大肠埃希菌耐环丙沙星gyrA基因突变的研究

目的了解临床分离大肠埃希菌耐环丙沙星ｇｙｒＡ基因突变情况。方法用环丙沙星浓度梯度法试条检测临床分离大肠埃希菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｇｙｒＡ基因喹诺酮耐药决定区，扩增产物片段长度为６６８ｂｐ，用限制性内切酶ＨｉｎｆⅠ消化ＰＣＲ产物，行８％聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果共检测大肠埃希菌４１株，１４株ＭＩＣ在０．２５～０．５μｇ／ｍｌ的菌株，未检出耐药性突变位点；４株ＭＩＣ在１～２μｇ／ｍｌ的菌株（２株ＭＩＣ为１μｇ／ｍｌ、１株为１．５μｇ／ｍｌ，１株为２μｇ／ｍｌ）均出现ｇｙｒＡ基因突变；耐药菌２３株（１株ＭＩＣ为１６μｇ／ｍｌ，其余≥３２μｇ／ｍｌ）也均发生ｇｙｒＡ基因突变。结论临床分离大肠埃希菌对环丙沙星耐药性与ＨｉｎｆⅠ酶切位点突变密切相关，低水平耐药菌株ｇｙｒＡ基因发生突变具有一定临床意义。     

自身免疫病患者血清胞间粘附分子检测的意义探讨

目的了解进行性硬皮病（ＰＳＳ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）血清可溶性细胞间粘附分子（ｓＩＣＡＭ）１和３的水平及与病情的关系。方法用进口酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）试剂盒分别检测活动期ＰＳＳ、ＲＡ、ＳＬＥ患者与正常人血清ｓＩＣＡＭ－１以及ＰＳＳ、ＲＡ患者、正常人血清ｓＩＣＡＭ－３的含量，比较其水平的差异。结果正常对照组（２０例）ｓＩＣＡＭ－１和ｓＩＣＡＭ－３水平分别为２０２．３５±７４．１２μｇ／Ｌ和３６．１８±１４．６８μｇ／Ｌ；ＰＳＳ组患者（３０例）分别为４１３．９２±１４４．５３μｇ／Ｌ和４７．５０±２６．６８μｇ／Ｌ；ＲＡ组患者（２５例）分别为４０５．８８±１８１．１６μｇ／Ｌ和２９．２５±１１．６４μｇ／Ｌ；ＳＬＥ组患者（１９例）ｓＩＣＡＭ－１的水平为３８９．０６±２４１．９４μｇ／Ｌ。各患者组的ｓＩＣＡＭ－１水平与正常对照组比较差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＰＳＳ、ＲＡ组患者与正常对照组ｓＩＣＡＭ－３测值相互间差异无显著性，但ＰＳＳ与ＲＡ组患者间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论ｓＩＣＡＭ－１与自身免疫病的活动性呈一致性，ｓＩＣＡＭ－３在不同的自身免疫病有不同的表现     

甲硝唑等药物对115株厌氧菌最低抑菌浓度测定

目的为临床合理选择抗厌氧随药物提供参考依据。方法 应用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ的ＡＮＩ厌氧鉴定卡进行厌氧菌鉴定；用琼脂稀法测定甲硝唑，苯酰甲硝唑羧苄青霉素及氯霉素对１１５株厌氧菌的最低抑制浓度（ＭＩＣ）。结果 甲硝唑及其衍生物苯酰甲硝唑对拟杆菌的ＭＩＣ９０均为２－４μｇ／ｍｌ，为梭杆菌ＭＩＣ９０分别为１．０μｇ／ｍｌ和０．５μｇ／ｍｌ；甲硝唑及苯酰甲硝唑对革兰阳性厌氧菌的抗菌活性低于氯霉素和羧苄青霉素。     

