细粒棘球蚴早期感染对小鼠T细胞亚群的影响

目的观察细粒棘球蚴感染早期,小鼠体内脾细胞中T细胞亚群及相关细胞因子表达的改变。方法以细粒棘球蚴感染Balb/c小鼠后收集细胞用FCM检测Th1、Th2、Treg、Th9细胞;同时用qRT-PCR检测IL-9、IL-10、IFN-γ、IL-4、PU.1和TGF-β的mRNA水平表达量;用ELISA检测血清中IL-9、IL-10、IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-25的含量。结果 FCM检测原头蚴组不同时间点Th1、Th2、Treg、Th9细胞的比例,差异均有统计学意义(P0.05);qRT-PCR检测IL-9、IL-10、IFN-γ、IL-4、PU.1和TGF-β的mRNA水平表达量在感染后升高,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);ELISA检测血清中IL-9、IL-10、IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-25的含量在感染后升高,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论原头蚴能刺激小鼠体内脾细胞向Th1、Th2、Treg、Th9细胞分化且上调相应细胞因子的分泌,且Th9与Th2、Treg之间呈正相关,提示这些亚群细胞可能在包虫病感染的免疫逃逸中发挥一定作用。     

子宫内膜异位症患者血清IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17的变化及意义

目的观察子宫内膜异位症(EM)患者血清IL-4、IFN-γ、TGF-β和IL-17的表达水平,分析Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡状态并探讨其与子宫内膜异位症发生发展的关系。方法选取确诊为子宫内膜异位症的病例42例为研究对象,并以无子宫内膜异位症的健康女性为对照组,采集其血清用ELISA法检测并比较IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β的水平,计算IL-4/IFN-γ、TGF-β/IL-17的比值。结果子宫内膜异位症患者外周血IFN-γ、IL-17的水平均显著低于对照组(P<0.01),而IL-4和TGF-β均显著高于对照组(P<0.05)。IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17的比值都显著高于对照组(P<0.01),EM组Ⅲ～Ⅳ期患者的IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期的患者。结论 EM组患者外周血中Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ和TH17细胞相关的IL-17水平均下降,而Th2和Treg细胞因子水平上升,且IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17随病程的进展而显著升高,提示在子宫内膜异位症患者可能存在着Th1/Th2和TH17/Treg细胞的平衡失衡,且与病程发展紧密相关。     

白三烯受体拮抗剂介导NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路改善支原体肺炎小鼠Th1/Th2免疫失衡

目的 探究白三烯受体拮抗剂对支原体肺炎小鼠Th1/Th2免疫的影响及可能机制。方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组（Control组）、肺炎支原体感染组（MP组）和白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特（MK组）,通过滴鼻接种菌液建立支原体肺炎小鼠模型。取材后对各组小鼠计算肺湿重指数;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺泡灌洗液中IL-1β、IL-12、IFN-γ、TNF-α含量;TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况;流式技术检测外周血CD4+/CD8+水平;Western blot法检测肺组织NLRP3、pro-caspase1、pro-IL1β的表达水平。结果 白三烯受体拮抗剂改善支原体肺炎小鼠肺脏损伤,抑制IL-1β、IL-12、IFN-γ、TNF-α的分泌,抑制细胞凋亡,改善Th1/Th2免疫失衡,下调NLRP3、pro-caspase1、pro-IL1β的表达。结论 白三烯受体拮抗剂通过介导NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路改善Th1/Th2免疫失衡,降低肺脏损伤。     

