芍药苷神经保护作用的实验研究

目的观察芍药苷(PF)的神经保护作用,为阿尔茨海默病(AD)的防治提供理论依据。方法体外培养PC12细胞,用Aβ1-40诱导α7nAChR缺失,建立AD早期细胞模型;用不同浓度(50、100和200μM)的芍药苷预处理,光镜观察细胞形态,MTT比色法测定细胞活性,MTB比色法测定细胞内Ca2+含量,免疫细胞化学法观察α7nAChR的表达情况。结果芍药苷预处理组细胞活性、α7nAChR平均灰度值(AVG)均随芍药苷浓度的增加而增加,且Aβ1-40+PF100μM组和Aβ1-40+PF200μM组增加明显(P<0.05);芍药苷预处理组细胞内Ca2+含量均降低(P<0.05)。结论芍药苷抑制细胞内Ca2+超载和Aβ1-4040的神经毒性作用,改善PC12细胞的活性,保护α7nAChR,是其防治AD的重要机制。     

六昧地黄汤含药脑脊液对aL7nAChR保护作用的实验研究

目的 探讨六味地黄汤含药脑脊液对Aβ1-40诱导的a7nAChR缺失的保护作用，为六味地黄汤防治AD提供实验依据。方法 观察细胞形态，以MTT法测定细胞活性、免疫细胞化学法测定a7nAChR的表达量。结果 六味地黄汤含药脑脊液1天20％＋1μM Aβ1-40组和10天20％＋1μM Aβ1-40组能改善细胞生长状况，明显上调PCI2细胞活性（P〈0．05，P〈0．01），增加a7nAChR的表达（P〈0．05，P〈0．01），但给药1天和10天其结果无显著性差异（P〉0．05）。结论 六味地黄汤含药脑脊液能抑制Aβ1-40的神经毒性作用，保护a7nAChR。     

六味地黄汤含药脑脊液对α7nAChR保护作用的实验研究

目的探讨六味地黄汤含药脑脊液对Aβ1-40诱导的α7nAChR缺失的保护作用,为六味地黄汤防治AD提供实验依据。方法观察细胞形态,以MTT法测定细胞活性、免疫细胞化学法测定α7nAChR的表达量。结果六味地黄汤含药脑脊液1天20% 1μMAβ1-40组和10天20% 1μMAβ1-40组能改善细胞生长状况,明显上调PC12细胞活性(P<0.05,P<0.01),增加α7nAChR的表达(P<0.05,P<0.01),但给药1天和10天其结果无显著性差异(P>0.05)。结论六味地黄汤含药脑脊液能抑制Aβ1-40的神经毒性作用,保护α7nAChR。     

RNA干扰抑制α3神经型尼古丁受体的表达对SH-SY5Y神经细胞抗氧化能力的影响

目的：探讨通过RNA干扰技术抑制α3神经型尼古丁受体（nAChR）基因表达后该受体对神经细胞抗氧化能力的影响,了解α3nAChR的神经保护作用。方法：设计并体外合成α3nAChR的特异性编码siRNA序列的寡核苷酸,退火后克隆至pSilencer 3.1-H1neo质粒中,构建重组质粒α3nAChR pSilencer3.1-H1neo。将α3nAChR pSilencer 3.1-H1neo转染SH-SY5Y细胞,用含G418的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用即时荧光定量PCR和Western blot方法检测转染细胞中α3nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化。用1μmol/Lβ-淀粉样肽1-42（Aβ1-42）处理转染细胞后,用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法测定细胞活力;用比色法测定其指质过氧化产物含量、超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果：成功构建α3nAChR siRNA表达质粒,转染后经G418筛选获得稳定转染重组质粒的细胞克隆株,与对照组相比,α3nAChR mRNA及蛋白表达量均降低（抑制率分别为98%和66%）;经转染处理的细胞活力明显低于对照组,细胞中脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加,超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性不同程度的降低;抑制α3nAChR基因表达后能增强Aβ的神经细胞毒性作用。结论：成功构建的α3nAChR siRNA表达质粒能特异性抑制α3nAChR基因表达,α3nAChR基因表达抑制后可引起氧化应激水平升高,并增加Aβ的神经毒性,表明α3nAChR具有一定的抗氧化能力和神经保护作用。     