小儿急性肾小球肾炎红细胞免疫功能和外周血超氧化物歧化酶的变化及其临床意义

目的：探讨急性肾小球肾炎患儿体内红细胞免疫功能及血超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）变化的临床意义。方法：检测３２例急性肾小球肾炎急性期及１９例治疗１个月后患儿的红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣＣ３ｂＲＲ）、红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣＩＣＲ）和ＳＯＤ。结果：急性肾小球肾炎患儿急性期ＲＢＣＣ３ｂＲＲ降低（０．０４８±０．０１３），ＲＢＣＩＣＲ升高（０．１３６±０．０１９），ＳＯＤ明显降低（２８２．３２±２２４．４７）μｇ·ｇ－１／Ｌ，与正常组比较均有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）；１个月后以上指标均有所恢复，ＲＢＣＣ３ｂＲＲ和ＲＢＣＩＣＲ分别为０．０９８±０．０１５和０．０５７±０．０１１，ＳＯＤ为（５８６．５９±３４３．５５）μｇ·ｇ－１／Ｌ；治疗前后比较亦均有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）。结论：急性肾小球肾炎时红细胞免疫功能低下，血ＳＯＤ降低；检测红细胞免疫功能和血ＳＯＤ对临床诊断、判定疗效及转归有较大参考价值     

高压氧治疗重型闭合性颅脑损伤对血清脂质过氧化物和超氧化物歧化酶的影响

目的观察重型闭合性颅脑损伤高压氧（ＨＢＯ）治疗前中后血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶－１（ＳＯＤ－１）的浓度变化。方法５０名患者分为高压氧＋常规治疗组（ＨＢＯ组）３２例和单纯常规治疗组（对照组）１８例,另有３０名健康志愿者作为正常组：于治疗前中后用硫代巴比妥酸比色法检测ＭＤＡ、用放射免疫法检测ＳＯＤ－１。结果ＨＢＯ组和对照组在治疗前的ＭＤＡ（５．２７±１．５９）μｍｏｌ／Ｌ,（５．７１±１．３４）μｍｏｌ／Ｌ和ＳＯＤ－１（２７１．３±１０２．９）μｇ／Ｌ,（２５６．３±１１２．４）μｇ／Ｌ,差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）,但与正常组比较差异均有非常显著性（Ｐ＜０．０１）;ＭＤＡ和ＳＯＤ－１呈负相关;治疗后ＭＤＡ升高和ＳＯＤ－１明显降低者疗效和预后差。ＨＢＯ组ＭＤＡ降低,为（４．１１±０．３５）μｍｏｌ／Ｌ;ＳＯＤ－１升高,为（３８０．５±１１５．３）μｇ／Ｌ及疗效均较对照组显著。结论ＭＤＡ和ＳＯＤ－１与损伤严重程度有关,可用于判断ＨＢＯ的疗效和预后,并有可能作为调整ＨＢＯ治疗方案的依据。     

76株淋病奈瑟菌药物敏感性试验及质粒检测

目的为临床合理选择抗淋病奈瑟菌药物提供参考依据。方法采用改良Ｋａｄｏ法进行质粒鉴定；采用琼脂稀释法测定青霉素Ｇ等７种药物对７６株不同质粒类型的淋病奈瑟菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ）。结果含２４．５×１０６质粒的４９株菌株中，３株含４．４×１０６Ｒ质粒，β－内酰胺酶阳性，并同时显示耐青霉素Ｇ（≥２μｇ／ｍｌ）、盐酸四环素（≥４μｇ／ｍｌ）和红霉素（≥２μｇ／ｍｌ），８株虽不含４．４×１０６质粒，也表现对青霉素Ｇ（≥１μｇ／ｍｌ）、盐酸四环素（≥２μｇ／ｍｌ）和氨苄西林（≥４μｇ／ｍｌ）的交叉耐药。与不含２４．５×１０６质粒组（０／２７）比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。未发现耐壮观霉素菌株。结论２４．５×１０６质粒与淋病奈瑟菌对青霉素Ｇ、盐酸四环素和氨苄西林的交叉耐药形成有关；壮观霉素可作为抗淋病奈瑟菌的首选药物     

耐甲氧西林葡萄球菌四种检测方法的比较及临床应用

用ｍｅｃＡ基因检测法、琼脂筛选法、Ｅ试验和Ｋ－Ｂ纸片扩散法检测１００株临床分离的葡萄球菌甲氧西林耐药株（ＭＲＳ）,比较其阳性检出率,对其可靠性和临床实用性进行评估,结果：凡ｍｅｃＡ阳性葡萄球菌（６９／１００）其琼脂筛选法均为阳性,其中６７株苯唑西林ＭＩＣ大于４μｇ／ｍｌ,２株凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ）为２μｇ／ｍｌ。在琼脂筛选法显示耐药的菌株（７３／１００）中,４株为ｍｅｃＡ阴性,且均检出β－内     

