山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急毒实验比较研究

目的进行山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急性毒性的比较研究,考察炮制对相关毒性物质基础含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法和经典急性毒性实验法,进行半夏、清半夏水提组分总生物碱、总有机酸及其可测单一成分的含量测定和急性毒性比较研究。结果相关物质基础含量测定结果显示：总有机酸、总生物碱和鸟苷含量大小为半夏〉清半夏;琥珀酸、麻黄碱含量为清半夏〉半夏。毒性研究结果显示：半夏、清半夏水提组分MLD值为301.2g/kg和374.4g/kg,分别相当于临床70kg成人每公斤体重日用量的2342.7倍和2912.0倍。结论炮制对山东半夏相关毒性物质含量与毒性有一定的影响,半夏毒性大于其炮制品清半夏。     

产地对半夏相关毒性物质基础和急性毒性影响的实验研究

目的对不同产地半夏药材水提组分中相关毒性物质基础的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨产地对半夏毒性物质含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法、经典急性毒性实验法,进行半夏水提组分总生物碱、总有机酸及其可测单一成分的含量测定和急性毒性比较研究。结果不同产地的半夏总有机酸含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏;琥珀酸含量依次为山东半夏〉湖北半夏〉贵州半夏;总生物碱含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏;麻黄碱含量依次为湖北半夏〉贵州半夏〉山东半夏;鸟苷含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏。毒性大小为：湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏。结论产地对半夏相关毒性物质的含量与毒性大小有一定的影响,且半夏毒性大小与总有机酸、总生物碱含量呈一定相关性。     

提取工艺对半夏急性毒性与相关物质基础含量的影响研究

目的考察提取工艺对半夏相关毒性物质基础含量与急性毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法和经典急性毒性实验法,进行半夏不同提取工艺样品的含量测定和急性毒性比较研究。结果半夏不同提取工艺样品总有机酸含量：75%醇渗液〉75%醇提液〉30%醇提液〉30%醇渗液〉水提组分≈水渗液;总生物碱含量：75%醇渗液〉75%醇提液〉30%醇渗液〉30%醇提液〉水渗液≈水提组分。毒性研究结果显示：75%醇渗液和75%醇提液可测出MTD值,其余组测得MLD值,毒性大小依次为75%醇渗液〉75%醇提液〉30%醇渗漉组〉30%醇提组〉水渗组〉水提组。结论提取工艺对半夏毒性及相关毒性物质含量有一定的影响,其毒性大小与总生物碱、总有机酸含量呈一定相关性。     

基原对柴胡急性毒性和皂苷类物质含量影响的实验研究

目的对不同基原柴胡的皂苷类物质含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨基原对柴胡皂苷类化学成分含量与急性毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、经典急毒实验法,进行南、北柴胡药材中柴胡总皂苷和皂苷a含量测定及急性毒性比较研究。结果北柴胡药材中总皂苷含量4．61％,柴胡皂苷a的含量0．60％,南柴胡药材中总皂苷含量3．53％,柴胡皂苷a的含量0．46％。1日内给小鼠灌胃南、北柴胡药材分别为25．2g／kg、26．4g／kg（按含生药量计算）,分别相当于临床70kg的成人每公斤体重日用量的196倍和205倍以上,观察14天,小鼠一般状况良好,无一死亡。结论北柴胡药材毒性大于南柴胡药材,其毒性的大小与柴胡皂苷类物质含量有一定相关性。     

半夏不同组分小鼠急性毒性的比较研究

目的对半夏全组分、水提组分和醇提组分进行小鼠急性毒性比较研究,以观察、评价半夏药材的急性毒性,为临床安全、合理用药提供依据。方法制备半夏全组分、水提组分和醇提组分样品,采用经典的小鼠急性毒性实验方法分别测定半夏全组分、水提组分的最大给药量和醇提组分的最大耐受量。结果半夏全组分的最大给药量（MLD）为34.8g/kg,水提组分的最大给药量（MLD）为300.0g/kg,醇提组分的最大耐受量（MTD）为99.2g/kg,分别相当于临床70kg人每公斤体重日用量的270.7倍、2333.3倍和771.6倍。结论半夏药材具有一定毒性,与药典、文献记载及临床应用相符。半夏醇提组分毒性大于水提组分及全组分,后两者基本安全、低毒。     