烟碱对AD大鼠海马αnAChR的影响及意义

目的探讨烟碱对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠认知功能的作用及海马αnAChR的影响。方法采用海马部位注射建立Aβ25-35AD大鼠模型,用Morris水迷宫实验测定认知功能、免疫组化、Western blotting观察大鼠海马α7nAChR变化。结果烟碱AD组大鼠在Morris水迷宫试验中显示比对照组学习记忆能力增强。烟碱AD组海马α7nAChR蛋白含量及免疫阳性细胞数较AD组增加。结论烟碱可增加AD大鼠海马α7nAChR的表达,烟碱拮抗Aβ25-35的神经毒性作用与α7nAChR有关。     

α3、α7-nAChRs缺损AD模型的建立及茶多酚的干预

目的 建立β-Amyloidpepfides(Aβ)诱导α3、α7-烟碱型胆碱能受体nAChRs受体亚型缺失AD病理模型，探讨Aβ的毒性作用机理，并观察茶多酚(EGCG)的可能干预。方法 纳摩尔Aβ慢性处理PC12细胞建立ct3、唧亚单位缺失细胞模型。用MTT比色法、Annexin V-FITC、配体结合实验、Western Blot、RPA法深入探讨Aβ损伤α3、α7 nAChRs亚型的机制以及EGCG的保护作用。结果 用纳摩尔浓度Aβ1-40和Aβ25-35能明显降低PC12细胞[^125I]α—Bungarotoxin和[^3H]Epibatidine结合位点数量，α3、α7亚单位蛋白和mRNA水平，但不诱导凋亡，却明显抑制MTT。而预先加入10μM EGCG几乎完全抑制Aβ对[^3H]epibatidine和[^125I]α-BTX的结合力的影响，可显著抑制Aβ对α3、α7 nAChRs受体亚单位蛋白的损伤。结论 Aβ诱导nAChRs缺损神经细胞模型，是目前较理想研究AD的细胞模型；EGCG可干预Aβ对nAChRs的神经毒性作用。     

β淀粉样肽对神经母细胞瘤细胞Notch信号通路的影响

目的：研究β淀粉样肽（Aβ）处理SH-SY5Y细胞以及α3神经型尼古丁受体（α3nAChR）沉默细胞后细胞Notch信号通路的变化.方法：2μmol/L Aβ处理SH-SY5Y细胞以及α3nAChR沉默细胞,用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real Time PCR）和蛋白印迹（western blot）方法分别检测细胞中Notch信号通路中Notch1和Hes1的mRNA及蛋白水平的变化,评价Aβ对细胞Notch信号通路的影响.结果：Aβ处理的SH-SY5Y细胞以及α3 nAChR沉默细胞中Notch1和Hes1的mRNA及蛋白水平表达均增加,且在α3 nAChR沉默细胞中增加更为明显,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：Aβ可增加细胞Notch信号通路基因表达,αα3 nAChR沉默会增强Aβ对Notch信号通路基因表达的影响,这可能与阿尔茨海默氏病（AD）的发病有一定的关系.     

灯盏细辛活性部位对神经细胞α7尼古丁受体表达的影响

目的：研究灯盏细辛活性部位对SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体（nAChR）亚单位在蛋白质水平的表达以及对抗β-淀粉样蛋白的毒性作用。方法：灯盏细辛经乙醇提取、乙酸乙酯及正丁醇萃取、再以反相硅胶柱分离等方式得到极性部位,选取一定浓度的灯盏细辛提取物处理神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）后,用Western blotting方法测定α7 nAChR蛋白水平的变化;再将能明显上调α7 nAChR蛋白水平的灯盏细辛提取物预处理SH-SY5Y细胞后,加入Aβ25-35处理,用比色法测定MTT还原率,观察灯盏细辛活性部位对细胞毒性的影响。结果：灯盏细辛醇提乙酸乙酯及正丁醇部位、以及该部位经反相硅胶柱分离的低极性部位均能显著上调α7 nAChR蛋白水平,并减弱β-淀粉样蛋白引起的细胞损伤。结论：灯盏细辛活性部位具有一定的神经保护作用,其机制之一可能与上调α7 nAChR有关。     

