脊髓背角神经元磷脂酰肌醇-3激酶p110β在大鼠关节炎性痛形成中的作用:与辣椒素受体及酸敏感离子通道1a的关系

目的 评价脊髓背角神经元磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K) p110β在大鼠关节炎性痛形成中的作用及与辣椒素受体(TRPV1)及酸敏感离子通道1a(ASIC1a)的关系.方法 鞘内置管成功的成年雌性SD大鼠40只,3月龄,体重250 ～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=10)∶对照组(C组)、关节炎性痛组(AP组)、AP+ PI3K p110β错义寡核苷酸组(MS组)和AP+ PI3K p110β反义寡核苷酸组(AS组).采用右踝关节腔内注射完全弗氏佐剂建立关节炎性痛模型,模型制备后即刻AP组、MS组、AS组分别经鞘内注射生理盐水、错义寡核苷酸15 μg和反义寡核苷酸15 μg,容量20μl,1次/d,连续6d.于术前1d、术后4、7、10d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足反应潜伏期(TWL),术后10 d处死大鼠,取腰段脊髓,采用Western blot法检测脊髓背角神经元PI3K p110β表达,采用免疫组化法检测脊髓背角神经元TRPV1和ASICla的表达.结果 与C组比较,AP组、MS组和AS组术后各时点MWT降低,TWL缩短,脊髓背角神经元PI3K p110β、TRPV1和ASICla表达上调(P＜0.01);与AP组和MS组比较,AS组术后各时点MWT升高,TWL延长,脊髓背角神经元PI3K p110β、TRPV1和ASIC1a表达下调(P＜0.01).结论 脊髓背角神经元PI3K p110β参与大鼠关节炎性痛的形成,其机制与上调脊髓背角神经元TRPVl和ASICla的表达有关.     

酸敏感离子通道1a偶联内质网应激在人髓核细胞退变中的作用机制初探

[目的]模拟人椎间盘髓核(nucleus pulposus,NP)酸性环境,探讨酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion channel 1a,ASIC1a)的活化与内质网应激的关系。[方法]体外单层培养人正常髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)系,不同p H值培养不同时间,模拟椎间盘酸性微环境,建立酸诱导的退变髓核细胞模型。CCK-8检测细胞增殖能力。Western blot、q PCR检测内质网应激。Western blot检测ASIC1a的表达。Fura-2/AM荧光探针检测ASIC1a活化介导的Ca2+内流。流式细胞术检测ASIC1a活化后细胞凋亡率。Pc TX1(ASIC1a特异性阻断剂)阻断ASIC1a后,观察细胞凋亡及内质网应激指标变化情况。[结果]酸诱导髓核细胞凋亡,酸激活ASIC1a及内质网应激,Pc TX1能降低促凋亡的内质网应激通路和髓核细胞凋亡率(P0.05),而未折叠蛋白反应相关指标无明显变化(P0.05)。[结论]ASIC1a能够调控内质网应激中的促凋亡通路,阻断ASIC1能够保护酸诱导的髓核细胞凋亡。     