芒见赛保总萜对H_(22)肝癌细胞移植瘤小鼠Th1/Th2漂移及Bax/Bcl-2表达的影响

目的探讨芒见赛保总萜对H_(22)肝癌细胞移植瘤小鼠Th1/Th2漂移及Bax/Bcl-2表达的影响。方法昆明种小鼠皮下接种H_(22)肝癌腹水建立荷瘤动物模型,观测小鼠的一般状况、体质量变化、抑瘤率及脏器指数,ELISA法检测血清及脾脏组织中Th1(IL-2、IFN-γ)及Th2(IL-4、IL-10)型细胞因子水平,免疫组化法检测肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达水平,HE染色观察肿瘤组织及肝脏的病理变化。结果 100~400 mg/kg芒见赛保总萜可明显改善H_(22)肝癌移植瘤小鼠一般状况,抑制肿瘤生长,升高血清及脾脏IL-2水平,降低IFN-γ、IL-4、IL-10、IFN-γ/IL-4比值,改善Th1/Th2漂移状态,增强肿瘤组织中Bax表达,并抑制Bcl-2表达从而升高Bax/Bcl-2比值,缓解肿瘤及肝脏组织的病理学变化。结论芒见赛保总萜可明显抑制小鼠H_(22)肝癌的生长,改善小鼠血清及脾脏Th1/Th2漂移,提高肿瘤组织Bax/Bcl-2比值可能是其抗肿瘤的作用机制之一。     

OX40L 对儿童哮喘和哮喘小鼠模型辅助性T 细胞分化的影响

目的:探讨OX40L对哮喘细胞免疫过程中辅助性T细胞分化的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测哮喘患者和健康受试者血清OX40L、IL-4、IL-17、IFN-γ和TGF-β的浓度。~3H-TdR渗入法测定T细胞的增殖。流式细胞仪分析Th1、Th2、Th17和Treg细胞数量。Western blot检测蛋白质表达和磷酸化。苏木精和伊红(HE)染色评价肺组织病理改变。结果:与稳定期哮喘患者或健康对照受试者相比,急性期哮喘患者的OX40L、IL-4和IL-17水平明显增加,而IFN-γ和TGF-β水平明显降低。用OX40L-Ig融合蛋白处理时,CD4~+T细胞的增殖进一步增加。OVA诱导的CD4~+T细胞中Akt的磷酸化水平升高,而OX40L-Ig融合蛋白处理的细胞中Akt的磷酸化水平进一步升高。PI3K/Akt抑制剂LY294002处理明显降低了OVA诱导的CD4~+T细胞的增殖。LY294002处理后,OVA诱导的CD4~+T细胞中IL-4、IL-17以及Th2和Th17细胞的数量明显减少。相反,LY294002显著升高了IFN-γ和TGF-β的表达以及Th1和Treg细胞的数量。用抗小鼠OX40L单抗处理时,与OX40L-Ig融合蛋白处理组相比,IL-4和IL-17水平以及Th2和Th17细胞的数量显著减少,而IFN-γ和TGF-β水平以及Th1和Treg的数量明显增加。HE染色显示,用抗小鼠OX40L单抗处理可抑制哮喘小鼠肺组织病变。结论:OX40L通过PI3K/Akt信号通路诱导了Th2和Th17细胞的分化,用抗小鼠OX40L单抗阻断OX40L可以诱导哮喘中的Th1和Treg细胞分化。     

重症支气管哮喘患者CD4T淋巴细胞免疫功能分析

目的探讨重症支气管哮喘患者CD4 T淋巴细胞免疫功能及相关细胞因子的变化。方法选择本院收治的重症支气管哮喘患者70例(实验组)及健康人群70例(对照组)作为研究对象,采用流式细胞仪检测CD4+T细胞亚群Th1、Th2、Th17以及Treg细胞在研究对象外周血中的比例;采用荧光定量PCR检测研究对象外周血PBMC细胞IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、IL-22、TGF-β、IL-10的mRNA表达水平;采用ELISA法检测研究对象血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-17、IL-22、TGF-β、IL-10的蛋白表达浓度。结果与对照组相比,实验组外周血中Th1/Th2细胞比例显著下降,而Th17/Treg细胞比例显著增高(P0.05);实验组外周血PBMC细胞中IL-4、IL-10、IL-17、IL-22的m RNA、蛋白表达水平均显著上调(P0.05);而IFN-γ、IL-2、TGF-β的mRNA、蛋白表达水平则呈现明显下降(P0.05)。结论重症支气管哮喘患者存在Th1/Th2、Th17/Treg的细胞免疫平衡失调,这种细胞免疫应答的变化可能与重症支气管哮喘的疾病进展密切相关。     

