原发性骨质疏松症患者的载脂蛋白E基因多态性

背景：近年来，国外学者发现载脂蛋白E基因与骨质疏松症及其并发髋部骨折存在相关性。国内外学者对载脂蛋白E基因采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性进行基因多态性与骨密度、骨质疏松之间关系进行了初步研究。 目的：观察载脂蛋白E基因多态性，分析其与原发性骨质疏松症、骨质疏松性骨折的相关性。 单位：南昌市第一医院骨科。 设计：临床对照观察。 对象：原发性骨质疏松患者60例，男31例，女29例，其中髋部骨折组30例均为新近骨折并有X射线片为诊断依据，单纯性骨质疏松组30例；健康对照组30例，男16例，女14例。 方法：选择2002—01／12南昌市第一医院骨科门诊、住院原发性骨质疏松患者60例，骨折组30例，单纯性骨质疏松组30例，健康对照组30例。全部受检对象均禁食12h以上，于次日早晨采静脉血，从分离的白细胞中提取DNA；进行基因位点DNA扩增聚合酶链反应-单链构象多态性分析。将已明确的载脂蛋白E2／2，E3／3，E4／4纯合子个体的模板DNA（中山大学达安基因诊断中心提供）进行PCR—SSCP分析，示快泳带中E3居前，E2居中，E4置后。将样本模板DNA与之同时电泳，比较快泳带的迁移率即可确定样本模板的载脂蛋白E基因型。 主要观察指标：载脂蛋白E基因型。 结果：参与者全部进入结果分析。①60例原发性骨质疏松患者（骨质疏松性髋部骨折组30例）和30例健康对照组中PCR扩增产物SSCP分析检测到6种基因型：载脂蛋白E2／2，E3／2，3／3，E4／2,4／3，4／4。各组均出现载脂蛋白E基因2型、3型、4型等位基因。②载脂蛋白E基因4型等位基因频率3组比较差异有非常显著性意义（r=17．520，P〈0．01），携带载脂蛋白E基因4型频率骨质疏松组及骨质疏松性骨折组明显高于正常人群（χ^2=4．904，16．681，P〈0．01）；骨质疏松性骨折组高于骨质疏松组（χ^2=4．658，P〈0．01）。 结论：载脂蛋白E4与原发性骨质疏松症、骨质疏松性骨折有密切相关性；载脂蛋白E4是原发性骨质疏松症，尤其是骨质疏松性骨折一个有用的标志物。     

载脂蛋白E基因多态性与代谢综合征的关联

目的：探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)基因多态性与代谢综合征(metabolic syndrome．MS)之间的关联。方法：将203例原发性高血压、糖尿病或原发性高血压合并糖尿病的患者分为MS组(n=96)和对照组(n=107)，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)确定特定ApoE片段基因型，应用莹光标记自动测序法测定PCR产物，确认单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)位点。结果：①MS组ApoEε4等位基因频率高于对照组(15．6％，8．9％，P=0．038)。②将PCR扩增产物直接测序，共检出2个SNP，均为T—C碱基转换，分别位于E4／4PCR扩增产物序列的137和210碱基处。与RFLP法检测ApoE基因型相符。③MS携带ε4的三酰甘油水平升高，高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotien-cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotien-cholesterol，LDL-C)水平均降低，其中HDL-C的84【(0．97&;#177;0．20)mmol／L】与83【(1．14&;#177;0．26)mmol／L】比较差异有显著性意义(P=0．0009)。通过Logitic多因素回归分析发现，三酰甘油是MS独立危险因素。结论：ApoE基因的ε4等位基因是MS危险因子，ApoE可能是MS候选基因之一。     