鞘内注射米诺环素对骨癌痛大鼠脊髓水平酸敏感离子通道蛋白1a表达的影响

目的 探讨鞘内注射米诺环素对骨癌痛(bone cancer pain,BCP)大鼠脊髓水平酸敏感离子通道蛋白1a(acidsensing ion channel 1a,ASIC1a)表达的影响. 方法 选择雌性SD大鼠(体重180～220 g),采用随机数字表法分为4组:假手术+生理盐水组(Ⅰ组)、假手术+米诺环素组(Ⅱ组)、BCP+米诺环素组(Ⅲ组)和BCP+生理盐水组(Ⅳ组).①于造模前1d及造模后3、5、7、10、14、18d测定大鼠(每组选8只)自由行走痛行为评分,同时测定大鼠机械缩足反射阈值(paw withdrawalmechanical threshold,PWMT)至14 d;②于造模前1d及造模后3、5、7、10、14、21 d同一时段随机处死大鼠(每组选4只),取腰段脊髓,采用Western blot法检测ASIC1a的表达;③于造模后1、3、7、14、21 d,采用免疫荧光技术观察大鼠(每组选4只)患侧脊髓ASIC1a和小胶质细胞标记物[离子钙接头蛋白分子1(ionized calcium binding adapter 1,Iba-1)]免疫反应阳性产物的共表达. 结果 ①与Ⅰ组和Ⅱ组比较,造模后14、18dⅢ组、Ⅳ组自由行走痛行为评分明显升高(P＜0.01);造模后5d时Ⅲ组、Ⅳ组PWMT开始下降(P＜0.01),至7、14 d维持在低水平(P＜0.01);与Ⅳ组比较,Ⅲ组PWMT在造模后7、10、14 d均较高(P＜0.05).②与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组从造模后3d开始ASIC1a表达上调(P＜0.01),于14 d达到高峰(P＜0.01);与Ⅳ组比较,Ⅲ组在造模后5、7、10、14、21 d ASIC1a表达量均较低(P＜0.05).③与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组在造模后3、7、14、21 d脊髓背角ASIC1a阳性细胞数和活化的小胶质细胞数均较高(P＜0.05),未发现双标细胞;与Ⅳ组比较,Ⅲ组大鼠脊髓ASIC1a阳性细胞数和活化的小胶质细胞数均明显降低(P＜0.01). 结论 大鼠BCP的形成和维持可能与ASIC1a有关;鞘内注射米诺环素可以减轻大鼠的机械性痛觉过敏,其作用可能是通过抑制脊髓ASIC1a的表达实现的.     

酸敏感离子通道1a在视网膜色素上皮细胞氧化损伤过程中的作用

目的 观察酸敏感离子通道1a( ASIC1 a)在视网膜色素上皮细胞(RPE)氧化损伤过程中的作用.方法 采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及Western blot的方法检测RPE在1 mmol/L H2O2诱导的细胞氧化损伤过程中(0.5 ～4.0 h),ASIC1a的表达变化;同时分别采用ASICs阻断剂amiloride和PCTx1,以及通过细胞转染ASIC1a,检测对该氧化损伤过程的影响,并应用噻唑蓝(MTT)比色法评价细胞的活性.结果 实时RT-PCR以及Western blot的结果均显示RPE中ASIC1a在mRNA及蛋白水平均有表达.1mmol/L H2O2处理RPE 1、2、4h后,RPE中ASIC1a的蛋白表达明显降低至(70.5±11.0)％、(40.6±5.6)％和(45.6±7.6)％.PCTx1阻断ASIC1a后,RPE细胞存活率明显降低,至4h细胞存活率为(76.2±5.0)％(与对照组比较,P＜0.05),而过表达ASIC1a能够提高RPE氧化损伤过程中细胞的存活率,与H2O2处理组比较,4h组为(38.0±6.0)％比(16.2±2.0)％(P＜0.05).结论 ASIC1a在RPE中具有表达并对RPE的氧化损伤具有一定的细胞保护作用.     

切口痛大鼠脊髓背角GluR1-AMPA受体和GluR2-AMPA受体胞浆至胞膜转运的变化

目的 探讨切口痛大鼠脊髓背角含谷氨酸受体1亚基的使君子酸(GluR1-AMPA)受体和含谷氨酸受体2亚基的使君子酸(GluR2-AMPA)受体胞浆至胞膜转运的变化.方法 成年雄性清洁级SD大鼠32只,体重280～ 300 g,6～8周龄,采用随机数表法,将其随机分为2组:正常对照组(C组,n=8)和切口痛组(Ⅰ组,n=24).Ⅰ组大鼠制作右足底切口痛模型.Ⅰ组于术后3h、1d和3d时取8只大鼠,测定累计痛评分(CPS)和机械缩足阈值(PWT).然后处死大鼠,取L3～6节段脊髓背角,采用Western blot法检测胞浆和胞膜GluR1和GluR2亚基的表达,采用免疫共沉淀技术检测脊髓背角Stargazin与GluR1或GluR2亚基的共表达.结果 与C组比较,Ⅰ组CPS评分升高,PWT降低,脊髓背角胞浆GluR1亚基表达下调,脊髓背角胞膜GluR1表达及Stargazin与GluR1共表达上调(P＜0.05或0.01),脊髓背角胞浆和胞膜GluR2及Stargazin与GluR2共表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 切口痛大鼠脊髓背角GluR1-AMPA受体从胞浆转运至胞膜,而GluR2-AMPA受体不发生胞浆至胞膜的转运.     

