螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌遗传育种

利用抗生素抗性与产量之间的相关性进行螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌的遗传育种,旨在获得高产菌株,提高螺旋霉素的生产水平。首先用正交试验法确定最佳发酵培养基,可使发酵单位提高25%。再通过紫外线     

从具沉默抗性基因的链霉菌中筛选新的抗菌物质

本文设计了一种新抗生素筛选方法，用抗生素抗性基因探针的菌落杂交方法，从大量野生型链霉菌中筛选可能含有抗生素抗性沉默基因的若干天然天抗菌活性的链莓菌作为诱变对象，再通过紫外线诱变，原生质体再生，融合等手段处理这些链霉菌，使其产生了抗菌活性。其中孢囊链菌菌ＳＰ－９２９９代谢物的抗耐药菌活性。     

硫酸二乙酯和紫外线对金霉素链霉菌的诱变育种

考察了硫酸二乙酯 (DES)和紫外线 (UV)对金霉素链霉菌进行诱变的效果。其中 2 ?S诱变剂对金霉素链霉菌无明显的致死效应 ,但在含有金霉素 2 2 0 μg/ml的培养基上筛选结果表明 ,DES对金霉素产生菌产生了较强的诱变效果 ,菌株正突变率达 5 2 %。对金霉素链霉菌进行紫外诱变的结果表明 ,在营养贫瘠培养基上筛选的诱变效果较营养丰富培养基上的效果好 ,且遗传特性稳定。     

产多杀菌素刺糖多孢菌的诱变选育

目的 采用甲基磺酸乙酯(EMS)、核糖体工程育种和常压室温等离子体(ARTP)方法处理产多杀菌素刺糖多孢菌 (Saccharopolyspora spinosa) SIIA-1802,采用含蛋氨酸培养基筛选得到高产菌株。方法 首轮采用EMS诱变;第二轮采用链霉 素抗性育种;第三轮采用ARTP诱变育种进一步巩固育种成效;采用对照和添加蛋氨酸的发酵培养基考察突变菌株的发酵水 平。结果 出发株刺糖多孢菌SIIA-1802经过EMS诱变、链霉素抗性筛选和ARTP诱变得到的突变株ESA-611,发酵水平提高了 671.8%,采用含有蛋氨酸的发酵培养基进行筛选,发酵水平进一步提高了57.6%。在ARTP诱变过程中,筛选到一株多杀菌素A 显著下降,但产生较高水平多杀菌素J的菌株ESA-598。结论 本方法简单经济,突变效率高,能够快速获得传代稳定的多杀菌 素高产突变株。另外,通过诱变拓宽了代谢产物谱,得到了具有更高潜在价值的组分。     

补加结晶母液对卡那霉素发酵的影响

根据不同抗生素产生菌的生化代谢特点,采用合适的发酵中间补料方式,能够延长菌体效价分泌期,一般来说,这是提高抗生素发酵效价的有效措施之一。 文献报导,基础培养基或发酵过程中间补加卡那霉素分子断片-2-脱氧链霉胺-能使卡那霉素发酵效价提高10—50％。并且为此提出关于2-脱氧链霉胺化学合成方法的专利报导。我们认为,后者由于合成路线繁琐,成本高昂,在工业生产中不具有实用价值。     

通过获得链霉素抗性基因(str)突变株筛选梅岭霉素高产菌株

本文通过链霉素对梅岭霉素（meilingmycin）产生菌南昌链霉菌NS－41－80菌株孢子致死浓度的测定，采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株的孢子进行诱变处理，诱变处理的孢子涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上，获得了大量的链霉素抗性基因（str）突变株。然后从链霉素抗性基因突变株进一步筛选到梅岭霉素高产菌株80－5．11－221，在摇瓶条件下，只产梅岭霉素不产南昌霉素，梅岭霉素活性效价达1500μg/ml，比出发菌株NS－41－80的摇瓶发酵效价855μg/ml提高了77．9％，该菌株连续传代六代进行摇瓶发酵，其F2代和F3代梅岭霉素发酵效价稳定，F4代至F6代随着传代数增加，其梅岭霉素发酵效价急速下降。通过EMS诱变剂量分别与抗药性突变率和链霉素抗性基因突变株产梅岭霉素产量的产势统计分析表明，菌株抗药性突变与产抗生素突变密切相关，产抗生素突变的EMS诱变剂量高于链霉素抗性基因突变诱变剂量。在0．03mol/L的EMS剂量作用下，菌株致死率为99．43％，而抗药性突变率为0．0440％，建立了梅岭霉素产生菌链霉素抗性基因突变筛选方法，为南昌链霉菌高产菌种选育研究作了有益的尝试，并有助于其它链霉菌属的抗生素产生菌育种研究。     