ITP患者血清中可溶性Tim3/Galectin9水平及其临床意义

目的探讨原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者血清中可溶性Tim3(sTim3)、Galectin9及Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)、Th17(IL-17)、Treg(TGF-β)细胞因子表达水平变化在ITP患者发病中的作用及意义。方法采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测35例ITP初诊患者和20例正常对照血清中sTim3、Galectin9及IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的表达水平。结果与正常对照组比较,35例ITP患者血清中sTim3、Galectin9的表达水平升高(P0.001);血小板数量降低(P0.001);Th1和Th17相关细胞因子表达水平升高(均P0.05),Th2和Treg相关细胞因子表达水平降低(均P0.05);sTim3与IFN-γ、PLT呈相关性,sTim3与IL-4、IL-17、TGF-β无相关性;Galectin9与sTim3、IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β、PLT无相关性。结论在ITP患者血清中sTim3和Galectin9表达水平升高,可能在ITP免疫失衡中发挥了一定作用。     

白芷乳剂对过敏性鼻炎小鼠血清细胞因子及鼻黏膜中Th17/Treg平衡的影响

为探讨白芷乳剂对过敏性鼻炎小鼠血清细胞因子及鼻黏膜中Th17/Treg平衡的影响,采用卵清蛋白诱发过敏性鼻炎小鼠模型,将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组和白芷组。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察鼻黏膜组织的病理变化,FCM检测血液中Th17和Treg的比例,ELISA检测血清和鼻腔灌洗液中IgE、IL-6、IL-10、IL-17和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的水平,RT-PCR检测鼻黏膜中IL-17和TGF-β1 mRNA的表达。HE染色结果显示:与正常组比较,模型组有大量嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润;与模型组比较,白芷组鼻黏膜上皮细胞排列整齐,上皮破损状况良好,嗜酸性粒细胞浸润相对减少。与正常组比较,模型组Th17比例增多(P0.01),Treg比例减少(P0.05),血清和鼻腔灌洗液中IL-6和IL-17水平显著升高(P0.01),IL-10和TGF-β1水平显著降低(P0.01);与模型组比较,白芷组Th17比例减少(P0.01),Treg比例增多(P0.05),血清和鼻腔灌洗液中IL-6和IL-17水平显著降低(P0.01),IL-10和TGF-β1水平显著升高(P0.05)。这提示白芷能有效缓解过敏性鼻炎小鼠的症状,减轻其鼻黏膜组织损伤,其机制可能与下调Th17比例,上调Treg比例,恢复Th17/Treg平衡有关。     

白细胞介素-6对胰腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的 探讨白细胞介素（IL)-6促进胰腺癌MPC-83细胞荷瘤小鼠移植瘤生长的Caspase-3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路的作用机制。 方法 取40只小鼠,腋部皮下注射小鼠胰腺癌MPC-83细胞制作胰腺癌荷瘤动物模型,随机分为空白对照组（A组）,腹腔注射PBS 10 ml/kg;IL-6组（B组）,腹腔注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg;IL-6受体阻断剂组（C组）,腹腔注射托珠单克隆抗体100 mg/kg;IL-6+IL-6受体阻断剂组（D组）,腹腔注射托珠单抗 100 mg/kg,30 min后再注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg,每组10只。各组小鼠每3 d给药1次,持续至28 d。于实验开始后第0、7、14、21及28天,记录瘤体积变化;采用ELISA法检测瘤组织生存素（survivin）和细胞色素C（Cyt-C）含量;采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting法检测瘤组织Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果 与A组比较,B组荷瘤小鼠瘤组织第7、14、21及28天生长较快,瘤组织生存素含量升高,细胞色素C含量下降,Caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调（P<0.05,P<0.01）;与B组比较,C组与D组荷瘤小鼠瘤组织第14、21及28天生长缓慢,瘤组织生存素含量降低,细胞色素C含量升高,Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）;C组与D组比较,各检测指标差异无显著性（P> 0.05）。结论 IL-6促进胰腺癌生长增殖的作用与其调控Caspase-3/Bax/Bcl-2细胞凋亡信号通路相关。     

