钙调神经磷酸酶与脑缺血

钙调神经磷酸酶参与细胞内Ca^2 超载引发的一系列反应，调控缺血后脑内蛋白质的磷酸化状态，对缺血性脑损伤具有双重作用。文章就钙调神经磷酸酶的分布、酶学特征、生物学功能以及在脑缺血中的作用进行了综述。     

钙调神经磷酸酶与心房颤动

钙调神经磷酸酶是受Ca2+/钙调素调节的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(又称蛋白磷酸酶2B,PP2B),是一种广泛分布的、参与多种细胞功能调节的多功能信号酶。近年来被应用于心房颤动的研究,本文就钙调神经磷酸酶在心房颤动研究中的现状作一简要综述。     

钙调神经磷酸酶与心房颤动

钙调神经磷酸酶是受Ca^2＋／钙调素调节的丝／苏氨酸蛋白磷酸酶（又称蛋白磷酸酶2B,PP2B）,是一种广泛分布的、参与多种细胞功能调节的多功能信号酶。近年来被应用于心房颤动的研究,本文就钙调神经磷酸酶在心房颤动研究中的现状作一简要综述。     

钙调神经磷酸酶与心肌重构

心肌重构是心肌对多种刺激因素所产生的适应性变化。在重构过程中,心肌细胞内发生一系列信号转导方面的改变,钙调弗经磷酸酶介导的信号转导是胞外信号传递至核内的关键环节,现将阐述钙调神经磷酸酶在细胞重构、组织重构、电重构、功能重构方面的作用,及钙调神经磷酸酶的几种抑制剂,并介绍钙调神经磷酸酶通路与其他信号转导通路间联系。     

糖尿病大鼠脑组织钙调神经磷酸酶研究

近些年通过流行病学研究，发现糖尿病是Alzheimer病（AD，又称老年性痴呆）的危险因素［‘-’j，Otta等［’j发现年龄为55～99岁的6330例痴呆患者中有742例是糖尿病病人（11．4％）；Sinclair等［“也证实在糖尿病病人中痴呆患病率显著升高（尸＜0．01），且认知功能明显障碍，     

钙调神经磷酸酶信号通路与心肌重构

心肌重构是心脏对缺氧或压力负荷过重的一种适应性反应。心肌细胞适应不良性肥大和心肌细胞坏死或凋亡是心肌重构的基础改变因素。已知细胞内钙超载与心肌重构有关 ,但对其作用机制还不清楚。最近研究表明 ,由Ca2 + 活化的钙调神经磷酸酶 (CaN)在心肌重构的信号传导中起重要作用 ,其可能是Ca2 + 信号导致肥大基因活化的偶联环节。同时 ,CaN通过影响其他信号通路对细胞凋亡有调节作用 ,但对其作用机制还不清楚。应用抑制CaN活性的药物CsA及FK5 0 6可以阻滞心肌肥大的发生发展 ,提示Ca2 + CaN依赖的信号传递通路可能是介导心肌重构的一条新的、重要的通路     

钙调神经磷酸酶信号通路在心肌肥厚中的作用

心肌肥厚是许多心血管病的病理结果,可引起心力衰竭,增加猝死发生率。因此,探讨心肌肥厚发生机制,寻求延缓和治疗心肌肥厚的新途径,早已引起人们的重视。近年来,研究发现钙调神经磷酸酶(Ca2 /钙调素调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶)可通过多种信号通路参与心肌肥厚的形成。现综述钙调神经磷酸酶信号通路在心肌肥厚发展中的作用。     

钙调神经磷酸酶与心肌肥厚的研究现状

心肌肥厚是临床上高血压、心肌梗死等心血管疾病共有的病理过程。初期有一定的代偿作用,晚期可以导致心律失常、猝死、心力衰竭。研究表明〔1〕:心肌肥厚的启动和发展与多条细胞信息通道有关,如钙调神经磷酸酶系统(CaN)、蛋白激酶C(PKC)系统、Wnt信号通路、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)系统、mir-RNA133和磷脂酰肌醇3(PI3K)介导的信号系统等。     

