应用荧光定量PCR产前诊断21三体综合征

目的　建立荧光定量PCR技术产前检测 2 1三体综合征。方法　采用PCR方法同时扩增位于 2 1号染色体上的人肝型磷酸果糖激酶基因 (humanliver typephosphofructokinasegene ,PFKL CH2 1 )和位于 1号染色体上的人肌型磷酸果糖激酶基因(humanmuscle typephosphofructkinasegene ,PFKM CH1 ) ,使用SYBRGreenⅠ荧光染料处理产物、琼脂糖电泳后在凝胶成像系统进行分析 ,得出扩增产物的荧光强度对比值。用此方法检测 2 0例 2 1三体综合征患儿和 2 1例正常人外周血及 1 1例孕妇绒毛或脐带血。结果　 2 6例 2 1三体综合征患儿PFKL CH2 1 /PFKM CH1 扩增产物的荧光强度对比值为 1 5 98± 0 1 78,而正常人PFKL CH2 1 /PFKM CH1 扩增产物的荧光强度对比值为 1 0 0 0± 0 0 5 0 ,两者间差别有显著意义。 1 0例孕妇绒毛或脐带血细胞DNA的PFKL -CH2 1 /PFKM -CH1 扩增产物的荧光强度对比值均在 1 0 0± 0 1 0之间 (正常人 x± 2SD) ,1例为 1 5 8,与染色体核型分析结果相符合。结论　SYBRGreenⅠ荧光定量PCR技术产前检测 2 1三体综合征具有准确、快速、安全、实用等特点 ,有较高的临床使用价值。     

印记基因H19和IGF-Ⅱ mRNA在新生儿胎盘中的表达与出生体质量的关系

目的 研究新生儿胎盘中印记基因H19和胰岛素样生长因子Ⅱ基因(W,F-Ⅱ gene)mRNA的表达,探讨印记基因H19和IGF-Ⅱ与出生体质量的关系.方法 收集无妊娠期并发症及无胎盘脐带异常的足月儿新鲜胎盘共30例,其中正常出生体质量儿12例、巨大儿10例,足月小样儿8例,采用实时荧光定量PCR方法检测以上标本中H19和IGF-Ⅱ mRNA表达.结果 H19基因在胎盘中表达与出生体质量呈负相关(r=-0.403,P=0.027),IGF-Ⅱ基因在胎盘中表达与出生体质量呈正相关(r=0.444,P=0.014);巨大儿组胎盘中H19 mRNA表达(0.21±0.31)较足月小样儿组(1.51±2.04)明显减少(P=013);巨大儿组胎盘中IGF-Ⅱ mRNA表达(2.67±3.41)较足月小样儿组(0.39±0.33)明显增加(P=0.013).结论 印记基因H19与IGF-Ⅱ的表达在不同出生体质量儿胎盘中差别明显,两基因与出生体质量的影响机制相关,且两基因之间存在一定相互关系.     

家族性圆柱瘤基因在病理性瘢痕中的表达

目的:探讨家族性圆柱瘤基因(cylindromatosis,CYLD)在病理性瘢痕组织及成纤维细胞中的表达及意义。方法:收集临床手术切除的皮肤标本72例,分为正常皮肤组(20例)、正常瘢痕组(14例)、瘢痕疙瘩组(25例)、增生性瘢痕组(13例)。免疫组织化学技术(SP法)和Western blot检测各组织中CYLD蛋白的表达情况并对结果进行差异比较;另收集瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及周围正常皮肤组织各10例,采用组织块贴壁法进行原代成纤维细胞培养,Western blot测定CYLD蛋白在3种成纤维细胞中的表达情况。结果:1免疫组化结果表明CYLD蛋白在A组(0.762±0.039)与B组(0.721±0.042)中的阳性表达明显高于C组(0.173±0.069)与D组(0.213±0.072),(F=213.832,P=0.000);C组、D组分别与A组比较(P值均为0.000),C组、D组分别与B组比较差异均具有统计学意义(P值均为0.000);2Western blot结果显示CYLD蛋白在正常皮肤(0.550±0.030)与正常瘢痕组织(0.442±0.016)中的表达明显高于瘢痕疙瘩(0.068±0.013)与增生性瘢痕(0.178±0.009)(F=424.685,P=0.000);3CYLD蛋白在正常成纤维细胞(0.564±0.037)中的表达同样明显高于瘢痕疙瘩(0.240±0.022)与增生性瘢痕成纤维细胞(0.256±0.038)(F=90.306,P=0.000)。结论:CYLD蛋白在病理性瘢痕成纤维中的表达低于正常皮肤与正常瘢痕,说明CYLD的低表达可能与病理性瘢痕的形成具有一定的关系。     