束缚应激对S180荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响

目的:观察束缚应激对荷S180瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响。方法:取腹腔传代第7天的肿瘤细胞S180,调细 胞密度至1×1010/L,注射于昆明小鼠右腋皮下,每只0.2 mL。接种后束缚限制活动,8 h/d,并设单纯束缚组、单纯肿瘤组和正常对照组。10 d后处死小鼠,剥取肿瘤称瘤重,计算胸腺指数,分别采用MTT比色法和丝裂原激活淋巴母细胞法检测脾T细胞增殖及产生Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的能力,并取血清用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4、IL-10的含量。结果:束缚应激可明显增加荷瘤小鼠的瘤重(P<0.01),降低小鼠胸腺指数和脾T细胞的增殖能力(P值分别<0.01),降低荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2和IFN-γ的能力(P值分别<0.01),并可使小鼠血清IL-4、IL-10的含量明显增加(P值分别<0.01和<0.05)。结论:束缚应激可显著抑制荷瘤小鼠的细胞免疫功能,使产生Th1型细胞因子的功能减弱,Th2型细胞因子的含量增加,导致Th1/Th2细胞的平衡进一步向Th2细胞漂移。这可能是其促进肿瘤生长的重要机制。     

雷帕霉素对高脂血症小鼠的治疗效果及作用机理探讨

目的探究雷帕霉素(RAPA)对高脂血症小鼠的治疗效果及其作用机制。方法 60只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和RAPA组,每组20只。对照组给予基础饲料喂养,模型组和RAPA组则给予高脂饲料喂养以建立高脂血症小鼠模型。连续喂养6周后,RAPA组小鼠以1 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量腹腔注射RAPA,对照组和模型组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水,连续给药4周。采用全自动生化分析仪测定小鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C血脂含量;采用Western blot检测小鼠血管内皮细胞mTORC1活性及自噬水平;采用流式细胞仪检测小鼠外周血Th17和Treg细胞表达水平;采用ELISA法检测小鼠血清IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β含量。结果与对照组相比,模型组小鼠TC、TG及LDL-C血清含量显著升高(P0.05)。RAPA组小鼠TC、TG、LDL-C血清含量较模型组显著下降(P0.05)。模型组小鼠Phospho-S6K1和P62表达水平较对照组明显升高,RAPA组小鼠的Phospho-S6K1和P62表达水平较模型组显著下调(P0.05)。与对照组相比,模型组小鼠外周血Th17细胞比例及其分泌的IL-17、IL-6血清浓度明显上升,Treg细胞比例及其分泌的IL-10、TGF-β血清浓度明显下降,Th17/Treg细胞比率上升(P0.05)。与模型组小鼠相比,RAPA组小鼠外周血Th17细胞比例及IL-17、IL-6血清浓度明显下降,Treg细胞比例及IL-10、TGF-β血清浓度显著上升,Th17/Treg细胞比率下降(P0.05)。结论 RAPA可能通过抑制m TORC1的活化,增强小鼠体内的自噬水平,改善Th17/Treg细胞的免疫失衡,从而调节小鼠体内的血脂代谢。     

慢性乙型肝炎患者核苷(酸)类似物治疗前后外周血中Treg和Th17细胞及其相关细胞因子水平的变化

目的 观察慢性乙型肝炎(CHB)患者应用核苷(酸)类似物(NA)抗病毒治疗前后外周血中Treg、Th17细胞及其相关细胞因子水平的变化.方法 采用流式细胞术,检测44例NA治疗12周的CHB患者外周血Treg(CD4+ CD25high CD127low)和Th17(CD3+ CD8-IL-17+)细胞频率.ELISA检测血清IL-10、TGF-β1、IL-17及IL-23水平.各组间采用Mann-Whitney U检验,治疗前后采用Wilcoxon配对T检验.结果 完全应答的14例患者的Treg细胞频率、IL-10、TGF-β1和IL-23水平及Treg/Th17比率较治疗前明显下降(Z=-2.691,-2.417,-2.237,-2.291,-2.291,P均＜0.05),Th17细胞频率及IL-17水平略有增加.部分应答的11例患者的Treg细胞频率、IL-10、TGF-β1和IL-23水平较治疗前明显下降(Z=-1.988,-2.934,-2.756,-2.803,P均＜0.05),Th17细胞频率及IL-17水平略有增加,Treg/Th 17比率略有下降.无应答的15例患者的Treg和Th17细胞频率、IL-10、TGF-β1、IL-23、IL-17水平及Treg/Th17比率较治疗无明显变化.HBV DNA下降≥2 log拷贝/ml及ALT恢复正常时,Treg细胞频率与细胞因子IL-10、TGF-β1和IL-23水平较治疗前明显下降(P均＜0.05).Treg细胞频率与HBV DNA及ALT水平三者之间具有一定的相关性.结论 NA抗病毒治疗前后,CHB患者Treg和Th17细胞频率及IL-10、TGF-β1、IL-23、IL-17水平均发生变化;治疗后获得满意应答的CHB患者Treg细胞频率、IL-10、TGF-β1、IL-23水平及Treg/Th17比率明显下降,Th17细胞及IL-17水平继续上升;且以上变化与病毒学应答及生化学应答有关.     

