞方法探讨

以片显示大脑各种神经细胞一般都是用含有重铬酸钾的固定液固定,用硝酸银浸染的方法进行,所以要想制作大批教学标本只能用传统的方法。而大脑神经细胞的特殊染色,只能用火棉胶切片或冰冻切片制作标本,操作步骤复杂、时间长。为此我们对石蜡切片、镀银染色显示大脑神经细胞的方法进行了探讨。本实验选用小白鼠大脑,组织块大小为2×2cm,勿超过3cm;固定后入1%～1.5%硝酸银水溶液浸染5～7天;蒸馏水洗2分钟;用还原液作用24小时;组织块脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,因低浓度酒精易使组织块退色,因此组织块经还原后在酒精内的脱水时间一定要精确。…     

微波二次固定提高肿瘤组织冰冻切片及苏木素—伊红染色质量的研究

冰冻切片质量的好坏直接关系到能否准确及时地作出病理诊断,以指导手术治疗方式,近年来,国内外学者对如何提高冻冻切片及染色质量做了大量工作,但仍然存在着组织结构被冰晶破坏,对比染色差,细胞核着色不清晰等缺点,我们应用微波加热固定液对组织块进行预固定,切片后再次固定的“二次固定技术”处理肿瘤组织,获得了比单纯脱脂固定切片更好的效果.1 材料与方法1.1 材料 选用我院1994～1995年外科送检需要急诊冰冻的乳腺、胃、肠、卵巢、甲状腺及脑等处的肿瘤组织,取材2cm×1.5cm×0.5cm数块.YWY781A型医用微波炉为浙江临安爱迪电子仪器厂产品,有8个功率选择开关,最大输出功率为500W.1.2 方法(1)将肿瘤组织分为不处理和处理组,处理组分别用生理盐水,10%甲醛和Bouin液在80℃恒温水浴固定5min,用微波2档(输出功率250W)固定1min.(2)将上述肿瘤组织用恒冷切片机切成5μm厚的冰冻切片数张,贴片稍于后分成不固定组和固定组,固定组分别用酒精-冰醋酸-甲醛固定液(AAF).改良的     

激光照射豚鼠皮肤的形态学改变

<正> 用CO_2激光照豚鼠背部皮肤,右侧为照射区,左侧非照区;在照射前三周取左,右侧皮片,照射20次及40次后分别切取左,右侧皮片。固定于Bouin液,常规制片,分别作H.E及Weigert弹性纤维染色。电镜材料用0.25%戊二醛固定,锇酸后固定,Epon812包埋,超薄切片,醋酸铀     

胃癌组织端粒酶活性及p53基因异常的分析

一、材料和方法１组织标本：４０例胃癌为我院１９９４年～１９６年手术切除标本，每例包括癌肿及正常胃粘膜，均经冷冻切片、染色、镜检证实癌组织癌细胞在７０％以上，正常组织无癌细胞。每例标本取一部分用甲醛固定、石蜡包埋留做免疫组化分析，余下部分－８０℃冰箱...     

肝部分切除后再生期间甲状腺组织化学和免疫组织化学的变化

用雌性大鼠80只,体重130～250g。分为肝大部切除组、肝小部切除组、假手术组和对照组。每组动物均为4只。4组动物分别于术后1、2、3、7、14天取材。Bouin 液内固定,制成6μm 厚的石蜡横切连续片。取相邻切片 HE 染色;PAS 反应;棓花青法显示核酸;Knospe 氯化钯法显示甲状腺     

病理收纳盒的设计及应用价值

正石蜡切片技术是组织学、发育生物学和病理学研究的重要技术手段,广泛用于医疗、教学和科研[1-3]工作中。常规石蜡切片的制作过程包括固定、脱水、浸蜡、包埋、切片和染色,其中的每一个环节均会影响最终制片的质量[4-6]。石蜡切片操作过程包括切片、捞片、放片,涉及的辅助工具如毛     

铺片在结膜杯状细胞研究中的应用

眼结膜杯状细胞对维持视觉功能起着十分重要的辅助作用。由于结膜受损 ,尤其是其中的杯状细胞减少或缺乏 ,将导致干眼症 ,甚至失明。目前 ,有关结膜杯状细胞的研究报道很少。为了解结膜杯状细胞的分布规律和正常生理变化 ,我们采用结膜切片、铺片和特殊染色方法 ,对结膜杯状细胞进行了初步研究。材料与方法 :标本取材于不同年龄的胚胎和成人尸体 ,处理如下 :1切片 :在球结膜和穹窿结膜的四个区域 (鼻、颞、上、下侧 )及上、下睑各取 1～ 3个组织块 ,分别用 1 0 %甲醛和 Carnoy固定液固定 ,常规石蜡包埋 ,切片厚 6 μm,分别用 HE、阿利新蓝…     

电针对创伤性休克大鼠垂体后叶神经分泌的组织化学初步观察

<正> 文章报导电针在抗创伤性休克过程中对垂体后叶神经分泌的影响。60只雄性大鼠随机分三组,正常对照组不作任何处理,创伤性休克组和电针组均造成创伤性休克模型,电针组再电针“人中”、“承浆”穴半小时。三组均取垂体于Bouin液固定,常规脱水、包埋和切片,Gomori醛复红(AF)染色法示垂体后叶神经分泌。显微分光光度     

家用高压锅在免疫组化抗原修复中的应用

常规石蜡切片进行免疫组化染色时，因组织经甲醛固定后，抗原成分往往被广泛交联而封闭，即使用高效敏感的免疫组化方法也达不到理想的结果。为提高阳性着色的强度和稳定可重复的效果，在乳腺癌雌激素受体和喉癌ｐ５３蛋白的免疫组化染色时，我们采用家用高压锅对常规石蜡...     

小鼠宫颈癌14号(U_(14))皮下移植后自发淋巴道转移的观察

本实验用U14瘤细胞接种于Km小鼠前肢腋部皮下,每只鼠接种细胞数8×10~6。小鼠体重18～22g,雌雄各半。三批实验小鼠于不同时间一次全部杀死,解剖检查肿瘤局部侵袭和全身转移情况,各脏器用Bouin液固定、石蜡包埋、切片、