γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察γ分泌酶抑制剂 （DAPT）对人宫颈癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 不同浓度DAPT对SKOV3细胞作用后,采用CCK-8法检测对SKOV3细胞的增殖抑制作用,吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）荧光双染色法及流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot检测SKOV3细胞Notch1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 与空白对照组相比,5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L浓度的DAPT对SKOV3细胞均有一定的增殖抑制作用（P<0.05),且其抑制作用呈剂量依耐性增加（P<0.05),24 h抑制率分别为19.87%、28.38%、46.67%。与空白对照组相比,不同浓度的DAPT作用SKOV3细胞24 h后凋亡率增加（P<0.05),且随DAPT浓度增加,凋亡细胞逐渐从早期凋亡过渡至晚期凋亡;Notch1 mRNA和蛋白表达抑制,其抑制率分别为 （10.23%、20.50％、38.83％）和 （12.89%、27.47％、49.84％）。结论 γ分泌酶抑制剂DAPT可阻断Notch信号通路,能抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调Notch1表达有关。     

γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对肝癌细胞增殖的影响

[目的]探索γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号通路对肝癌细胞增殖的影响。[方法]通过Western blotting和RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。用不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肝癌细胞,48h后用Western blotting法检测Notch各蛋白的表达,采用RT-PCR法检测Notch信号通路下游基因HES1 mRNA表达,MTT法测定细胞增殖。[结果]HepG2细胞中可检测到Notch1~4蛋白和mRNA的表达。不管是与培养基对照还是DMSO对照相比,不同浓度MW167对Notch1~4蛋白的表达没有显著影响。与相应浓度的对照组相比,MW167处理组HES1 mRNA表达下降(P<0.05)。随着MW167处理浓度升高,HES1 mRNA表达抑制率逐渐升高(P<0.05)。MTT法检测结果显示,MW167处理的细胞,其吸光度高于对照组(P<0.05),且随着MW167浓度的升高,细胞增殖率相应升高。[结论]HepG2细胞中可检测到Notch1~4蛋白和mRNA的表达,MW167处理可降低HES1 mRNA表达,MW167处理可促进细胞的增殖。     

γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的观察γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号对肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法正常氧条件下培养肺腺癌细胞A549,通过Western blotting及RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。在正常氧条件下,不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肺腺癌细胞A549(加药组),48 h后采用Western blotting方法检测Notch1蛋白表达的变化,采用RT-PCR方法检测Notch信号通路下游基因HES1mRNA表达的变化,应用MTT法检测MW167对细胞增殖的影响;每个浓度设二甲基亚砜对照组。结果 Notch1～4各亚型在A549细胞均有表达。5、10、20μmol/L MW167处理肺腺癌A549细胞48 h后,各加药组与对照组相比,Notch1蛋白表达升高(P<0.05),而HES1 mRNA表达下降(P<0.05),随MW167浓度升高,对HES1 mRNA表达的抑制率逐渐升高(r=0.927,P<0.01)。MTT法检测结果显示各加药组吸光度高于对照组(P<0.05),且随MW167浓度升高,细胞增殖率相应升高(r=0.904,P<0.01)。结论在正常氧条件下,MW167可阻断Notch信号通路,对A549细胞起促增殖作用;Notch1信号通路可能在A549细胞中起一定抑癌作用。     

Notch信号通路调控癌症的研究进展

Notch信号通路在调控细胞进程、调节细胞命运方面起至关重要的作用,该通路高度依赖于上下游分子的调控,在不同的细胞环境中功能大相径庭.因此Notch信号调控癌症相关通路具有极强的复杂性,但目前对该通路的具体机制及功能的研究仍然存在许多未知的领域.本文着重于整理近年来研究Notch信号通路及其相关的肿瘤的关系的最新进展,...     

