胰岛素对人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物-2基因表达的影响

目的观察胰岛素对人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物-2（IRS-2）基因mRNA表达的影响。方法用胰岛素干预人成骨肉瘤MG-63细胞，半定量RT-PCR检测细胞IRS-2基因mRNA的表达量。结果10^-10mol/L～10^-6mol/L胰岛素上调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05），且具有剂量依赖性。胰岛素的调节还存在时效依赖性，10^-8mol/L胰岛素干预12h可下调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05），干预24h～48h上调细胞IRS-2基因mRNA的表达（P＜0．05）。结论胰岛素可影响人成骨肉瘤MG-63细胞IRS-2基因mRNA的表达，胰岛素可能对1型糖尿病患者骨质疏松的发生和发展起着重要的作用。     

NALP1基因与骨肉瘤细胞的相关研究

目的:探讨NALP1基因在骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的表达,以及高表达NALP1基因对于骨肉瘤细胞体外凋亡的影响.方法:使用RT-PCR、Western-blot法检测骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平并与人成骨细胞株hFOB1.19比较.将NALP1基因转染质粒PcDNA3.1,将重组质粒转染骨肉瘤细胞,分成高表达基因组、空质粒组及对照组,加入抗肿瘤药物顺铂及甲氨蝶呤促使肿瘤细胞凋亡,使用流式细胞仪测定各组肿瘤细胞凋亡率.结果:通过统计分析,骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平均低于人成骨细胞株hFOB1.19 (P＜0.05),NALP1高表达组的肿瘤细胞凋亡率明显高于空白质粒组及对照组.结论:上调骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的NALPl的表达量可以促进肿瘤细胞凋亡.     

川芎嗪逆转骨肉瘤(MG-63/ADM)细胞多药耐药的研究

目的研究川芎嗪与阿霉素合用对人骨肉瘤(MG-63/ADM)耐药细胞的影响。方法用流式细胞仪检测经过川芎嗪处理的(MG-63/ADM)耐药细胞和未经川芎嗪处理的(MG-63/ADM)耐药细胞P170蛋白的表达。结果人骨肉瘤(MG-63/ADM)耐药细胞对阿霉素(ADM)耐药,耐药倍数是11.62,这种耐药细胞的P170有高表达。单用TMP处理和未用TMP处理的MG-63/ADM细胞之间的P170表达率差异有统计学意义(P<0.01)。结论川芎嗪可以部分逆转骨肉瘤(MG-63/ADM)耐药细胞的对阿霉素的耐药性。     

牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的探讨牛蒡子苷元对人骨肉瘤MG-63细胞系增殖及凋亡的影响。方法以人骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,采用不同浓度(1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)的牛蒡子苷元处理细胞。采用CCK-8法测定细胞体外增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax和VEGFR-2基因的表达水平变化。结果牛蒡子苷元能够抑制骨肿瘤细胞MG-63的增殖,促进细胞凋亡,随着药物浓度的增加能够降低Bcl-2基因的表达,升高Bax基因的表达,抑制VEGFR-2基因的表达。结论牛蒡子苷元可诱导人骨肉瘤MG-63细胞系发生凋亡,抑制其细胞增殖能力,并能抑制Bcl-2和VEGFR-2基因的表达水平,同时能够诱导促凋亡基因Bax表达水平的上升,这些结果阐明了其抗肿瘤作用中存在的作用机制。     

