核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响北大核心CSCD

目的探讨核转录因子Snail对肝内胆管癌细胞HCCC9810侵袭和迁移能力的影响。方法采用小干扰RNA(si-RNA)技术靶向沉默肝内胆管癌细胞HCCC9810中Snail的表达,通过Transwell和划痕实验检测肝内胆管癌细胞侵袭和迁移能力,采用免疫印迹法检测si-RNA处理前后的胆管癌细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达情况。结果 Transwell结果显示靶向沉默Snail后HCCC9810细胞的迁移能力下降(P=0.005),侵袭能力减弱(P=0.007),细胞划痕结果表明细胞迁移能力同样降低(P=0.017),免疫印迹结果表明沉默Snail后E-cadherin表达上调(P=0.004),Vimentin表达下调(P=0.001)。结论 Snail可诱导HCCC9810细胞上皮间质转化,增强其侵袭和迁移能力。     

HOTTIP通过竞争性结合miR-506调节Vimentin基因的表达调控肾透明细胞癌细胞迁移

目的:探究HOTTIP通过竞争性结合miR-506来调节Vimentin基因的表达调控肾透明细胞癌细胞迁移的作用机制。方法:通过生信分析TCGA数据库中肾透明细胞癌的差异表达miRNA、mRNA、lncRNA。利用miRcode数据库数据对lncRNA-miRNA的结合进行预测,并对miRNA调控的靶基因进行预测。qRT-PCR检测肾透明细胞癌细胞系中HOTTIP、miR-506、Vimentin的表达,RNA pull-down实验检测miR-506和HOTTIP结合,RIP实验检测miR-506与HOTTIP和Vimentin的结合,Transwell和划痕愈合实验检测786-O细胞迁移能力。结果:HOTTIP在肾透明细胞癌中显著上调,并且与患者预后显著相关,其靶miRNA miR-506在肾透明细胞癌中显著下调。miR-506的下游调控基因Vimentin在肾透明细胞癌中显著上调并且与患者预后显著相关。HOTTIP通过竞争性结合miR-506来调节Vimentin基因的表达。干扰HOTTIP后,肾透明细胞癌细胞的迁移能力显著降低,而干扰HOTTIP的同时沉默miR-506或过表达...     

Twist1在乳头状甲状腺癌中的表达及意义

目的:检测Twist1在乳头状甲状腺癌组织及细胞中的表达情况,并探讨其与乳头状甲状腺癌的临床病理因素和生物学行为的关系.方法:研究应用免疫组织化学方法检测120例乳头状甲状腺癌组织中Twist1的表达.体外细胞研究构建靶向Twist1的shRNA真核表达质粒,转染乳头状甲状腺癌细胞,采用MTT法检测细胞转染前后增殖能力变化,通过Boyden小室实验以穿过人工基底膜的细胞数量评估甲状腺癌细胞株体外侵袭能力的变化;同时检测细胞间连接及黏附相关蛋白E-cadherin、Vimentin等的表达情况.结果:免疫组化结果显示,Twist1在乳头状甲状腺癌中的表达水平与肿瘤的淋巴结转移呈正相关(P＜0.05),与其他临床病理因素(如临床分期、分化程度等)没有明显相关性.RNA干扰使乳头状甲状腺癌细胞株IHH-4中Twist1的表达下调;与阴性对照组比较,Twist1蛋白表达分别降低了50％(KD-A)、60％(KD-B)和64％(KD-C).且E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调.结论:Twist1在人乳头状甲状腺癌中表达上调,与肿瘤的淋巴结转移相关.针对Twist1的shRNA真核表达载体能明显抑制乳头状甲状腺癌细胞的Twist1表达,并有效抑制乳头状甲状腺癌细胞的体外侵袭能力.Twist1可能通过调控乳头状甲状腺癌的上皮-间质转化过程来影响其局部浸润及淋巴结转移.     