Hedgehog和Notch信号通路与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是一类高度异质性肿瘤,严重威胁女性的身心健康.目前统一使用2017年St.Gallen会议提出的4种乳腺癌分子分型.即luminal A型、luminal B型、HER2过表达型及三阴性型(triple negative breast cancer,TNBC)[1].针对不同分子分型乳腺癌进行针对性治疗取得了较好的疗效,但是对于乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌的治疗,仍需要寻找新的治疗靶点,以提高疗效.近来,对信号通路的研究已经成为热点,目前所知Hedgehog信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路等与乳腺癌的发生发展关系密切;且各个信号通路之间存在交互对话,通过研究信号通路及信号通路之间的交互对话将为指导乳腺癌临床诊疗提供新思路.     

γ-分泌酶抑制剂在乳腺癌治疗中的研究进展

γ-分泌酶复合物是许多1型跨膜蛋白的关键水解酶。对于Notch受体的激活和靶基因转录的调节非常重要。Notch通路的异常激活和表达与包括乳腺癌等的许多肿瘤类型的发生和发展密切相关。本综述介绍了乳腺癌的治疗现状及研究进展、γ-分泌酶复合物的基本情况、γ-分泌酶在Notch通路中的生物学功能和作用、过去5年中γ-分泌酶抑制剂在乳腺癌治疗中的进展、γ-分泌酶介导的乳腺癌的作用机制以及γ-分泌酶抑制剂的优缺点,提出了γ-分泌酶抑制剂进一步研究和发展的前景。     

Notch信号通路与肿瘤关系研究进展

目的目前肿瘤治疗包括手术治疗、化疗、放疗等,但并不能收到令人满意的效果,因此探究新的治疗方案迫在眉睫。如今,肿瘤靶向治疗已成为最具前途的一种新型治疗手段。越来越多的证据显示,Notch信号通路在各种恶性肿瘤的病理生理中发挥着重要作用。在肿瘤靶向治疗中Notch信号通路抑制剂的应用目前处于起步阶段、该文对目前研究的Notch信号通路在各种肿瘤中的关键机制、新数据以及Notch信号通路靶向治疗最新进展予以综述。     

Notch信号通路与肝癌

细胞间的信息传递在细胞发育分化过程中扮演着重要角色。Notch信号通路作为一种进化上相对保守的细胞相互作用机制,维持着细胞增殖、分化、凋亡之间的平衡,其能够扩大并固化相邻细胞之间的分子差异,对细胞分化命运起决定性作用。本文综述了Notch蛋白的基本结构、Notch信号通路的激活方式、其主要相关分子以及Notch信号通路在肝癌中的作用。     

Notch信号通路在肿瘤中的研究进展

Notch基因最早发现于果蝇,其某种基因突变可造成翅膀锯齿样缺损。1983年科研人员首次克隆了该基网,并命名为Notch。Notch是一种在进化上十分保守、既简单又复杂的跨膜受体蛋白家族。Notch信号途径的精确调控,对大多数组织的正常发育至关重要;其异常调控可引起组织发育异常,并导致肿瘤等多种疾病的发生。     

基于Notch信号通路探讨中医药治疗骨关节炎的研究进展

骨关节炎是骨科疾病中常见的一种退行性疾病,严重影响患者的工作和生活。Notch信号通路是目前骨关节炎研究的最新热点之一。Notch信号通路与骨关节炎的发生、进展等密切相关。研究证实,中医药治疗骨关节炎具有独特优势,且取得了较好的临床效果。本文旨在概述中医药干预Notch信号通路治疗骨关节炎的相关研究成果,以期为中医药预防和治疗骨关节炎提供临床参考。     

Notch信号通路在骨与骨病中的研究进展

Notch受体是决定细胞命运的单次跨膜蛋白,当Notch配体的相互作用,使蛋白水解裂解释放出Notch胞内结构域,转位到细胞核中,调节靶基因的转录：包括分割多毛增强剂（HES）和HES相关YRPW基序（Hey）。     

Notch信号通路与乳腺癌的研究进展

Notch基因最早发现于果蝇,因该基因的部分功能缺失会在果蝇翅缘造成缺刻(Notch)而命名.1983年Artavanis Tsakonas研究组首次克隆了Notch基因,并发现其编码一类大的跨膜受体,即Notch受体.随后相继在线虫、爪蟾、鼠等多个物种体内发现其家族不同成员.     

