喉癌患者治疗前后外周血CK19 mRNA、CK20 mRNA的表达及临床意义

目的探讨喉癌患者根治性治疗前后外周血CK19 mRNA、CK20 mRNA的表达及临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测48例喉癌患者术前和术后6、12、24个月外周血中CK19 mRNA、CK20 mRNA的表达情况。结果 48例喉癌患者外周血术前CK19 mRNA、CK20 mRNA阳性率分别为37.5%(18/48)、45.8%(22/48);患者术后6、12、24个月外周血CK19 mRNA与CK20 mRNA的表达均较术前下降(P<0.05);复发组CK19 mRNA、CK20 mRNA术前表达均高于无复发组(P<0.05);4例复发患者术前与术后6、12个月外周血CK19 mRNA、CK20 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论检测喉癌患者治疗前后外周血CK19 mRNA和CK20 mRNA的表达水平有助于评估喉癌微转移及临床疗效,从分子生物学方面为喉癌局部复发的预测提供帮助。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达及与临床的关系

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中细胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）mRNA的表达变化及与临床的关系。方法：采用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）法进行外周血CK19mRNA表达的测定。结果：NSCLC组患者外周血CK19mRNA的阳性率为60．7％。显著高于良性病变组的3．3％和健康对照组的0（P〈0．01）；Ⅲ和Ⅳ期NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ和Ⅱ期患者的阳性率（P〈0．05）；而不同病理类型NSCLC患者外周血CK19mRNA阳性率之间无显著性差异（P〉0．05）。结论：外周血CK19mRNA的检测有助于我们对NSCLC患者的病情、预后和治疗进行判断．且这并不受病理分型的影响。     

乳腺癌患者外周血CK19 mRNA表达及不同化疗方案对其影响

目的以CK19（cytokeratin-19）mRNA为基因标志检测不同乳腺癌患者外周血肿瘤细胞,检测化疗前后外周血有核细胞CK19 mRNA表达量的改变及其与临床病理因素的关系,比较不同化疗方案下外周血有核细胞CK19 mRNA表达量的变化。方法采用实时定量RT—PCR方法检测217例乳腺癌患者外周血CK19 mRNA表达（17例导管内癌、176例浸润性导管癌和24例乳腺癌远处转移）。217患者中有67例完成了化疗全过程常规取血和查血,对这些患者的化疗前后外周血CK19 mRNA拷贝数的改变及其与临床病理因素的关系进行分析。化疗方案为CEF方案（CEF组23例）、TEC方案（TEC组28例）和TP方案（TP组16例）,3组均行化疗6个周期,21d为1个周期。由于217例患者拷贝数改变值在各组中的分布均不符合正态分布,统计学分析采用非参数秩和检验。结果在导管内癌组、浸润性导管癌组和乳腺癌转移组3组间,外周血CK19 mRNA拷贝数差异有统计学意义（P=0．048）,乳腺癌远处转移组外周血CK19 mRNA拷贝中位数高于导管内癌组和浸润性导管癌组（P〈0．050）。67例患者中,化疗前后外周血CK19 mRNA拷贝数改变在临床分期组间差异有统计学意义（P=0．041）,临床Ⅳ期患者化疗前后外周血CK19 mRNA拷贝数改变的中位数高于Ⅰ～Ⅲ期患者（P〈0．050）。PCNA阳性患者化疗前后外周血CK19 mRNA拷贝数改变的中位数高于PCNA阴性患者,两组间差异有统计学意义（P=0．032）。肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级、ER、PR、以及HER-2亚组间化疗前后外周血CK19 mRNA拷贝数改变的差异均无统计学意义（P〉0．050）。3组患者化疗后外周血CK19 mRNA拷贝数均有改变,3组间差异有统计学意义（P=0．011）。结论乳腺癌患者外周血CK19 mRNA表达可以提示转移风险,TEC方案较TP和CEF方案对外周血CK19 mRNA表达量改变的影响更显著,因此可以通过检测?     