miR-384靶向HMGA2对肝癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的 探讨miR-384靶向高迁移率蛋白A2(HMGA2)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 对数生长期HUH7细胞分为对照组、miR-384 NC组和miR-384 mimic组,qRT-PCR法检测miR-384表达情况,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶基因报告法检测靶向关系,蛋白印迹法检测HMGA2、上皮钙粘蛋白(E-cad)、神经钙粘蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vimentin)相对表达量。结果 人肝癌细胞HEP3 B、BEL-7402和HUH7中miR-384表达水平低于人肝脏正常上皮细胞THLE3中miR-384表达水平。对照组和miR-384 NC组miR-384表达水平、细胞存活率、迁移和侵袭细胞数以及HMGA2、E-cad、N-cad和Vimentin蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与miR-384 NC组比较,miR-384 mimic组miR-384表达水平升高,细胞存活率降低,迁移和侵袭细胞数减少,HMGA2、N-cad和Vimentin蛋白相对表达量降低,E-cad蛋...     

Twist1对人乳腺癌细胞E-cadher in表达及亚细胞定位的影响

  目的   探讨转录调控因子Twist1对人乳腺癌MCF-7细胞E-cadherin表达的影响。   方法   上调人乳腺癌MCF-7细胞中Twist1的表达, 利用RT-PCR, Western blot, 细胞免疫荧光检测分析上调Twist1对E-cadherin表达的影响; 划痕实验分析对细胞侵袭运动能力的影响; 三维培养观察Twist1对MCF-7细胞成血管能力的影响。   结果   MCF-7细胞过表达Twist1抑制细胞E-cadherin的表达, 并且导致其亚细胞定位异常, 细胞迁移运动能力增强, 细胞成血管能力增强。   结论   Twist1能抑制MCF-7细胞E-cadherin的表达, 并增强其侵袭迁移及血管生成能力。      

棘霉素对肝癌SMMC7721细胞凋亡相关基因影响的研究

目的：探讨棘霉素诱导肝癌SMMC7721细胞的凋亡作用及对转录因子Twist、p53、Survivin和hTERT（人端粒酶）基因的影响。方法：采用MTT法测定棘霉素对肝癌细胞的生长抑制率；半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测与肝癌的发生和转移密切相关的转录因子Twist，与细胞增殖和凋亡联系紧密的p53、Survivin和hTERT的mRNA表达水平的改变；利用Westernblot方法分析棘霉素治疗后上述基因的蛋白表达情况。结果：体外实验证实，棘霉素浓度〉10．0ng／mL各组对细胞的生长抑制均显著增加，P〈0．05，随棘霉素药物浓度增加，细胞抑制率明显增大。棘霉素抑制肝癌细胞株SMMC7721的作用呈剂量一时间依赖性。RT-PCR方法证实，随着棘霉素剂量的增加，肝癌SMMC7721细胞株中Twist、Survivin和hTERTmRNA表达水平逐渐下调，P〈0．01，p53mRNA表达水平微弱上调，P〈0．05。Westernblot检测显示，Twist、Survivin和hTERT蛋白的表达量呈递减趋势，P〈0．01，p53蛋白的表达微弱上调，P〈0．01。结论：随着棘霉素剂量的增加，细胞凋亡率显著增加。棘霉素能够抑制与肝癌生长密切相关基因的Twist、Survivin和hTERTmRNA表达，促进p53mRNA表达上调，相应蛋白的表达呈下调和上调。棘霉素可能通过抑制肝癌细胞的生长、转移和促进肝癌细胞的凋亡起到抑制肿瘤生长的作用。     

MicroRNA-100调节mTOR表达对肝癌细胞侵袭转移及上皮间质转化的影响及机制研究

目的:探讨microRNA-100调节m TOR表达对肝癌细胞侵袭转移及上皮间质转化的影响并研究其可能的分子机制。方法:通过脂质体介导将microRNA-100模拟物及阴性对照转染Hep G2细胞,将细胞分为转染试剂对照组(mock)、阴性对照组(control)和microRNA-100 mimic(miRNA-100 mimic)组。采用realtime PCR检测转染后细胞中miRNA-100的表达水平,Western blot检测m TOR的表达变化,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Tranwell检测细胞的侵袭能力,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin、α-SMA和E-cadherin的表达。结果:过表达miRNA-100通过抑制m TOR的表达抑制肝癌细胞的迁移及侵袭能力,并通过下调肝癌细胞中MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达,上调E-cadherin的表达,阻抑上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的发生。结论:MicroRNA-100可能通过降低m TOR的表达抑制肝癌细胞的转移侵袭能力,并抑制上皮间质转化过程的发生。     