miR-335-3p通过靶向FOXD1发挥对骨肉瘤细胞肿瘤生物学行为的抑制作用

目的 探讨miR-335-3p通过靶向调控FOXD1基因抑制骨肉瘤(osteosarcoma, OS)细胞的增殖和迁移的作用及机制。方法 使用RT-PCR法评估miR-335-3p在OS组织和临近组织，正常人成骨细胞系(hFOB1.19f)和OS细胞系(SAOS2、U2OS、MG63)中的表达；使用细胞增殖实验测定研究miR-335-3p过表达对U2OS、MG63的活力的影响；EDU染色和DAPI染色评估miR-335-3p过表达对U2OS、MG63迁移和侵袭的影响；荧光素酶报告基因测定法确定miR-335-3p靶向调控FOXD1编码基因发挥作用；蛋白质免疫印迹法检测OS细胞中FOXD1蛋白表达；pcDNA-FOXD1转染OS细胞，并评估细胞增殖、迁移和侵袭的水平。结果 miR-335-3p在OS癌组织和细胞中低表达；利用miR-335-33p mimic转染细胞后，可在体外抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭；miR-335-3p通过直接结合FOXD1 mRNA的3′-UTR发挥抑制作用，从而负面调节FOXD1的表达；miR-335-3p通过靶向调节FOXD1的表达，进而抑制OS癌细胞的增殖...     

氟化钠对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响

目的 探讨氟化钠(NaF)对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响.方法 以0、10-2、10-1、1、10、102、5×102、103、5×103、104、2×104、4×104 μmol/L NaF染毒MG-63细胞,培养48 h.采用MTI实验观察NaF对MG-63细胞增殖能力的影响,以流式细胞技术检测MG-63细胞周期变化.结果 MTr实验结果显示,MG-63细胞开始有增殖活性时的NaF浓度为102 μmol/L,增殖活性最大时的浓度为5×103 μmol/L,增殖活性受到抑制时的浓度为2×104 μmol/L.流式细胞技术检测结果显示,采用MTT实验中确定的3个关键浓度染毒细胞48 h后,高剂量(2×104 μmol/L)组的MG-63细胞凋亡率最高(6.001％),细胞增殖指数(PI)最低(0.339);中剂量(5×103μmol/L)组的细胞凋亡率最低(2.220％),PI最高(0.632);低剂量(102 μmol/L)组的PI及细胞凋亡率均与对照组无明显差异.结论 NaF对成骨细胞具有双向作用,低浓度下促进细胞增殖,超过一定浓度后因其增殖抑制而使细胞凋亡增加.     

性激素结合蛋白、胰岛素受体底物、葡萄糖转运蛋白表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用分析

目的探讨妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中性激素结合球蛋白(SHBG)、胰岛素受体底物(IRS)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)的表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的作用,为临床诊治提供参考依据。方法收集2017年1月-2018年6月在南开医院产科定期产检,择期行剖宫产手术的单胎足月孕妇,其中妊娠期糖尿病孕妇120例为妊娠期糖尿病组,糖代谢正常孕妇120例为正常对照组。应用实时PCR (qPCR)和Western blot技术检测两组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1、GLUT3、GLUT4 mRNA和蛋白的表达水平,并分析各指标间的相关性。结果妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-1、GLUT1 mRNA表达水平差异无统计学意义(均P0. 05)。妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、GLUT3、GLUT4蛋白表达水平明显低于正常对照组,差异有统计学意义(均P0. 05);两组孕妇胎盘组织中IRS-2、PI3K-p85β、GLUT1蛋白表达水平差异无统计学意义(均P0. 05)。Pearson分析显示,SHBG与IRS-2、PI3K-p85β、GLUT3、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4 mRNA表达呈正相关; IRS-1与PI3K-p85β、GLUT3 mRNA表达呈负相关。SHBG与IRS-2、GLUT3、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-2与GLUT1、GLUT4蛋白表达呈正相关; IRS-1与GLUT3蛋白表达呈负相关。结论妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织中SHBG、IRS及GLUT表达异常; SHBG浓度降低可能通过影响胰岛素信号传导通路导致胎盘葡萄糖利用障碍,最终引发妊娠期糖尿病。     

