二甲双胍激活AMPK通路减轻饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应

目的 观察二甲双胍对饱和脂肪酸(SFA)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应中炎性因子的影响及探讨其可能机制.方法 SFA干预RAW264.7巨噬细胞建立体外炎性反应模型;实验分为对照组、SFA干预组、二甲双胍+ SFA干预组、AMPK抑制剂Compound C+二甲双胍+SFA干预组;实时定量PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测TNF-α和IL-6蛋白的分泌,Western blot分析腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平.结果 与对照组比较,SFA干预组RAW264.7巨噬细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均显著升高(P＜0.05);与SFA组比较,二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达水平及蛋白分泌水平均降低(P＜0.05),而细胞AMPK的磷酸化水平增强(P＜0.05);与二甲双胍+SFA干预组比,Compound C+二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均升高,AMPK磷酸化水平降低(P＜0.05).结论 二甲双胍激活AMPK降低饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性因子TNF-α、IL-6的分泌.     

PPARγ配体4i通过抑制NF-κB和MAPK信号通路抑制小鼠巨噬细胞炎性细胞因子的产生

目的探讨新型过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)配体4i的体外抗炎作用及机制。方法取对数生长期RAW264. 7小鼠腹腔巨噬细胞,经100 ng/m L脂多糖(LPS)诱导,采用ELISA检测10μmol/L 4i对巨噬细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)分泌的影响;采用Western blot法检测4i对核因子κBp65(NF-κBp65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)活性的影响,加入不可逆的PPARγ拮抗剂GW9662(5μmol/L)探讨PPARγ在NF-κB和MAPK相关蛋白表达中的作用;采用SYBYL 8. 1软件进行分子对接分析探讨4i与PPARγ蛋白的结合特性。结果 4i显著抑制TNF-α和IL-6的产生呈时间依赖性;不同程度抑制NF-κBp65、IκBα、JNK、ERK1/2和p38MAPK蛋白的磷酸化水平,且抑制作用被GW9662所逆转; 4i能与PPARγ受体较好地结合。结论4i通过激活PPARγ抑制NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白的活化,抑制TNF-α、IL-6等的产生,发挥抗炎作用。     

二甲双胍对脂多糖致炎性反应小鼠的抗炎作用

目的探究二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)致炎性小鼠的抗炎效应。方法 ICR小鼠分为对照组、LPS组、二甲双胍高、中和低剂量组(400, 200和100 mg/kg)。对照组和LPS组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,其余3组注射不同剂量的二甲双胍;0.5 h后,除对照组外,其余4组腹腔注射等体积的LPS致小鼠炎性反应,6 h后测量小鼠的脾指数;ELISA检测小鼠血清中炎性因子IL-6、TNF-α和IL-10的表达;RT-PCR检测小鼠肝脏组织IL-6、TNF-α和IL-10 mRNA表达的变化;HE染色检测小鼠肝脏组织炎性反应变化。结果相对于LPS组,二甲双胍用药组小鼠的脾指数降低(P0.05);外周血IL-6和TNF-α及肝脏组织中IL-6和TNF-αmRNA的表达明显下降(P0.05);而外周血IL-10及肝脏组织中IL-10 mRNA显示上升(P0.05);二甲双胍高剂量组可明显减轻由LPS所致小鼠肝脏的炎性反应。结论二甲双胍对于LPS致炎性小鼠具有一定的抗炎活性。     