鼻喷激素与白三烯受体拮抗剂治疗儿童腺样体肥大临床观察比较

目的:探讨并比较儿童腺样体肥大患者使用鼻喷激素或白三烯受体拮抗剂治疗的临床效果。方法:对我院2011年6月至2013年8月收治的160例腺样体肥大患儿,随机分为治疗组和对照组,治疗组分为鼻喷激素治疗组(雷诺考特)、白三烯受体拮抗剂治疗组(孟鲁司特钠)以及雷诺考特与孟鲁司特钠联用治疗组,每组患儿各40例,并观察临床症状指标评分及腺样体厚度/鼻咽腔宽度(Adenoido/Nasopharyngeal比值)的改变。结果:鼻喷激素治疗组患儿临床症状综合评分较对照组明显下降,分别为3.20±0.29、3.27±0.48及3.50±0.17,差异具有统计学意义(2组比较均P=0.000),腺样体厚度/鼻咽腔宽度比降至0.60以下;白三烯受体拮抗剂治疗组患儿临床症状综合评分较对照组明显下降,分别为3.49±0.45、3.61±0.32及3.41±0.39,差异具有统计学意义(两组比较均P=0.000),腺样体厚度/鼻咽腔宽度比降至0.71以下;联合治疗组患儿临床症状综合评分较对照组明显下降,分别为3.02±0.13、3.22±0.41及3.38±0.12,差异具有统计学意义(两组比较均P=0.000),腺样体厚度/鼻咽腔宽度比降至0.60以下;联合治疗组部分临床症状评分优于单独给药组(2组比较均P=0.000);联合治疗组改善腺样体体积疗效优于单独给药组(P分别为0.05、0.001及0.001)。结论:鼻喷激素(雷诺考特)与白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特钠)能有效改善儿童腺样体肥大患者的临床症状,且联合治疗组疗效优于单独给药组。     

乙型肝炎病毒X基因在肝细胞肝癌及慢性乙型肝炎肝细胞染色体上整合情况的对照研究

目的:应用染色体制备和生物素原位杂交技术,研究乙型肝炎病毒X(HBx)基因在肝细胞肝癌(HCC)细胞染色体上的整合,并与慢性乙型肝炎(CHB)进行对比分析,了解HBx基因在肝细胞染色体上的整合与HCC发生的相关性.同时探讨在HCC与CHB患者中乙肝血清标志物差异及HBx整合与乙肝血清标志物之间的相关性.方法:HCC患者19例,CHB患者14例,分别获取手术或肝穿刺标本并制备成染色体载玻片,以生物素标记的HBx基因探针进行原位杂交,同时统计分析其乙肝血清标志物资料.结果:①19例HCC中有13例患者的肝细胞分裂期染色体上可观察到杂交信号,占68.24%,明显高于CHB组,差别有统计学意义(χ2=5.12,P＜0.05),肝癌患者肝细胞染色体上HBx整合位点数为3.80±1.36,而CHB患者肝细胞染色体上整合位点数为1.30±0.36,二者差别具有极显著性(t=3.5,P＜0.01).②乙型肝炎e抗原(HBeAg)在CHB患者中阳性率为80.0%,明显高于HCC组(10.53%),差别有统计学意义(χ2=6.33,P＜0.01).③HCC及CHB患者HBx整合与否与患者乙肝血清标志物未见明显相关性.结论:①HBx基因在HCC细胞染色体上的整合明显高于CHB;②CHB患者乙肝病毒复制较HCC患者活跃;③HBx基因整合与否与HCC及CHB乙肝血清标志物未见明显关系.     