氨基甙类抗生素及其合理应用

氨基甙类抗生素是由放线菌属微生物产生的具有抗菌活性的物质,根据其来源可分为:一、由链霉菌产生的氨基甙抗生素及其衍生物:包括链霉素、双氢链霉素、卡那霉素、卡那霉素B、丁胺卡那霉素(Amikacin),双去氧卡那霉素(Dibekacin)、妥布霉素及新霉素。二、由小单孢菌产生的氨基甙抗生素及其衍生物:包括庆大霉素及西梭霉素(Sisomicin)等。     

核糖霉素高产菌株核苷链霉菌筛选

以核苷链霉菌09-15为出发菌株,采用氮离子束注入、甲基磺酸乙酯、紫外线诱变,耐抗生素的筛选等手段育种,以期获得高产菌株.测定了09-15菌对8种抗生素的敏感性,并讨论了菌株对自身代谢产物低耐受性的原因.比较了多种方法的诱变效应,氮离子束注入的诱变效应好,正变率高;紫外线正变率低.经过多种方法复合处理,获得St-150菌株,摇瓶发酵单位比亲株09-15提高20%,发酵液的杂质含量明显降低,并在20吨发酵罐得到验证.     

氮离子注入法选育春雷霉素高产菌株和生产发酵

目的以氮离子束注入法对春雷霉素产生菌进行诱变育种,获得高产菌株。方法以小金色链霉菌(Streptomyces microaureus)US17为出发菌株,采用不同剂量的氮离子注入法处理该菌株,经过摇瓶初筛、复筛和上罐发酵,确定生产性状优良的菌种。结果经过诱变处理和筛选后,获得4株高产菌株。其中K1999.2010S247菌株摇瓶效价达到27 546mg·L-1。经25吨罐生产验证,平均发酵效价比原工业生产菌株提高了5.44%,组分含量质量分数提高了4.5%。结论采用离子束注入法对春雷霉素产生菌诱变育种效果显著,所获得高产菌株发酵效价高、组分含量高,产生巨大的经济效益,适合工业生产发酵使用。     

卡里霉素产生菌的卡那霉素抗性基因表达

天蓝色链霉菌放线紫红素生物合成基因成功的分子克隆以及它们异种宿主的表达促进了成功克隆其它抗生素生物合成的基因。一种抗生素生物合成所需基因多半同相同抗生素的抗性编码基因和在抗生素合成调控中的基因密切联系。红霉素生物合成基因的克隆就是以这种抗性基因作为工具而取得进展的。我们感兴趣的是簇集生物合成基因表达的控制机制,以及作为生物合成基因是如何调控这些抗性基因的表达的。解决这些问题会有助于链霉菌次级代谢调控和差别的了解。本文阐述被克隆的卡那霉素抗性基因(Kmr)的特征及其在卡那霉素产生菌内的转录调控作用。卡那霉素抗性机制曾报道,变铅青链霉菌1326隐含克隆卡那霉素链霉菌Kmr基因的pMCP5质粒,该     

N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍对麦迪霉素产生菌诱变作用的研究

近年来微生物遗传变异的研究进展甚快,而在获得产量高、性质优良的抗生素产生菌的选育工作中,仍以诱变育种为主。本试验选用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍为诱变剂,考查了它对我所1974年自土壤中筛选所得的麦迪霉素产生菌—生米卡链霉菌四川变种(S.mycarofaciens var.Sichuanensisn Yan)113菌株的诱变作用。试验中研究了在不同pH与不同时间作用下,诱变剂对生米卡链霉菌的致死、表型、抗菌活力、生理缺陷等变异作用,观察了它们彼此间的相关性。     

中生菌素高产菌的选育及发酵条件的研究

中生菌素是由淡紫灰链霉菌海南变种产生的一种氨基糖苷类抗生素，其产生菌用紫外诱变、磁场辅助紫外诱变等手段获得高产菌株O－66，产量达500mg/ml，比原株提高了2．5倍。在选育过程中注意了菌落形态与产量的相关性并采用正交法筛选出发酵培养基。     

螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌遗传育种

本文是利用抗生素抗性与产量之间的相关性来进行螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌的遗传育种,旨在获得高效价菌株,从而提高螺旋霉素的生产水平。首先用正交试验法确定出发菌株最佳发酵培养基,并在此基础上通过紫外线诱变,和在螺旋霉素浓度梯度平板上筛选螺旋霉素抗性菌株。按上述方法理性化筛选得到的菌株多为正突变株。从本实验得到一株螺旋霉素抗性菌株SPM~r-248,其抗性较出发菌株提高300％,生产能力较出发菌株提高81.3％。菌株SPM~r-248的高效价生产性能遗传特性稳定。在7m~3罐做发酵放大,与出发菌株相比,发酵效价提高31.4％,发酵指数提高18.8％,具有一定的学术意义和经济价值。     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论 紫外、微波及LiCl复合诱变后经抗生素抗性筛选,结合发酵培养基优化,可有效提高菌株的达托霉素发酵产量。     

文摘

1.用含艮他霉素的筛选培养基定向分离小单孢菌 在寻找新抗生素产生菌中定向分离一定类群的微生物是很有意义的。在分离培养基中加入不同类型的抗生素以抑制对它敏感的微生物生长就是一种有效的方法,用含新生霉素的培养基分离类似原放线菌的链霉菌便是实例。产生抗生素的菌株一般对该素是耐药的,可以设想,在含一定抗生素的培养基中生长的微生物(特别是链霉菌)是与该抗生素化学结构相类似抗生素的产生菌,筛选已     

青霉素菌种选育的新方法

目的：改良已知菌种或生产菌株的特性,使其符合工业生产的要求。方法：以青霉菌产生菌原生质体来代替青霉素产生菌孢子作为诱变育种的材料进行紫外光处理。结果：分析表明其诱发率突变频率和诱变育种的效率均得以大幅度的提高。结论：原生质体诱变后所获得新菌种,具有单位高,发酵总亿高,糖耗低等优良特性。     

微波在顶头孢霉菌选育中的应用

头孢菌素 C 是半合成头孢菌素类抗生素的重要原料,通过对其产生菌顶头孢霉菌的诱变研究,能使发酵单位不断提高。本实验通过用微波诱变顶头抱霉菌 B_(42)节孢子,得到变株 B42—V2,单位提高16.03%,且遗传性状非常稳定。实验表明:微波诱变育种效果好、操作简便、所选育菌株遗传性状稳定。     

链霉菌原生质体融合导致放线菌素合成定子的高频率转移

引言链霉菌遗传学研究的重要性,不仅在于这个属能产生许多抗生素,而且因为对它的分化作用及其次级代谢调节作用感到兴趣,并提出质粒涉及多种抗生素产生,包括链霉素、卡那霉素、瞟呤霉素、Turimycin、新霉素、头霉素、春日霉素、金丝菌素、氯霉素和土霉素。还可能因被消除剂除去质粒,例如在吖啶黄存在时生长,使一些细胞不能产生抗生素,推测质粒包含抗生素合成。通过天兰色链霉菌 A3(2)质粒研究已确证其含有甲基霉素 A 合成所需的信息。     

由加利利链霉菌产生的新蒽环抗生素阿柔比星X

在研究蒽环抗生素的生物合成过程中发现了阿柔比星(aclarubicin)X(1),它存在于加利利链霉菌(Str.galilaeus)的7日龄菌丝体中。产生菌的种子以YS培养基制备,发酵用SGM培养基,28℃,350r/min,培养 7天。     

氮离子注入土霉素产生菌的诱变育种

目的获得土霉素产生菌的高产菌株,提高发酵单位。方法用土霉素产生菌龟裂链霉菌经分离纯化的2810#菌株的分生孢子作处理样品,使用发射能量为15×103eV的氮离子束对其进行诱变处理,氮离子的注入剂量为每平方厘米注入2.0×1015个离子,分生孢子死亡率为98.2%。结果诱变处理后经摇瓶筛选得到1082#高产菌种,其摇瓶发酵单位提高11.2%,投入发酵生产后平均发酵单位提高8.9%。结论氮离子注入方法对提高龟裂链霉菌的产量正向突变频率有明显效果。