山羊脾脏多肽的HPCE定性分析

目的：应用HPCE对由山羊脾脏中获得的多肽进行分析。方法：由经前期诱导后山羊脾脏中提取多肽；经毛细管等电聚焦电泳（CIEF）的方法测定其组成及各组分的等电点。结果：毛细管等电聚焦电泳测得山羊脾脏多肽各组分等电点单一，约为pI=4．46。结论：由山羊脾脏中获得的多肽是由等电点单一的成分组成。     

柱色谱法分离纯化黄酮类化合物研究进展

目的综述柱色谱法分离纯化黄酮类化合物的研究进展。方法查阅近年来公开发表的论文、专著等资料,对柱色谱法分离纯化黄酮类化合物进行概述。结果与结论柱色谱法是一种简单易行又行之有效的分离纯化黄酮类化合物的方法。     

蝮蛇毒小分子多肽的分离、纯化及其抗肿瘤作用研究

目的从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,测定理化性质,研究其对肿瘤细胞的生长抑制作用。方法利用有机溶剂沉淀和Sephadex G-50S、ephadex G-25凝胶过滤色谱等方法分离纯化长白山栖岩蝮蛇蛇毒中的1种小分子多肽Saxis;采用Tricine-SDS-PAGE鉴定;利用Bradford蛋白质测定法测定蛋白质浓度;运用MTT比色法检测该小分子多肽对宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞SMMC-7721和胃腺癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。结果该小分子多肽Saxis的相对分子质量约为5 200,它能抑制Hela、SMMC-7721和SGC-7901细胞的增殖,并且对这3种肿瘤细胞的抗增殖作用具有药物剂量依赖关系,24 h的IC50分别为66.3,54.5,62.2μg/mL。结论利用有机溶剂沉淀和凝胶过滤色谱法可以从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,其对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用。     

鹿茸多肽的分离纯化及药理活性

采用凝胶过滤层析，离子交换层析以及高效液相方法，从马鹿鲜茸分离得到了一种多太，其在SDSPAGE电泳上显示为一条带。HPLC图谱为单峰，质量显示其相对分子量为3095．1，氨基酸组成分析结果表明，此多肽主要含有缬氨酸，丙氨酸，赖氨酸和甘氨酸，没有半胱氨酸，经FDNB法测定，其N-末端氨基酸为缬氨酸，活性检测表明，该多肽能够明显促进表皮细胞和BRL肝细胞株的增殖。     

多肽类物质分离纯化与鉴定方法的研究进展

多肽类化合物在自然界中广泛存在。天然产物中已知的活性多肽主要是由生物体分泌细胞、内分泌腺组织器官、体液或胞质中产生或获得的,生命活动中的多种生理功能均与活性多肽密切相关。随着分离纯化技术和结构鉴定等研究方法的飞速发展,越来越多的具有某种生物活性及药用价值的天然多肽类化合物被分离鉴定出来。本文将从多肽类物质的分离纯化和鉴定方法着手,对近几年的色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在多肽类物质研究中的最新应用进展作一综述。     

蚓激酶活性成分的分离纯化

目的本实验采用色谱分离的方法从赤子爱胜蚓（EiseniaFoelide）中分离纯化出一种纯度达到95％以上的蚯蚓纤溶酶。方法采用匀浆抽提、热变性、超滤、色谱分离、SDS—PAcE和高效液相色谱法等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并用纤维平板法测定其活性。结果通过一系列纯化步骤所得的蚓激酶比活120000u／mg,经sDs—PAGE分析得一条带,相对分子量为28000Da;高效液相色谱分析其纯度达95％以上。结论本实验从蚯蚓中分离纯化出一种高活性、高纯度的蚓激酶。     