Th22细胞对小鼠Lewis肺癌免疫逃逸的影响北大核心CSCD

目的探讨T辅助细胞22(Th22)在小鼠Lewis肺癌抗肿瘤免疫中的作用及其机制。方法通过皮下接种Lewis肺癌细胞悬液建立Lewis肺癌小鼠模型,IL-22中和抗体(IL-22 nAb)组小鼠在此基础上腹腔注射IL-22 nAb(50μg/kg)。14 d后处死小鼠,计算肿瘤质量和抑瘤率。流式细胞术检测小鼠Th22和调节性T细胞(Treg)的表达情况;RT-PCR法检测小鼠肿瘤组织TAP1和CTLA-4 mRNA表达;酶联免疫吸附法检测小鼠血清IL-4、IL-10、IL-22和TGF-β含量。结果与对照组比较,模型组小鼠Th22细胞数量和IL-22水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,IL-22 nAb组小鼠肺癌组织的质量和Treg细胞数量明显降低(P<0.05),肺癌组织TAP1和CTLA-4 mRNA表达显著降低(P<0.05),血清IL-4、IL-10和TGF-β表达明显降低(P<0.05)。结论IL-22通过调控Treg细胞功能,参与肺癌免疫逃逸过程。     

新疆维吾尔族自身免疫性肝炎部分患者外周血Th17细胞/调节性T细胞比值及其相关因子水平增加

目的研究Th17细胞和调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子在维吾尔族自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血中的表达水平,探讨Th17细胞和Treg在AIH患者发病中的作用。方法应用流式细胞术检测AIH患者及正常对照者外周血Th17细胞和Treg的频数,ELISA检测血清中白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)水平。结果与正常对照组相比,AIH患者外周血Th17细胞的频数明显增加、Treg频数明显降低,Th17细胞/Treg的比率明显增加;AIH患者外周血IL-17水平显著升高、而TGF-β明显降低,IL-17/TGF-β比值明显增加。结论 AIH患者外周血中Th17细胞/Treg及其相关细胞因子的比值增加。     

T细胞疫苗对CIA的免疫调节作用

目的探讨T细胞疫苗(TCV)对小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的免疫调节作用。方法通过TCV干预CIA模型,观察小鼠发病情况,运用免疫组化技术观察局部关节病变程度;FACs分析T细胞亚群变化;ELISA检测细胞培养上清中TGF-β、IFN-γ、IL-17水平;定量PCR方法检测Treg、Th1、Th17细胞相关转录因子表达水平。结果经过TCV干预,小鼠自身反应性T细胞的增殖能力被显著抑制,CII抗体水平也显著下降;相较CIA组,TCV组Treg细胞百分比上升,Th1、Th17细胞百分比明显降低;各细胞分泌细胞因子的能力也发生相应的变化,其中TGF-β上升,IFN-γ、IL-17降低;Treg细胞转录因子Foxp3基因水平提高,Th1、Th17细胞转录因子T-bet、RORα及RORγt的mRNA水平降低。结论 TCV干预可通过抑制CIA小鼠自身反应性T细胞增殖,上调小鼠体内Treg细胞并抑制Th1、Th17细胞的表达而发挥免疫调节作用,有效降低小鼠发病严重度和关节炎症。     

