北京地区住院急性呼吸道感染患儿的病毒病原检测分析

目的了解北京地区住院急性呼吸道感染(ARI)患儿的病毒病原情况。方法取1260例年龄14岁以下住院ARI患儿的鼻咽深部分泌物,用间接免疫荧光及病毒分离法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A、B型、副流感病毒1、2、3型及腺病毒等7种常见呼吸道病毒。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对其中490例患儿标本进行肠道病毒(EV)检测。结果1.ARI1260例中,43.33%检测到了病毒病原,7种常见呼吸道病毒检出率36.19%,RSV阳性率最高(23.97%),以冬春季为著,88.08%的RSV阳性为3岁以下小儿。2.EV阳性率16.33%。3.19例存在2种病毒混合感染,均出现在冬春季,16例为RSV并EV感染。4.入选的510例急性呼气性喘息患儿中,3岁以下RSV阳性率最高(43.20%),3岁以上EV阳性率最高(36.11%)。结论1.RSV是北京地区冬春季婴幼儿ARI的主要病原。2.冬春季EV可并RSV等其他呼吸道病毒感染。3.RSV及EV是引起小儿急性喘息性疾病的主要病毒病原。     

南京地区急性呼吸道感染儿童支原体、衣原体和常见呼吸道病毒病原学分析

目的：了解南京地区急性呼吸道感染（acute respiratory infection, ARI）儿童除细菌外的其他病原微生物感染情况,指导临床诊断和治疗。方法应用荧光定量PCR法检测肺炎支原体（MP）和沙眼衣原体（CT）,直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、甲型和乙型流感病毒（IVA和IVB）、副流感病毒1、2、3型（PIV-1、2、3）、人偏肺病毒（hMPV）。结果1 592例标本中,MP和CT阳性率分别为25.7%、2.4%;总呼吸道病毒阳性率为40.9%,其中RSV最常见,占阳性病毒株的61.3%,其次为PIV-3、hMPV,分别为6.7%、4.9%。病原体的混合感染率为6.7%,混合感染主要发生在1岁以内婴儿,有68例,占混合感染的63.6%。结论病毒感染是南京地区婴幼儿ARI的主要原因,RSV是首要病毒病原,MP也是常见的ARI病原体,1岁以内婴儿混合感染率高。［中国当代儿科杂志,2010,12（6）：450-454］     

温州地区2005～2006年急性呼吸道感染患儿病毒病原学检测的情况

目的了解2005～2006年温州地区急性呼吸道感染（ARI）患儿7种呼吸道病毒感染情况。方法选择3970例ARI患儿。其中急性上呼吸道感染308例,下呼吸道感染3662例。采集门诊患儿咽拭子及病房患儿的鼻咽分泌物,应用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒（RSV）,流感病毒（IV）A、B型,副流感病毒（PIV）1、2、3型及腺病毒（ADV）7种常见呼吸道病毒。结果送检标本阳性1773例,阳性率44.7%,以RSV最高（36.2%）。病毒总检出率在性别间（χ^2=9.2P〈0.01）、年龄组间（χ^2=120.5P〈0.01）、疾病种类间（χ^2=101.3P〈0.01）及门诊、住院患儿间（χ^2=180.4P〈0.01）比较均有非常显著性差异。结论RSV仍是温州地区2005～2006年ARI患儿的主要病毒病原,男性患儿较女性患儿对呼吸道病毒易感,且婴幼儿（尤其〈6个月）易感;住院患儿病毒检出率高,以毛细支气管炎阳性率最高。     

儿童呼吸道人类偏肺病毒呼吸道合胞病毒和流感病毒感染的临床特征比较

目的 了解人类偏肺病毒(hMPV)在苏州地区儿童呼吸道感粢中的感染情况;比较hMPV、呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒(Inf)引起呼吸道感染的临床特征.方法 选取2005年11月至2006年10月苏州大学附属儿童医院呼吸科1932例急性呼吸道感染住院患儿.采用无茵负压吸引法采集新鲜痰液.直接免疫荧光法检测RSV,腺病毒,Inf A、B型,副流感病毒1、2、3型等7种常见呼吸道病毒;同时用逆转录.聚合酶链反应法(RTPCR)检测hMPV N基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列进行比较分析.结果 1932例标本中hMPV阳性例数为128例(6.6%),其中hMPV合并其他呼吸道病毒感染5例(3.9%);hMPV检测阳性率在冬季呈现高峰;hMPV感染患儿的平均年龄为22.17月龄,较RSV和Inf感染患儿大;hMPV感染者临床特征与RSV和Inf感染相似,喘息在RSV和hMPV感染患儿中更为多见,发热则更多见于hMPV和Inf感染患儿.RSV感染后所致的首要疾病是毛细支气管炎,hMPV和Inf感染后所致的首要疾病是肺炎.单纯hMPV与hMPV合并其他呼吸道病毒感染临床表现差异无统计学意义(P＞0.05).结论 苏州地区部分儿童的呼吸道感染与hMPV有关;hMPV感染临床特征无特异性;hMPV在合并其他呼吸道病毒感染时并不加重病情.     