山姜素通过促进IL-6启动子CpG岛区域胞嘧啶甲基化并抑制表达

目的通过检测山姜素对鼠巨噬细胞(RAW246.7)IL-6启动子部位CpG岛二核苷酸甲基化修饰状态及IL-6合成的影响,揭示诱导甲基化修饰是山姜素调控炎症分子表达的重要机制。方法 RAW246.7按照不同干预分为对照组、山姜素组(终质量浓度分别为100、200、500μg/ml以及1 mg/ml)、山姜素+GW9662组以及山姜素+DNMT3A(DNA甲基转移酶3A)SiRNA组,孵育96 h后经亚硫酸氢钠处理。亚硫酸氢盐测序PCR分析IL-6启动子序列碱基信息,甲基化PCR分析以上序列中CpG二核苷酸甲基化修饰状态,Western blot法检测RAW246.7核内PPAR以及DNMT3A含量,ELISA法检测IL-6表达水平。结果经Cpgplot数据库确认鼠巨噬细胞IL-6转录起始点上游300～1 300 bp部位存在典型CpG岛,山姜素可呈剂量依赖性促进该岛内CpG二核苷酸甲基化修饰。山姜素可促进核内DNMT3A合成,GW9662可阻断促进作用,而干扰DNMT3A不影响PPAR表达;另外,GW9662以及DNMT3A干扰均可完全逆转山姜素对甲基化修饰的促进;但GW9662更明显恢...     

土荆皮乙酸对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及M1表型偏移的抑制作用

目的初步探讨土荆皮乙酸(PLAB)对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞抗炎作用及影响M1表型偏移的分子机制。方法 LPS诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型,给予0.5μmol/L PLAB和1μmol/L过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)阻滞剂GW9662处理。流式细胞术检测细胞周期变化,实时定量PCR检测PPARγ和M1型巨噬细胞标志物白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达,Western blot法检测核因子κB(NF-κB)信号通路相关信号分子水平。结果 PLAB能够明显降低LPS诱导RAW264.7细胞的IL-1β、TNF-α的mRNA水平,上调PPARγ的mRNA水平。下调NF-κB p65、p NF-κB p65、IKKα、IKKβ、p IKKα/β、IκBα、p IκBα的蛋白水平,使RAW264.7细胞阻滞在G0和G2期。GW9662可以抵抗PLAB的抗炎作用。结论 PLAB抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应并抑制巨噬细胞向M1表型偏移,与影响细胞周期分布、调控NF-κB/PPARγ通路有关。     

二甲双胍抑制p38MAPK/ATF2信号通路改善糖尿病大鼠认知功能障碍

目的 探索二甲双胍对糖尿病大鼠认知功能障碍的保护作用，探讨p38 MAPK/ATF2信号通路的作用。方法 30只SD大鼠随机分成空白组、模型组及二甲双胍组，每组10只。除空白组外均给予高糖高脂饲料，50 d后腹腔注射链脲佐菌素（STZ, 30 mg/kg）建立2型糖尿病脑病模型。模型制备成功后，二甲双胍组大鼠腹腔注射100 mg/kg二甲双胍，连续给药6周，空白组和模型组给予等体积蒸馏水。Morris水迷宫检测各组大鼠认知能力；HE染色观察海马区形态学变化；TUNEL染色检测神经元凋亡；Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase3以及p38 MAPK、p-p38 MAPK、ATF2蛋白的表达情况。结果 二甲双胍组大鼠逃避潜伏期明显缩短，目标象限停留时间延长，穿越平台次数相应增加，海马区神经细胞结构改善、神经元凋亡数量显著降低，Bax/Bcl-2比值和Cleaved-caspase3蛋白表达水平显著降低，二甲双胍还能够抑制p-p38 MAPK、ATF2蛋白的表达。结论 二甲双胍改善糖尿病大鼠认知功能，与抑制p38 MAPK/ATF2信号通路有关。     

二甲双胍对脂多糖诱发的血管内皮细胞炎性损伤的影响

目的探讨二甲双胍(Metformin, Met)对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱发的人主动脉内皮细胞HAEC炎性损伤的影响及作用。方法体外培养人主动脉内皮细胞株HAEC,随机分为4组:正常对照组,LPS组(1μg/mL LPS),2.5mmol/L Met预处理+LPS组,5 mmol/L Met预处理+LPS组。MTT法检测细胞生存活性;Western Blot检测细胞内cleaved-caspase-3的表达;ELISA法检测细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。实时PCR检测IL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA表达。结果与正常对照组相比,LPS组细胞生存率明显降低,细胞内的cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高,细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显升高。2.5mmol/L Met、5mmol/L Met预处理12h后,能显著减轻LPS诱发HAEC细胞炎性损伤,并存在剂量依赖性。而且细胞内的IL-1βmRNA、IL-6 mRNA、TNF-αmRNA表达明显低于LPS组。结论二甲双胍拮抗LPS诱发的HAEC细胞炎性损伤,与降低细胞内IL-1βmkHA、IL-6mkHA、TNF-αmRNA的表达,从而抑制炎症因子的释放相关。     