重组腺病毒载体Ad5-Eag1-shRNA对骨肉瘤小鼠肿瘤的影响

目的探讨重组腺病毒载体Ad5-Eag1-shRNA对骨肉瘤小鼠的肿瘤增殖、生长、表达和血管生成的影响。方法选取30只雌性BLAB/c小鼠随机分为3组(A、B、C组各10只),分别进行Ad5-Eag1-shRNA感染骨肉瘤MG-63移植、Ad5-Control-shRNA感染MG-63移植以及单纯感染MG-63移植;利用裸鼠成瘤实验和CCK-8法、蛋白印迹技术(Western blot)和免疫组化技术对不同分组骨肉瘤小鼠的肿瘤增殖和体积、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达和微血管密度(microvascular density,MVD)进行观察并比较。结果 Ad5-Eag1-shRNA感染组小鼠骨肉瘤感染24 h、36 h、48 h和72 h的MG-63细胞存活率在各时间段均显著低于Ad5-Control-shRNA感染组(P0.05),且细胞存活率呈现降低趋势(P0.05); Ad5-Eag1-shRNA感染组小鼠的肿瘤体积、单个高倍视野下MVD数均显著低于Ad5-Control-shRNA感染组和对照组,WB结果显示Ad5-Eag1-shRNA感染组的VEGF水平表达也显著低于Ad5-Control-shRNA感染组和对照组,上述差异均具有统计学意义(P0.05)。结论重组腺病毒载体Ad5-Eag1-shRNA对骨肉瘤小鼠的肿瘤增殖、生长、表达和血管生成能够起到抑制和阻碍效果。     

MTSS1基因对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的探讨MTSS1基因在骨肉瘤组织中的表达情况,对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法 qRT-PCR、Western blot和免疫组化染色分别检测骨肉瘤组织及其对应的癌旁组织样本中MTSS1的mRNA和蛋白表达水平。构建MTSS1表达载体在骨肉瘤细胞株MG63中过表达MTSS1,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Transwell细胞迁移和侵袭实验分别检测对细胞迁移和侵袭能力的影响;检测MMP2和MMP9的表达情况。结果骨肉瘤组织中MTSS1 mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织。MTSS1高表达能够抑制MG63细胞的增殖,抑制细胞凋亡。MTSS1表达上调显著降低细胞的迁移和侵袭能力。MG63细胞中过表达MTSS1可以降低MMP2和MMP9的表达。结论 MTSS1基因在骨肉瘤中低表达,MTSS1能够降低MG63细胞的增殖并促进细胞凋亡,可能通过抑制MMP2和MMP9的表达调控骨肉瘤的侵袭和转移。     

流体剪切应力对成骨细胞增殖效应及细胞周期的影响研究

目的:探究人成骨样细胞MG-63细胞在流体剪切应力(Fluid Shear Stress,FSS)作用下细胞增殖效应的改变及其机制。方法:对体外培养的MG-63加载强度为1.2Pa的FSS,在FSS作用不同时间(0min、30min、60min、120min)后采用MTT观察细胞增殖活性的改变,通过RT-PCR法观察细胞周期调控相关基因周期素依赖性蛋白激酶2、4(CDK2、CDK4)及CDK抑制因子p27mRNA表达的变化。结果:30min、60min实验组相对于对照组(0min)细胞增殖效应有所提高,CDK2和CDK4的mRNA表达均有增高,60min时作用最为显著(P<0.05),而120min实验组与对照组(0min)相比增殖活性有所降低,p27mRNA在30min及60min时的表达与对照组无明显差异,120min时明显增高(P<0.05)。结论:FSS对MG-63持续作用不同时间会促进细胞增殖效应及相关基因表达,但是这种持续性应力作用对细胞增殖效应的影响具有时间限制性。     

Twist及其相关调控基因在不同转移性人乳腺癌细胞中的差异表达

目的:观察不同转移潜能人乳腺癌细胞株中Twist及其相关调控基因mRNA表达的差异。方法:培养低侵袭性人乳腺癌细胞株MCF-7和高转移性人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,采用RT-PCR法检测两种细胞株中Twist、脆性组氨酸三联体(FHIT)、皮性钙黏附素(E-cadherin)、细胞凋亡相关基因Mcl-1、Bcl-2和Bax mRNA表达的差异。结果:MCF-7中FHIT、E-cadherin、Bax mRNA的表达显著高于MDA-MB-435S细胞,Twist mRNA在MDA-MB-435S细胞中的表达明显高于MCF-7,Mcl-1、Bcl-2 mRNA在两种细胞株中的表达无明显差异。结论:Twist、FHIT、E-cadherin、Bax mRNA表达差异可能与人乳腺癌细胞的不同转移潜能有关。     