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目的分析住院急性呼吸道感染(ARI)患儿病毒病原检测结果,为临床儿童急性呼吸道感染提供病毒病原学诊断依据。方法选择2003年4月至2005年3月重庆医科大学儿童医院呼吸内科住院治疗的急性呼吸道感染患儿,取其鼻咽分泌物做免疫荧光检测筛查7种常见呼吸道病毒抗原,包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒、流感病毒A及B型、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,对检测标本阳性的病例进行统计分析。结果1052份标本中,阳性标本409份,占38.88%。其中RSV阳性标本360份,占总阳性标本例数的88.02%,副流感病毒Ⅲ37份占9.05%;RSV发病高峰时期在12月至次年2月和7、8月两个时期;RSV感染多见于3岁以下,发病高峰年龄为2～6个月,男女发病比例为2.24∶1。结论2003～2005年重庆地区急性呼吸道感染的病毒病原体仍以RSV为主。     

儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析

目的了解儿童急性下呼吸道感染病毒病原学特点。方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年9月—2009年9月住院的5480例0～12岁下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行8种病毒检测。结果5480例患儿中,2710例检出至少1种病毒,总检出率49.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)检出最多,为1386例,占51.1%,其余,依次是偏肺病毒(hMPV)513例(18.9%),副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)338例(12.5%),腺病毒(ADV)192例(7.1%);流感病毒A(IFA)128例(4.7%),流感病毒B(IFB)79例(2.9%),副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)41例(1.5%),副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)33例(1.2%)。6个月以下年龄组阳性率最高,为43.5%。RSV、hMPV季节性较明显,主要集中在冬春季节(11月至次年4月)。肺炎、毛细支气管炎、支气管炎(伴喘息)、支气管炎(不伴喘息)和哮喘患儿病毒阳性率分别为47.4%、63.6%、50.5%、30.1%和43.5%。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的主要病原。发病年龄主要在婴幼儿,其中RSV和hMPV最常见。     

2007～2008年温州地区急性呼吸道感染病毒病原学研究

目的：分析2007~2008年温州地区急性呼吸道感染病毒病原学的检测结果,为临床提供病毒病原学诊断依据。方法：取5 097例急性呼吸道感染儿童鼻咽分泌物,采用直接免疫荧光法检测7种常见呼吸道病毒抗原。结果：①2 209份标本（43.3%）病毒病原检测阳性,其中呼吸道合胞病毒（RSV）1 725例（78.1%）,腺病毒（ADV） 61例（2.8%）,流感病毒A型（IVA）66例（3.0%）,流感病毒B型（IVB）12例（0.5%）,副流感病毒1型（PIV1）38例（1.7%）,副流感病毒2型（PIV2）7例（0.3%）,副流感病毒3型（PIV3）275例（12.4%）;②病毒检出率在小于3个月和小于6个月年龄组较高,分别为53.6% 和49.2%;③冬季病毒检出率最高。结论：2007～2008年温州地区急性呼吸道感染的病毒仍以RSV为主要病原体, ＜6个月的婴幼儿病毒感染率较高,好发于冬季。［中国当代儿科杂志,2010,12（1）：32-34］     