载脂蛋白E基因多态性与代谢综合征的关联

目的:探讨载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)基因多态性与代谢综合征(metabolicsyndrome,MS)之间的关联。方法:将203例原发性高血压、糖尿病或原发性高血压合并糖尿病的患者分为MS组(n=96)和对照组(n=107),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)确定特定ApoE片段基因型,应用莹光标记自动测序法测定PCR产物,确认单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)位点。结果:①MS组ApoEε4等位基因频率高于对照组(15.6%,8.9%,P=0.038)。②将PCR扩增产物直接测序,共检出2个SNP,均为T→C碱基转换,分别位于E4/4PCR扩增产物序列的137和210碱基处。与RFLP法检测ApoE基因型相符。③MS携带ε4的三酰甘油水平升高,高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoprotien-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoprotien-cholesterol,LDL-C)水平均降低,其中HDL-C的ε4犤(0.97±0.20)mmol/L犦与ε3犤(1.14±0.26)mmol/L犦比较,差异有显著性意义(P=0.0009)。通过Logitic多因素回归分析发现,三酰甘油是MS独立危险因素。结论:ApoE基因的ε4等位基因是MS危险因子,ApoE可能是MS候选基因之一。     

载脂蛋白E基因多态性检测技术的对比性研究

目的建立并比较载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性检测技术,为ＡｐｏＥ基因分型提供良好的方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测技术对１１０例患者及相同人数的正常人进行ＡｐｏＥ基因型检测和分析。结果应用ＲＦＬＰ、ＳＳＣＰ技术测得正常对照组：ε２／２（０,０．０２０）,ε３／３（０．７００,０．７６０）,ε４／４（０,０．０４０）,ε２／３（０．１００,０．０６０）,ε２／４（０,０．０２０）,ε３／４（０．２００,０．１００）,ε２（０．０５０,０．０６０）,ε３（０．８５０,０．８４０）,ε４（０．１００,０．１００）。经χ２检验,ＡｐｏＥ基因型频率和等位基因频率的差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。上两种检测技术与既往两种检测技术（ＩＥＦ,ＷｅｓｔｅｒｐＢｌｏｔｉｎｇ）的结果经χ２检验,其ＡｐｏＥ等位基因频率的差异也无显著意义（Ｐ＞０．０５）,均符合中国汉族人ＡｐｏＥ基因频率分布。结论ＰＣＲＲＦＬＰ方法是一种稳定可靠的ＡｐｏＥ基因多态性分析方法,多重ＰＣＲＳＳＣＰ技术更加简便有效,使ＡｐｏＥ基因多态性的研究更加完善。     

新疆石河子地区哈萨克族载脂蛋白E基因多态性的检测

目的初步了解新疆石河子地区哈萨克族自然人群载脂蛋白E（apo E）基因多态性和表型分布特征,建立石河子地区哈萨克族apo E基因遗传资源库,并建立一种快速、敏感的apo E基因多态性分析的方法,为临床今后开展apo E基因分型提供实验室依据。方法采用聚合酶链反应（PCR）特异性扩增apo E基因含编码112位和158位氨基酸的基因序列,用限制性内切酶Hha I酶切,经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳观察其片段长度多态性（RFLP）,确定PCR产物的基因型。结果新疆石河子地区哈萨克族自然人群apo E基因型频率分布分别是E3/3 65%、E3/4 17%、E2/3 16%、E2/4 1%、E4/4 1%;ε2、ε3、ε4等位基因频率分别是9.0%、81.5%、9.5%。其中ε2等位基因频率明显高于维吾尔族,ε4等位基因频率明显低于维吾尔族,但差异无统计学意义。结论PCR-RFLP简便、敏感、准确,适合一般实验室开展检测及大规模人群调查。     

中国汉族载脂蛋白E基因多态性与高血压的关系

目的 以中国汉族为对象研究载脂蛋白E(apoE)基因多态性与高血压间的关系。方法 选择临床诊断原发性高血压120例，及同期无心血管系统病史体检者120例为对照组。采用聚合酶链反应及限制性酶切技术来分析鉴别apoE基因第四外显子中含多态位点的DNA片断。结果 高血压组E3／4基因型频率为17．5％，对照组E3／4基因型频率为7．5％，高血压组E3／4基因型频率高于对照组E3／4基因型频率(r=5．67，P&;lt;0．05)；高血压组E4等位基因频率为16．2％，对照组E4等位基因频率为为10．6％，高血压组E4等位基因频率高于对照组E4等位基因频率(x^2=5．46，P&;lt;0．05)，高血压组E4等位基因频率明显高于对照组。结论 apoE的E3／4基因型及E4等位基因与高血压有关系.     