胰岛素受体底物-1在子宫内膜癌中的表达

目的:探讨胰岛素受体底物-1在子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌发生的关系。方法:采用免疫组织化学SP法分别对子宫内膜癌、子宫内膜非典型增生、子宫内膜单纯增生和分泌期子宫内膜各30例进行胰岛素样生长因子-1受体、胰岛素受体底物-1、雌激素受体的表达进行检测,同时检测各组细胞的Ki-67指数。结果:胰岛素受体底物-1在4种子宫内膜组织中均有表达,但在子宫内膜癌中表达增强,与分泌期子宫内膜的表达相比差异显著,胰岛素受体底物-1在子宫内膜组织中的表达定位在胞浆;胰岛素样生长因子-1受体定位在胞膜,其在子宫内膜癌中的表达减弱,与分泌期子宫内膜相比差异显著;ER与IGF-1R和IRS-1在4种不同子宫内膜组织中的表达无统计学意义;Ki-67指数在子宫内膜癌及癌前病变与子宫内膜良性病变及正常子宫内膜间相比较统计学差异显著;Ki-67指数与IRS-1间存在正相关。结论:胰岛素受体底物-1在子宫内膜癌的发生、发展中可能起着重要的调节作用。     

NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞Snail、MMP-2表达的影响

目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞Snail、MMP-2表达的影响,探讨选择性COX-2抑制剂NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞侵袭力的影响机制。方法:以不同浓度的NS-398作用于人卵巢癌细胞,MTT法测定NS-398药物的浓度对SW626细胞的生长抑制作用,实时荧光定量PCR法分别检测NS-398作用于人卵巢癌细胞株SW626的Snail以及MMP-2的mRNA的表达水平,免疫细胞化学在蛋白水平定性检测Snail以及MMP-2的表达情况。结果:MTT法测定结果显示:NS-398对SW626细胞有明显的生长抑制作用,并呈剂量依赖性和时间依赖性;RT-PCR半定量结果显示:NS-398可使人卵巢癌细胞株SW626Snail蛋白和MMP-2的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降,呈浓度依赖关系(P<0.05),各实验组相比较有统计学意义(P<0.05)。结论:选择性COX-2抑制剂NS-398能够抑制人卵巢癌细胞株SW626的Snail蛋白和MMP-2表达,使Snail以及MMP-2表达下调,这可能是其抑制人卵巢癌细胞株SW626肿瘤细胞侵袭力的机制之一。     

幽门螺杆菌诱导人胃黏膜细胞GES-1过表达COX-2的研究

目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)对人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖和COX-2表达的影响。方法 GES-1细胞与Hp共培养后不同时间段,采用MTT法检测GES-1细胞增殖的动态变化;采用RT-PCR技术分析GES-1细胞COX-2mRNA的表达水平;采用ELISA检测GES-1细胞培养上清液中COX-2的蛋白水平。结果 Hp在低浓度(1×102、1×103cfu/ml)时,可以不同程度地促进人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖,但在高浓度(1×105、1×106cfu/ml)时,细胞的增殖活性逐渐受到抑制。在共培养后24～48 h,GES-1细胞的COX-2 mRNA表达和上清液中的蛋白含量均明显升高。结论在体外培养条件下,Hp能调节GES-1细胞的增殖活性,并能上调COX-2的表达。     