丝胶对Ⅱ型糖尿病模型大鼠脾干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α、白介素-4、白介素-10水平的影响

目的:观察丝胶对Ⅱ型糖尿病模型大鼠脾干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-4、IL-10水平的影响,以探讨其对免疫功能调节的可能机制。方法:小剂量链脲佐菌素连续腹腔注射建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型。SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。丝胶治疗组和二甲双胍组分别给予丝胶和二甲双胍灌胃治疗35 d。4组均采用葡萄糖氧化酶法检测Ⅱ型糖尿病模型大鼠血糖,免疫印迹和RT-PCR法分别检测脾IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10蛋白及mRNA的表达,并比较。结果:与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠血糖、脾IFN-γ和TNF-α的水平均明显升高,脾IL-4和IL-10的水平均明显降低。与模型组大鼠相比,丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠血糖、脾IFN-γ和TNF-α的水平均明显降低,脾IL-4和IL-10的水平均明显升高。结论:丝胶可通过下调脾IFN-γ和TNF-α的表达,上调IL-4和IL-10的表达,发挥免疫调节作用。     

羟考酮通过TLR4/p38MAPK通路抑制小胶质细胞的活化缓解大鼠骨癌痛北大核心CSCD

目的：通过制备骨癌痛大鼠模型,探究羟考酮是否通过调节Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）参与调控小胶质细胞活化,缓解大鼠骨癌痛。方法：选取72只SD健康大鼠,随机分为假手术组、骨癌痛组、阳性药物组、羟考酮高浓度组、羟考酮低浓度组、羟考酮+TLR4激活组,每组12只。术前1 h、术后3 d、5 d、7 d、10 d进行动物行为学检测,测定各组大鼠机械缩足反射阈值（MWT）、后足热缩足反射潜伏期（TWL）;ELISA检测各组大鼠脊髓TNF-α、IL-1β水平;免疫荧光染色法检测各组大鼠补体C3受体（OX-42）表达水平;Western blot检测各组大鼠脊髓TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK水平。结果：与假手术组相比,骨癌痛组大鼠术后各时间点TWL、MWT值显著降低,大鼠脊髓TNF-α、IL-1β、OX-42水平、TLR4蛋白表达量、p-p38MAPK/p38MAPK显著升高（P<0.05）;与骨癌痛组相比,阳性药物组、羟考酮高浓度组、羟考酮低浓度组大鼠术后各时间点TWL、MWT值显著升高,大鼠脊髓TNF-α、IL-1β、OX-42水平、TLR4蛋白表达量、p-p38MAPK/p38MAPK显著降低（P<0.05）;与羟考酮高浓度组相比,羟考酮低浓度组、羟考酮+TLR4激活组大鼠术后各时间点TWL、MWT值显著降低,大鼠脊髓TNF-α、IL-1β、OX-42水平、TLR4蛋白表达量、p-p38MAPK/p38MAPK显著升高（P<0.05）;阳性药物组与羟考酮高浓度组相比,各指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：羟考酮可通过抑制TLR4/p38MAPK通路相关蛋白表达和激活减轻炎症反应,抑制小胶质细胞活化,缓解骨癌疼痛。     