南、北柴胡不同组分对小鼠急性毒性试验比较研究

目的探讨南、北柴胡不同组分对小鼠急性毒性的影响。方法分别制备南、北柴胡水提组分和醇提组分,按照经典小鼠急性毒性试验方法,进行南、北柴胡不同组分的小鼠急性毒性试验比较研究,试验数据用公斤体重法计算最大耐受量（MTD）和最大给药量（MLD）,连续观察14天。结果南、北柴胡不同组分对小鼠急性毒性强度为：北柴胡醇提组分〉南柴胡醇提组分〉北柴胡水提组分〉南柴胡水提组分。南、北柴胡水提组分没有出现死亡,测得MLD值按含生药量计算分别为181.6g·kg-·1d-1和201.6g·kg-·1d-1,分别相当于临床70kg人每公斤体重日用量的1412.4倍和1568.0倍;南、北柴胡醇提组分无法做出LD50,测得MTD值按含生药量计算分别为46.4g·kg-1·d-1和75.2g·kg-1·d-1,分别相当于临床70kg人每公斤体重日用量的360.9倍和584.9倍。结论北柴胡药材毒性大于南柴胡,且南、北柴胡的醇提组分均大于其水提组分。柴胡皂苷类物质含量高低与其毒性大小有一定相关性,推测柴胡皂苷可能是其主要毒性物质基础。     

不同醇处理方式对半夏毒性物质基础含量和急毒影响的比较研究

目的比较不同醇处理方式对半夏总生物碱和总有机酸含量的影响,并对其急性毒性进行观察与评价,为临床用药的安全性提供依据。方法分别用不同醇处理方式制备半夏不同样品,采用紫外分光光度法,取各供试品溶液与空白对照液,在波长416 nm处测定吸光度,计算总生物碱含量,采用酸碱滴定法测定各样品中总有机酸的含量。按照经典小鼠急毒试验方法,公斤体重法计算最大耐受量(MTD),测定最大给药量(MLD),考察半夏75%醇渗、75%醇提(MTD)值,30%醇提组、30%醇渗组(MLD)值,连续给药观察14天,记录各组动物体重变化,毒性症状谱及死亡情况。结果半夏不同醇处理提取(75%醇渗、75%醇提、30%醇提组、30%醇渗组)中总生物碱含量为75%醇渗液>75%醇提液>30%醇渗液>30%醇提液;总有机酸含量为75%醇渗液>75%醇提液>30%醇提液>30%醇渗液。急毒研究结果显示,半夏75%醇渗MTD可达94.4 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的734.2倍;半夏75%醇提MTD可达99.2 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的771.6倍;半夏30%醇提MLD值为295.2 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的2 296.0倍。半夏30%醇渗MLD值为291.6g.kg-.1d-1,相当于临床人用量的2268.0倍。结论提取温度和醇提取浓度对半夏毒性相关物质基础含量影响较大,总生物碱和总有机酸部位均在高浓度醇溶液中含量最高,总生物碱的提取还受温度影响,而总有机酸受温度影响不大。急毒试验结果显示,不同醇提取样品毒性大小与总生物碱、总有机酸含量有一定的相关性。     

不同酸处理方式对半夏总生物碱含量和急性毒性影响的比较研究

目的比较进行不同酸处理方式对半夏总生物碱含量的影响及急性毒性观察与评价,为临床用药的安全性提供依据。方法分别用不同酸处理方式制备半夏不同样品,采用紫外分光光度法,取各供试品溶液与空白对照液,在波长416nm处测定吸光度,计算总生物碱含量,按照经典小鼠急毒试验方法,用bliss法计算半数致死量(LD50),公斤体重法计算最大耐受量(MTD),考察半夏酸水提取,酸醇提取(MTD)值、酸水渗漉、酸醇渗漉提取(LD50)值,连续给药观察14天,记录各组动物体重变化,毒性症状谱及死亡情况。结果半夏不同酸处理提取(酸水提取、酸醇提取、酸水渗漉、酸醇渗漉)中总生物碱含量为酸醇渗漉液>酸醇提取液>酸水渗漉液>酸水提取液。急毒研究结果显示,半夏酸水提取MTD可达29.6 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的230.2倍;半夏酸醇提取MTD可达27.2g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的211.6倍;半夏酸水渗漉提取LD50值为14.15 g.kg-1.d-1,95%的可信限为12.981～15.563 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的110.0倍。半夏酸醇渗漉提取LD50值为14.27g.kg-.1d-1,95%的可信限为13.167～15.204g.kg-.1d-1,相当于临床人用量的111.0倍。通过小鼠急毒实验观察:呼吸抑制、抽搐、腹泻、烦躁,呕吐和流泪是半夏不同酸处理提取样品主要的急性毒性症状,小鼠死亡多发生于4小时之内。结论半夏总生物碱部位有明显毒性,是半夏产生毒性作用的物质基础之一,同时温度对半夏总生物碱富集物毒性影响较大,说明半夏产生毒性作用的部位中某些成分加热易被破坏。     