当归芍药散对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察当归芍药散(Danggui Shaoyao San，DSS)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PCI2细胞损伤的保护作用。方法：制备含DSS脑脊液(CSF-DSS)与含DSS人工脑脊液(ACSF-DSS)，应用Aβ25-35诱导PC12细胞损伤，MTT法测定细胞活力和比色法测定细胞内过氧化氢酶(CAT)活性。结果：10μmol／L Aβ25-35可显著降低PC12细胞活力及CAT活性：5mg／L ACSF-DSS和0．93g／kg-0．5％、1．86g／kg-1．0％CSF-DSS均可显著提高细胞活力与CAT活性。结论：DSS可能通过提高CAT活性而对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤起到保护作用。     

天参益智复方对β淀粉样蛋白引起的神经细胞中尼古丁受体表达降低及细胞毒性损害的拮抗作用

目的:探讨天参益智复方对β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)引起的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞尼古丁受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)亚单位在蛋白质和mRNA水平降低、细胞损伤及脂质过氧化的拮抗作用。方法:选取一定浓度的天参益智复方制剂预处理SH-SY5Y细胞后,再加入Aβ蛋白处理,比色法测定细胞甲基噻唑基四唑还原率,从细胞整体水平了解此复方制剂对细胞活性的影响。蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链法分别从蛋白质水平和mRNA水平测定nAChR亚单位α3、α7表达的变化。硫代巴比妥酸比色法测定脂质过氧化产物丙二醛的水平,以了解该复方制剂的抗氧化能力。结果:安全浓度的天参益智复方对α7的蛋白质表达水平有上调作用;能对抗Aβ引起的α3和α7 nAChR亚单位蛋白质水平降低及α7亚单位mRNA表达低下,但对α3亚单位mRNA水平无明显影响;能减弱Aβ引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高。结论:天参益智复方制剂能在蛋白质水平上调尼古丁受体α7亚单位,对抗Aβ引起的nAChR表达降低及神经毒性作用,在阿尔茨海默病的治疗中可能起到一定作用。     

芍药苷对TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化及PI3K/AKT通路的影响

目的 探讨芍药苷(paeoniflorin, PF)对转化生长因子-β1(trans-forming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK-2的纤维化作用及磷酸酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphoinositol 3 kinase and serine-threonine protein kinase, PI3K/AKT)信号通路的影响,并分析其可能的作用机制。方法 将HK-2细胞分为对照组、模型组(10μg·L^-1 TGF-β1)、PF低剂量组(20μMPF+10μg·L^-1TGF-β1)、PF高剂量组(80μM PF+10μg·L^-1 TGF-β1)。细胞毒性实验(cell counting kit-8,CCK-8)检测TGF-β1和PF对HK-2细胞活力的影响。蛋白免疫印迹(Western blot)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、上皮钙黏素(epithelial cadherin, E-cad)及通路相关蛋白...     