过表达miR-449a对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的保护作用及机制研究

目的探究过表达miR-449a对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的保护作用及机制。方法选取40只SD健康雄性大鼠,将其中10只作为对照组,其余30只建立溃疡性结肠炎大鼠模型后分为模型组、抑制miR-449a组、过表达miR-449a组。抑制miR-449a组大鼠尾部静脉注射30 mg/kg antagomiR-449a进行干预,过表达miR-449a组大鼠尾部静脉注射30 mg/kg agomiR-449a进行干预,对照组及模型组大鼠给予等量生理盐水干预。采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF-α);免疫透射比浊法检测免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、环氧化酶-2(COX-2);采用免疫组织化学染色法检测紧密连接蛋白Claudin-1、Toll样受体4(TLR4);采用Western blot法检测p-p38、过氧化酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、核因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠IL-8、IL-17、IgA、IgM、IgG、TNF-α、COX-2、TLR4较高,IL-10、Claudin-1较低,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,抑制miR-449a组大鼠IL-8、IL-17、TNF-α、COX-2、TLR4下降,IL-10、IgA、IgM、IgG、Claudin-1上升,差异具有统计学意义(P0.05);与抑制miR-449a组相比,过表达miR-449a组大鼠IL-8、IL-17、IgA、IgM、IgG、TNF-α、COX-2、TLR4较低,IL-10、Claudin-1较高,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,模型组大鼠PPARγ下降,p-p38、NF-κB上升,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,抑制miR-449a组大鼠PPARγ上升,p-p38、NF-κB下降,差异具有统计学意义(P0.05);与抑制miR-449a组相比,过表达miR-449a组大鼠PPARγ上升,p-p38、NF-κB下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论采用过表达miR-449a对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的损伤进行修补,能够有效改善其肠黏膜的破损,激活PPARγ,抑制p38/NF-κB通路,效果显著。     

PPARγ通过PTEN调控AKT/FAK通路影响高糖条件下肾小管上皮细胞转分化

目的:探讨在高糖培养的肾小管上皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对PTEN/AKT/FAK通路的调控机制及对肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:以高糖培养的肾小管上皮细胞NRK52E为研究对象,采用过表达及shRNA干扰技术分别上调和下调肾小管上皮细胞中PPARγ的表达,并培养48 h,应用细胞免疫荧光、Western blot和RT-qPCR方法检测PTEN及EMT相关蛋白的表达变化;然后,在过表达及敲减PTEN的情况下,分别给予PPARγ抑制剂GW9662及激动剂罗格列酮干预,进一步观察PPARγ对AKT/FAK通路的调节是否通过PTEN实现的。结果:过表达PPARγ组PPARγ和PTEN的mRNA及蛋白表达增加,E-cadherin的表达明显上调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著下调(P<0.05);PPARγ敲减组PPARγ及PTEN的mRNA及蛋白表达水平明显降低,E-cadherin的表达也明显下调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05)。GW9662干预组PTEN的表达减少,而p-AKT(Th...     

PPARγ受体激动剂抑制急性肺损伤大鼠肺脏粘附分子和趋化因子的表达

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂-罗格列酮(ROSI)对急性肺损伤大鼠肺脏细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和中性粒细胞趋化因子(CINC)-1表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠36只，随机分为对照组、ROSI组、GW9662 (PPARγ拮抗剂)组、脂多糖(LPS，6 mg/kg iv) 组、ROSI-LPS组(ROSI 0.3 mg iv+LPS)和GW9662-ROSI-LPS组(ROSI给药前20 min iv 0.3 mg/kg GW9662)。注射LPS后4 h测定肺组织湿/干重比（W/D）、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛（MDA）和CINC-1含量，免疫组化法检测肺组织ICAM-1蛋白表达。结果：ROSI预处理能显著抑制LPS所致肺组织MPO活性和MDA含量升高，减轻肺水肿，并降低CINC-1和ICAM-1的蛋白表达(P<0.01)。上述效应可被PPARγ拮抗剂逆转。结论：ROSI预处理能减轻LPS诱导的肺损伤，其机制可能通过激活PPARγ，从而抑制肺组织ICAM-1和CINC-1的表达。     

人参皂苷Rg1通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控脂多糖诱导的炎症反应中BV2小胶质细胞的极化

目的 通过脂多糖刺激BV2小胶质细胞建立炎症模型,探讨人参皂苷Rg1是否通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)受体蛋白对炎症的调控作用。方法 BV2小胶质细胞随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg1组、罗格列酮组、GW9662组。对照组不做任何处理,模型组加入1 mg/L脂多糖,其他组在加入脂多糖处理后,再分别加入0.4 mmol/L人参皂苷Rg1、10μmol/L罗格列酮或10μmol/L GW9662。CCK-8法检测各组BV2小胶质细胞增殖情况;采用免疫荧光和免疫印迹法检测PPARγ、磷酸化核因子κBp65(p-NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和人精氨酸酶1(ARG-1)蛋白的表达。ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果 与对照组相比,模型组细胞增殖率明显上升,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α炎症因子含量明显增高,免疫荧光和免疫印迹结果显示,iNOS和p-NF-κB p65阳性表达明显增多,PPARγ和ARG-1阳性表达明显减少(均P...     