何首乌不同组分对小鼠急性毒性试验比较研究

目的比较何首乌全组分、水提组分、醇提组分对小鼠急性毒性的影响,进行何首乌药材的急性毒性观察与评价。方法分别制备何首乌全组分、水提组分、醇提组分,按照经典小鼠急性毒性试验方法测定何首乌不同组分小鼠口服半数致死量（LD50）、最大耐受量（MTD）、最大给药量（MLD）,连续观察14天,观察其急性毒性症状谱,记录累积死亡数及小鼠体重变化。结果何首乌不同组分对小鼠急性毒性强度为：全组分〉醇提组分〉水提组分。何首乌全组分、水提组分、醇提组分无法作出LD50,MTD试验结果按含生药量计算分别为20.0 g.kg-1.d-1、98.4 g.kg-1.d-1和78.0g.kg-1.d-1,分别相当于临床70 kg人每公斤体重日用量的116.7倍、574.0倍和455.0倍。主要毒性症状是腹泻、怠动、毛色不华。结论何首乌药材具有一定的毒性,与文献记载相符。其不同组分中化学成分是决定其毒性强度不同的物质基础,通过何首乌不同组分小鼠急性毒性试验比较研究,有利于进行何首乌药材系统的毒性研究与评价,为进一步锁定其毒性物质基础提供试验依据,其毒性成分和致毒机理有待于进一步研究。     

产地对北柴胡皂苷类物质含量及急性毒性影响的实验研究

目的对不同产地北柴胡药材全组分、醇-水提取物中皂苷类物质的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、经典急性毒性实验法,进行北柴胡药材全组分、醇-水提取物柴胡总皂苷和皂苷a的含量测定及急性毒性比较研究。结果不同产地北柴胡药材全组分柴胡总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉内蒙柴胡、山西柴胡〉河南柴胡,其最大给药量（MLD）大小为：河南柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河北柴胡;不同产地北柴胡药材醇-水提取物总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河南柴胡,其最小致死量（MTD）为：内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡〉河北柴胡。河北产地的北柴胡药材全组分、醇-水提取物中柴胡总皂苷及皂苷a含量均较其他产地北柴胡药材含量高,其对应的全组分MLD、醇-水提取物MTD均较其他产地北柴胡药材的小,毒性最大。结论产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性有一定的影响,且柴胡毒性大小与皂苷类物质含量有一定的相关性。     

半夏类药材提取物抗HeLa细胞活性研究

目的:研究半夏类药材提取物体外抗肿瘤的活性。方法:用流式细胞术检测半夏类药材提取物诱导HeLa细胞凋亡作用,并分析掌叶半夏提取物对细胞生长周期和Caspase-3表达的影响。结果:半夏类药材的抗肿瘤活性主要集中在总有机酸提取物或醋酸乙酯提取部位;掌叶半夏和半夏的抗肿瘤活性作用较强,水半夏相对较弱;抗肿瘤作用与抑制S期细胞增殖和激活Caspase家族诱导细胞凋亡有很大的关系。结论:半夏、水半夏和掌叶半夏的根茎,都有抗肿瘤的活性,以掌叶半夏活性最强;诱导细胞凋亡是它们抗肿瘤的作用机制之一。     

半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的:观察并比较半夏类药材不同提取物诱导体外培养的人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用。方法:应用流式细胞术,检测半夏类药材不同提取物促进人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用,并观察了2种掌叶半夏醋酸乙酯提取物对细胞凋亡的量效关系。结果:3种药材都有诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡的活性,其诱导肿瘤细胞凋亡的有效成分主要集中在总有机酸或醋酸乙酯提取部分。结论:掌叶半夏和半夏诱导肿瘤细胞凋亡的作用较强,水半夏较弱,并且2种掌叶半夏样品的醋酸乙酯部分对促进Bel-7402细胞凋亡呈现一定的剂量依赖性。     

Simultaneous determination of 6 organic acids, 3 nucleosides,and ephedrine in Pinellia ternata by HPLC

Pinellia ternata has a long history of medicinal use in China, Japan, and Korea. Herein, we present a sensitive, selective, and robust HPLC method for the simultaneous determination of 6 organic acids (oxalic acid, malic acid, citric acid, formic acid, acetic acid, and succinic acid), 3 nucleosides (uridine, guanosine hydrate, and adenosine), and ephedrine in P. ternata. The Rhizoma pinelliae samples were collected from different parts of Southwest China, and the 10 constituents were detected at a wavelength of 210 nm. Chromatographic separation was achieved on a Boston Green ODS reversed-phase column along with a gradient mobile phase of methanol and phosphate buffer (pH 2.3, 10 mmol/L, v/v) at a flow rate of 1.0 mL/min. The range of recovery was between 90.8% and 101.9%, and the calibration curves showed high linearity. The relative standard deviations of the new method were less than 3.0% for intra- and inter-day analyses. All samples were stable for at least 48 h. The abundance of the 10 compounds were dependent on their specific locations. The new HPLC method is a powerful technique for the quality control of P. Ternata.     

