武汉地区献血员血清TTV等几种肝炎相关病毒的基因检测

了解武汉地区不同献血员血清ＴＴＶ感染特点及其与其它几种肝炎相关病毒感染之间的关系。方法采用ＰＣＲ及巢式ＰＣＲ对５４例武汉市城区义务献血员及７４例既往乡村献血者分别进行血清ＴＴＶ ＤＮＡ,ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ等检测。结果：ＴＴＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ指标阳性率在既 往乡村个体献血员为４３．２％、２３．０％与２．７％,城区义务献血员为５．６％、１．９％与１．９％,前者ＴＴＶ     

病毒性肝炎中TTV检测及临床特点初探

ＴＴＶ是近年发现的与病毒性肝炎相关的一种新型病毒 .为了解本地区ＴＴＶ感染状况及其在已知和未知病毒性肝炎中的意义 ,探索其临床特征 ,我们对 84例病毒性肝炎患者血清进行ＴＴＶ检测 .现将有关结果报道如下 .1　材料和方法标本来源 :84份血清取自 1 996年 5月～ 1 998年 1 0月门诊及住院病人 .男 47例 ,女 37例 ;年龄 1岁～ 73岁 ,平均 (38 6±1 1 2 )岁 .临床诊断为急性肝炎 43例、慢性肝炎 2 2例、重型肝炎 8例、肝硬化 1 1例 .诊断均符合 1 995年 (北京 )第五次全国传染病与寄生虫病学术会议制定的标准 .其中甲 -戊型肝炎 30例 ,非…     

TTV-DNA感染48例临床特点分析

48例TTV－DNA检测阳性患者中，单一TTV感染20例，混合感染28例；同时观察血清生化指标，急性肝炎19例，慢性肝炎17例，肝硬化9例，肝癌3例。而单一TTV感染临床特征与急性肝炎相似，绝大部分病例（15／20）病程短于半年，也有部分病例（5／20）病程超过半年。结果表明TTV可以单独感染，也可与各型肝炎病毒混合感染；仅12．5％（6／48）患者有输血或输注血制品史；可以急性发病，也可以迁延呈慢性改变。     

不同人群TTV感染的检测及部分基因序列分析

目的探讨湛江地区不同人群中TTV的感染状况及部分TTV的基因序列. 方法应用PCR检测512份正常献血员血清标本、60份HBsAg阳性血清标本和48份抗-HCV阳性血清标本的TTV感染状况,并对部分扩增出的阳性片段进行克隆测序,与国内外报道的序列进行同源性比较. 结果正常献血员、HBsAg阳性、抗-HCV阳性标本的TTV DNA阳性率分别为10.94%、13.33%和16.67%,不同人群间结果无显著性差异（P＞0.05）;随机选出的5例TTV DNA阳性片段,其序列显示与日本株（AB008394）和中国株（TTV CH1）相应位置核苷酸序列的同源性大于97%,可能属同一基因型. 结论湛江地区不同人群TTV DNA与HBsAg阳性、抗-HCV阳性无明显相关.     

肝炎患者血清中经输血传播病毒的核酸检测

目的 了解肝炎患者中药输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况及流行特征。方法 采用半巢式聚合酶链反应方法检测肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ,特异性引物们位于ＴＴＶ基因组的ＯＲＦ１保守区。结果 ６６例急慢性肝炎患者血沮中共检出１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性,总阳性率为１５％,其中１６例非甲－庚型肝炎中检出４例阳性（２５％）,３９例乙型肝炎中检出６例阳性（１５％）,１１例其他类型肝炎中未检出阳性病例。结论广州地区肝炎患     

重症肝炎患者TTV的检测及基因型研究

目的：研究兰州地区重症肝炎患者TTV感染状况及基因型。方法：采用TTV基因ORFl区套式PCR技术检测血清中TTVDNA，限制性内切酶进行酶切分型研究。结果：57例重症肝炎患者血清中TTVDNA阳性率为36．8％(2l／57)，基因表现型的感染率依次为1a型33．3％(7／21)、lb型23.8％(5／21)、2a型9．5％(2／21)、2b型9．5％(2／21)、lb／2a型14．3％(3／21)、lb／2b型9．5％(2／21)。结论：兰州地区重症肝炎患者中有较高比率的TTV感染，重叠感染率高于单纯TTV感染率；血清中存在2种基因型、6种基因表现型，其中2b型、lb／2b型为首次发现，基因表现型呈现多样化。应对TTV的致病性进行深入研究。     

TTV肝炎4例报道(摘要)