甲硝唑等药物对115株厌氧菌最低抑菌浓度测定

目的为临床合理选择抗厌氧菌药物提供参考依据。方法应用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ的ＡＮＩ厌氧鉴定卡进行厌氧菌鉴定；用琼脂稀释法测定甲硝唑、苯酰甲硝唑羧苄青霉素及氯霉素对１１５株厌氧菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）。结果甲硝唑及其衍生物苯酰甲硝唑对拟杆菌的ＭＩＣ９０均为２～４μｇ／ｍｌ，对梭杆菌ＭＩＣ９０分别为１．０μｇ／ｍｌ和０．５μｇ／ｍｌ，；甲硝唑及苯酰甲硝唑对革兰阳性厌氧菌的抗菌活性低于氯霉素和羧苄青霉素。结论４种药物对厌氧菌的ＭＩＣ值有不同程度的上升趋势，但甲硝唑及其衍生物仍可作为抗厌氧菌感染的首选药物，且具有副作用小、使用方便等优点     

急性腹泻患者粪便中分离出抗O／129的非O1群霍乱弧菌

从临床急性腹泻患者的粪便标本中分离到非Ｏ１群霍乱弧菌１７５株，检出率为５．１３％，其中有１７株（９．７１％）具有抗１０μｇ和１５０μｇ二氨基二异丙基喋啶磷酸盐（Ｏ／１２９）的作用。试验表明：该１７株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌其Ｏ抗原分属于ＶＢＯ２、３、４、７、８和１０型；并与抗霍乱弧菌鞭毛单抗ＳＰＡ制剂凝集；对氟哌酸等７种临床常用药物１００％敏感，对ＴＭＰ－ＳＭＺ１００％耐药。     

急性腹泻患者粪便中分离出抗O／129的非O1群霍乱弧菌

从临床急性腹泻患者的粪例标本中分离到非Ｏ１群霍乱弧菌１７５株，检出率为５．１３％，其中有１７株（９．７１％）具有抗１０μｇ和１５０μｇ二氨基二异丙基喋啶磷酸盐（Ｏ／１２９）的作用。试验表明：该１７株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌其Ｏ抗原分属于ＶＢＯ２、３、４、７、８和１０型，并与抗霍乱弧菌鞭毛单抗ＳＰＡ制剂凝集；对氟哌酸等７种临床常用药物１００％敏感，对ＴＭＰ－ＳＭＺ１００％耐药。．     

血清白细胞介素6和肿瘤坏死因子与多发性骨髓瘤相关性的初步探讨

采用ＩＬ－６依赖细胞株ＫＤ８３增殖实验检测２３例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者血清ＩＬ－６活性；用ＥＬＩＳＡ法测定相应患者血清ＴＮＦ水平，结果显示ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ水平分别为０．２０±０．１０（ＯＤ值）与８．８±２．４μｇ／Ｌ，而正常组分别为０．１０±０．０６（ＯＤ值）与０．５±１．１μｇ／Ｌ，两组相比Ｐ＜０．０ｌ，ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ水平显著高于正常组，并与疾病分期相关。对１３例初治患者进行动态观察，发现ＩＬ－６、ＴＮＦ水平和变化情况与疗效有关。结果提示ＩＬ－６和ＴＮＦ都可作为ＭＭ临床分期、反映疗效和估计预后的重要指标。     