Notch信号通路与心血管疾病的研究进展

心血管疾病是多基因遗传与多种环境因素共同作用下的复杂疾病。Notch信号通路作为重要的信号系统,参与了心血管疾病的病理生理及炎症过程,其在心血管疾病发生、发展中的作用也越来越受到人们的关注,研究也取得了一定的进展。该文主要介绍Notch信号通路,并总结近年来其在心血管疾病中的作用。     

Notch信号通路中Notch2在胰腺癌中表达及临床意义

目的：探讨Notch2在胰腺癌组织中的表达及临床意义。方法：采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测48例胰腺癌组织和配对的癌旁组织中Notch2的表达,分析Notch2的表达与临床病理特征的关系。结果：RT-PCR检测结果显示,Notch2 mRNA在胰腺癌中相对表达量为0.713±0.032,在胰腺癌旁组织中为0.312±0.026。Western印迹检测结果显示,Notch2蛋白在胰腺癌中的相对表达量为0.621±0.047,在胰腺癌旁组织中为0.297±0.052。胰腺癌组织中Notch2 mRNA和蛋白平均表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Notch2 mRNA和蛋白表达水平与胰腺癌的分化程度、TNM分期明显相关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移和CA19-9无明显相关(P>0.05)。结论：胰腺癌组织中Notch2蛋白呈高表达,Notch2蛋白的高表达可能与胰腺癌的发生及发展密切相关。     

Notch信号通路与溃疡性结肠炎的相关研究进展

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis ,UC ）是以结肠上皮黏膜的持续性损伤为主要病理改变的临床难治性疾病［1‐2］。大量证据表明肠道上皮细胞的增殖和分化在结肠上皮黏膜的维护和修复方面发挥着重要的作用,当肠道上皮细胞系统的增殖和分化失常时会诱发多种肠道疾病（如溃疡性结肠炎、克罗恩病,甚至结肠癌等）［3‐5］。肠道上皮细胞的增殖和分化主要受Notch、Wnt和BM P等细胞内信号通路的调节［6‐8］,其中 Notch信号通路是黏膜层再生过程中的决定性因素,是调节肠道上皮细胞增殖和分化以及参与肠道上皮细胞的维护,保持肠道上皮细胞抗菌活性的关键通路［3,9］。此外,Notch信号通路在淋巴前体细胞向T淋巴细胞的分化以及 T 淋巴细胞向 T h1或 T h2效应淋巴细胞的分化过程中起重要作用［10‐11］,而 Th1和 Th2效应淋巴细胞在溃疡性结肠炎发病中起重要作用,其分化控制调节的炎性细胞因子白细胞介素（IL ）‐2、肿瘤坏死因子‐γ（IFN‐γ）、IL‐4、IL‐10表达失衡可能是溃疡性结肠炎发病的主要机制之一。     

基于Notch信号通路对脑梗死的保护机制研究进展

Notch信号通路是一种进化上保守的细胞间信号机制,在胚胎和出生后的发育过程中影响许多分化过程,对维持神经干细胞增殖分化、调节角质细胞生成及参与神经元迁徙方面发挥重要的作用。近年研究证实,脑梗死缺血损伤后激活Notch信号通路,活化的Notch信号通路促进血管细胞生成、调节神经干细胞增殖及减轻炎症反应等在血管缺血区血管生成、神经系统受损修复、减少免疫细胞浸润中起重要调节作用。文章就Notch信号通路在脑组织中的生理功能及在脑梗死病中的作用机制进行探讨,总结针刺疗法及中药对Notch信号通路的调控作用,为治疗脑梗死提供新的靶点。     

Notch信号通路在肝癌相关疾病中的研究进展

<正>Notch信号通路是细胞间一条进化保守的通路,由notch受体(notch1-4)、配体(Jag1、Jag2、Deltalike 1(Dll1)、Deltalike 3(Dll3)和 Deltalike 4(Dll4))、细胞内效应分子、DNA结合蛋白及notch的调节分子等成分组成,决定细胞命运、参与胚胎和组织发育、组织功能及修复等生物学过程^[1]。     