载脂蛋白E基因多态性与血脂水平及高脂血症的相关性

目的:分析载脂蛋白E基因多态性、血脂水平与高脂血症的关系。方法:选择2005-06/2006-03武汉大学中南医院收治的高脂血症患者165例为高脂血症组,另外108例健康体检者为健康对照组。所有受试者均采集空腹静脉血,应用等位基因特异性多重聚合酶链反应技术进行载脂蛋白E基因多态性分析,同时测定所有样本血清中总胆固醇,三酰甘油,载脂蛋白AI,载脂蛋白B,高、低密度脂蛋白胆固醇,脂蛋白α和载脂蛋白E水平,并比较不同载脂蛋白E基因型和等位基因受试者血脂水平的差异。结果:273例受试者全部完成测试进入结果分析。①共检出载脂蛋白E的4种基因型,以E3/3频率最高。高脂血症组ApoEE3/3基因型频率明显低于健康对照组(66.1%,75.0%,P<0.05),载脂蛋白E3/4基因型频率明显高于健康对照组(16.4%,6.5%,P<0.05),载脂蛋白Eε4等位基因频率又明显多于健康对照组(12.3%,3.2%,P<0.05)。②高脂血症组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白E水平明显高于健康对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇,载脂蛋白AI明显低于正常对照组(P<0.05)。③高脂血症组中载脂蛋白Eε4携带者的总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于ε2和ε3携带者;载脂蛋白Eε2携带者的总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白α水平最低。载脂蛋白E水平顺序是E2/3>E3/3>E3/4。结论:载脂蛋白Eε4等位基因与高脂血症有关,载脂蛋白E基因多态性可能是高脂血症患者的遗传因素。     

冠心病患者载脂蛋白E基因型及表型的研究与临床意义

目的：探讨在冠心病（ＣＨＤ）发生发展中的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因多态性的作用及其对血脂水平的影响。方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法,测定２１０例ＣＨＤ患者和１７２例正常对照者的ａｐｏＥ基因型。应用ＳＰＳＳ统计软件包分析该基因对两组受试者的血脂,脂蛋白和载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）载脂蛋白Ｂ１００（ａｐｏＢ１００）的影响及其与ＣＨＤ的临床相关关系,结果：ＣＨＤ组ａｐ     

聚合酶链反应限制性内切酶消化法检测人载脂蛋白E基因多态性

采用聚合酶链反应与限制性核酸内切酶ＨｈａＩ消化相结合的方法建立一种简便。实用的人载脂蛋白Ｅ基因多态性检测方法。ＰＣＲ扩增含有编码１１２和１５８位氨基酸的基因片断序列，产物经ＨｈａⅠ酶消化，经聚丙烯酸 胺凝胶电泳可见２－４条特定长度的ＤＮＡ条带易于判定ａｐｏＥ基因型。     