ＴＴＶ是继甲、乙、丙、丁、戊及庚型肝炎病毒之后发现的又一新型肝炎病毒．为了解本地区有无ＴＴＶ感染及其临床特点，我们在北京地坛医院的帮助下，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对３４例非甲－庚型肝炎患者血清进行ＴＴＶＤＮＡ检测．结果检出ＴＴＶ阳性４例（１１７６％）．临床诊断为急性肝炎２例，慢性为２例．４例ＴＴＶ肝炎临床上均有不同程度乏力、食欲下降等症状，肝功损害以ＳＡＬＴ升高为主，可伴有黄疸．其中１例慢性肝炎肝穿活检，仅见肝细胞变性、坏死，炎性细胞浸润，血窦受压变窄，未见明显纤维组织增生，与ＨＢＶ，…     

TTV 部分传播途径的初步研究及西安地区TTV部分片段测序分析

目的研究输血传播肝炎病毒(TTV)有否直接垂直传播途径及尿液传播的可能性,初步了解西安地区TTV结构部分特点.方法参照文献[1]在TTV DNA ORF1区设计一套套式PCR引物,建立TTV DNA套式PCR检测方法,对16例血清检测TTV DNA阳性的患者尿液做了TTV DNA检测,对52 例正常顺产孕妇血清及其婴儿脐带血同时检测TTV DNA; 并且对西安地区1例原因不明而TTV阳性肝炎患者的TTV套式PCR扩增终产物纯化直接测序.结果 16例血清检测TTV DNA阳性的患者尿液TTV DNA检测未发现1例阳性; 在52例顺产妇外周血中,9例TTV DNA阳性TTV基因检测阳性率为17.3%(9/52);而新生儿脐带血TTV基因检测阳性率为7.7%(4/52); 其中,母子同时TTV DNA阳性2 例,单纯母亲血TTV DNA 阳性7例; 单纯婴儿脐带血TTV DNA 阳性2例.直接测序法测序,测得的143bp序列用DNAsis分析软件中国1株(BDH1)序列比较,二者同源性为65.0%,差异率为35.0%(>30%).结论 TTV可能不能通过尿液传播,但能经胎盘直接垂直传播, 西安地区TTV流行毒株可能存在新的TTV基因型.     

各型肝炎患者中输血传播病毒感染的检测及临床意义

目的:了解输血传播病毒(TTV)在各型肝炎患者中的感染情况。方法:采用套式PCR方法,对218 例不同型别的肝炎病人血清进行TTV-DNA检测。结果:218 例不同肝炎病人中共检出72 例TTV-DNA阳性血清,总检出率为33.0%,不同民族、性别间TTV-DNA 阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。其中排除非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV-DNA阳性率为53.9%,而在明确诊断为甲型、乙型、丙型肝炎病人中TTV-DNA阳性率为26.5%,两组相比差异有统计学意义(χ2=13.38,P<0.05)。结论:各型肝炎患者中存在TTV感染,非甲非戊型肝炎单纯转氨酶增高病人中TTV感染率明显高于明确病原肝炎病人。TTV感染与肝炎有关,可能是原因不明肝炎的病因之一。     

肝炎患者TTV感染情况及部分基因序列分析的研究

目的 :新发现的DNA病毒 (transfusiontransmittedvirus简称TTV)被认为是一种新的肝炎病毒。为了研究肝炎患者中TTV的感染情况 ,对 10 8例肝炎患者 (ALT >2 0 0IU/L)进行了TTVDNA的检测。方法 :利用巢式PCR方法扩增TTV基因 ,并对两例TTV分离株的部分基因进行克隆和序列分析。结果 :10 8中有 2 4例TTVDNA阳性 ,阳性率为 2 2 2 % ;在非甲～非庚型肝炎中TTV的阳性率为 3 4 6% ( 9/ 2 6) ;甲型肝炎病例中TTVDNA的阳性率为 9 1%( 1/ 11) ;乙型肝炎病例为 2 3 2 % ( 13 / 5 6) ;丙型肝炎病例 7 1% ( 1/ 14 )。两个TTV分离株 (TTVHN 1AF15 15 3 2 ,TTVHN 2AF15 1683 )的核酸序列与GenBank资料中TTV对应序列的核酸同源性高于 90 %。结论 :TTV病毒可能是非甲～非庚型肝炎的重要致病因子 ,并且能够与甲、乙、丙型肝炎病毒发生重叠感染     

部分人群中输血传播病毒的检测

目的　了解部分人群是否有输血传播病毒 (TTV ,TransfusionTransmittedVirus)感染。方法　利用半套式PCR方法对慢性乙肝患者、慢性丙肝患者、血液透析者、健康人群中TTV的感染状况进行了筛选。结果　 2 40例慢性乙肝患者中发现 2例TTV阳性 ,10 0例慢性丙肝患者中发现 4例TTV阳性。 2 0例血液透析者和 10 0例健康人群中都未发现TTV感染。结论　慢性丙肝患者比慢性乙肝患者有较高的感染率 ,在血液透析者和健康人群中没有发现TTV感染者。     