E-cadherin、Cyclin D1和Cyclin E在叶绿酸抗细胞恶变中表达研究

目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT-PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各组细胞E-cadherin基因mRNA表达差异;荧光细胞免疫化学技术检测E-cadherin、Cyclin D1及Cyclin E蛋白水平。结果反式-BPDE诱导恶变细胞组出现E-cadherin基因在mRNA和蛋白水平表达缺失,而经叶绿酸抗转化组该基因表达正常。Cyclin D1、Cyclin E蛋白在正常对照组中表达阴性,而在反式-BPDE恶性转化组中上述两种蛋白呈现高表达,通过叶绿酸干预抗转化组中其表达明显下调。结论叶绿酸抗反式-BPDE致细胞恶变作用与其避免抑癌基因E-cadherin的表达缺失有关。叶绿酸在拮抗反式-BPDE致癌中具有影响细胞周期素CyclinD1和CyclinE表达作用。     

明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠肝细胞胰岛素受体与胰岛素受体底物-2 mRNA表达的影响

目的研究明日叶查尔酮(Ashitabe chalcone,AC)对糖尿病大鼠肝细胞胰岛素受体(insulin receptor,InsR)和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)mRNA表达的影响。方法将用高脂饲料喂养加链尿佐菌素腹腔注射诱发的2型糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组和高、低剂量AC组,每组10只,均喂饲高脂饲料,分别每日经口灌胃给予明日叶查尔酮的剂量为0、30、10 mg/kg。另设一个正常对照组为正常大鼠喂饲普通饲料,实验周期4 w。用放射免疫分析法检测血清胰岛素水平、逆转录聚合酶链式反应方法检测肝细胞InsR和IRS-2 mRNA表达水平、免疫组化法测肝细胞InsR蛋白表达水平、葡萄糖氧化酶法测血糖含量。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组空腹血糖和血清胰岛素升高,而InsR和IRS-2 mRNA表达水平降低。与糖尿病组比较,高剂量AC组空腹血糖和血清胰岛素降低,而InsR和IRS-2mRNA表达水平升高,各项差异均有显著性意义(P<0.05)。结论明日叶查尔酮可上调2型糖尿病大鼠肝细胞InsR和IRS-2mRNA表达水平,改善胰岛素抵抗状况。     

Chronic prenatal ethanol exposure alters expression of central and peripheral insulin signaling molecules in adult guinea pig offspring

Maternal ethanol consumption during pregnancy can produce a range of teratogenic outcomes in offspring. The mechanism of ethanol teratogenicity is multi-faceted, but may involve alterations in insulin and insulin-like growth factor (IGF) signaling pathways. These pathways are not only important for metabolism, but are also critically involved in neuronal survival and plasticity, and they can be altered by chronic prenatal ethanol exposure (CPEE). The objective of this study was to test the hypothesis that CPEE alters expression of insulin and IGF signaling molecules in the prefrontal cortex and liver of adult guinea pig offspring. Pregnant Dunkin-Hartley-strain guinea pigs received ethanol (4 g/kg maternal body weight/day) or isocaloric-sucrose/pair-feeding (nutritional control) throughout gestation. Fasting blood glucose concentration was measured in male and female offspring at postnatal day 150–200, followed by euthanasia, collection of prefrontal cortex and liver, and RNA extraction. IGF-1, IGF-1 receptor (IGF-1R), IGF-2, IGF-2 receptor (IGF-2R), insulin receptor substrate (IRS)-1, IRS-2, and insulin receptor (INSR) mRNA expression levels were measured in tissues using quantitative real-time PCR. The mean maternal blood ethanol concentration was 281 ± 15 mg/dL at 1 h after the second divided dose of ethanol on GD 57. CPEE resulted in increased liver weight in adult offspring, but produced no difference in fasting blood glucose concentration compared with nutritional control. In the liver, CPEE decreased mRNA expression of IGF-1, IGF-1R, and IGF-2, and increased IRS-2 mRNA expression in male offspring only compared with nutritional control. Female CPEE offspring had decreased INSR hepatic mRNA expression compared with male CPEE offspring. In the prefrontal cortex, IRS-2 mRNA expression was increased in CPEE offspring compared with nutritional control. The data demonstrate that CPEE alters both central and peripheral expression of insulin and IGF signaling molecules at the mRNA level, which may be related to metabolic dysregulation in adult offspring. Furthermore, altered insulin and IGF signaling may be a mechanism of ethanol neurobehavioral teratogenicity.     