可调节式骨科手术架在强直性脊柱炎伴脊柱后凸畸形矫形中的应用

正强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种慢性炎症性疾病~([1]),通常会导致脊柱畸形和关节强直,晚期常需手术治疗,以恢复矢状面平衡、脊柱力线和视野,以期获得满意的外观和临床效果~([2])。脊柱截骨手术常需在俯卧位下施行~([3]),因部分患者长期处于脊柱后凸畸形及下肢关节非功能位强直~([4]),造成手术体位摆放困难,且AS常伴有中轴骨骨质疏松及周围韧带骨化~([5]),在体位摆放过程中,轻微外力亦会造成医源性骨折发生~([6]),在脊柱截骨矫形术中,在截骨端闭合过程易造成脊髓剪切、螺钉拔出~([7])。     

脊髓内先天性上皮囊肿

先天性上皮囊肿包括皮样囊肿、表皮样囊肿、气管源性囊肿、肠源性囊肿、畸胎瘤性囊肿等,起源于胚胎残余组织~([1]),发生于脊髓内者少见~([2]).2001年10月～2009年3月我们收治12例脊髓内先天性上皮囊肿患者,报告如下.     

先天性蝴蝶椎合并脊髓损伤1例

正蝴蝶椎是一种罕见的先天性脊柱发育不良病变。是由胚胎发育期间脊索在椎体中央矢状面残留,椎体的两个软骨化中心异常融合导致~([1]),因其在X线正位片上外形似蝴蝶翼而得名~([2])。先天性蝴蝶椎患者临床通常无特异性的表现,多因慢性腰背痛就诊时而确诊~([3])。其常与一些综合征,如Jarcho-Levin综合征~([4])、Crouzon综合征~([5])和Alagille综合征等并存。近年来临床出现了先天性蝴蝶椎合并椎间盘突出症、强直性脊柱炎等报道~([6-7]),笔者于2019-10诊治蝴蝶椎合并脊髓损伤1例,报道如下。     

大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a基因的表达

目的 探讨大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a基因的表达.方法 健康雄性SD大鼠60只,体重200～220 g,随机分为3组(n=20):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和慢性背根神经节压迫组(CCD组).CCD组制备CCD诱导神经病理性痛模型,分别于术前48 h(基础状态)、术后4、8、24 h时取5只大鼠,测定热痛阈,然后取术侧L4,5节段脊髓,采用实时定量PCR技术测定脊髓背角Homer-1a基因的表达水平.结果 与基础值相比,CCD组术后4、8 h时脊髓背角Homer-1a基因表达上调(P<0.01),术后24 h时降至基础值水平(P0.05),术后24 h时热痛阈降低(P<0.01).与C组和S组比较,CCD组术后4、8 h时脊髓背角Homer-1a基因表达上调,术后24 h时热痛阈降低(P<0.01).结论 大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a表达水平迅速而短暂的上调,可能抑制早期痛敏的发生.     