南充半夏不同部位总生物碱含量研究

目的: 比较四川南充半夏不同部位总生物碱的含量.方法: 采用紫外分光光度法测定总生物碱含量.结果: 南充半夏不同部位都含有总生物碱.结论: 鉴于半夏皮及须根中含有较多的总生物碱,因此半夏在加工过程中去除皮及须根的问题值得进一步研究.     

复方配伍对益母草急性毒性和总生物碱含量影响的实验研究

目的对益母草的总生物碱含量和急性毒性大小进行研究,探讨不同配伍对益母草的总生物碱类化学成分含量与急性毒性的影响。方法运用紫外分光光度法、经典急性毒性实验法,进行不同配伍方式中益母草总生物碱的含量测定及急性毒性比较研究。结果益母草、益母草＋当归、益母草＋川芎、益母草＋木香和益母丸全方样品中,益母草总生物碱的含量依次为0．51％,0．34％,0．37％,0．37％,0．36％。益母草组无法做出LD舶值,其MTD值为2．34g·kg^-1,相当于临床70蝇人每埏体重日用量的218．8倍,其中2只小鼠死亡;益母草＋当归、益母草＋川芎、益母草＋木香和益母丸全方的MLD值相当于含益母草生药量分别为2．34,3．52,3．23,3．60,3．32g·kg^-1,分别相当于临床70蝇人每埏体重日用量的328．8,301．6,336．3,310．0倍,连续观察14d,小鼠一般状况良好,无死亡。结论不同配伍对益母草中总生物碱的含量和毒性各不相同,其最大耐受量提示益母草毒性较小,可通过与当归、川芎、木香等中药配伍降低益母草中总生物碱的含量达到减毒的目的。     

半夏药材中鸟苷和尿苷的含量测定及半夏指纹图谱研究

目的建立不同产地半夏的指纹图谱,对主要核苷类成分含量进行测定。方法采用Hanbon Science & Technolog Co.Ltd.色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长为254 nm,所得不同样品的指纹图谱用相似度评价软件进行分析。结果确定了10个共有峰,建立了半夏药材的指纹图谱。但各主要核苷类成分的含量有较大的差异,其中宜兴半夏的鸟苷、尿苷含量均为最高,达到0.061%和0.052%。结论该方法简单、快速、准确,可作为半夏质量控制的方法。     

A DNA microarray for the authentication of toxic traditional Chinese medicinal plants

A silicon-based DNA microarray was designed and fabricated for the identification of toxic traditional Chinese medicinal plants. Species-specific oligonucleotide probes were derived from the 5S ribosomal RNA gene of Aconitum carmichaeli, A. kusnezoffi, Alocasia macrorrhiza, Croton tiglium, Datura inoxia, D. metel, D. tatula, Dysosma pleiantha, Dy. versipellis, Euphorbia kansui, Hyoscyamus niger, Pinellia cordata, P. pedatisecta, P. ternata, Rhododendron molle, Strychnos nux-vomica, Typhonium divaricatum and T. giganteum and the leucine transfer RNA gene of Aconitum pendulum and Stellera chamaejasme. The probes were immobilized via dithiol linkage on a silicon chip. Genomic target sequences were amplified and fluorescently labeled by asymmetric polymerase chain reaction. Multiple toxic plant species were identified by parallel genotyping. Chip-based authentication of medicinal plants may be useful as inexpensive and rapid tool for quality control and safety monitoring of herbal pharmaceuticals and neutraceuticals.     

半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响

目的:研究半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:将Bel-7402与半夏生物碱(400、200、100μg·mL-1)共同培养,采用MTT比色法测定半夏生物碱对Bel-7402增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组化SABC染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况。结果:作用24h后,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)对Bel-7402增殖有显著抑制作用,且抑制作用随着药物浓度增加而加强,最高抑制率可达到36.98%。TUNEL结果显示,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)能有效诱导Bel-7402细胞凋亡,且呈量效关系。半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)可使Bax表达显著升高而Bcl-2表达显著下降。结论:半夏生物碱对Bel-7402生长有一定的抑制作用,可诱导其凋亡,其作用机制可能为上调Bax和下调Bcl-2。