自然流产患者蜕膜组织TH1/TH2型细胞的变化

目的观察蜕膜TH1、TH2型细胞在早期自然流产患者中的变化,探讨β-HCG、孕酮与TH1、TH2在自然流产发生中的关系。方法正常早孕组15例,自然流产组20例。采用流式细胞仪检测蜕膜组织CD4 细胞胞内因子IFN-γ和IL-4,用微粒子化学发光法检测外周血β-HCG、孕酮。结果1自然流产组蜕膜组织TH1细胞为(25.45±15.27)%,比正常早孕组(15.26±12.16)%明显增加(P=0.027);TH1/TH2比值为(27.32±15.21)%,较正常早孕组(3.46±3.69)%明显增加(P=0.000);TH2细胞在正常早孕组为(3.89±4.94)%,自然流产组为(2.13±2.00)%,差异无统计学意义(P=0.214)。2自然流产组血β-HCG浓度明显低于正常早孕组(z=-4.527,P=0.000);自然流产组血清孕酮浓度明显低于正常早孕组(t=-5.633,P=0.000)。3β-HCG、孕酮分别与IFN-γ呈负相关,β-HCG、孕酮分别与IFN-γ/IL4呈负相关,β-HCG、孕酮与IL4均无相关关系。结论不明原因早期自然流产患者蜕膜TH1/TH2细胞平衡向TH1细胞为主的模式转化,HCG、孕酮减少可能与TH1、TH2细胞变化互为因果。     

乳腺癌17号染色体多体与HER2基因扩增及预后因素的相关性

目的 分析乳腺癌17号染色体多体与HER2基因扩增及预后因素的相关性,探讨其临床意义.方法 采用免疫组化(IHC)技术检测120例浸润性乳腺癌患者HER2蛋白表达情况,选择IHC结果为( + + )及( + + + )的患者92例行荧光原位杂交(FISH)检测其HER2基因扩增及17号染色体多体.结果 58.7%(54/92)的患者出现HER2基因的扩增,免疫组化( + + )、( + + + )的病例所占比例分别为72.8%(67/92)、27.2%(25/92);FISH与免疫组化检测在HER2蛋白( + + )、( + + + )的符合率分别为47.8%(32/67)、88%(22/25);20.7%的患者存在17号染色体多体,HER2基因扩增组出现17号染色体多体的概率比HER2基因无扩增组更高(P<0.01);存在17号染色体多体的患者其淋巴结转移率更高;17号染色体多体与肿瘤最大直径及组织学分级无相关性.结论 HER2免疫组化( + + )的患者建议行FISH检测.17号染色体多体与HER2基因扩增相关,且可能是导致HER2基因扩增的原因之一.17号染色体多体可能提示乳腺癌的预后.     

C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的:研究C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义.方法:应用组织芯片技术制作正常结直肠、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用免疫组织化学SP法检测C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数.结果:C-erb B-2的标记率(%)在结直肠癌组织(45.62±4.27)明显高于正常结直肠组织(15.53±1.43)及腺瘤组织(22.47±2.19)(P＜0.01),后两者无显著性差异(P＞0.05);结直肠癌C-erb B-2标记率与分化程度(rs=0.525,P=0.000)、Dukes分级(rs=0.473,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.540,P=0.000)呈正相关.结直肠癌C-erb B-2表达与转移抑制蛋白nm23表达(rs=-0.403,P=0.000)和靶蛋白p53表达(rs=-0.357,P=0.000)呈负相关;结直肠癌C-erb B-2表达与凋亡抑制蛋白bcl-2表达呈正相关(rs=0.628,P=0.000);结直肠癌C-erb B-2表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(F=57.81,P＜0.01).结论:结直肠腺癌中原癌基因C-erb B-2和bcl-2蛋白的过表达,抑癌基因nm23和bcl-2的表达缺失共同参与了肿瘤的发生,发展,浸润,转移,联合检测上述标志物有一定的临床意义.     