肺癌患者外周血CK19mRNA与微转移的实验研究

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19mRNA的表达情况,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。方法：选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT—PCR方法检测外周血CK19mRNA,相对定量分析结果。结果：肺癌组与健康对照组CK19mRNA阳性表达率分别为72．5％（29／40）、14．0％（7／50）,差异显著（P〈0．05）;相对表达量分别为1．69±0．44、0．28±0．12,有显著差异（P〈0．05）。阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性;相对表达量在中央型、T3＋T4、Ⅲ期＋Ⅳ期及低分化患者数值较高,但不具有统计学意义,鳞癌患者高于腺癌,且有显著差异（P〈0．05）。结论：CK19mRNA作为Real—time RT—PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标记物,具有一定临床应用价值,但特异性仍需提高,应进一步扩大样本进行研究及随访。相对定量分析是一种值得推荐、准确简便的荧光实时相对定量方法。     

肾癌患者围手术期CK19mRNA和CK20mRNA的定量分析

[目的]探讨肾癌患者围手术期外周血CK19mRNA和CK20mRNA的变化。[方法]采用RT-PCR方法检测141例肾癌患者术前血液样本,分析CK19mRNA和CK20mRNA与临床、病理因素的关系;检测103例肾癌患者术前、术中和术后三个时间点的血液标本,并对三组标本进行比较。[结果]CK19mRNA、CK20mRNA的表达与患者的性别、年龄和肿瘤大小无关(P均>0.05);术后外周血CK19mRNA的拷贝数(5.68±3.08)高于术前(4.97±3.58),差异有统计学意义(P<0.05);肾癌患者外周血CK20mRNA的拷贝数低于CK19mRNA。[结论]检测肾癌患者循环肿瘤细胞CK19mRNA,可反映肿瘤的血源性播散,判断病情。     

早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性循环细胞检测及其临床意义

 目的　探讨早期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性细胞检测的临床意义及其预后价值。方法　应用RT-PCR检测50例早期乳腺癌患者、24例良性乳腺病变患者及20名健康体检志愿者外周血有核细胞CK19 mRNA的表达,并根据基因标志物结果随访。结果　早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率40.0 %（20／50）,与良性乳腺疾病患者[12.5 %（3／24）]及健康体检志愿者[5 %（1／20）]比较,差异均有统计学意义（P＝0.018,P＝0.004）;外周血有核细胞CK19 mRNA阳性率与患者年龄、月经状况、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移状况、病理分化、激素受体状况、Her-2、血清CA153、血清CEA水平异常升高无关（P＞0.05）;20例外周血有核细胞CK19 mRNA阳性的患者中有11例随访期出现转移复发（P＝0.002）,中位无瘤生存期明显缩短（P＝0.007）。结论　CK19 mRNA可以作为循环肿瘤细胞基因标志物。检测CK19 mRNA阳性循环肿瘤细胞,可能作为早期乳腺癌术后判断复发转移的辅助指标。     

大肠癌患者外周血CK19 mRNA检测的临床意义

目的：探讨大肠癌外周血中上皮性骨架蛋白CK19 mRNA的表达，与不同临床病理指标间的关系及对术后治疗的指导意义。方法：应用RT-PCR方法检测71例大肠癌患者外周血CK19 mRNA的表达．其中35例同时测定肠系膜静脉血的CK19 mRNA表达。结果：71例大肠癌惠者外周血CK19 mRNA阳性检出率为59．1％（42／71），肿瘤回流血（肠系膜静脉血）为68．6％（24／35），两者间差异无统计学意义。71例患者中Duke’s分期C＋D期的惠者CK19 mRNA表达率（84．6％）明显高于Duke’s A＋B期（44．4％）的患者，X^2=7．86，P=0．05。CK19 mRNA表达与其他病理指标间无相关性。结论：CK19 mRNA在大肠癌外周血中有较高的检出率，随病期进展，阳性率增高。     

荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的：研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20（CK20）mRNA的表达情况，并探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法：采用FQPCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20mRNA表达水平进行检测；并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20mRNA。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20mRNA表达均〈10^3 copiesuL的检测下限；子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为（2．08&#177;0．84）&#215;10^4 copies／uL，阳性率为100％。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mRNA表达水平为（5．52&#177;1．14）&#215;10^4 copies／uL，高表达率（阳性率）为40．6％（26／64）。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义，P〈0．05，与病理分级无关，P〉0．05。结论：FQPCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达，对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

LunX和CK19基因定量表达在肺癌诊断及疗效观察中的应用研究

目的：探讨采用荧光定量RT—PCR检测肺癌患者外周血LunX和CK19基因的表达，以及在肺癌诊断和疗效观察中的应用价值。方法：建立定量检测LunX和CK19 mRNA的荧光定量RT—PCR技术，检测在肺癌患者外周血的表达及治疗前后的表达水平的比较。结果：外周血标本中治疗前病例、治疗后病例和肺部良性病例LunX mRNA的表达分别为83．87％（26／31）、46．67％（7／15）和10％（1／10）。治疗前肺癌组和肺部良性病例组LunX mRNA的表达差异有统计学意义，X^2=15．2，P〈0．001；肺癌治疗前后LunX mRNA的表达也有统计学意义，X^2=4．9，P〈0．05。正常对照10例和非肺癌的肿瘤患者4例LunX mRNA的表达均为阴性，与LunX基因相比较，CK19基因灵敏度相近，但特异性较差。结论：荧光定量RT—PCR检测LunX基因的表达可以作为肺癌诊断及治疗前后疗效考核的重要参考指标，应用价值优于CK19基因。     