钙调神经磷酸酶在人类心肌中的表达与分布

目的 了解钙调神经磷酸酶(CaN)在人类健康心肌和衰竭心肌中的表达与分布.方法 以12例行移植手术的终末期衰竭心脏和5例因车祸丧生的"健康供体"心脏为研究对象,分别利用免疫组化和Western blot技术对左、右心室中CaN的表达与分布进行研究.结果 CaN在心脏的心肌细胞、纤维母细胞、心外膜间皮细胞中染色阳性,且Western blot实验在后两种细胞中均检测到单一的58 000带,心肌内血管内皮细胞和平滑肌细胞中CaN染色阴性.与"供体"心肌比较,无论左心室还是右心室,衰竭心肌的CaN蛋白水平差异均无统计学意义(衰竭右心室和供体右心室电泳带强度分别为130.20±8.66和139.87±6.21,P=0.33.衰竭左心室和供体左心室电泳带强度分别为106.45和126.34±12.09),且左右心室肌CaN蛋白水平差异也无统计学意义(衰竭心肌左、右心室电泳带强度分别为96.99±10.67和104.58±13.18,P=0.63.供体心肌左、右心室电泳带强度分别为132.12和120.74).结论 CaN存在于人类心脏多数类型细胞中,包括心肌细胞、纤维母细胞和心外膜间皮细胞.心力衰竭时,CaN蛋白水平没有改变.     

钙调神经磷酸酶信号通路与心肌细胞肥大

目的　探讨不同来源的细胞内Ca2 ([Ca2 ]i)在钙调神经磷酸酶 (CaN) 活化T细胞核因子 3 (NFAT3 )介导的心肌肥大中的作用。方法　分别用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )或雷尼丁刺激培养的大鼠心肌细胞外Ca2 跨膜内流或细胞内Ca2 释放 ,检测CaN、NFAT3、锌指转录因子 (GATA4)蛋白量、NFAT3定位以及氚 亮氨酸 (3H Leu)掺入量 ,环孢素A作为CaN特异抑制剂。结果　AngⅡ、雷尼丁刺激 1、3d ,心肌细胞CaN、NFAT3、GATA4蛋白表达及3H Leu掺入量较对照组明显增高(P值 <0 0 5或 <0 0 1)。AngⅡ和雷尼丁刺激第 1天 ,心肌细胞NFAT3表达由胞质转入胞核表达为主。环孢素A可抑制上述作用 ,与刺激组相比差异有显著性 (P <0 0 5或 <0 0 1)。结论　刺激心肌细胞Ca2 内流及Ca2 释放 ,均可激活CaN NFAT3信号通路。CaN NFAT3信号通路的激活与[Ca2 ]i增加有关 ,而与 [Ca2 ]i的来源无关。环孢素A能够抑制AngⅡ和雷尼丁介导的CaN NFAT 3 GATA 4表达的增加和蛋白质合成     

醛固酮调控大鼠心肌钙调神经磷酸酶抑制因子的机制

目的:通过皮下注射醛固酮（A ld）,诱导大鼠心肌肥厚反应发生,采用蛋白印记杂交的方法,观察心肌组织钙调神经磷酸酶（CaN）抑制因子（Cain）表达的变化。方法:健康雄性W istar大鼠,随机分为3组（n=7）,①正常对照组;②心肌肥厚组:皮下注射A ld 18μg.d-1,连续14 d;③螺内酯组:皮下注射A ld 18μg.d-1,同时给予螺内酯20mg.kg-1.d-1灌胃,亦连续14 d。采用大鼠尾动脉法测量平均动脉压,称重后抽血处死,分别计算左心室质量（LVW）及全心质量（HW）与体质量（BW）的比值。通过放免方法测定血浆A ld含量,运用蛋白印记杂交的方法,测定Cain表达的变化。结果:心肌肥厚组与正常对照组比较,BP显著升高,LVW/BW及HW/BW比值显著增加,血浆A ld增加,CaN活性增加,Cain的表达显著增加;而螺内酯组与心肌肥厚组比较,LVW/BW及HW/BW比值下降,血浆A ld增加,CaN活性减低,Cain的表达显著减少,而BP无明显变化。结论:外源性醛固酮可通过CaN依赖的信号转导通路诱导心肌肥厚反应的发生。同时,机体内源性Cain的表达的变化,受到CaN信号转导系统调控。     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节.方法24只Wistar大鼠随机分为2组实验组和对照组.实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水.测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET-1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβ mRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达.结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANF mRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P＜0.05)的表达.结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大.螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大.     

