蟾酥中蟾毒配基类成分的分离纯化及其体外抗肿瘤活性的研究

目的:研究蟾酥中蟾毒配基类成分的分离纯化方法,并初步考察其体外抗肿瘤活性。方法:采用硅胶柱层析法纯化蟾酥药材粗提物,高效液相法测定三种蟾毒配基含量,以此确定最佳纯化工艺;MTT比色法测定药物对肿瘤细胞的生长抑制作用。结果:用优化工艺制备得到的纯化产物蟾毒配基类成分平均含量为95.98%;纯化产物具有显著的抑制肿瘤细胞生长作用,在0.001～100μg/mL的浓度范围内,药物对人乳腺癌MDA-MB-435细胞和人肺癌A549细胞有很强的抑制作用。结论:硅胶柱层析法适合于蟾酥中蟾毒配基类成分:脂蟾毒配基、华蟾毒基、蟾毒灵的制备,且纯化产物体外抗肿瘤作用显著。     

蟾毒灵抗肿瘤作用研究进展

蟾毒灵是传统中药蟾酥的重要活性成分。近些年的研究表明蟾毒灵具有良好的抗肿瘤作用,主要体现在促进肿瘤细胞分化、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成、放射增敏、逆转耐药、调节机体免疫系统等方面,其作用机理与改变肿瘤细胞基因表达、调节信号转导途径、干扰细胞生长周期、抑制细胞膜Na^＋/K^＋-ATP酶、降低拓扑异构酶活性、增强有丝分裂原激活蛋白酶活性等有关。本文就近些年来国内外关于蟾毒灵的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述,希望能给相关研究人士提供一些参考。     

蟾毒灵抗肿瘤作用机制研究进展

蟾毒灵是蟾酥的主要活性成分之一。现代药理研究表明蟾毒灵具有高效、多靶点的抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞自噬、调节机体免疫功能等。本文就近年来国内外有关蟾毒灵的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述。     

蟾毒灵抗肿瘤作用的实验研究进展

蟾毒灵是传统中药蟾酥的主要有效成分之一。现代药理研究表明蟾毒灵具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化及凋亡、逆转肿瘤耐药、抗肿瘤血管生成、免疫调节及抑制肿瘤干细胞生长等作用。就近年来国内外有关蟾毒灵的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述。     

蟾毒它灵体内外抗肿瘤作用的研究

目的评价蟾毒它灵的体内外抗肿瘤作用。方法采用SRB测试察蟾毒它灵对人非小细胞肺癌细胞A549、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞SGC-7901和人宫颈癌细胞HeLa的生长抑制活性。通过静脉恒速输注方式给药,对S180及H22荷瘤小鼠进行蟾毒它灵体内药效评价,包括高剂量短时程给药和低剂量长时程给药。结果蟾毒它灵对SGC-7901、A549、Bel-7402、HeLa细胞作用72 h的IC50值分别为0.018、0.017、0.052、0.013μg/mL。蟾毒它灵采用恒速输注给药方式可以实现50%以上的抑瘤率。结论蟾毒它灵在体内外均具有很好的抗肿瘤效果。     

蟾毒灵抗肿瘤作用机制的研究进展

阐述近年来蟾毒灵抗肿瘤作用具体机制的研究进展。蟾毒灵抗肿瘤的机制主要体现在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤血管形成等方面,同时以蟾毒灵为基础衍生的抗肿瘤药物可以优化蟾毒灵的抗肿瘤作用,减少其副作用。     

蟾毒灵抗肿瘤作用分子机制的研究进展

蟾毒灵是传统中药蟾酥的主要有效成分之一,具有明显的抗肿瘤作用。已有研究表明蟾毒灵可抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞分裂以及逆转肿瘤耐药等。就近年来国内外有关蟾毒灵的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述,以期为蟾毒灵进一步的研究及扩大临床运用提供参考。     

干蟾化学成分的研究

目的:探讨干蟾的化学成分。方法:硅胶柱层析分离,薄层层析和光谱技术鉴定化合物的结构。结果:分离得到6个化合物,分别为胆甾醇、β谷甾醇、脂蟾毒配基、华蟾毒精、蟾毒灵、日蟾毒它灵。结论:首次报道了干蟾的化学成分。     

HPLC法同时测定不同产地蟾酥中的5种活性成分

目的 建立了同时测定蟾酥中活性成分的HPLC方法,并对5个不同产地的药材中5种活性成分进行测定.方法 采用HPLC法测定,色谱柱为Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,25 μm),流动相为醇-水(50∶50),检测波长296 nm,柱温30℃,体积流量1 mL/min,并在此色谱条件下测定不同产地经60％甲醇回流提取的蟾酥样品中活性成分的量.结果 各成分的质量浓度和峰面积具有良好的线性关系,且有很好的分离度.日蟾毒它灵、蟾毒灵、沙毒精、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基平均回收率为99.9％、99.6％、97.9％、96.7％、99.5％,RSD为2.8％、3.2％、1.9％、1.0％、3.4％.不同产地蟾酥样品的HPLC色谱图差别明显,所含成分的种类和质量分数差异较大.结论 本方法简便、灵敏度高,具有实用性,可作为蟾酥药材的质量控制方法.     