重庆地区急性呼吸道感染患儿鼻咽吸取物标本中人偏肺病毒的分离研究

目的分离新近发现的儿童呼吸道病毒病原——人偏肺病毒（hMPV）,并分析其感染的临床表现。方法选取重庆医科大学儿童医院2004年12月至2005年7月因呼吸道感染住院的患儿,无菌采集鼻咽吸取物。离心后细胞沉淀用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A／B、副流感病毒1、2、3型等常见呼吸道病毒病原。上清接种于Veto-E6和LLC-MK2细胞,进行hMPV分离,出现细胞病变者,扩增hMPV N、F基因,F基因扩增产物序列递交GenBank。收集并分析hMPV感染患儿的临床资料。结果收集的86份鼻咽吸取物中,有6份接种Veto-E6和LLC-MK2细胞后出现细胞病变,且用RT-PCR成功扩增出hMPV N、F基因片段,证实hMPV分离成功。在6例阳性标本中,2例收集于冬季,2例春季,2例夏季。6位患儿年龄都小于2岁,诊断为支气管肺炎（2／6）、毛细支气管炎（2／6）、婴幼儿哮喘（1／6）和上呼吸道感染（1／6）。副流感病毒3和腺病毒可为协同感染病毒病原。结论首次在中国内地成功分离获得6株hMPV,从活病毒水平证实hMPV是导致中国儿童下呼吸道感染的病毒病原,hMPV感染的临床表现与呼吸道合胞病毒感染相似。采用病毒分离技术,hMPV在呼吸道感染患儿中的检出率约为7％（6／86）。     

东莞市镇区小儿呼吸道人类偏肺病毒感染临床与分子流行病学特征

目的 了解东莞市镇区小儿呼吸道人类偏肺病毒(hMPV)感染的临床与分子流行病学特征.方法 收集2007年2-10月东莞市石碣医院儿科门诊及病房7岁以下呼吸道感染患儿呼吸道分泌物标本340例,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hMPV F基因,应用多霞PCR检测呼吸道合胞病毒A、B型(RSV A、B型).流感病毒甲、乙型(Flu-A、B型),副流感病毒l、2、3型(PIV1、2、3型).并随机挑选4例hMPV阳性者PeR产物行基因测序分析.结果 340份标本中hMPV阳性者32份(9.41%),其中在阳性标本中5例并RSV感染,2例并PIV 3型、2例并Flu-B型.2-4月份检出阳性率高于5-10月份.32例hMPV感染阳性患儿平均年龄5.97个月,临床表现以发热、咳嗽、喘息为主,hMPV感染患儿临床表现与其他常见呼吸道病毒感染者无显著性差异(P>0.05).32例hMPV阳性患儿诊断下呼吸道感染30例,占阳性标本的93.75%,急性上呼吸道感染2例(6.25%).4例PCR产物基因测序分析与GenBank序列同源性87%～99%.hMPV PCR产物基因序列进化数分析显示其属于2个不同的基因型,其中A基因型3例,B基因型1例.结论 hMPV是小儿呼吸道感染一种重要的病原体,小儿呼吸道hMPV感染发病率在2-4月份较高,其临床表现以咳嗽、发热、喘息为主.东莞地区小儿呼吸道感染中hMPV存在A、B 2个不同基因型,以A基因型较常见.实用儿科临床杂志,2009,24(10):741-744     

5岁以下儿童喘息性疾病与呼吸道合胞病毒、偏肺病毒、博卡病毒的相关临床分析

目的分析5岁以下喘息性疾病患儿与呼吸道合胞病毒(RSV)、人类偏肺病毒(hMPV)、人类博卡病毒(hBoV)感染的相关性。方法回顾性分析2010年1月至2013年1月因喘息住院且咽拭子病毒PCR检测阳性的5岁以下儿童共627例的病毒检测结果及临床资料。结果检测出RSV、hMPV、hBoV阳性者共286例,其中RSV 173例(27.59%),hMPV 70例(11.16%),hBoV 43例(6.86%)。5岁以下喘息性疾病患儿RSV感染主要集中在冬春季节,hMPV主要在春季流行,hBoV主要在夏季流行。不同年龄段组、临床诊断组以及喘息严重程度之间病毒检出分布的差异均有统计学意义(P0.001)。RSV在6个月、毛细支气管炎以及中度喘息的患儿中检出率最高;hMPV多见于1~3岁、喘息性支气管肺炎及轻中度喘息的患儿;而hBoV的检出率与年龄、疾病临床诊断和喘息严重程度无明显关联。结论 RSV是诱发婴儿早期喘息及毛细支气管炎的最常见病毒,而hMPV和hBoV也是诱发儿童喘息的重要病毒。     