中药复方更年春含药血清及其主要单体对β淀粉样蛋白所致细胞损伤的保护作用

目的：观察中药复方更年春含药血清及其主要单体成分对β淀粉样蛋白（amyloid β—protein,Aβ）所致肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞损伤的保护作用。方法：采用Aβ25-35作用PC12细胞构建阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）细胞模型,相差显微镜观察细胞形态改变。运用中药血清药理学方法制备大鼠更年春含药血清,以四甲基偶氮唑盐法观察更年春含药血清及其主要单体芍药苷、黄连素、知母皂苷AⅢ、淫羊藿苷对体外培养的PC12细胞活力的影响及其拮抗Aβ损伤的作用,采用流式细胞仪观察更年春复方含药血清及复方主要单体对Aβ诱导的PC12细胞凋亡的影响。结果：PC12细胞在Aβ25-35作用后,有活力细胞数目减少,细胞间连接较松,胞浆较暗淡,细胞碎片较多,贴壁细胞欠透明,部分发生皱缩,胞浆中有较多颗粒。Aβ25-35剂量、时间依赖性地抑制PC12细胞的活力。更年春含药血清可以增强PC12细胞活力,不同浓度更年春含药血清培养细胞24、48、72h后,其增强PC12细胞活力均在20％浓度作用最强。更年春复方含药血清及复方主要单体之一的黄连素及主要单体混合液（包括芍药苷、黄连素、知母皂苷A-Ⅲ、淫羊藿苷）均有拮抗Aβ对PC12细胞损伤的作用,且均能抑制Aβ诱导的PC12细胞早期凋亡,其中更年春含药血清作用最强,中药单体混合液作用其次,而单体黄连素作用最弱。结论：更年春对AD细胞模型有保护作用,其含药血清作用强于主要中药单体及主要单体的混合液。     

氧化芍药苷对泡沫细胞胆固醇流出的影响

分析氧化芍药苷对THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响。方法THP-1 细胞加入160 nmol/L 佛波酯（PMA）24 h，再加入50 μg/ml 乙酰化低密度脂蛋白（ac-LDL）建立泡沫细胞模型，CCK-8 法测定氧化芍药苷的细胞毒性，同位素标记法测定各处理组泡沫细胞胆固醇流出率。共聚焦显微镜观察泡沫细胞内脂肪分化相关蛋白（ADFP）表达变化，Western blot分析泡沫细胞中ADFP、三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）和过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）蛋白表达变化。结果成功建立THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞模型。氧化芍药苷毒性分析表明，质量浓度在200.0μg/ml 以下无细胞毒性。150.0μg/ml 与200.0μg/ml氧化芍药苷处理泡沫细胞，胆固醇流出率分别为（10.317±0.508）%与（11.265±0.713）%，与apoA-1组相比，差异有统计学意义（p <0.05），均高于apoA-1 组。氧化芍药苷处理的泡沫细胞内ADFP 荧光明显减弱。Western blot分析泡沫细胞ADFP 表达量降低28%。氧化芍药苷处理组PPARα 表达量增加51%，ABCA1 表达量增加45%。结论实验表明氧化芍药苷可通过上调PPARα增加ABCA1 表达，进而促进泡沫细胞胆固醇流出。     

荔枝核皂苷对正常PC12细胞的毒性及其抑制Aβ细胞毒性的有效浓度测定

目的：测定荔枝核皂苷（LSS）对正常PC12细胞最大安全药物浓度,评价其体外细胞毒性,并测定其抑制Aβ25-35诱导PC12损伤的有效浓度。方法：CCK8法测定PC12细胞活性;6级毒性分类法评价荔枝核皂苷的细胞毒性;LOGIT法计算Aβ25-35抑制PC12细胞活性的半抑制浓度（IC50）。结果：15mg.L^-1及其以上浓度荔枝核皂苷组OD值与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,PC12细胞相对增殖百分率（RGR）〈75%,细胞毒性在2级以上;7.5mg.L^-1及其以下浓度荔枝核皂苷组OD值与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,RGR〉75%,细胞毒性在0～1级之间。Aβ25-35抑制PC12细胞活性的IC50为23.74μmol.L^-1;0.94～7.50mg.L^-1荔枝核皂苷预处理组OD值较Aβ25-35组明显升高（P〈0.05）,OD值依次为7.50mg.L^-1〉3.75 mg.L^-1〉1.88 mg.L^-1〉0.94 mg.L^-1 LSS预处理组。结论：小于或等于7.5mg.L^-1荔枝核皂苷对体外培养的PC12细胞无毒性,即LSS的最大安全浓度为7.5mg.L^-1;荔枝核皂苷抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的有效浓度为0.94～7.50mg.L^-1。在此终浓度范围内,研究荔枝核皂苷抑制Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的作用及机制安全可靠。     