蟾毒灵体内外抗肿瘤作用及制剂研究进展

蟾毒灵是中药蟾酥中的一种活性单体,能抑制多种实体瘤及白血病肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,逆转肿瘤细胞耐药,抑制肿瘤细胞迁移和浸润。该文就蟾毒灵对肝癌、肺癌、肠癌、胃癌、膀胱癌等多种肿瘤的体内外抑制作用及机制的最新研究成果进行了详尽综述,并综括了其新型制剂的研究进展,以期为其更深入的研究和应用提供参考。     

蟾酥提取工艺优化与提取物体外抗肿瘤活性研究

目的优化蟾酥中脂溶性成分华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的提取工艺,并探讨蟾酥提取物对人宫颈癌HeLa细胞和卵巢癌SKOV-3细胞的增殖及细胞周期的影响。方法采用U5（54）均匀设计,考察酒精浓度、酒精用量、提取时间等因素对指标性成分提取的影响;MTT法检测蟾酥提取物对HeLa与SKOV-3细胞增殖的影响;流式细胞技术检测细胞周期变化;倒置显微镜下观察HeLa和SKOV-3细胞形态变化。结果以100倍量95%酒精加热回流提取2次,每次2.5 h,两种指标性成分转移率最大,为（117.20±3.52）%;蟾酥提取物呈时间和剂量依赖性地抑制HeLa和SKOV-3细胞增殖;随着蟾酥提取物剂量的增加,HeLa细胞出现S期和G2/M期阻滞,SKOV-3细胞出现G0/G1期阻滞,两种细胞均出现空泡样变性。结论均匀设计法优选蟾酥有效成分的提取工艺合理可行;蟾酥提取物可显著抑制HeLa和SKOV-3细胞的增殖,使细胞出现空泡样变性,并阻滞细胞周期。     

蟾酥缓释注射液的制备及其局部麻醉作用研究

目的以泊洛沙姆407作为载体材料制备蟾酥缓释注射液,并评价其在体内局部麻醉作用效果。方法采用冷溶法制备蟾酥缓释注射液,以胶凝温度为指标筛选蟾酥缓释注射液最佳处方,采用豚鼠皮丘模型比较蟾酥缓释注射液和蟾酥溶液局部麻醉作用时间。结果蟾酥缓释注射液的最佳处方是泊洛沙姆407 15.5%、乙醇10%、蟾酥提取物0.5%,胶凝温度在33℃,体内局部麻醉作用时间可达6～7 h,而蟾酥溶液麻醉作用时间仅为2～3 h。结论蟾酥缓释注射液是一种长效制剂。     

蟾酥逆转大肠埃希菌耐药性的研究

目的：探讨蟾酥对耐药大肠埃希菌的体外抗菌效果及其逆转细菌耐药的部分机理。方法：分别检测水提蟾酥和醇提蟾酥对耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度（MIC）,采用PCR方法分别检测与低于一个MIC浓度梯度的水提蟾酥和醇提蟾酥作用前、作用1、5、10天的耐药大肠埃希菌耐药基因（TEM、SHV、DHA、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9、OXA-2、OXA-10、oprD2）,同时采用RT-PCR方法检测阳性耐药基因mRNA的表达情况。结果：水提蟾酥和醇提蟾酥对耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度分别为1：4,1：8,耐药大肠埃希菌的TEM和CTX-M-9基因在蟾酥作用前后均为阳性,其余耐药基因在蟾酥作用前后均为阴性,蟾酥作用前及作用1天后,耐药大肠埃希菌的TEM和CTX-M-9的mRNA为阳性,而作用5天后,TEM和CTX-M-9的mRNA检测阴性。结论：耐药大肠埃希菌携带多种耐药基因,蟾酥具有逆转耐药大肠埃希菌的耐药性,其逆转机理可能与其抑制耐药基因表达有关。     

蟾酥镇痛膏中蟾酥的提取工艺探索

目的：探索蟾酥镇痛膏中蟾酥最佳提取工艺。方法：采用理化鉴别和薄层色谱鉴别法对提取后的蟾酥残渣进行检查。结果：蟾酥最佳提取工艺为采用90％、80％乙醇依次提取。结论：蟾酥采用90％、80％乙醇依次提取，有效成分提取完全，提取工艺合理。     