脾多肽注射液增强胃癌大鼠脾脏免疫杀伤细胞活性的机制

目的 探讨脾多肽注射液增加胃癌大鼠脾脏免疫杀伤细胞活性的机制。方法 取75只大鼠,其中60只用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍（MNNG）诱导建立大鼠胃癌模型,采用随机数表法将其分为模型组和低、中、高剂量组;剩余15只健康大鼠给予正常饮用水为对照组。第36周起,低、中、高剂量组分别尾静脉注射0.06,0.18,0.54 mL·kg^-1脾多肽注射液,对照组和模型组尾静脉注射生理盐水,每日1次,持续35 d。处死大鼠后观察胃组织病理学变化;对比各组脾脏指数、脾脏NK细胞杀伤活性;对比各组胃组织及脾脏中NK细胞占比及其表面活化受体（NKG2D）的表达、胃组织中NKG2D配体组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A （MICA） mRNA及蛋白相对表达量。结果 模型组胃黏膜固有层有大量炎性细胞浸润,癌化细胞多,黏膜腺体排列严重紊乱;低、中、高剂量组胃黏膜固有层炎性细胞减少,黏膜腺体排列紊乱,癌细胞数量减少,其中中剂量组减少最为显著;脾脏指数、脾脏NK细胞杀伤活性、脾脏及胃组织中NK细胞占比及NKG2D表达、MICA mRNA和蛋白相对表达量组间比较,对照组最高,中剂量组其次,低、高剂量组稍低,模型组最低,并且除低、高剂量组之间比较差异无统计学意义外,其他每2组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 脾多肽注射液可增强胃癌大鼠脾脏NK细胞杀伤活性,其中0.18 mL·kg^-1的脾多肽注射液增强效果最佳,可能与促进NK细胞增生、上调NK细胞活化性受体NKG2D及其配体MICA mRNA和蛋白表达有关。     

高速逆流色谱法分离纯化环孢菌素

应用高速逆流色谱法对环孢菌素的分离纯化进行研究，选择石油醚-丙酮-水(3：3：2，V／V)为两相体系，计算环孢菌素A、B、C、D在两相体系中的分配系数，以上相为固定相，下相为流动相进行高速逆流色谱分离纯化，高效液相色谱法测定单组分纯度。实验结果表明一次高速逆流色谱即可将环孢菌素粗品分离纯化，得到纯度98.5％以上的环孢菌素A,B,C,D单组分，收率达85％以上。     

高速逆流色谱技术在植物活性成分分离与纯化中的应用

高速逆流色谱是一种连续液-液色谱技术,具有无固相载体、样品无需严格预处理等优点。本文就近年来高速逆流色谱在植物有效成分分离方面的应用作了简述。     

鹿角脱盘多肽的分离纯化及其降糖活性的研究

以鹿角脱盘为原材料,经稀醋酸提取,再利用Resource S、Superdex 75、反相HPLC进一步纯化和质谱检测确定其Mr为7 127.6的多肽,命名为鹿角脱盘多肽,对其进行了理化分析。通过对KK-ay小鼠单次给药观察粗品的降糖效果,并采用高胰岛素诱发HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,初步研究了鹿角脱盘多肽对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果表明鹿角脱盘多肽具有明显的降糖活性,不仅能够降低KK-ay小鼠的血糖水平,并且200、100μg/mL粗品和100μg/mL鹿角脱盘多肽均能显著促进胰岛素抵抗HepG2细胞模型的葡萄糖消耗。     

银杏叶中银杏内酯A分离纯化工艺研究

目的:建立一种简易的白银杏叶中提取、分离和纯化银杏内酯A的方法.方法:依次通过乙醇溶液搅拌提取、乙酸乙酯萃取、大孔树脂吸附与洗脱及结晶和重结晶对银杏叶中的银杏内酯A进行分离纯化.以银杏内酯A的得率和纯度为指标,对银杏内酯A的分离纯化工艺进行优选.结果:确定银杏内酯A提取、分离和纯化的最佳工艺条件为:将银杏叶乙醇提取物混...     

钝顶螺旋藻酸性多糖的分离纯化和结构分析

本研究从钝顶螺旋藻中分离纯化了酸性多糖,并进行了结构分析.多糖经DEAE-纤维素柱和Sephadex-200凝胶柱纯化得到螺旋藻酸性多糖纯品,HPLC检测纯度达96.7%,分子量均一,约1.62×10~5.TLC和GC分析表明该多糖主要由D-鼠李糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-甘露糖醛酸构成,摩尔比为65.5:19.5:9:6.经IR、~(13)C NMR和甲基化分析,推测该多糖可能以1,3-连接的鼠李糖为主链.其中木糖为β构型,鼠李糖、葡萄糖和甘露糖醛酸均为α构型,所有糖基均呈吡喃型.     

蓬子菜多糖分离纯化及其性质的研究

目的：从蓬子菜中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法：主要采用Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化,测定各部位中性糖和酸性糖的含量。结果：从蓬子菜水溶性多糖中分离纯化得到2种不同的均一多糖组分TP-1、TP-2,总糖含量均达到90%以上。结论：2种均一多糖首次从蓬子菜中分离得到。     