二甲双胍抑制腰椎间盘退变模型兔椎间盘组织的细胞凋亡

目的 探究二甲双胍对兔椎间盘组织自噬及炎性反应的影响,以初步探究其抗椎间盘退变的分子机制。方法 将兔分为：假手术组、模型组、二甲双胍组、自噬抑制剂组、二甲双胍+自噬抑制剂组,每组10只。免疫组化染色法检测自噬相关蛋白7(Atg7)阳性表达;Western blot检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、凋亡相关蛋白caspase-8表达。结果 与模型组相比,二甲双胍组兔椎间盘退变减轻,自噬小体及自噬溶酶体形成增多,自噬蛋白质表达增多,炎性因子及凋亡蛋白质表达降低(P<0.05)。自噬抑制剂可抑制自噬,加重椎间盘退变,增强炎性因子及凋亡蛋白质表达,并减弱二甲双胍发挥的增强自噬、减弱炎性反应及凋亡作用(P<0.05)。结论 二甲双胍可能通过促进自噬激活,减弱炎性反应,来抑制椎间盘组织细胞凋亡,改善椎间盘退变。     

二甲双胍联合膈下逐瘀汤对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗大鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察二甲双胍(metformin,Met)联合膈下逐瘀汤对经脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR-4)/核因子κB(nucler factor-κB,NF-κB)信号通路的影响及其作用机制。方法:将110只经脱氢表雄酮诱导造模成功的PCOS大鼠用随机数字表法随机分为3组,分别为模型(model)组(30只)、二甲双胍治疗(Met)组(40只)和二甲双胍联合膈下逐瘀汤治疗(combination)组(40只)。Model组大鼠每天灌胃相同体积的0.9%氯化钠;Met组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃;combination组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg·kg~(-1)·d~(-1))+膈下逐瘀汤(34.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃。3组大鼠均连续干预28 d。干预结束后测定血糖[空腹血糖(FPG)和餐后2 h血糖(2h PBG)];用RT-PCR法分别检测3组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4及氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)的mRNA表达水平;ELISA检测外周血清炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的浓度。结果:干预结束后Met和combination组大鼠FPG、2h PBG及血清IL-6、TNF-α和CRP浓度均低于model组(P0.05),且combination组大鼠外周血清上述指标均低于Met组(P0.05);干预结束后Met和combination组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4和ox-LDL的mRNA水平均低于model组(P0.05),且combination组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4和ox-LDL的mRNA水平均低于Met组(P0.05)。结论:在给予二甲双胍的基础上给予膈下逐瘀汤来治疗PCOS胰岛素抵抗大鼠,能通过降低外周血清及卵巢上皮细胞炎性因子表达,以及卵巢上皮组织NF-κB、TLR-4和ox-LDL表达来改善胰岛素抵抗状态。     

右美托咪定通过上调PPAR-γ改善神经病理性疼痛模型大鼠的痛觉敏化

目的 探究右美托咪定(DEX)对选择性坐骨神经损伤(SNI)大鼠的镇痛作用及潜在机制。方法 将大鼠随机分为对照组，模型(SNI)组、DEX组、 DEX+GW9662组，每组12只。SNI术后1～14 d, DEX组鞘内注射右美托咪定2μg/kg(10μL), DEX+GW9662组鞘内注射右美托咪定2μg/kg+PPAR-γ抑制剂(GW9662)300μg(10μL),对照组及SNI组仅鞘内注射相同容积的溶剂。于SNI术前1 d、术后3、7、14 d,检测大鼠的患肢足底的疼痛程度。于SNI术后14 d,用免疫荧光染色检测各组大鼠脊髓背角Iba-1的表达；Western blot检测患肢同侧脊髓背角Iba-1和PPAR-γ的表达；ELISA检测脊髓背角IFN-γ、IL-6含量。结果 SNI术后7、14 d, SNI组大鼠患肢足底疼痛程度较对照组增加，并伴有同侧脊髓背角Iba-1、PPAR-γ、IL-6、IFN-γ表达上调(P<0.05);DEX组大鼠患肢足底疼痛程度较SNI组明显减轻，并且同侧脊髓背角Iba-1、PPAR-γ、IL-6、IFN-γ的表达明显降低(P<0.05)...     