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目的分析急性呼吸道感染住院患儿的病原学特点。方法对2005年10月至2009年9月苏州大学附属儿童医院呼吸科8172例急性呼吸道感染住院患儿,采用无菌负压吸引法采集其新鲜痰液,分别用直接免疫荧光法、RT-PCR检测7种常见病毒抗原和人类偏肺病毒基因(6599例),细菌培养检测细菌(6404例),ELISA法检测血清肺炎支原体(7842例),检出的阳性病例入选,分析其病例资料。结果 8172例标本中检出1种或1种以上病原4756例(58.2%),6404例细菌检测标本中阳性1883例(29.4%),6599例病毒检测标本中阳性1886例(28.2%),7842例肺炎支原体检测标本中阳性2630例(33.5%)。细菌病原中肺炎链球菌(10.8%)最多见。病毒中以呼吸道合胞病毒(15.8%)最常见。病原混合感染率为16.9%,以细菌及病毒混合感染为最常见。呼吸道合胞病毒冬季检出率最高,人类偏肺病毒冬春季、副流感病毒3夏季检出率较高,流感病毒A夏季检出率较低,肺炎支原体检出率夏秋季较高,冬春季较低;副流感病毒1,2季节差异不明显。结论肺炎支原体是本地区儿童急性呼吸道感染最常见的病原,病毒次之,细菌是混合感染的常见病原。细菌和病毒感染多见于1岁以下婴儿,而支原体感染多见于3岁以上儿童。各病原的流行季节各异。     

Frequent detection of viral coinfection in children hospitalized with acute respiratory tract infection using a real-time polymerase chain reaction

BACKGROUND: Respiratory viruses are the main cause of acute respiratory tract infection (ARI) in children. Real-time polymerase chain reaction (PCR) technology is highly practicable for the rapid detection of viral pathogens. The simultaneous detection of a broad spectrum of viruses enables the diagnosis and evaluation of viral coinfection in ARI. METHODS: A 1-step real-time PCR was developed for the detection of 12 respiratory viruses (10 RNA and 2 DNA viruses) in clinical samples. Clinical samples from 254 children admitted to the Departments of Pediatrics with ARI during a 10-month period were tested. RESULTS: Respiratory syncytial virus (RSV) was the most frequently detected pathogen in 112 samples (44.1%), followed by human bocavirus (hBoV) in 49 (19.3%), and rhinovirus in 17 samples (6.7%). Viral coinfection was detected in 41 (16.1%) samples with RSV and hBoV being the most dominating combination (27 cases, 10.6%). Viral coinfection was found in 10 cases (17%) of children with bronchitis (n = 58) and in 7 cases (23%) of bronchiolitis (n = 30). In patients with pneumonia (n = 51), 17 cases (33%) were positive for 2 or more viral pathogens. CONCLUSIONS: Simultaneous testing of respiratory viruses by real-time PCR is a suitable tool for the detection of viral coinfections. In children hospitalized because of respiratory infection viral coinfection is frequently detected with RSV and hBoV being a common combination.     

5150例急性下呼吸道感染儿童呼吸道病毒检测结果分析

目的 了解急性下呼吸道感染(ALRTI)住院患儿咽拭子呼吸道病毒的分布情况。方法 采用直接免疫荧光法,对该院2014 年3 月至2015 年2 月5 150 例ALRTI 住院患儿咽拭子标本进行流感病毒A 型(FA)、流感病毒B 型(FB)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒1、2、3 型(PIV-1、2、3)检测,了解ALRTI 患儿中呼吸道病毒的分布情况。结果 5 150 例住院患儿的咽拭子样本中病毒检测阳性2 155 例(41.84%),其中RSV、 PIV-3 、FA 是检出率最高的前3 位病毒,分别为1 338 例(25.98%)、439 例(8.52%)、166 例(3.22%),并有29 例为2 种病毒混合感染。随年龄增加病毒检出率呈下降趋势(χ²=279.623,P<0.01)。RSV 检测阳性率自9 月开始呈增高趋势,11 月最高,达60.09%,6 月最低,仅为1.51%。PIV-3 检测阳性率5 月最高(21.38%),11 月最低(1.77%)。结论 ALRTI 患儿的病毒流行分布随年龄、季节而不同,秋冬季以RSV 流行为主,春夏季以PIV-3 流行为主。RSV 是ALRTI 住院儿童的最常见病毒。     