α-细辛醚、β-细辛醚改善Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤及机制

目的：探究α-细辛醚、β-细辛醚对β淀粉样蛋白活性片段Aβ_25-35诱导的PC12细胞损伤模型的保护作用及相关作用机制。方法：采用Aβ_25-35诱导PC12细胞建立Aβ毒性损伤细胞模型。将PC12细胞分为空白对照组、模型对照组、α-细辛醚组（0.5、1.0、1.5?μg/mL）、β-细辛醚组（6.3、12.5、25.0?μg/mL）、血管活性肠肽（VIP）组,并设VIP拮抗剂对照。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验检测炎症因子白介素（IL）-1、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α,氧化因子诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、一氧化氮（NO）和凋亡因子caspase-3、p53水平;蛋白质印迹法检测细胞c-Jun氨基端激酶（JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）蛋白表达。结果：与模型对照组比较,α-细辛醚组、β-细辛醚组和VIP组细胞存活率增加,细胞凋亡率下降,凋亡因子caspase-3、p53和炎症因子IL-1、TNF-α水平下降,IL-10水平升高,氧化因子iNOS和NO水平下降,c-Jun氨基端激酶（JNK）、p38MAPK蛋白表达减少（均P<0.05）。VIP拮抗剂干预后,β-细辛醚组细胞存活率下降,细胞凋亡率增加,凋亡因子caspase-3、p53和炎症因子IL-1、TNF-α水平升高,IL-10水平下降,氧化因子iNOS和NO水平升高,JNK、p38MAPK蛋白表达增加（均P<0.05）;α-细辛醚组无显著变化（均P>0.05）。结论：α-细辛醚、β-细辛醚对Aβ_25-35诱导的PC12细胞损伤模型具有保护作用,β-细辛醚可通过促进VIP的分泌,调控JNK/MAPK通路从而抑制炎症因子、氧化因子水平,改善PC12细胞凋亡;α-细辛醚作用机制与VIP分泌水平无明显联系。     

二苯乙烯苷对抗MPP^＋诱导的PC12细胞凋亡的作用

目的：探讨不同浓度的二苯乙烯苷（TSG）对1-甲基-4苯基吡啶离子（MPP＋）诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法：MTT比色试验检测细胞活性; Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态; 流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡比例; TUNEL酶标记法检测凋亡细胞断裂的DNA片段.结果：1,5,10μmol/LTSG对MPP＋诱导的PC12细胞损伤具有一定的保护作用.与MPP＋组相比,1,5,10μmol/LTSG预处理组细胞活力分别上升为（57.8±1.2）%（P〈0.05）,（74.3±2.7）%（P〈0.05）,（86.8±2.0）%（P〈0.05）.Hoechest33258染色发现MPP＋组较多胞核出现固缩凝集,而TSG处理组预处理组则分别减少为（31.6±2.3）%,（22.4±1.8）%,（13.4±1.1）%（P〈0.05）.FCM检测也提示TSG预处理可降低细胞凋亡百分率.TUNEL染色显示MPP＋组TUNEL阳性细胞（35.3±1.2）%增加,而TSG预处理组TUNEL阳性细胞显著降低为（25.3±1.2）%,（17.3±0.9）%,（11.7±0.9）%.结论：TSG可减轻MPP＋诱导的PC12细胞损伤和凋亡.     