FHIT蛋白和p21蛋白在外阴尖锐湿疣、外阴上皮内瘤变中的表达

目的:探讨FHIT和p21蛋白在外阴尖锐湿疣(Vulvar condyloma acuminatum,VCA)、外阴上皮内瘤变(Vulvar intraepi thelial neoplasia,VIN)及正常外阴组织中的表达情况.方法:采用免疫组化(SP)法检测51例VCA,39例VIN及20例正常外阴组织中的脆性组氨酸三联体基因(Fagih histidine triad,FHIT),p21的表达.结果:FHIT在VCA组和VINI～Ⅱ,VINⅢ中的阳性率明显低于正常组(P=0.000 1);FHIT在VCA组和VINⅢ组阳性率无统计学意义(P=0.592);p21在正常外阴、VIN和VCA组中阳性率差异有统计学意义(P=0.000 1);p21在正常外阴、VIN阳性率无统计学意义(P=0.793),而在VIN和VCA中差异有统计学意义(P=0.000 1).结论:(1)FHIT和p21基因异常表达与VCA和VIN的发生发展有关.(2)FHIT基因异常是外阴癌变过程中的早期事件.     

氨基末端脑钠肽前体与冠状动脉病变相关性分析

目的探讨氨基末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)与冠状动脉病变的相关性。方法入选笔者医院2012年6月~2014年2月诊断为急性ST段抬高型急性心肌梗死(ST-elevation myocardial infarction,STEMI)患者157例,根据患者血中NTpro BNP水平分为NT-pro BNP正常组(NT-pro BNP<780pg/ml)78例、NT-pro BNP升高组(NT-pro BNP>780pg/ml)79例。统计患者入院基本临床资料,所有患者均检测肌钙蛋白(c Tn I)、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),根据冠状动脉狭窄直径≥50%累及左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)、右冠状动脉(RCA)或左主干(LM)分为单支、双支(累及左主干为双支病变)及3支病变组,根据Gensini积分标准对每位患者冠状动脉病变进行评分。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用两独立样本t检验,计数资料采用率表示,组间比较用χ2检验,NT-pro BNP水平与冠状动脉Gensini积分相关性采用线性相关分析。结果与NT-pro BNP正常组相比,NT-pro BNP升高组患者冠状动脉病变情况在总体上差异有统计学意义(P=0.000),以冠状动脉无病变组作为对照组,单支病变组、两支/左主干病变组和3支病变组与对照组相比,差异均有统计学意义(P=0.004,P=0.000,P=0.000);NT-pro BNP升高组患者平均冠状动脉病变支数更多(1.22±0.84 vs 2.08±0.82,P=0.000),Gensini积分更高(24.83±22.31 vs 54.60±29.13,P=0.000);NT-pro BNP与Gensini积分存在相关关系(r=0.648,P=0.000)。结论冠状动脉病变程度与NT-pro BNP存在一定关系,可以用血中NT-pro BNP水平预测冠状动脉病变程度。     

巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄前后血管内膜的变化

目的观察巨噬细胞和组织血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近远端血管内膜的变化情况。方法25只新西兰大白兔随机分为对照手术组(n=10)、高脂手术组(n=10)、高脂假手术组(n=5),饲养28周后,对照手术组和高脂手术组行腹主动脉缩窄术,高脂假手术组行假手术。术后继续以原来的饲养方法饲养4周,在测量狭窄近远端压力后获取标本。采用HE染色和免疫组织化学分析检测血管内膜厚度、巨噬细胞数量、血管紧张素Ⅱ水平。结果平均内膜厚度(μm):高脂手术组狭窄近端(204.7±8.3)较高脂假手术组相同位置(175.8±4.3)增厚(P=0.001);而高脂手术组狭窄远端(140.1±1.3)较高脂假手术组相同位置(166.2±5.1)厚度降低(P=0.000)。巨噬细胞数量(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较狭窄远端(0.16±0.04)显著升高(P=0.000);高脂手术组狭窄近端(0.31±0.05)较高脂假手术组相同位置(0.20±0.02)显著升高(P=0.000)。组织血管紧张素Ⅱ水平(/μm):高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较狭窄远端(0.12±0.01)显著升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.26±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.17±0.01)明显升高(P=0.000),高脂手术组狭窄近端(0.12±0.01)较高脂假手术组狭窄远端(0.15±0.02)明显降低(P=0.000)。结论在动脉粥样硬化兔腹主动脉狭窄近端,压力增高,血管组织内膜厚度和巨噬细胞数量增加,血管紧张素Ⅱ水平明显升高;在狭窄远端,血管组织内膜厚度变薄,巨噬细胞数量减少,血管紧张素Ⅱ水平降低。     