用PCR方法检测肝组织中的新型肝炎病毒TTV

选取非甲－非庚型肝炎后肝病死亡患者肝组织,提取肝组织DNA,应用PCR方法检测TTV,观察肝组织中TTV的感染情况。结果表明：16例肝病患者肝组织中TTV阳性者9例,总检出率56％。提示TTV可以感染肝组织,可能是导致非甲－非庚型肝炎的重要病原。     

湖南地区输血传播肝炎病毒感染者的初步观察

为观察湖南地区输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染情况,合成了特异性引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清ＴＴＶＤＮＡ。共检测７０例肝炎病人血清和４３例献血员血清。结果显示：在３８例血清ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阴性的病人中,１０例ＴＴＶＤＮＡ阳性（２６３％）,ＡＬＴ平均为（４５２±２３６）Ｕ·Ｌ－１;３２例血清甲～戊型和庚型肝炎标志物阴性的病人中,１２例ＴＴＶＤＮＡ阳性（３７５％）,ＡＬＴ平均为（５８２±２５９）Ｕ·Ｌ－１;４３例献血员中,４例ＴＴＶＤＮＡ阳性（９３％）,ＡＬＴ在正常范围。提示湖南地区首次发现ＴＴＶ感染者。本资料与日本首次报道者相近;不能排除ＴＴＶ感染与ＡＬＴ升高的关系。     

丁型肝炎病毒RNA巢式逆转录PCR检测

为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性的均未检出ＨＤＶＲＮＡ。结论：巢式逆转录ＰＣＲ可以作为丁型肝炎病毒临床检测的一种方法     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目的：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％；同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％；外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率为２０％，慢性肝炎和肝炎肝硬变分别为５６．７％，４０％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检出率在急性肝炎和慢性肝炎之间有显著差异。结论：外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的存在与乙型肝炎的慢性化有关     

Detection of hepatitis C virus in serum and peripheral blood mononuclear cells by two reverse transcription polymerase

Over 75% of patients with acute hepatitis C （HCV） will develop into chronic infection associated with chronic hepatitis, end stage liver disease or hepatocellular carcinoma. HCV infection is usually ignored because the level of HCV in serum of some patients is very low and most patients with chronic HCV infection are asymptomatic. Some patients with persistent abnormal liver function may be infected with HCV although HCV RNA and HCV antibodies in serum are negative because their HCV load is under the current detectable limit or sometimes HCV is absent in serum but present in the liver or peripheral blood mononuclear cells （PBMCs） and other tissues.     

熔点曲线法研究慢性乙型肝炎患者中TTV准种与其临床分型的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者中输血传播病毒(transfusion transmitted virus,TTV)准种及其与患者不同临床分型的关系。方法收集TTV DNA阳性的慢性乙型肝炎病例126例,其中乙型肝炎病毒携带者(ASC)4例;慢性乙型肝炎患者(chronic hepatitis B,CHB)46例,其中轻度、中度、重度分别为7例、14例、25例;慢性重型乙型肝炎患者(chronic severity hepatitis B,CSHB)76例。采用巢式荧光实时多聚酶链式反应(PCR)扩增TTV DNA,用熔点曲线方法进行TTV准种检测。结果乙型肝炎病毒感染者中CHB中度、重度和CSHB组中熔点曲线波峰数量显著多于ASC和CHB轻度组(P<0.05),CSHB和CHB重度熔点曲线波峰数量显著多于CHB中度患者(P<0.05)。但CHB重度患者TTV DNA熔点曲线波峰数量与CSHB相比较差异无显著性(P>0.05)。结论TTV存在病毒准种,TTV准种感染的复杂性可能是TTV与HBV感染者重叠感染使病情加重的因素之一。     

河南TT病毒全基因序列测定及TTV感染检测方法的研究

目的 :为了分析河南省TTV的基因结构、特征及基因变异 ,建立适合我国人群的诊断方法。方法 :采用巢式聚合酶链式反应 (PCR)技术从河南省血液中心献血员TTV阳性血清中扩增TTV全基因 ;用PCR方法扩增ORF2片段 ,进行原核表达 ,并转化大肠杆菌 ,进行诱导表达。用SDS PAGE分析表达产物。结果 :在国内较早地克隆测定了一株TTV河南分离株的基因序列 ;建立了检测TTV感染的PCR检测方法 ;在国内较早地表达出TTV重组蛋白抗原 ,抗原具有良好的活性。结论 :用表达的抗原初步建立了检测血清抗 TTVIgG抗体的间接ELISA方法 ,可有效地应用于TTV感染的检测。