Wnt和Notch信号通路在肺癌干细胞调控中的研究进展

肿瘤干细胞是具有自我更新和多向分化潜能的少部分未分化细胞,在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。肺癌干细胞被认为是肺癌发生的根源,具有自我更新、分化、转移、致瘤性等特征。已有研究表明,肺癌干细胞受自身内在基因和其所处微环境信号的共同调控,两条经典的发育调控通路Wnt、Notch在其中发挥重要作用。深入研究Wnt和Notch信号通路在肺癌干细胞调控中的作用,有望在肺癌的诊断及治疗中找到新靶点。     

Notch信号通路在胰岛素调节子宫内膜癌细胞生长及凋亡中的作用

目的 探讨抑制Notch信号传导对胰岛素诱导子宫内膜癌细胞增殖及相关凋亡蛋白表达水平的影响.方法 将子宫内膜癌Ishikawa 3-H-12细胞行体外原代及传代培养,将培养好的细胞分为:对照组(加入磷酸盐缓冲液3 mL)、胰岛素组(加入1×106 mol/L胰岛素单独刺激)及MW167组(应用不同剂量γ分泌酶抑制剂MW167预处理后再用胰岛素刺激),培养48 h后应用噻唑蓝(MTT)比色法测定各组子宫内膜癌细胞生长抑制情况,应用蛋白质印迹法(Western blot)测定半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8及Notch1蛋白表达情况.结果 胰岛素可促进子宫内膜癌细胞中Notch1蛋白表达,刺激48 h后Notch1蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05),MW167可抑制胰岛素诱导Notch1蛋白表达,且抑制作用具有浓度依赖性.不同组别子宫内膜癌细胞在培养24、48、72 h后570 nm处吸光度(A570)值存在明显差异(P＜o.05),其中胰岛素组各时间点A570值均高于对照组(P＜0.05),胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖在48 h时达到最高水平.MW167以浓度及时间依赖的方式抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖,在48 h时20 μmol/L MW167可持久抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞的增殖.胰岛素组各时间点Caspase-3、Caspase-8蛋白表达水平低于对照组(P＜0.05),MW167以浓度及时间依赖的方式促进细胞Caspase-3、Caspase-8蛋白表达.结论 MW167可通过抑制Notch信号通路传导而抑制胰岛素促子宫内膜癌细胞增殖及促进相关凋亡蛋白表达,诱导子宫内膜癌细胞凋亡.     

miR-625经RAS信号通路对多发性骨髓瘤大鼠的干预作用

目的：探究基于肉瘤基因（RAS）信号通路研究微小RNA-625(miR-625)对多发性骨髓瘤大鼠的干预作用。方法：在60只大鼠中取15只作为空白组（A组）不建模,其余建立多发性骨髓瘤模型大鼠作为试验组,建模成功后分为模型组（B组）、过表达组（C组）、沉默组（D组）各15只,A组、B组做空白处理,C组、D组分别加入miR-625过表达质粒、miR-625 siRNA行过表达、沉默转染。观察各组大鼠RAS通路蛋白及肿瘤相关指标的变化。结果：实验组大鼠肿瘤体积、腹水量平均值、荷瘤重量平均值均高于空白组（P<0.05）。与A组相比,B、C组细胞增殖率、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）蛋白表达量较高,细胞侵袭数、迁移数较多,细胞凋亡率、RAS、p-p38、Bax蛋白表达量较低（P<0.05）。与B、C组相比,D组大鼠肿瘤体积、腹水量平均值、荷瘤重量、细胞增殖率、RAS、p-p38、Bax蛋白表达量较低,细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达量较高,细胞侵袭数、迁移数较少（P<0.05）。结论：沉默miR-625可能通过抑制RAS信号通路,抑制多发性骨髓瘤大鼠恶性生物学行为。