GLP-1通过Par-4/NF-κB途径改善2型糖尿病胰岛β细胞凋亡

目的:观察GLP-1对糖尿病小鼠中Par-4/NF-κB的表达和胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将小鼠随机分成正常对照组(8只,C组)、Par-4敲除组(8只,CP组)、糖尿病组(8只,D组)、糖尿病Par-4敲除组(8只,DP组)、GLP-1+糖尿病组(8只,GD组)、GLP-1+糖尿病Par-4敲除组(8只,GDP组),TUNEL法检测各组细胞凋亡,Western blot检测各组细胞Par-4和NF-κB蛋白表达水平,ELISA检测各组胰岛素分泌。结果:C组凋亡率(P=0.965)和NF-κB(P=0.754)与CP组比较无统计学差异,胰岛素分泌无统计学差异(P=0.797);与C组和CP组比较,D组凋亡率(P=0.000)、Par-4(P=0.000)和NF-κB(P=0.000)表达明显升高,胰岛素分泌下降(P=0.000);与D组相比,DP组和GD组细胞凋亡率(P=0.000,P=0.000)、Par-4(P=0.000,P=0.000)和NF-κB(P=0.000,P=0.002)表达明显下降,胰岛素分泌有所改善(P=0.000,P=0.026);与GD组比较,GDP组凋亡率...     

精子染色质扩散试验及末端转移酶标记法检测精子脱氧核糖核酸完整性

目的 比较精子染色质扩散试验(SCD)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测精子DNA完整性.方法 对20名已生育的成年健康男性和32例不育患者的精液用上游法筛选得到活动精子,同时进行SCD和TUNEL.结果 不育组和生育组DNA损伤精子百分率的SCD检测结果分别为(12.8±5.8)%和(7.6±3.3)%,2组比较差异有统计学意义(t=3.576,P=0.001);TUNEL检测结果分别为(11.1±5.1)%和(6.8±2.8)%,2组比较差异有统计学意义(t=3.467,P=0.001).SCD与TUNEL检测结果在不育组(r=0.841,P=0.000)和生育组(r=0.823,P=0.000)均具有明显的线性相关关系.生育组SCD检测结果与TUNEL检测结果比较差异无统计学意义(t=1.996,P=0.060),而不育组SCD检测结果明显高于TUNEL检测结果,差异有统计学意义(t=3.023,P=0.005).结论 精子DNA损伤与男性不育有关.与TUNEL比较,SCD是一种更为准确、简单、廉价的检测精子DNA完整性的方法.     

X线照射对U87胶质瘤多细胞球体MMP-2活性及Cho/Cr的影响

目的构建胶质瘤细胞系U87的多细胞球体(MCS)模型,探讨不同剂量的X线对胶质瘤多细胞球体上清液基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性和水溶性代谢物的影响。方法采用琼脂糖培养法建立U87多细胞球体模型;用0、1、5、10 Gy的X线分别照射多细胞球体,0 Gy组作为对照组,利用高氯酸提取细胞中水溶性代谢物[胆碱(Cho)、肌酸(Cr)、N-乙酰天门冬氨酸(NAA)],采用14.7T高场强磁共振仪获取水溶性代谢物波谱;采用明胶酶谱法测量U87多细胞球体上清中MMP-2活性。结果成功建立了U87多细胞球体模型;多细胞球体在1、5、10 Gy X线照射下的胆碱与肌酸比值(Cho/Cr)分别为2.74±0.02、4.32±0.17、4.92±0.07,与对照组(2.10±0.29)比较,细胞内水溶性代谢物比值Cho/Cr升高(P=0.033,P=0.000,P=0.000);多细胞球体在0~10 Gy X线照射范围内,随着照射剂量的增加,细胞M M P-2活性增加。与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论亚致死剂量的X线可导致U87胶质瘤多细胞球体MMP-2活性增高,Cho/Cr升高。     