血管活性肠肽对肺泡巨噬细胞活化和p38MAPK信号通路影响的实验研究

目的 研究血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）对肺泡巨噬细胞活化的影响。方法 原代小鼠肺泡巨噬细胞分为Normal组（正常对照）、LPS组（脂多糖刺激巨噬细胞活化）、LPS+VIP组(脂多糖刺激巨噬细胞活化后,10^-6mol/L VIP干预)。3 C57BL/6小鼠随机分为Normal组（正常对照）,ALI组（急性肺损伤）,ALI+VIP组(急性肺损伤后,10^-8mol/L VIP气管滴入)。免疫荧光法检测肺泡巨噬细胞标记物CD86和白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的表达;ELISA法检测细胞培养上清和血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-6的含量;RT-PCR法检测巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase, MAPK）mRNA的表达水平;Western blot法检测各组巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38MAPK、p-p...     

血管活性肠肽对肺泡巨噬细胞活化和p38MAPK信号通路影响的实验研究

目的 研究血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）对肺泡巨噬细胞活化的影响。方法 原代小鼠肺泡巨噬细胞分为Normal组（正常对照）、LPS组（脂多糖刺激巨噬细胞活化）、LPS+VIP组(脂多糖刺激巨噬细胞活化后,10^-6mol/L VIP干预)。3 C57BL/6小鼠随机分为Normal组（正常对照）,ALI组（急性肺损伤）,ALI+VIP组(急性肺损伤后,10^-8mol/L VIP气管滴入)。免疫荧光法检测肺泡巨噬细胞标记物CD86和白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的表达;ELISA法检测细胞培养上清和血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-6的含量;RT-PCR法检测巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase, MAPK）mRNA的表达水平;Western blot法检测各组巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38MAPK、p-p...     

二甲双胍抑制OLETF大鼠肝组织TNF-α表达

目的 观察自发胰岛素抵抗的OLETF大鼠糖脂代谢异常的同时肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平的变化以及二甲双胍治疗对TNF-α表达水平的影响。方法 以野生型的LETO大鼠作为对照（LETO组）,OLETF大鼠分为OLETF组和OLETF/M组（二甲双胍 100mg/kg·日）。治疗22周,测定肝组织三酰甘油含量,用Western blot方法测定肝组织TNF-α蛋白表达水平,用定量PCR方法测定TNF-αmRNA的表达水平。结果 与LETO组大鼠相比OLETF组大鼠空腹血糖、胰岛素以及三酰甘油、游离脂肪酸的水平显著升高,肝组织三酰甘油含量增加。同时,OLETF组大鼠肝组织TNF-α蛋白表达水平为LETO组大鼠的1.57倍（P<0.05）, TNF-αmRNA表达水平是LETO组的1.67倍（P<0.05）。经二甲双胍治疗,OLETF/M组大鼠的空腹血糖、胰岛素、游离脂肪酸及肝组织三酰甘油含量明显下降。OLETF/M组大鼠TNF-α的表达水平也显著受抑,其中蛋白表达水平较OLETF组下调59%（P<0.05）、mRNA水平下调45%（P<0.05）。结论 抑制肝脏TNF-α表达是二甲双胍发挥改善胰岛素敏感性及肝脏脂肪变作用的重要纽带。     

PPARγ在结核分枝杆菌感染小鼠脂质代谢中的作用

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/CD36通路对结核分枝杆菌(MTB)感染小鼠脂质代谢的影响.方法:使用结核分枝杆菌毒株H37Rv,建立小鼠感染模型.实验分为对照组、MTB组、MTB+罗格列酮组和MTB+GW9662组.收集各组肺组织标本,检测感染小鼠肺组织荷菌量;分别采用RT-qPCR和Weste...