CK-19mRNA表达与乳腺癌关系的研究

目的：探讨乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19mRNA（CK-19mRNA）的表达与手术、化疗、临床病理的关系及其临床意义。方法：应用实时荧光定量PCR检测60例Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌患者手术及化疗前后外周静脉血CK-19mRNA的含量。选择20例乳腺良性疾病手术患者做为对照。结果：对照组外周血中未检出CK-19mRNA。术前乳腺癌组外周血CK-19mRNA阳性率为30．0％（18／60），与对照组比较有显著差异（P〈0．05）。术后1周内及术后化疗1周期后CK-19mRNA阳性率分别降至25．0％（15／60）和13．3％（8／60）。Ⅲ期乳腺癌CK-19mRNA的阳性表达率高于Ⅱ期（P〈0．05），CK-19mRNA的表达与激素受体、HER2表达无关（P〉0．05）。有神经及脉管受侵或淋巴结转移者CK-19mRNA的阳性表达率增高，与无神经及脉管受侵或淋巴结转移者有显著差异（P〈0．05）。结论：CK-19mRNA的表达与神经及脉管受侵以及淋巴结转移有关，与激素受体及HER2表达无关。随着肿瘤分期的增高，微转移检出率将升高。     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

细胞角蛋白19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其对微转移的临床意义

目的通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CK19 mRNA的表达,探讨其对外周血微转移的意义。方法 NSCLC患者170例,肺良性疾病患者20例和健康志愿者20例作为对照,均在治疗前抽取外周血,通过RT-PCR法检测CK19 mRNA的表达,结合随访资料和生存时间进行分析。结果 NSCLC患者的CK19 mRNA阳性率为46.5%(79/170),对照组为5%(2/40),差异有统计学意义(P<0.01)。外周血CK19 mRNA阳性患者的远处转移发生率为32.4%(24/74),高于阴性患者的发生率(17.1%,14/82;P<0.05)。全组无瘤生存时间为37个月,外周血CK19 mRNA阳性组和阴性组的无瘤生存时间分别为30个月和45个月(P=0.003)。结论 CK19 mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移的较好方法,对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义,是预测复发转移和预后不良的辅助指标。     

荧光定量PCR检测上皮性恶性肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA

[目的]探讨荧光定量PCR技术检测外周血CK19、CK20mRNA对上皮性恶性肿瘤微转移的临床意义.[方法]采用荧光定量PCR技术检测41例上皮性恶性肿瘤患者术前外周血CK19、CK20mRNA的表达情况.[结果]41例肿瘤患者中CK19mRNA阳性率26.82%,CK20mRNA阳性率21.95%,两者均阳性5例(12.19%).CK19、CK20mRNA阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤细胞分化程度无关(P＞0.05),而与肿瘤分期相关,其差异有显著性.[结论]CK19、CK20mRNA可作为一个检测上皮性恶性肿瘤患者外周血微转移标志物,两者联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.     

CK19 mRNA,MUC1 mRNA,LUNX mRNA在非小细胞肺癌微转移中的表达及临床意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）和非肿瘤患者骨髓和外周血中肿瘤特异性标志物细胞角蛋白19（CK19）、黏蛋白1（MUC1）和肺特异性蛋白X（LUMX）mRNA表达情况,探讨微转移与肿瘤的病理类型、分期的关系。方法：选取肺癌患者30例,健康对照组15例,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测CK19、MUC1和LUNX三项标志物。结果：患者骨髓和外周血中CK19 mRNA阳性率分别为36.7%和30%,其表达状况与患者的肿瘤病理类型、吸烟史无明显关系,而与肿瘤的病理分期关系密切;MUC1 mRNA阳性率分别为6.7%、6.7%,其表达与肿瘤的分期、病理类型、患者的吸烟史均无显著关系,与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定;LUNX mRNA阳性率分别为16.7%和13.3%,可以作为指示NSCLC微转移的敏感特异的指标。结论：三种检测标志物中CK19 mRNA对微转移的诊断敏感性较高,但存在假阳性的可能;LUNX mRNA作为一个新的检测指标对微转移的诊断有一定的作用,但特异性和敏感性不高;MUC1 mRNA与骨髓及外周血中微转移的关系尚待确定。     