促肾上腺皮质激素受体检测和肿瘤细胞超微结构观察在肾上腺皮质肿瘤亚型诊断中的应用价值

目的评估促肾上腺皮质激素受体(ACTH-R)检测和肿瘤细胞超微结构观察在肾上腺皮质肿瘤亚型诊断中的应用价值。方法采用Polymer免疫组织化学染色方法检测87例肾上腺皮质肿瘤组织中的ACTH-R表达情况,并以10例正常肾上腺组织作为对照;电子显微镜观察肿瘤细胞的超微结构,比较超微结构间的差异。结果 sub-CPA组、CPA组、APA组、NFA组和NC组的ACTH-R阳性表达率分别为(80.1±8.2)%、(53.2±10.3)%、(63.2±10.1)%、(83.3±6.5)%和(70.1±7.3)%,其中,NFA组和sub-CPA组均明显高于NC组(P=0.001,P=0.000)、APA组(P=0.000,P=0.000)及CPA组(P=0.000,P=0.000),NC组明显高于APA组(P=0.039),APA组明显高于CPA组(P=0.037),NFA与sub-CPA组间差异无统计学意义(P=0.325)。透射电子显微镜观察结果显示,肾上腺皮质肿瘤具有部分相似的超微结构,但不同亚型肾上腺皮质肿瘤细胞内分泌颗粒的类型和数量存在差异。结论 ACTH-R检测和肿瘤细胞超微结构观察可用于区分不同分泌功能的肾...     

子宫内膜癌组织Syk基因的表达及其甲基化分析

目的 探讨脾酪氨酸激酶(Syk)基因在子宫内膜癌组织表达及该基因启动子甲基化与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应检测52例子宫内膜癌组织及其癌周正常组织中Syk基因的表达,同时采用巢式双重甲基化特异性PCR(MSP)方法检测该基因启动子甲基化情况.结果 Syk基因在子宫内膜癌中的表达显著低于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因表达率显著低于无淋巴结转移组(χ2=8.32,P<0.01).Syk基因启动子甲基化发生率在子宫内膜癌组织中明显高于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组(χ2=8.15,P<0.01);发生甲基化的肿瘤组织中,均无Syk mRNA的表达.结论 Syk基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,Syk基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌发生发展有关.     

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与精神分裂症关联分析

目的探测中国汉族人儿茶酚O-甲基转移酶(COMT)基因第108位密码子由缬氨酸到甲硫氨酸突变的多态性与精神分裂症的关系.方法应用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)技术,检测309例精神分裂症患者(患者组)和367名正常人(对照组)的COMT基因多态性.结果 (1)患者组COMT等位基因A频率(23.78%)低于对照组( 30.93% ),等位基因G频率(76.22%)高于对照组(69.07%),差异均有非常显著性(P=0.003).按性别比较,等位基因A和G频率在两组男性之间的差异均具显著性(P=0.02),而两组女性间的差异则不具显著性(P=0.073).(2)COMT基因A/A基因型频率两组的差异无统计学意义(P=1.000,P=0.815).患者组及其男性和女性的A/G基因型频率(分别为39.80%、40.75%和39.35%)均低于对照组(分别为53.68%、55.76%和51.98%);P=0.000, P=0.006,P=0.018.患者组及其男性和女性的G/G基因型频率(分别为56.32%、57.15%和55.48%)均高于对照组(分别为42.23%、41.21%和43.07%);P=0.000、P=0.004和P=0.020.结论该结果提示,在我们研究的样本中COMT108Met多态性与精神分裂症关联.所以,不能排除中国汉人22号染色体存在精神分裂症易患性基因的可能性.     

多发性硬化眼部视网膜神经纤维层厚度变化的研究

目的:通过对视网膜正常者视网膜神经纤维层厚度以及多发性硬化患者视网膜厚度的差异性研究,探讨多发性硬化患者视神经损害的诊断方法。方法:采用OCT检测并比较MS患者及正常人视网膜上方、下方、颞侧及鼻侧的神经纤维层厚度。结果:60例检查的病例中,MS组和视网膜正常组在年龄,性别构成以及眼压之间差别无统计学意义,说明两组之间均衡可比。MS组患者与正常人组眼部上方的神经纤维层的厚度分别为(117.24±10.34)μm,(140.15±8.24)μm,P<0.05;下方分别为(117.24±10.34)μm,(137.31±10.03)μm,P=0.000;颞侧分别为(74.98±1.21)μm,(89.9±14.14)μm,P=0.000;鼻侧分别为(89.9±14.12)μm,(88.45±1.01)μm,P=0.000,差别均有统计学意义。结论:OCT测量RNFL厚度具有较好可重复性,有助于多发性硬化的早期诊断和随访观察     

mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞A20生物学特性的影响

目的探究mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞生物学特性的影响。方法采用MTT法和流式细胞仪检测mCD99L2基因沉默前后干扰组A20-LV-mCD99L2和未干扰组A20细胞的增殖率和细胞周期;Transwell法测定两组细胞的体外侵袭能力;采用裸鼠与BALB/c鼠皮下成瘤实验观察比较两组细胞在体内的成瘤时间和成瘤率。结果MTT法显示干扰组A20-LV-mCD99L2增殖率为(0.61±0.12),低于未干扰组增殖率(0.75±0.20),差异有统计学意义(P=0.000);干扰组A20-LV-mCD99L2处于G2期的细胞比例为(10.58±4.97),高于未干扰组(3.33±1.31),差异有统计学意义(P=0.009);Transwell法显示干扰组A20-LV-mCD99L2运动能力较未干扰组下降。裸鼠皮下成瘤时间干扰组(13.33±4.63)d长于未干扰组(9.50±2.90)d,成瘤率均为100%;BALB/c鼠皮下成瘤时间干扰组(10d)长于未干扰组(7.0±0.82)d,成瘤率干扰组为14.3%,显著低于未干扰组(100%),差异有统计学意义(P=0.000)。结论mCD99L...     

鸢尾素通过自噬对棕榈酸诱导的INS-1细胞功能和凋亡的影响

目的:探讨鸢尾素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的胰岛β细胞功能和凋亡的影响.方法:培养INS-1细胞,用不同浓度梯度的鸢尾素干预INS-1细胞,根据蛋白结果筛选出最佳鸢尾素干预浓度为1500 ng/mL.然后将INS-1细胞分为正常组、PA组、PA+1500 ng/mL鸢尾素组、PA+1500 ng/mL鸢尾素+雷帕霉素组、PA+1500 ng/mL鸢尾素+3-MA组.用3.3 mmol/L和16.7 mmol/L的葡萄糖浓度刺激检测干预后胰岛素的分泌水平,Western blot检测自噬相关蛋白p-mTOR、mTOR、p62、LC3Ⅱ、LC3 Ⅰ的蛋白水平,用mGFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平.结果 采用SPSS 20.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,多组间差异比较采用单因素方差分析及Turkey HSD检验.结果 :①PA组LC3Ⅱ/Ⅰ的比值较正常组增高(0.745±0.035 vs.1.015±0.012,P=0.000),随着鸢尾素干预浓度增加,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平较PA组逐渐升高且有统计学意义(Ⅰ1组1.465±0.028,Ⅰ2组2.269±0.063,I3组1.858±0.074,I4组2.355±0.074,均P=0.000),鸢尾素浓度为1500 ng/mL时LC3Ⅱ/Ⅰ的水平最高.②PA组INS-1细胞上清液中胰岛素水平在3.3 mmol/L和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下较正常组均下降[(0.447±0.067) ng/mL vs.(0.138±0.012) ng/mL,P-0.000;(0.625±0.041) ng/mL vs.(0.245±0.043) ng/mL,P=0.000],鸢尾素干预后胰岛素水平较PA组均升高[(0.138±0.012) ng/mL vs.(0.322±0.041) ng/mL,P-0.001;(0.245±0.043) ng/mL vs.(0.414±0.036) ng/mL,P=0.005].③与正常组相比,PA干预细胞后,自噬体数量增加(2.33±1.53 vs.10.33±1.53,P=0.000),而自噬溶酶体数量无明显变化(2.33±1.53 vs.3.33±1.53,P=0.939),鸢尾素干预后,自噬体数量和自噬溶酶体数量较PA组均升高(10.33±1.53 vs.15.67±1.53,P=0.007;3.33±1.53 vs.12.00±2.00,P=0.001).④与正常组相比,PA干预后细胞凋亡率增加[(11.417±1.297)％ vs.(46.507±0.525)％,P=0.000],鸢尾素干预后凋亡率降低[(46.507±0.525)％ vs.(33.767±1.083)％,P=-0.000].结论:鸢尾素通过自噬改善PA诱导的INS-1细胞分泌功能和凋亡.