1165例急性下呼吸道感染住院儿童的病毒病原学分析

目的：了解长沙地区急性下呼吸道感染(ALRTI) 住院儿童中常见呼吸道病毒的流行特点,为本地区儿童ALRTI的防治提供依据。方法：收集2007年9月至2008年8月诊断为ALRTI的住院患儿鼻咽抽吸物标本1165份,采用RT-PCR方法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A(IFVA)、流感病毒B(IFVB)、副流感病毒1~3(PIV1~3)、偏肺病毒(hMPV)、冠状病毒NL63(HCoV-NL63)及冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1);PCR方法检测腺病毒(ADV)、博卡病毒(HBoV);巢式PCR方法检测多瘤病毒WU(WUPyV）和多瘤病毒KI(KIPyV)。并对阳性标本进行基因测序以证实。结果：1165份标本中有871份检出了病毒,总检出率74.76%,其中RSV最为常见,检出率为27.03%,其次为HRV（17.33%）、PIV3（13.73%）及新发现病毒HBoV(8.67%)和hMPV(6.52%)。病毒总检出率在男女之间差异无统计学意义,但男性PIV3、hMPV和HBoV的阳性检出率高于女性。病毒阳性检出率在各年龄组之间差异有统计学意义（χ2=10.934,P=0.027）,以6个月至1岁以内年龄组检出率最高。病毒总检出率在四季分布差异有统计学意义（χ2=12.307,P=0.006）,以冬季检出率最高。结论：病毒病原在长沙地区儿童ALRTI中占重要地位,其中RSV、HRV及PIV3是主要病毒病原,近年新发现的HBoV和hMPV也占较高比例;病毒检出率以6个月至1岁以内年龄组最高;冬季病毒总检出率高于其他季节。     

6岁以下儿童急性下呼吸道感染的病毒病原及临床研究

目的　了解北京地区 6岁以下儿童中急性下呼吸道感染 (ALRI)患儿的病毒感染状况 ;探讨人类偏肺病毒 (hMPV)感染在儿童ALRI中的作用及所致支气管肺炎的临床特征。方法　 (1)采集 2 0 0 1年 2月至 2 0 0 3年 3月就诊于首都儿科研究所 4 4 6例年龄 1个月至 5岁的ALRI住院患儿的鼻咽分泌物 ,同时应用间接免疫荧光 (IFA)及病毒分离方法进行人类呼吸道合胞病毒 (hRSV)、流感病毒 (甲、乙型 )、副流感病毒 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )及腺病毒等 7种常见呼吸道病毒的病原检测。 (2 )采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月住我院内科的ALRI患儿中经 7种呼吸道常见病毒病原检测阴性的 2 16份鼻咽洗液 ,进行了hMPV基因检测 ,并分析hMPV感染患儿的临床资料。结果　 (1) 4 4 6例患儿中 7种常见呼吸道病毒总阳性例数为 2 0 9例 (46 86 % ) ,hRSV阳性者最多为 16 3例 (36 5 5 % )。 (2 )在 2 16份上述 7种呼吸道病原检测阴性的标本中 6 9份测到hMPV阳性扩增产物 (31 9% ) ,占同期送检标本的 19 17%。结论　 (1)hRSV是北京地区冬春季节婴幼儿ALRI的主要病原。 (2 )2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月我院ALRI住院患儿中有 19 17%与hMPV感染有关     

重庆地区婴幼儿重症肺炎呼吸道病毒病原分析

目的 了解重庆地区婴幼儿重症肺炎病毒病原的感染情况.方法 2006年12月至2008年3月,取ICU病房收集诊断为重症肺炎患儿的深部气道或机械通气气管导管内吸取物标本119例,采用RT-PCR或PCR方法 检测呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(hMPV)、博卡病毒(HBoV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)1、2、3和流感病毒(IV)A、B等呼吸道病毒病原.结果 119例标本中病毒总检出例数为86例(72.3%),其中RSV检出率最高,为41.2%(49/119).有2种及以上病毒协同感染23例,占26.7%(23/86);RSV阳性中有19例存在协同感染,占38.8%(19/49).69例行细菌检测,其中53例为阳性,阳性率为76.8%.这69例标本中,病毒阳性率为76.8%;病毒细菌双阳性为41例,占59.4%.结论 (1)病毒感染仍是重庆地区婴幼儿重症肺炎的重要病因.(2)BSV是婴幼儿重症肺炎最常见病毒病原,其次为ADV和hMPV.(3)病毒的协同感染较在重症呼吸道患儿中可能较为普遍,但尚无证据说明病毒协同感染可加重病情.