姜黄素逆转电离辐射诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化

目的 探讨姜黄素对电离辐射诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮间质转化的影响。方法 用电离辐射诱导A549细胞发生上皮间质转化,将其命名为A549R。CCK8法检测细胞增殖;Western blot检测姜黄素对A549R上皮/间质标志物表达的影响;划痕实验及Transwell实验检测姜黄素对A549R细胞迁移能力的影响。结果 A549R细胞经姜黄素处理后,细胞形态由纺锤形转变为椭圆形上皮形态;E-cadherin表达下调,pan-Keratin表达上调,Vimentin、Twist表达显著下调,N-cadherin表达水平无明显变化;划痕愈合面积随姜黄素浓度的升高而显著下降;A549R细胞迁移能力随姜黄素浓度的升高而显著下降。结论 姜黄素通过下调E-cadherin、Vimentin、Twist的表达,并上调Keratin的表达,从而逆转电离辐射诱导A549细胞发生上皮间质转化。     

BMP4 通过诱导EMT 促进肝癌迁移侵袭*

目的:检测BMP 4 在肝癌中的表达并探讨BMP 4 在诱导肝癌EMT 中的作用,进而研究其对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测肝癌组织中BMP 4 的表达,分析其与肝癌临床病理资料之间的关系。将BMP 4 表达质粒转染至肝癌细胞系HepG2 中,诱导BMP 4 外源性过表达。观察BMP 4 转染前、后HepG2 的细胞形态学改变;Westernblot检测转染前、后HepG2 中BMP 4、EMT 相关蛋白（E-cadherin、Vimentin）表达变化情况;划痕和侵袭实验检测BMP 4 对细胞迁移侵袭能力的影响。结果:BMP 4 与患者的年龄、病理分级、临床分期、不良预后密切相关。BMP 4 过表达后HepG2 呈现典型的EMT 形态学改变,E-cadherin 表达下调、Vimentin 表达上调、细胞的迁移侵袭能力显著增强。结论:BMP 4 与肝癌临床病理资料密切相关,并可能通过诱导EMT 促进肝癌细胞的迁移侵袭能力。      

棘霉素对肝癌SMMC7721细胞凋亡相关基因影响的研究

目的:探讨棘霉素诱导肝癌SMMC7721细胞的凋亡作用及对转录因子Twist、p53、Survivin和hTERT(人端粒酶)基因的影响.方法:采用MTT法测定棘霉素对肝癌细胞的生长抑制率;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测与肝癌的发生和转移密切相关的转录因子Twist,与细胞增殖和凋亡联系紧密的p53、Survivin和hTERT的mRNA表达水平的改变;利用Western blot方法分析棘霉素治疗后上述基因的蛋白表达情况.结果:体外实验证实,棘霉素浓度＞10.0 ng/mL各组对细胞的生长抑制均显著增加,P<0.05,随棘霉素药物浓度增加,细胞抑制率明显增大.棘霉素抑制肝癌细胞株SMMC7721的作用呈剂量-时间依赖性. RT-PCR 方法证实,随着棘霉素剂量的增加,肝癌SMMC7721细胞株中Twist、Survivin和hTERT mRNA表达水平逐渐下调,P<0.01,p53 mRNA表达水平微弱上调,P<0.05.Western blot检测显示,Twist、 Survivin和hTERT蛋白的表达量呈递减趋势,P<0.01,p53蛋白的表达微弱上调,P<0.01.结论:随着棘霉素剂量的增加,细胞凋亡率显著增加.棘霉素能够抑制与肝癌生长密切相关基因的Twist、Survivin和hTERT mRNA表达,促进p53 mRNA表达上调,相应蛋白的表达呈下调和上调.棘霉素可能通过抑制肝癌细胞的生长、转移和促进肝癌细胞的凋亡起到抑制肿瘤生长的作用.     