小剂量多巴胺对肠系膜上动脉闭塞休克兔动脉血及门静脉血乳酸浓度影响的研究

目的：探讨肠系膜上动脉闭塞（ＳＭＡＯ）休克兔动脉血和门静脉血乳酸浓度的变化,以及小剂量多巴胺（５ μｇ·ｋｇ－ １·ｍ ｉｎ－ １）对其的影响。方法：２０只新西兰家兔随机分成２组,均制成ＳＭＡＯ 休克模型,２组均按３０ ｍ ｌ·ｋｇ－ １·ｈ－ １输入０．９％ ＮａＣｌ;Ａ组另给予多巴胺５ μｇ·ｋｇ－ １ ·ｍ ｉｎ－ １,Ｂ组作为对照组。分别观察血流动力学、动脉血和门静脉血乳酸浓度（ＡＬＴ、ＰＬＴ）,以及腹腔组织氧供（ＳＤＯ２）、氧耗（ＳＶＯ２）和氧摄取率（ＳＯ２ＥＲ）的变化。结果：Ａ组门静脉血流量指数（ＱｐｖⅠ）在休克模型复制后６０、９０ 和１２０ 分钟时明显高于Ｂ组（Ｐ＜ ０．０５或Ｐ＜ ０．０１）;２ 组ＡＬＴ、ＰＬＴ均明显升高,以休克后０ 时为最高〔Ａ 组分别为（６．５±１．１）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和（６．９±１．４）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ;Ｂ组分别为（６．４±０．８）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和（６．８±１．２）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ〕,但Ａ 组在此后呈逐渐下降趋势,在１２０分钟时最低〔分别为（３．２±０．３）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和（３．５±０．３）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ〕,而Ｂ组则呈持续高水平〔分别为（５．５±０．５）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ和（５．７±０．９）ｍ ｍ     

CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤疗效观察

为探索肿瘤免疫治疗的新方法，我们应用ＰＨＡ（１０μｇ／ｍｌ），ｒＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）和ＣＤ３Ａｂ（抗ＣＤ３单克隆抗体，２００ｎｇ／ｍｌ）共同激活，ｒＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）维持培养的自体人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）－ＣＤ３ＡＫ细胞治疗晚期恶性肿瘤，结果显示：（１）治疗有效率（ＰＲ＋ＭＲ）为３６．３６％，（２）治疗后Ｔ细胞亚群中ＣＤ８＋下降（Ｐ〈０．０５），ＣＤ３＋，ＣＤ４＋以及ＣＤ４＋／Ｃ     

抗PML-RARα反义核酸的设计、合成和对NB4细胞生长、凋亡的影响

目的合成针对长型ＰＭＬＲＡＲα融合基因ｍＲＮＡ起始部位和融合位点的反义核酸（ＡＳ），探讨ＡＳ的稳定性、特异性及其对ＮＢ４细胞生长、凋亡的影响。方法以ＮＢ４细胞株为研究对象，采用台盼蓝拒染法进行细胞计数；聚丙烯酰胺凝胶进行寡核苷酸的电泳；流式细胞仪、ＤＮＡ电泳、细胞荧光染色进行细胞凋亡检测。结果合成的ＡＳ稳定、耐细胞内外核酸酶、无非特异性作用；起始部位ＡＳ（ＳＴＡＳ）和融合位点ＡＳ（ＦＵＡＳ）明显抑制细胞增殖，且呈剂量依赖性。浓度２０μｇ／ｍｌ时增殖抑制率０％～１１．３％；８０μｇ／ｍｌ时，抑制率５０．０％～６７．７％。ＦＵＡＳ（６０μｇ／ｍｌ）处理第７天、第９天出现明显的凋亡细胞群，处理后３天、５天、７天、９天的凋亡细胞率分别为９．３％、２４．５％、４１．０％、３４．２％。结论针对长型ＰＭＬＲＡＲα融合基因的ＡＳ设计、合成是成功的；抗ＰＭＬＲＡＲαＡＳ能抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

可溶性白细胞介素2受体在乙型肝炎,肝硬化中的临床意义

用ＥＬＡＳＡ法测定７８例乙型肝炎、４０例肝硬化血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ），发现重症肝炎（１２７６±４３３μｇ／ｍｌ），慢性乙型肝炎组（７６５±５２３μｇ／ｍｌ），急性乙型病毒性肝炎组（５１３±１３３μｇ／ｍｌ）及肝经组（７３４±２５４μｇ／ｍｌ）的ＳＩＬ－２Ｒ显著高于同时测定的４０例正常对照组（３６５±１１２μｇ／ｍｌ），各组与正常对照组比较除急性肝炎组Ｐ值小于０．０１外，其余各     