非甾体抗炎药对脑缺血再灌注时大脑脑组织钙调神经磷酸酶与环氧化酶表达的影响

目的观察大鼠脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)24 h和72 h脑组织钙调神经磷酸酶(Ca N)、环氧化酶(COX)-1和COX-2的分布及非甾体抗炎药阿司匹林和罗非昔布的影响。方法雄性SD大鼠,线栓法制作右侧局部大脑中动脉缺血2 h、再灌注24 h或72 h模型。分为假手术组、溶媒组、阿司匹林(50 mg/kg)组和罗非昔布2 mg/kg组。TTC染色法观察脑损伤面积;免疫组化法测定Ca N、COX-1和COX-2表达,高倍视野(×400)计数阳性细胞表达数目。结果 1与CI/RI 24 h相比,CI/RI 72 h脑损伤面积减小,阿司匹林和罗非昔布均有明显的保护作用。2Ca N表达:CI/RI24 h和72 h,Ca N表达减少;阿司匹林明显提高两个时间点的表达,而罗非昔布没有明显效果。3COX-1表达:CI/RI 24 h和72 h,COX-1表达没有明显变化,阿司匹林和罗非昔布对其没有明显影响。4COX-2表达:CI/RI 24 h和72 h,COX-2表达明显增强,阿司匹林和罗非昔布明显降低其表达,2组间无显著差异。结论脑缺血/再灌注时Ca N、COX-1和COX-2在脑组织的阳性表达无明显一致性;Ca N可能是阿司匹林神经保护作用的新靶点。     

钙调神经磷酸酶在支气管哮喘大鼠气道重塑中的作用

目的 通过测定支气管哮喘(简称哮喘)大鼠肺组织中钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)蛋白、Mrna的表达及CaN的活性,探讨CaN在哮喘大鼠气道重塑中的作用.方法 将20只Wistar大鼠随机分为哮喘组和对照组,每组10只.鸡卵清白蛋白溶液致敏及激发复制大鼠哮喘模型.HE染色观察气道炎症情况;图像分析观察支气管管壁厚度;实时定量(Real-time)PCR测定肺组织中CaN Mrna水平;免疫组织化学法检测肺组织中CaN蛋白的相对表达量;生物化学法检测大鼠肺组织CaN活性;流式细胞仪测定外周血单个核细胞细胞周期时相分布;ELISA法测定血浆中白介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 ①哮喘组大鼠支气管管壁厚度较对照组明显增加(P＜0.01);②哮喘组大鼠肺组织中CaNmRNA水平的相对表达量、CaN蛋白的相对表达量及CaN的活性均较对照组高(分别P＜0.05、P＜0.01和P＜0.01);③哮喘组大鼠血浆中IL-4和TNF-α含量较对照组明显增加(分别P＜0.01,P＜0.05);④与对照组相比,哮喘组大鼠外周血单个核细胞处于G0/G1期的百分率降低,处于S期、S+G2/M期百分率增加(P值均＜0.01);⑤大鼠肺组织CaN活性分别与大鼠支气管管壁厚度呈正相关(P＜0.01),与处于S期、S+G2/M期的外周血单个核细胞百分率呈正相关(P值均＜0.05),与血浆中IL-4的含量呈正相关(P＜0.05);血浆中IL-4含量与TNF-α含量及大鼠支气管管壁厚度亦呈正相关(P值均＜0.05).结论 哮喘大鼠肺组织CaN的活性增加,其可能通过促进外周血单个核细胞的分裂、增殖及活化产生IL-4和TNF-α而参与哮喘气道重塑的形成.     