Wnt7a对肝癌细胞凋亡、迁移及侵袭的影响

目的:检测Wnt7a在肝癌中的表达,分析Wnt7a对肝癌细胞活性、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨Wnt7a在肝癌中的作用。方法:分别采用免疫组织化学染色和Western blot检测组织和细胞系中Wnt7a的表达情况;Hep3B细胞经人重组Wnt7a蛋白（rWnt7a）处理后,MTT法检测细胞活性改变,流式细胞仪检测细胞凋亡变化,Transwell分析细胞迁移及侵袭能力变化。结果:相对于癌旁组织,肿瘤组织低表达Wnt7a蛋白;经rWnt7a处理后,Hep3B细胞活性降低、细胞凋亡增多且迁移与侵袭能力下降。结论:Wnt7a蛋白能抑制Hep3B细胞生长、迁移与侵袭能力,可能在肝癌中发挥抑癌作用。     

Pyk2基因对肝癌He p3 B细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的：探讨沉默富含脯氨酸的酪氨酸激酶2（Pyk2）基因对人肝癌Hep3 B细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法构建Pyk2基因RNA干扰（RNAi）载体,脂质体转染至肝癌Hep3B细胞,实验分3组,Pyk2 RNA干扰组（siRNA组）：转染携带Pyk2基因RNAi的质粒;阴性对照组：转染不携带Pyk2基因RNAi的空载质粒;空白对照组：未转染任何质粒。应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blotting鉴定Pyk2基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、Transwell侵袭和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移等生物学特性。结果 Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2 mRNA 的表达（0．16±0．03）较阴性对照组（0．74±0．13）和空白对照组（0．77±0．16）均明显下降,差异均有统计学意义（t＝51．46,P＝0．000;t＝53．21,P＝0．000）。Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2蛋白的表达（0．24±0．06）较阴性对照组（0．83±0．05）和空白对照组（0．91±0．06）均明显下降,差异均有统计学意义（t＝57．29,P＝0．000;t＝68．53,P＝0．000）。siRNA组48 h细胞增殖抑制率（26．17％±0．28％）较阴性对照组（9．28％±0．22％）和空白对照组（6．47％±0．31％）明显提高,差异均有统计学意义（t ＝31．45,P＝0．004;t＝34．64,P＝0．002）。siRNA组细胞的穿膜细胞数（32．5±8．5）／10 HP明显低于阴性对照组（98．4±12．3）／10 HP和空白对照组（112．6±11．3）／10 HP,差异有统计学意义（t＝95．64,P＝0．000;t＝105．17,P ＝0．000）。siRNA 组的划痕愈合率（28．17％±1．46％）显著低于阴性对照组（77．38％±2．24％）和空白对照组（79．41％±3．17％）,差异有统计学意义（t ＝85．86,P＝0．000;t ＝89．37,P＝0．000）。结论 Pyk2基因参与肝癌Hep3B细胞的增殖、侵袭及迁移,与肿瘤发展、侵袭、转移等密切相关,Pyk2有望成为肝癌诊断和治疗的分子靶标。     

The Effect of Twist Expression on Angiogenesis in Hepatocellular Carcinoma

H epatocellular carcinoma (HCC) has become a worldwide com- mon malignant tumor which shows relatively poor prognosis and rapid progression. Identification of the key molecular targets related to hepatocarcinogenesis has significant therapeutic implicatio…     