经皮椎体后凸成形术治疗后壁不完整骨质疏松性椎体骨折

正骨质疏松性椎体骨折是骨科老年患者中常见疾病,通常选择PVP或PKP进行治疗~([1-2]),但椎体后壁不完整的骨折在临床上较少见,约占骨质疏松性椎体骨折5.8%~([3]),用PVP或PKP进行微创治疗,有骨水泥后壁渗漏致脊髓或神经根损伤的风险,被列为相对禁忌证~([4])。2009-08-2014-05,本科共收治后壁不完整骨质疏松性椎体骨折25例,均行PKP进行治疗,效果满意,     

let-7a对人胃癌细胞周期的影响

微小RNA是一种内源性的、非编码RNA分子,属转录后基因表达调控因子~([1]),参与多种生理过程~([2]),已成为继小干扰RNA(siRNA)之后新的研究热点之一~([3]).lethal-7(let-7)是1993年后被发现的第2个微小RNA~([4]).我们利用重组慢病毒将let-7a转导人胃癌SGC-7901细胞,观察其对SGC-7901细胞周期的影响.     

颈椎病合并亨廷顿舞蹈症前路手术后椎前间隙血肿1例报道

正亨廷顿舞蹈症虽同属于退行性神经系统病变~([1]),其临床症状与颈椎病的表现却差异明显。有报道称亨廷顿舞蹈症患者中能够观察到颈椎滑脱和脊髓高信号等类似颈椎病脊髓压迫病变的影像学表现,提示两者间可能存在相关性~([2])。颈椎病是一种由于慢性颈椎退行性改变导致脊髓神经压迫而引起神经症状的常见疾病~([3]);其临床表现通常以颈痛、受累神经根支配区域的疼痛麻木以及脊髓受压引起的肢体运动障碍症状为主~([4、5])。然而,目前国际上尚缺乏颈椎病合并亨廷顿舞蹈症患者的临床诊疗的相关报道~([6、7])。本科室收治了1例颈椎病合并亨廷顿舞蹈症的患者,在其诊疗过程中发现存在不同于颈椎病手术诊疗的特殊问题,报道如下。     

经皮椎体后凸成形术后自发性椎管内硬膜下血肿导致截瘫1例

正随着老龄化社会的发展,骨质疏松性骨折的发生率逐渐提高,最常见的是椎体压缩骨折,好发于下胸椎及腰椎。椎体压缩骨折目前主要采用椎体成形术治疗,具有创伤小、疼痛缓解迅速、并发症少等优点~([1])。椎体成形术具有着良好的止痛效果,微创手术使患者住院时间明显缩短,显著提高患者生活质量~([2]),但也存在并发症发生的风险~([3])。笔者于2019-02诊治1例胸椎压缩骨折伴脊髓水肿,经皮椎体后凸成形术后自发性椎管内硬膜下血肿导致截瘫,报道如下。     

miRNA在脊髓损伤中病理生理作用的研究进展

<正>脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)常造成感觉、运动和自主功能的障碍~([1]),主要包括原发性SCI和继发性损伤阶段~([2])。目前急性SCI的主要治疗方式是椎管减压手术~([3]),但患者运动功能或感觉功能的恢复情况往往差强人意,因此需要对SCI的病理生理机制进行深入的探究,并联合应用多方面策略以促进功能恢复~([4])。微小核糖核酸(micro     

射频消融治疗转移性脊柱肿瘤的研究进展

正骨是转移性肿瘤的好发部位之一~([1]),在死于恶性肿瘤的患者中约有80%发生骨转移~([2]),其中约有50%为脊柱转移~([3])。脊柱转移瘤最常见的症状是难以忍受的慢性疼痛(占90%以上)~([4]),导致患者卧床不起或依靠轮椅生活的情况~([5]),严重影响患者的生活质量。目前,对于中位生存期不长的转移性脊柱肿瘤患者,外科治疗方式的选择往往陷于两难境地,既要解决患者症状,又没有必要行开放性手术让患者面临创伤及并发症等风险~([6])。随着微创理念和医疗技术     