仙茅苷对H2O2氧化损伤心肌细胞的保护作用

目的探讨仙茅苷对H2O2氧化损伤心肌细胞的保护作用及机制。方法体外培养大鼠原代心肌细胞,将其分为空白对照组、DMSO溶剂对照组（0.1%）、H2O2氧化损伤组（200μmol/L）、槲皮素干预组（槲皮素30μmol/L＋H2O2200μmol/L）、低浓度仙茅苷干预组（仙茅苷0.5μmol/L＋H2O2200μmol/L）、中浓度仙茅苷干预组（仙茅苷5μmol/L＋H2O2μmol/L）、高浓度仙茅苷干预组（仙茅苷50μmol/L＋H2O2200μmol/L）。用H2O2氧化损伤经槲皮素及不同浓度仙茅苷预培养24 h的心肌细胞,18 h后测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放量、心肌细胞内丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）含量,并测定心肌细胞的凋亡率和生长抑制率。结果 H2O2氧化损伤后LDH、MDA含量明显升高,GSH-px活性明显下降,细胞抑制率和凋亡率均增加（P〈0.01）;而经槲皮素、不同浓度的仙茅苷预处理组的心肌细胞,LDH、M DA含量明显下降,GSH-px活性明显升高,细胞生长抑制率和凋亡率均降低（P〈0.01）;且仙茅苷对心肌细胞氧化损伤的保护作用呈浓度依赖性。结论仙茅苷预处理心肌细胞可保护H2O2所诱导的氧化损伤,其作用可能与抑制脂质过氧化、增加抗氧化酶活性、减少心肌细胞凋亡有关。     

MCI-186对Aβ25-35诱导PC12细胞晚期糖基化终产物的影响

目的：研究MCI-186对淀粉样β蛋白25-35（Aβ25-35）诱导PC12细胞晚期糖基化终产物（AGEs）的影响。方法：实验对象共分3组：正常对照组、MCI-186处理组（20μmol/LMCI-186,30μmol/LAβ25-35）和Aβ25-35干预组（30μmol/LAβ25-35）。采用MTT法测定细胞生存率,ELISA法测定AGEs含量。结果：与正常对照组相比,MCI-186预处理组细胞生存率和AGEs含量没有差异（P〉0.05）。与Aβ25-35干预组相比,MCI-186预处理组细胞生存率和AGEs含量减低（P〈0.001,P〈0.01）。结论：MCI-186能够减少Aβ25-35对PC12细胞内晚期糖基化终产物的生成,发挥神经保护作用。     

RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞α7神经型尼古丁受体基因的表达

目的:利用小分子干扰RNA(RNAi)技术抑制神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中α7 神经型尼古丁受体(nAChR)基因的表达,并研究α7 nAChR基因表达受抑制后对细胞存活率及脂质过氧化水平的影响.方法:设计并通过分子生物学方法合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA(siRNA),转染SH-SY5Y细胞,培养48 h后收集细胞,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和西印迹方法(Western-blotting)检测转染细胞中α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化,并用1 μmol/L β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)处理siRNA转染细胞,比色法测定脂质过氧化产物含量.四氮基偶氮唑蓝(MTT)方法测定细胞活力.结果:转染siRNA后,与对照组相比,实验组α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低,抑制率分别为52%和36%,脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加,MTT法表明实验组细胞活力明显低于对照组,且能增强Aβ的细胞毒性作用.结论:特异性siRNA能有效抑制α7 nAChR基因的表达,α7 nAChR基因的表达的抑制能增加Aβ的神经毒性作用,间接说明α7 nAChR有一定的神经保护作用,其表达减少与阿尔茨海默病的发生有一定关系.     

齐墩果酸对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究琐琐葡萄提取物齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其机制.方法 采用20μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞损伤构建阿尔茨海默病(AD)细胞模型,20、40和80μg/mL OA干预,CCK-8法检测各组细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,Annexin V-FITC流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞凋亡相关基因bcl-2和bax表达.结果 与模型组比较,20、40和80μg/mL OA预处理可有效提高PC12细胞存活率,减少乳酸脱氢酶渗漏,降低细胞凋亡率,下调bax mRNA表达(P＜0.05),40、80μg/mL OA预处理上调bcl-2 mRNA表达(P＜0.05).结论 OA对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡损伤具有明显的保护作用,其机制可能与OA通过调节细胞凋亡相关基因表达,从而抑制凋亡有关.