Gastric bypass up-regulates insulin signaling pathway

Objective

In the severely obese, Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) reverses diabetes before body weight loss occurs. We determined changes in protein expression of insulin receptor (IR), its substrates (IRS1 and IRS2), and their phosphorylated state (p-IR and p-IRS1/2) in skeletal muscle (SM), liver and adipose tissue (AT), and GLUT4 in SM and AT, 14 and 28 d after RYGB to gaining insight into the time-related dynamics of insulin transduction pathway that may contribute to diabetes resolution.

Background

RYGB induces a rapid weight loss followed by a slower weight loss period, leading to reversal of diabetes. We hypothesize that diabetes reversal is due to RYGB-induced up-regulation of insulin signaling pathway.

Methods

Diet-induced obese rats had RYGB or sham-operation (obese-controls). Daily food intake, body weight, glucose, insulin, and adiponectin were measured. IR, IRS1, IRS2, p-IR, and p-IRS1/2 were measured in SM, liver, and AT and GLUT4 in SM and AT, 14 and 28 d after RYGB, respectively, reflecting the rapid and slower weight loss periods after RYGB.

Results

On day 14, in RYGB rats versus obese-controls, food intake, body weight, and fat mass decreased. Rats became normo-glycemic and had low insulin levels and elevated glucose:insulin ratio and decreased adiponectin concentrations. This persisted to day 28, except that adiponectin rose. No change in IR occurred on day 14, in RYGB rats versus obese-controls. By day 28 RYGB rats had a higher IR expression in SM and liver, but no changes in AT. RYGB induced a time-related increase in p-IR in liver and in pIRS1/2 in SM and liver. An increase in GLUT4 occurred by day 28 in SM and AT.

Conclusions

Improvement in diabetes occurred after RYGB due to up-regulation in key insulin pathway proteins at several levels, predominantly in SM and liver in association with ongoing caloric restriction, body weight, and fat mass loss.     

宿主因子CD63对人轮状病毒SA11体外复制的影响

目的 测定轮状病毒2种宿主细胞内CD63的高低表达对病毒体外复制的影响,为探究轮状病毒与宿主因子CD63的相互作用机制奠定基础。方法 构建CD63沉默表达质粒shRNA - 4038、shRNA - 4041和过表达质粒pcDNA3.1（+） - CD63 - flag（CD63 - Flag）。质粒转染轮状病毒2种宿主细胞CV - 1和MA104,采用实时定量PCR（RT - qPCR）和western blot检测CD63 mRNA和蛋白的表达,筛选CD63高表达细胞株（CD63 - H）和低表达细胞株(CD63 - L)。轮状病毒SA11感染CD63 - L、CD63 - H、正常对照细胞组（CNr）及空白对照细胞组（shNC）,采用RT - qPCR、western blot检测病毒基因拷贝数和病毒蛋白表达。结果 细胞转染shRNA - 4038和shRNA - 4041质粒后, CD63的表达明显抑制,其中CV - 1细胞mRNA和蛋白水平抑制效率分别为69.7%和39.8%,MA104细胞mRNA和蛋白水平抑制效率分别为76.4%和49.3% ;CD63 - H组细胞内CD63的mRNA和蛋白表达明显增加（P＜0.05）。采用滴度为8logFFU/ml的SA11病毒感染细胞后,CD63 - L组病毒基因拷贝数下降32.6%（CV - 1）和35.7%（MA104）;病毒蛋白表达水平下降41.6%（CV - 1）和44.7%（MA104）;CD63 - H组病毒基因拷贝数和蛋白表达水平明显增加,对照组病毒表达量无明显变化（P＜0.05）。结论 宿主因子CD63高表达能够促进病毒复制,而CD63抑制表达后,病毒复制明显下降。宿主因子CD63的表达与轮状病毒复制呈现正相关。