Twist、E-cadherin和β-catenin在肝细胞肝癌中的表达及其与预后的关系*

目的:探讨Twist、E-cadherin 和β-catenin 在肝细胞肝癌复发与转移中的作用及与预后的相关性。方法:以石蜡包埋组织切片,免疫组化SP法染色分别检测97例肝细胞肝癌,其中复发与转移组49例,非复发与转移组48例Twist、E-cadherin 和β-catenin 的表达情况。结果:复发、转移与性别、年龄无关（P=0.424,P=0.738）,与临床分期密切相关（P=0.000）。 复发与转移组Twist、β-catenin 表达高于无复发与转移组（P=0.000;P=0.000）,复发与转移组E-cadherin 表达低于无复发与转移组（P=0.027）。Twist,β-catenin 阳性组平均生存时间分别为（28.880 ± 3.285）、（ 31.477 ± 3.359）个月,中位生存时间分别为26、28个月,阴性组平均生存时间分别为（44.603 ± 3.521）、（ 42.009 ± 3.720）个月,中位生存时间分别49、45个月,Twist、β-catenin 阳性组生存期较阴性组缩短差别具有统计学意义（P=0.002,P=0.029）。 E-cadherin 阳性组平均生存时间为（44.514 ± 3.447）个月,中位生存时间为49个月,阴性组为（29.110 ± 3.581）个月,中位生存时间为25个月,E-cadherin 阳性组生存时间较阴性组延长有统计学意义（P=0.002）。 结论:Twist、β–catenin 过度表达,E-cadherin 表达缺失可能与HCC 复发转移、不良生存预后存在相关性。      

miR-3612靶向SEMA4C调控肝细胞癌细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-3612靶向信号素（SEMA）4C对肝细胞癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法:收集2020年5月至2021年9月间在皖南医学院第一附属医院弋矶山医院手术切除的肝细胞肝癌的40对癌组织和相应癌旁组织,常规培养肝细胞癌Hep3B和Huh7细胞,将其分为对照组、miR-3612 mimics-NC组、miR-3612 mimics组、miR-3612 inhibitor-NC组、miR-3612 inhibitor组、si-NC组、si-SEMA4C组、mimics-NC+pcDNA-NC组、miR-3612 mimics+pcDNA-NC组和miR-3612 mimics+pcDNA-SEMA4C组,用转染试剂将相应的核酸和质粒转染各组细胞。qPCR法检测miR-3612和SEMA4C mRNA在肝细胞癌组织和Hep3B和Huh7细胞中的表达,双荧光素酶报告基因实验和免疫共沉淀（RIP）实验验证miR-3612与SEMA4C的结合及调控关系,qPCR法和WB法检测转染后各组Hep3B和Huh7细胞中miR-3612、SEMA4C mRNA和蛋白的表达,CCK-8法、细胞划痕...     

Twist ARF和E-cadherin在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Twist、ARF、E-cadherin蛋白在大肠癌组织中的表达与临床病理参数的关系。同时分析Twist、ARF、 E-cad?herin与大肠癌生长,侵袭转移之间的关系。方法：采用免疫组织化学SP染色方法对60例大肠癌标本及60例正常大肠黏膜标本分别进行Twist、ARF、E-cadherin蛋白检测。结果：Twist在肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常大肠黏膜（P<0.05）;ARF及E-cadherin在肿瘤组织中的阳性表达率明显低于正常大肠黏膜 （P<0.05）,差异有统计学意义。Twist的表达与大肠癌的病理学分级、肠壁浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期相关 （P<0.05）。ARF、 E-cadherin的表达与大肠癌的病理学分级、肠壁浸润深度、有无淋巴结转移、 TNM分期、 有无远处转移相关 （P<0.05）。Twist与ARF共同阳性者10例,共同阴性者8例,两者呈显著性负相关 （r=0.806, P=0.004）。Twist与E-cadherin共同阳性者3例,共同阴性者7例,两者呈显著性负相关 （r=0.754, P=0.006）。结论：Twist的过度表达,ARF、E-cadherin蛋白的表达缺失在大肠癌的发生及侵袭转移中起重要的作用, Twist通过调节ARF/MDM2/p53途径抑制细胞凋亡促进肿瘤细胞形成, 同时影响E-cadherin的表达而促进上皮-间质转化现象,参与大肠癌的发生和转移。     