CK20m RNA在大肠癌病人外周血中的表达及其临床意义

目的：以CK20mRNA作为靶产物,检测大肠癌病人外周血中的癌细胞即微转移。并探讨其存在的临床意义。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）。检测20例健康志愿者和47例大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达。同时检测20例大肠癌新鲜组织标本中CK20mRNA的表达。结果：20例大肠癌组织标本均扩增出370bp的条带。结肠腺癌HT-29细胞系作为阳性对照亦扩增出370bp的条带,20例正常人外周血中CK20mRNA表达均阴性。全组47例大肠癌病人,19例外周血中表达CK20mRNA,总阳性率为40.4%(19/47),CK20mRNA的表达与肿瘤Dukes分期,最大直径,肝转移有关,结论：CK20mRNA可作为检测大肠癌病人外周血中微转移的良好指标;外周血中CK20mRNA的检测有助于识别出具有复发或远处转移倾向的高危大肠癌病人。     

大肠癌患者外周血CK19和MUC-1 mRNA水平及其临床意义

目的 探讨大肠癌（CRC）患者外周血中角蛋白（CK）19、黏蛋白（MUC）-1 mRNA水平并分析两者与临床病理特征的关系。方法 采用巢式逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测20例健康体检者（健康组）、20例大肠良性腺瘤患者（良性疾病组）及90例CRC患者（CRC组）的外周血CK19和MUC-1 mRNA水平,并分析两者与CRC临床病理参数（Dukes分期、分化程度、远处转移及组织学类型）的关系。结果CRC组CK19 mRNA阳性率为58.9％（53／90）,均高于健康组的0和良性疾病组的5.0％（1／20）,差异有统计学意义（P＜0.05）;CRC组MUC-1 mRNA阳性率为52.2％（47／90）,与健康组的60.0％（12／20）和良性疾病组的50.0％（10／20）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;健康组和良性疾病组CK19 mRNA、MUC-1 mRNA阳性率的差异无统计学意义（P＞0.05）。CRC中CK19 mRNA和MUC-1 mRNA阳性率均与Dukes分期、分化程度及远处转移有关（P＜0.05）,但与组织学类型无关（P＞0.05）。 结论 CRC患者外周血中CK19 mRNA阳性率明显升高,且外周血中CK19mRNA、MUC-1 mRNA与Dukes分期、分化程度及远处转移有关,提示两者可能在CRC发生发展中均有重要意义。     

食管癌放疗患者外周血CK19mRNA检测的临床意义

背景与目的肿瘤细胞在侵袭转移的早期阶段就可能进入血液循环,本研究检测食管癌根治性放疗前后外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)标记细胞角蛋白19(Cytokeratin 19,CK19)mRNA的表达,探讨其临床意义。方法收集72例食管癌患者根治性放疗前后外周血,应用巢式RT-PCR检测CK19 mRNA的表达,分析其与临床病理特征及两年无进展生存(progerssion-free survival,PFS)的关系。结果放疗前后CK19 mRNA阳性者分别占44.4%(32/72)与30.6%(22/72),差别无统计学意义(P=0.085)。放疗前后CK19 mRNA阳性与淋巴结转移相关(P值分别为0.037和0.031)。生存分析也表明放疗前后CK19 mRNA阳性与不良PFS有关(P值分别为0.040和0.001),Cox回归模型则进一步证实放疗后CK19 mRNA阳性是独立预后指标。结论放疗后外周血CK19 mRNA阳性可望成为食管癌根治性放疗预后判断的有效分子标记。     

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与胃癌患者外周血微转移的研究

目的:检测胃癌患者外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20mRNA和hTERTmRNA定性和半定量表达.结果:1)CK20mRNA和hTERTmRNA在胃癌患者中阳性率分别为52.50%(21/40)和65.00%(26/40),相对系数分别为0.81±0.17和0.78+0.17;在胃良性病变患者阳性率均为5.26%(1/19),相对系数分别为0.12和0.11;在健康体检者中均为0.胃癌患者与胃良性病变患者、健康体检者相比,两项指标均有统计学差异(P＜0.01).2)CK20mRNA、hTERTmRNA阳性率和相对系数与临床分期、淋巴结转移、远处转移均有关(P＜0.05),阳性者生存率低于阴性者(P＜0.05).3)CK20 mRNA、hTERT mRNA与CEA、CA199表达呈正相关(P＜0.05),其阳性率高于CA199(P＜0.05).结论:胃癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERTmRNA表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示两项指标能预测外周血微转移和判断预后,其诊断外周血微转移优于CAl99.