枇杷叶中科罗索酸的分离纯化及其抗肿瘤活性研究

目的应用中药分离纯化技术从枇杷叶中提取纯化科罗索酸,并研究分离过程中不同样品对胃癌细胞BGC823增长的抑制作用。方法通过大孔吸附树脂富集纯化、硅胶柱层析及制备色谱法,对枇杷叶95%乙醇提取物进行纯化。用MTT法检测不同样品对胃癌细胞BGC823生长的影响。结果科罗索酸具有抑制胃癌细胞BGC823的生长的作用,分离得到的不同科罗索酸样品具有不同程度的抑制作用,且其他组分（如山楂酸或成熟果酸）和科罗索酸能够产生协同作用。结论本法为建立科罗索酸的提纯工艺,开发新型抗癌药物提供实验依据。     

金黄色葡萄球菌细胞壁可溶性肽聚糖的分离纯化和鉴定

目的：从金黄色葡萄球菌中提取纯化可溶性肽聚糖并鉴定其活性。方法：采用小剂量青霉素作用金黄色葡萄球菌（ATCC25923），诱导合成可溶性肽聚糖（PGN）粗品，经Sephadex G-100凝胶层析进一步分离纯化；采用SLP试剂盒对纯化的可溶性PGN定性，ELISA法检测纯化的可溶性PGN对小鼠RAW264．7细胞的活化作用。结果：分离纯化的可溶性PGN经SLP试剂检测阳性，该可溶性PGN可刺激RAW264．7细胞释放TNF-α，并具有明显的量效关系。结论：采用青霉素诱导结合凝胶层析技术可从金黄色葡萄球菌获取纯度及生物学活性较高的可溶性PGN。     

大鼠胰岛分离纯化及功能测定

目的探讨分离和纯化高纯度、高活率、功能佳的大鼠胰岛的方法,并为胰岛移植等实验建立基础。方法采用胶原酶P逆行胆总管灌注,消化分离成年大鼠胰岛,Ficoll 400非连续密度梯度离心法纯化胰岛。形态观察,双硫腙（DTZ）染色鉴定胰岛,AO／PI染色检测细胞活率,胰岛素释放试验评价胰岛的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛形态完整,平均获得量为（512±89）IEQ,胰岛细胞纯度大于90％;胰岛细胞活率大于90％。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为（25．42±4．22）mIU·L-1和（38．75±4．56）mIU·L-1,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论胶原酶P逆行灌注消化胰腺、Ficoll 400非连续密度梯度离心法可获得形态、功能完好、高纯度、高活率的胰岛。     

中药露蜂房水溶性蛋白NV-PP-4的分离纯化及部分理化性质鉴定

目的 :从中药露蜂房抗炎活性有效部分纯化得到一酸性蛋白NV PP 4 ,并鉴定了其部分理化性质。方法 :用SephadexG 50、DEAE SephadexA50、羟基磷灰石等柱层析及HPLC等方法纯化 ,并以HPLC、毛细管等电聚焦电泳 ,氨基酸自动分析等手段 ,鉴定其理化性质。结果 :NV PP 4经不同的HPLC柱和不同的流动相匀表明为一对称单一峰、毛细管等电聚焦电泳呈单一染色带。亲水型分子排阻HPLC测定其分子量为 8 71 1KD ,毛细管等电聚焦电泳测定其等电点为 1 79,氨基酸分析表明NV PP 4含有 87个氨基酸残基 ,其中Gly、Asp、Pro、Glu等含量较多。结论 :NV PP 4是从中药露蜂房中首次分离得到的酸性蛋白质成分。     

珠母贝氨基多糖的分离纯化及其抗肿瘤活性的初步研究

探讨珠母贝氨基多糖的分离纯化及其抗肿瘤活性。马氏珠母贝全脏器经胰酶和枯草杆菌蛋白酶双酶水解、醇沉后得到氨基多糖粗品(CPG)．再经DEAE-52-纤维素柱纯化，并采用MTT法检测其体外抗肿瘤活性。结果表明：CPG和经DEAE-52-纤维素柱纯化级分GAG-1，GAG-2中总氨基己糖的质量分数分别为45．9％，56．5％和59.2％，级分GAG-1硫酸基的质量分数高达13.8％；体外抗肿瘤试验表明CPG，GAG-1和GAG-2具有抑制肿瘤细胞生长的作用，对HL-60细胞的抑制率分别为54．6％。50.0％和35．4％，且能显著增敏化疗药物5-Fu抑制肿瘤细胞的作用，其中GAG-1为主要的活性成分。     

鹿茸多肽对骨、软骨细胞增殖的实验研究

用3H－TdR参入法观察鹿茸多肽对兔助软骨细胞、人胚关节软骨细胞及鸡胚头盖骨成骨样细胞DNA合成的影响。结果表明，10～50μg／ml鹿茸多肽能明显刺激软骨细胞和成骨样细胞的增殖，其增殖作用有明显的量效关系且无种属特异性。