产地对蟾酥药材质量的影响

目的: 建立蟾酥药材质量分析方法,并分析产地对其有效成分的影响。 方法: 以华蟾酥毒基和脂蟾毒配基为对照,采用薄层色谱法和高效液相色谱法进行分析和含量测定。 结果: 不同产地蟾酥药材所含成分类型基本相似,但在成分含量上存在明显的差异,以脂蟾毒配基含量变化最为明显,其中产地山东的蟾酥的华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量基本最高;成分差异在薄层色谱图谱中主要表现在斑点2(脂蟾毒配基)、斑点3(华蟾酥毒基)、斑点4、斑点6和斑点9上,在高效液相图谱中表现在3,4,6,7,8,9,14,15号峰上,且还可以看出7,8号峰的含量与14号(华蟾酥毒基)、15号(脂蟾毒配基)峰含量可能存在相关性。 结论: 不同产地蟾酥药材存在明显质量差异;本文方法稳定可行,重现性和专属性好,可用于蟾酥鉴别及质量分析。     

国产蟾酥药材质量综合评价研究

 目的 综合考察国产蟾酥药材质量。方法 用HPLC测定14批蟾酥药材中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分含量,并考察样品中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、蟾毒灵等7种指标成分TLC鉴别和水分、总灰分、酸不溶灰分、醇浸出物等药材常规理化实验项目。结果 各样品中均可检测出7种指标成分的色谱峰,蟾酥药材指标成分含量和常规理化实验项目测定结果表明,不同产地蟾酥药材间品质差异较大。结论 本实验为蟾酥药材综合质量评价体系的建立提供理论和实验依据。     

蟾酥β-环糊精包合物的制备工艺

目的 :研究蟾酥β-环糊精包合物的制备工艺。 方法 :采用均匀设计法筛选优化出最佳制备条件 ,在此条件下分别采用 5种不同的包合方法制备蟾酥 β-环糊精包合物。 结果 :采用球磨法制备蟾酥 β-环糊精包合物 ,优于其他几种制备方法 ,其蟾毒配基类化合物的包合率达 85 .42%。结论 :在本实验考察范围内 ,球磨法为最佳制备方法。     

蟾酥凝胶贴膏成型工艺的研究

目的:以蟾酥制备外用止痛的蟾酥凝胶贴膏,通过对蟾酥凝胶贴膏的空白基质进行优选,从而确定最佳的空白基质配比;对蟾酥凝胶贴膏中蟾酥的加入量进行考察,确定其最佳的载药量。方法:通过预试验确定蟾酥凝胶贴膏的基质组成,该凝胶贴膏的基质配方组成采用正交试验法进行优选,将剥离强度作为蟾酥凝胶贴膏的主要考察指标,将膏体的涂展性作为辅助的观察指标。在保证凝胶贴膏成型性良好的前提下,以每贴基质中蟾酥的最大含量作为该凝胶贴膏的载药量。结果:混合保湿剂组成为甘油-丙二醇(13∶1),基质配方确定为混合保湿剂、水、聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠、明胶、卡波姆,其比例为4.0∶3.0∶0.4∶0.1∶0.2∶0.25,在pH值为8时制备的蟾酥凝胶贴膏各种指标均较好。蟾酥凝胶贴膏载药量定为每贴50 mg。结论:确定的蟾酥凝胶贴膏基质配方和载药量制成的凝胶贴膏成型性和黏附性较好,载药量大,工艺合理可行,能适合生产的需要。     

高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱分析蟾酥有效成分

 目的采用高效液相色谱-高分辨电喷雾飞行时间质谱(HPLC-DAD/ESI-TOF-MS)联用技术,对蟾酥中的部分有效成分进行初步分析,探讨HPLC-DAD/ESI-TOF-MS联用技术作为蟾酥质量控制方法的可行性。方法采用Agilent C₁₈色谱柱,以乙腈和水(含体积比0.1%醋酸)为流动相,采用梯度洗脱,流速为0.8mL·min^-1,室温,DAD检测器检测波长为291nm,ESI-TOF-MS采用正离子模式。通过HPLC-ESI-TOF-MS在线测定部分化合物的精确分子量,结合文献报道,对蟾酥毒素进行鉴别。结果结合文献报道,在色谱峰当中对12个主要色谱峰进行鉴定。结论高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用技术是蟾酥质量控制的有效方法。     

中药蟾酥研究进展的CiteSpace知识图谱分析

检索了中国知网及Web of Science数据库近10年发表的蟾酥相关的中、英文文献,应用文献计量学和CiteSpace 5.8. R3可视化软件对作者、研究机构、关键词及文献来源等进行分析,并结合信息提取方法对蟾酥研究的现状及发展趋势进行分析。经过筛选最终纳入447篇中文文献和316篇英文文献。叶文才是该领域发表文献最多的作者;山东中医药大学、暨南大学分别是发表蟾酥相关中、英文文献量最多的机构;中文领域机构间合作有待提升,英文领域机构间的合作较为普遍。分析中、英文关键词,发现蟾酥相关研究主要集中在有效成分、安全性、质量标准等方面,抗肿瘤机制和毒效成分研究是目前及未来的热点。