STAT3通过上调Twist基因表达从而诱导肺腺癌细胞上皮-间质转化

目的探讨信号转导子与转录激活子3（STAT3）基因在肺腺癌细胞上皮-间质转化（Epi．thelial-mesenchymal transition,EMT）过程中的作用。方法应用STAT3-siRNA转染人肺腺癌A549细胞,下调STAT3基因表达。转染后观察细胞形态学变化,通过Westernblot检测STAT3和Twist蛋白的表达变化。同时应用Transwell法和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。并应用免疫组化法验证STAT3和Twist蛋白在肺腺癌组织中表达的相关性。结果STAT3-siRNA转染人肺腺癌A549细胞后,STAT3基因表达下降,同时降低Twist的表达,并且降低肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,在肺腺癌组织中我们也观察到随着分化程度升高,两个蛋白在肺癌组织中的的表达均逐渐降低,并呈正相关。结论STAT3基因通过调节Twist的表达,参与EMT过程,从而在肺癌进展中发挥重要作用。     

miR-4465 通过靶向下调HMGA1的表达抑制肝细胞癌Hep3B细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-4465 靶向高迁移率族蛋白A1（HMGA1）对肝细胞癌 Hep3B 细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法：收集2020 年5 月至2021 年9 月在皖南医学院第一附属医院确诊为肝细胞癌患者的16 对癌组织和癌旁组织样本，采用qPCR 分析miR-4465 在肝细胞癌组织和Hep3B、Huh7细胞中的表达情况，双荧光素酶报告基因实验验证miR-4465 与HMGA1的调控关系。按转染物的不同将 Hep3B 细胞分为 mimics-NC 组 、miR-4465-mimics 组、inhibitor-NC 组、miR-4465 inhibitor组、si-NC 组、si-HMGA1 组；另外分组转染mimics-NC+pcDNA-NC、miR-4465 mimics+pcDNA-NC 和miR-4465 mimics+pcDNA-HMGA1进行回复实验。采用qPCR和WB法检测各组细胞中HMGA1 mRNA和蛋白水平的变化，CCK-8法检测各组细胞增殖能力的变化，划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化，Transwell 实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果：miR-4465 在肝细胞癌组织和细胞中的表达水平显著低于癌旁组织和正常肝细胞（P<0.05或P<0.001）。转染48 h后，过表达miR-4465 的Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著下降（P<0.05、P<0.01或P<0.001）；敲低miR-4465 后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显升高（P<0.05、 P<0.01或P<0.001）。双荧光素酶报告实验验证了HMGA1-3''UTR 与miR-4465 的靶向结合关系，miR-4465 可以靶向下调HMGA1 mRNA 和蛋白质的表达（均P<0.01）。过表达HMGA1 能部分逆转过表达 miR-4465 对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及HMGA1 表达的抑制作用（均P<0.05）。结论：miR-4465 通过靶向下调HMGA1 在肝细胞癌Hep3B 细胞中的表达，从而抑制Hep3B细胞的恶性生物学行为。     

Silencing of Twist Expression by RNA Interference Suppresses Epithelial-mesenchymal Transition,Invasion, and Metastasis of Ovarian Cancer

Purpose: This study aimed to explore the role of the Twist gene in the epithelial-mesenchymal transition ofovarian cancer. Methods: An RNA interference plasmid expressing a small interfering RNA (siRNA)-targetingTwist (Twist siRNA vector) was designed, constructed, and transfected into the human ovarian cancer cell lineA2780. Transfection efficiency was assessed under a fluorescence microscope. Changes in the expression of TwistmRNA in A2780 after transfection with the pGenesil Twist shRNA plasmid were analyzed through RT-PCR.MTT assays and adhesion experiments were applied to determine changes in proliferation and adhesion abilityof A2870 after transfection with the Twist shRNA plasmid. Changes in the expression of the E-cadherin andN-cadherin proteins in A2780 after transfection with the Twist shRNA plasmid were analyzed using Westernblotting. Result: The restructuring plasmid pGenesil-Twist shRNA was constructed successfully. After 48 h ofculture, 80% of the cells expressed high-intensity GFP fluorescence and stability. The expression of Twist decreasedsignificantly after the transfection of the Twist shRNA plasmid (P<0.05). Proliferation of the transfected TwistshRNA cells showed no difference with that of the A2780-nontransfection or A2780-si-control groups (P>0.05) butthe adhesion ability of A2780 decreased dramatically (P<0.05). Expression of the E-cadherin protein increased,whereas that of the N-cadherin protein decreased compared with that in the A2780-nontransfection or A2780-si-control groups (P<0.05). Conclusion: Twist is essential for epithelial-mesenchymal transition, invasion, andmetastasis of ovarian cancer.