原发性骨质疏松症的候选基因多态性

目的:就近几年对原发性骨质疏松症有关致病基因研究进行总结。资料来源:检索Medline1998-01/2004-05关于原发性骨质疏松症与候选基因多态性的关系的相关文章,检索词为“osteoporosis,candidategene,polymorphism,VitaminDreceptorgene,estrogenreceptorgene,insulin-likegrowthfactorgene,IL-6gene,transforminggrowthfactorbetagene,calcitoninreceptorgene,COLIAgene”,并限定文章语言种类为英文。资料选择:对资料进行初审,选择关于原发性骨质疏松与基因多态性关系的文献,筛除明显缺少随机对照的实验研究,并对剩余文献开始查找全文,同时排除综述类文章和重复性研究。资料提炼:共收集到符合条件的文献197篇,按候选基因与原发性骨质疏松相关性研究的新观点选择符合要求的文献27篇,排除的170篇文章,105篇为未随机研究或重复性研究,65篇为综述类文章。资料综合:对所选取的文献内容进行总结,对候选基因在骨质疏松的病因学及发病机制方面的研究进行了概括和评价。众多的候选基因参与了对原发性骨质疏松的调控,目前虽无法明确影响骨质疏松的主要基因,但基因在原发性骨质疏松病因中的作用是肯定的,这种作用主要体现在对骨密度、骨量峰值等的影响。结论:维生素D受体基因、雌激素受体基因、胰岛素样生长因子基因、白细胞介素6基因等候选基因的多态性与骨密度、骨量峰值、骨硬度指数、发生骨折的风险等相关,证明基因的多态性在原发性骨质疏松症病因中起决定作用。     

原发性骨质疏松症的候选基因多态性

目的：就近几年对原发性骨质疏松症有关致病基因研究进行总结。 资料来源：检索Medline 1998-01／2004-05关于原发性骨质疏松症与候选基因多态性的关系的相关文章，检索词为“osteoporosis，candidate gene，polymorphism，Vitamin D receptor gene，estrogen receptor gene，insulin-like growth factor gene，IL-6 gene，transforming growth factorbeta gene，calcitonin receptor gene，COLIA gene”，并限定文章语言种类为英文。 资料选择：对资料进行初审，选择关于原发性骨质疏松与基因多态性关系的文献，筛除明显缺少随机对照的实验研究，并对剩余文献开始查找全文，同时排除综述类文章和重复性研究。 资料提炼：共收集到符合条件的文献197篇，按候选基因与原发性骨质疏松相关性研究的新观点选择符合要求的文献27篇，排除的170篇文章，105篇为未随机研究或重复性研究，65篇为综述类文章。 资料综合：对所选取的文献内容进行总结，对候选基因在骨质疏松的病因学及发病机制方面的研究进行了概括和评价。众多的候选基因参与了对原发性骨质疏松的调控，目前虽无法明确影响骨质疏松的主要基因，但基因在原发性骨质疏松病因中的作用是肯定的，这种作用主要体现在对骨密度、骨量峰值等的影响。 结论：维生素D受体基因、雌激素受体基因、胰岛素样生长因子基因、白细胞介素6基因等候选基因的多态性与骨密度、骨量峰值、骨硬度指数、发生骨折的风险等相关，证明基因的多态性在原发性骨质疏松症病因中起决定作用。     

Apolipoprotein E polymorphisms in Mexican patients with coronary artery disease.

BACKGROUND: Apolipoprotein E polymorphisms have important effects on plasma lipid levels and in the genetic susceptibility to development of cardiovascular diseases. Thus, the purpose of this study was to investigate the association of apolipoprotein E polymorphisms with coronary artery disease and with plasma lipid levels in a group of Mexican Mestizo patients. METHODS: Apolipoprotein E polymorphisms were determined in 156 Mexican patients with coronary artery disease and 200 non-related healthy controls using the restriction fragment length polymorphism technique. The correlation of these polymorphisms with lipid profile (total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol and triglycerides) in the patient group was determined. RESULTS: A similar distribution of allele and genotype frequencies in coronary artery disease patients and healthy controls was found. Higher serum levels of high-density lipoprotein cholesterol and lower levels of low-density lipoprotein cholesterol, triglycerides and glucose were found in patients with the APOE*2/3 genotype when compared to patients with the APOE*3/4 and APOE*3/3 genotypes, although these differences were not significant. CONCLUSIONS: Our data suggest that genetic variation at the APOE is not a genetic factor related to the genetic susceptibility to coronary artery disease in Mexican individuals, but the role of this polymorphism in determining the lipid profile cannot be excluded.     