钙调神经磷酸酶活性测定

钙调神经磷酸酶是一种钙离子敏感的蛋白磷酸酶 ,广泛分布于包括心脏在内的全身组织中 ,参与多种生物功能的调节。本文对四种钙调神经磷酸酶活性测定法的原理、操作要点及其特点进行简要综述。     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节。方法24只Wistar大鼠随机分为2组:实验组和对照组。实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水。测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβmRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达。结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANFmRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P<0.05)的表达。结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大。螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大。     

钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在致心肌肥大中的作用

心肌细胞内持续的Ca2 平台激活钙调神经磷酸酶（CaN)，使活化T细胞核因子c(NF-ATc)去磷酸化并进入胞核，去磷酸化的NF－ATc再与锌指转录因子（GATA4）等相互作用，活化多种心肌肥厚的相关基因导致心肌肥厚，免疫抑制剂环胞素A（CsA),FK506等可抑制CaN活性，消除心肌肥厚而改善心衰。     

钙蛋白酶-2和钙调神经磷酸酶蛋白表达与老年瓣膜病患者心房颤动发生的关系

目的探讨钙蛋白酶-2和钙调神经磷酸酶蛋白表达与老年瓣膜病患者心房颤动发生的关系。方法选取因瓣膜病接受瓣膜置换术的老年患者46例,收集术前临床资料,根据心律情况分为窦性心律组(20例)、房颤组(26例)。以外科换瓣手术取下的右心耳肌组织为研究标本,蛋白印迹法检测钙蛋白酶-2、钙调神经磷酸酶蛋白表达水平。结果房颤组患者心率、服用地高辛比例均明显高于窦性心律组(P0.05);超声心动图检查结果显示,房颤组患者左心房内径厚度明显大于窦性心律组(P0.05)。房颤组患者心肌组织中钙蛋白酶-2表达水平明显高于窦性心律组(P0.05),钙调神经磷酸酶脂蛋白催化亚基的全长分子(分子质量60 000)和不含自抑区的活性分子片段(分子质量45 000)表达水平明显高于窦性心律组(P0.05)。结论钙蛋白酶-2-钙调神经磷酸酶信号通路参与老年瓣膜性房颤的发生。     

钙调神经磷酸酶在心血管系统中的作用

钙调神经磷酸酶是一种受Ca^2-钙调素调节的丝氨酸—苏氨酸蛋白磷酸酶，在体内分布广泛，作为Ca^2 信号下游效应分子，起去磷酸化作用，参与多种细胞功能的调节。尤其是新近研究表明，钙调神经磷酸酶可参与心血管正常结构和功能的维持、血管平滑肌细胞增殖、心肌肥大和内皮细胞功能的调节，在心血管生理及病理生理过程中均发挥重要作用。     

钙调神经磷酸酶在高血压心肌肥厚发展中的作用

目的 探讨钙调神经磷酸酶（CaN）在肾血管性高血压心肌肥厚发展中的作用,以及CaN抑制剂环孢菌素A（CsA）对心肌肥厚的影响。方法 39只大鼠（造模组）采用两肾一夹法行肾血管性高血压大鼠心肌肥厚造模,2个月时处死15只（造模Ⅰ组）;余24只中,13只予生理盐水腹腔注射（造模Ⅱ组）,11只行CsA腹腔注射（造模Ⅲ组）1个月后处死。另设22只大鼠为对照组,除不放置银夹外,其他处理与造模组相同,分别于2个月（对照Ⅰ组）、3个月（对照Ⅱ组）各处死11只。观察各组大鼠心肌肥厚程度、CaNmRNA和蛋白质表达及CaN活性的改变。结果左室重量（LVW）及与胫骨长度的比值（LVW／TL）,光镜下心肌细胞横截面积（Atea）,心肌CaN mRNA和蛋白质表达及其活性在造模Ⅰ组、Ⅱ组均较对照Ⅰ组、Ⅱ组增高（P均〈0．05）,造模Ⅲ组较造模Ⅰ组、Ⅱ组均显著下降（P均〈0．05）。结论 CaN参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚发展;抑制CaN活性可逆转心肌肥厚。