Stargazin在切口痛大鼠脊髓背角GluR1-AMPA受体胞浆至胞膜转运中的作用

目的 评价Stargazin在切口痛大鼠脊髓背角含谷氨酸受体1亚基的使君子酸(GluR1-AMPA)受体胞浆至胞膜转运中的作用.方法 成年雄性清洁级SD大鼠45只,体重280 ～ 300 g,6～8周龄,采用随机数字表法,将其分为5组:正常对照组(C组)、假手术组(S组)、切口痛+生理盐水组(P组)、切口痛+ Stargazin小干扰RNA(siRNA)组(I组)和切口痛+Stargazin无意义siRNA组(N组).P组、I组和N组分别鞘内注射生理盐水10μl、20 μmol/L siRNA、20μmol/L无意义siRNA 10μl,2次/d,连续3d,4d后制备右足底切口痛模型.切口痛术后3h时测定大鼠累计痛评分(CPS)和机械缩足阈(PWT).然后处死大鼠,取L3-6节段脊髓背角,采用Westem blot法检测胞浆和胞膜GluR1和GluR2亚基表达,采用免疫共沉淀技术检测脊髓背角Stargazin与GluR1或GluR2亚基的共表达.结果 与C组比较,P组和N组CPS评分升高,PWT降低,脊髓背角胞浆GluR1表达下调,脊髓背角胞膜GluR1表达上调,I组CPS评分升高(P＜0.05或0.01);与P组比较,I组CPS评分降低,PWT升高,脊髓背角胞浆GluR1表达上调,脊髓背角胞膜GluR1表达下调,脊髓背角Stargazin和Stargazin与GluR1共表达下调(P＜ 0.05或0.01).结论 Stargazin介导了切口痛大鼠GluR1-AMPA受体从胞浆至胞膜转运.     

硬膜外神经根吻合重建人工排尿反射弧的实验研究

<正>应用躯体神经-脊髓中枢-内脏神经重建反射弧恢复脊髓损伤(SCI)后膀胱排尿功能已获得实验和临床证实,大多数学者采用硬膜囊内将支配膀胱的S2神经根与躯体神经根吻合,文献报道~([1~3]),75%(9/12)~88%(81/92)的患者效果良好。但这种切开硬脊膜进行神经根吻合的手术方法创伤大,操作复杂。本研究对Beegle犬采用硬膜外神经根吻合的方法建立人工排尿反射弧,并进行尿动力学检测,     

梅毒性脊髓炎1例报告

<正>梅毒是梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)感染所致的一种慢性性传播疾病,神经梅毒系由TP感染人体后出现的大脑、脑膜或脊髓损害的一组临床综合征~([1]),未经治疗的早期梅毒患者约10%可发展为神经梅毒~([2])。梅毒性脊髓炎是神经梅毒的一种,是TP累及脊膜引起的炎症反应,是梅毒性神经损害的早期表现,多发生于TP感染后2~10年,表现为急性或亚急性横贯性脊髓损害,如下肢瘫痪或     

妇科腹腔镜手术中纱布卷压迫止血的临床应用

正腹腔镜手术具有康复快、疗程短、痛苦轻、创伤小等优点,在妇科临床工作中已得到广泛应用~([1]),在保证手术疗效的同时满足了现代女性对美学的要求~([2])。对于妇科复杂腹腔镜手术,最常见的并发症为术中出血~([3]),可影响手术进程、加大手术难度,延缓康复,甚至造成不可逆的损伤。如术中大面积创面渗血,尤其靠近大血管、输尿管、肠管及盆底静脉丛部位,反复多次电凝止血可能带来副损伤,影响手术的顺利进行~([4])。因此腹腔镜下有效止血是顺利开展腹腔镜手术     

Kümmell病的分期、分型与治疗进展

正Kümmell病指轻微脊柱创伤后迟发的椎体塌陷及进行性脊柱后凸~([1])。该病最早由德国外科医生Kümmell于1891年描述~([2]),他报道了5例经历轻微脊柱创伤的患者,经过数月甚至数年的无症状期,最后出现胸腰段疼痛及进行性后凸畸形。Kümmell病的发病机制目前仍不明确,比较公认的假说是创伤后椎体骨缺血坏死~([3~5])。椎体迟发性塌陷在X线片上被发现后~([10]),多数学者均认为椎体内真空裂