白细胞介素2和α干扰素逆转白血病细胞多药耐药的研究

目的：探讨细胞因子对人白血病细胞系Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２的影响。方法：以ＭＴＴ法测定小剂量细胞因子作用后柔红霉素（ＤＮＲ）的毒性变化；用荧光法测定细胞内药物浓度；用免疫组化法检测ｐ－膜糖蛋白（ｐ－ｇｐ）变化；用ＲＴ－ＰＣＲ法检测多药耐药基因（ｍｄｒ－１）ｍＲＮＡ。结果：发现ＤＮＲ对Ｋ５６２／Ａ０２及Ｋ５６２／Ｓ的半数抑制率（ＩＣ５０）分别为４５．０８μｇ／ｍｌ及０．６０７μｇ／ｍｌ。α干扰素（ＩＦＮ－α）和白细胞介素２（ＩＬ－２）作用２４小时可增加ＤＮＲ对Ｋ５６２／Ａ０２的细胞毒作用，与未加药组相比ＩＣ５０下降为１６．３９及１１．９６μｇ／ｍｌ，但不影响Ｋ５６２／Ｓ细胞（ＩＣ５０无明显改变）。且ＩＦＮ－α、ＩＬ－２可提高细胞内ＤＮＲ浓度，从未加药组的２１５１ｎｇ／ｍｇ蛋白到２５７０及２５０３ｎｇ／ｍｇ蛋白。但ｐ－ｇｐ及ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ无明显改变。结论：ＩＦＮ－α、ＩＬ－２可增加ＤＮＲ对Ｋ５６２／Ａ０２细胞的毒性作用，增加Ｋ５６２／Ａ０２细胞内的药物浓度，但不是通过下调ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ机制而起逆转作用。     

广东省非O1群霍乱弧菌对O/129磷酸盐出现抗性的研究

广东省１９８６～１９９４年从腹泻病人粪便和外环境标本检出的非Ｏ１群霍乱弧菌１１９株中，有１０．０８％和５．８８％分别对１０μｇ和１５０μｇ的Ｏ／１２９磷酸盐出现抗性，出现抗性最早的一株是１９８６年从海产品中检出的。对１０μｇ和１５０μｇ的Ｏ／１２９出现轻度敏感者分别占４．２０％和３．３６％，抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌可能会增加。在抗１０μｇ和１５０μｇＯ／１２９的７株非Ｏ１群霍乱弧菌中，有５株同时抗磺胺甲基异恶唑（ＳＭＸ），但仍有２株对ＳＭＸ敏感。在分离鉴定时应加以注意，并需继续观察。     

超临界CO2萃取技术提取的蒜素中SOD活力的检测

运用目前国际上先进的植物提取工艺———超临界ＣＯ２萃取技术 ,从大蒜中提取有效降脂成分———蒜素 ,为考察和确定其生物活性作用 ,我们对其中的ＳＯＤ活力进行检测 ,现将方法和结果报道如下。１试剂及仪器１．１ＰＨ８．２０．０５ＭＴｒｉｓ-Ｈｃｌ缓冲液 (Ａ）储存液（０．２ＭＴｒｉｓ溶液） ,２４．２２８ｇ加纯水至１００ｍｌ。 (Ｂ）应用液 :２５０ｍｌ０．２Ｍ加０．１Ｎ盐酸２２５ｍｌ,再加水至１００ｍｌ。１．２１ｍＭ邻苯三酚溶液 (Ａ）储存液（０．１Ｍ）１．２６１１ｇ、ＡＲ级邻苯三酚加纯水至１００ｍｌ。(Ｂ）应用液 :…     

改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物

采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。     

脑脊液蛋白质氯烃基二甲基代苯甲胺比浊测定法

氯烃基二甲基代苯甲胺（ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＢＡＣ）季胺化合物能与蛋白质反应形成浊度［１］，据此，用于脑脊液蛋白质含量的测定。１　材料与方法１．１　试剂１．１．１　ＢＡＣ贮存液　于９０ｍｌ蒸馏水中溶解ＢＡＣ（Ｓｉｇｍａ，Ｂ－６２９５）１１３ｍｇ，ＥＤＴＡ二钠盐３．６５ｇ，ＮａＯＨ８ｇ，然后用１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ调ｐＨ至１２．８，最终加蒸馏水至１００ｍｌ。１．１．２　ＢＡＣ应用液　取ＢＡＣ贮存液１份加０．１５ｍｏｌ／ＬｐＨ７．０磷酸盐缓冲液４份。１．１．３　蛋白标准液　总蛋白标…