ApoE基因多态性与阿尔茨海默病及血管性痴呆的关系

目的　评价ApoEε4与阿尔茨海默病及血管性痴呆的关系。 方法　对 15 6 0例老年患者 (平均年龄 77± 8岁 )进行ApoE等位基因测定 ;通过DSM Ⅳ标准将上述患者分为三组 ,进行统计分析。结果　在AD组中携带E4等位基因的患者为 30 9例 ,占此组的 5 0 % ,与非痴呆组比较差异有显著意义 (5 0 %vs32 % ,P<0 0 1)。ApoEε4 (P <0 0 0 0 1)、年龄 (P <0 0 0 0 1)、女性 (P <0 0 5 )是阿尔茨海默病发病的独立危险因素。ApoEε4 (P =0 6 9)不是血管性痴呆的独立危险因素。结论　ApoEε4与阿尔茨海默病有显著相关 ,是其发病的一个重要危险因素 ,但与血管性痴呆的关系仍不明确     

Apolipoprotein E polymorphisms and mortality in Italian type 2 diabetic patients

AIMS: To determine if apolipoprotein E polymorphism is associated with cardiovascular or all-cause mortality in Italian Type 2 diabetic patients. METHODS: A prospective study of mortality in Type 2 diabetic patients (n = 433) as a function of apolipoprotein E phenotype, which was assessed at entry into the study. During follow up (10 years), 110 (25.4%) patients died of which 66 (15.2%) were the result of cardiovascular causes. Cause of death was established from death certificates and clinical records. The clinical status of the survivors was determined at the end of the study. RESULTS: Apolipoprotein E polymorphisms were not associated with excess cardiovascular or all-cause mortality in the Italian Type 2 diabetic patients either in univariate or multivariate analyses. Age, duration of diabetes and glycated haemoglobin levels at entry were the primary determinants of premature mortality in the diabetic population. CONCLUSIONS: Apolipoprotein E polymorphisms are not markers for premature mortality in Italian Type 2 diabetic patients. The impact of apolipoprotein E mutations may be attenuated by environmental factors, notably a healthier diet, in Italian patients.     

Apolipoprotein A-V gene polymorphisms in subjects with metabolic syndrome.

BACKGROUND: Genetic variation at the apolipoprotein A-V locus, recently discovered proximal to the APOA1/C3/A4 gene cluster, is associated with elevated triglyceride concentrations, a risk factor for atherosclerosis. METHODS: The goal of our study was to determine the association of two apolipoprotein A-V (APOA5) gene polymorphisms in a group of urban Romanian subjects with the prevalence of the metabolic syndrome. For this purpose, we assayed -1.131T>C and c.56C>G polymorphisms for 279 subjects divided into three groups: a control group, a metabolic syndrome group and a cardiovascular disease group. Then we correlated the minor allele frequencies with body mass index and biochemical parameters. RESULTS: We obtained higher frequency for -1.131C compared to c.56G alleles, both mainly distributed in overweight subjects. Body mass index and triglyceride levels were higher in -1.131C allele carriers in metabolic syndrome patients, but were not significantly different in c.56G carriers compared to those with the native gene. Metabolic syndrome -1.131C homozygotes presented lower high-density lipoprotein cholesterol and higher glucose levels compared to subjects with the native gene. Total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol and insulin were not different between -1.131C or c.56G allele carriers and those with the native gene. CONCLUSIONS: Our results demonstrate an independent risk for -1.131T>C APOA5 gene polymorphisms in the development of metabolic syndrome.     

Apolipoprotein E genotypes in Chinese patients with Wilson's disease

Sir, The name Wilson’s disease (WD) derives from great workof the English specialist Wilson (1912).¹ On the Chinese mainland,approximately 3000 WD in-patients have been institutionalizedat the Anhui College of TCM.² WD is due to mutations in theATP7B gene, whose various defects cause accumulation of copperin the liver, brain, kidney, etc.³ ApoE genotypes