玉屏风散对S180荷瘤小鼠Th1／Th2型细胞因子的影响

目的探讨玉屏风散对荷瘤小鼠Th1／Th2型细胞因子产生的影响。方法采用体外培养S180肉瘤细胞，接种C57BL／6纯系小鼠，建立荷瘤小鼠模型，设正常对照、荷瘤对照及玉屏风散给药组，检测各组脾脏T淋巴细胞增殖能力及Th1（IL-2、IFN-γ）和Th2（IL-4、IL-10）细胞因子产生水平。结果荷瘤组T细胞增殖能力明显下降，Th2型细胞因子IL-10的产生明显增加，与正常对照组比较均有统计学意义（P〈0．01），而IL-4的含量略有增加，但无统计学意义。Th1型细胞因子IL-2及IFN-γ的产生明显减少，与正常对照组比较有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。玉屏风散给药对T细胞增殖能力及细胞因子的产生有较为明显的调节作用，与荷瘤组比较T细胞增殖能力及IL-2、IFN-γ的产生明显增加（P〈0．01），Th2型细胞因子IL-10的血清含量下降（P〈0．01）．IL-4的含量略有下降，但与荷瘤对照组比较无统计学意义。结论玉屏风散可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能，促进荷瘤鼠Th1型细胞因子的产生，有效纠正荷瘤导致Th1／Th2的失衡，增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

Th17和 Treg 细胞及其相关细胞因子在结核性胸膜炎患者中的变化及意义

目的检测健康人和结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞和调节性T细胞（ Treg细胞）（ CD4＋CD25＋Foxp3＋）在CD4＋T细胞中的表达率以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β血清水平和患者胸水中的IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,研究Th17细胞和调节性T细胞以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β在结核性胸膜炎发病机制中的作用。方法使用流式细胞术检测患者以及健康对照人群外周血Th17细胞和调节性T细胞表达率,ELSIA方法定量检测血清以及胸水中IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,使用SPSS17．0统计学软件,分析健康人和结核性胸膜炎患者上述指标之间的差异以及各指标间的相关性。结果结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞表达率（1．02％±0．20％）明显高于健康人外周血Th17细胞表达率（0．89％±0．13％,P＝0．002＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血调节性T细胞表达率（4．64％±0．77％）明显低于健康人外周血调节性T细胞表达率（5．10％±0．90％,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者Th17/Treg细胞的比率（0．25±0．07）明显高于健康人（0．17±0．05,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血IL-17（17．49 ng/L±3．94 ng/L）和IL-23（90．42 ng/L±23．06 ng/L）水平和胸水中IL-17（26．13 ng/L±5．98 ng/L）和IL-23（122．26 ng/L±31．71 ng/L）水平显著高于对照组外周血IL-17（14．45 ng/L±3．81 ng/L）和IL-23（77．55 ng/L±20．26 ng/L）的水平,P值分别为0．022、0．039、0．000、0．000;患者胸水中IL-17和IL-23浓度也显著高于本人血液中的IL-17和IL-23浓度,P值为0．000和0．000;患者胸水中IL-6的浓度（5．31 ng/L±0．74 ng/L）显著高于患者血液中IL-6的浓度（4．54 ng/L±1．02 ng/L）和对照组血液中IL-6的浓度（4．26 ng/L±0．91 ng/L）,P值分别为0．003和0．000,患者血液与对照组血液中IL-6的浓度没有显著差别（P＝0．274）;对照组外周血液TGF-β浓度（3．95 ng/L±0．79 ng/L）显著高于患者外周血液TGF-β浓度（3．32 ng/L±0．80 ng/L）及胸水中TGF-β浓度（3．12±0．77）,P值分别为0．005和0．000,患者血液及胸水中TGF-β水平之间没有显著差别（P＝0．365）;结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其Treg细胞在外周血的表达率呈显著负相关（r＝-0．684, P＝0．000＜0．05）,结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其外周血中的IL-17、IL-23、IL-6水平呈明显的正相关（r＝0．479,0．441,0．326,P＝0．013,0．015,0．017）;患者血液中TGF-β水平与Treg细胞在外周血的表达率呈明显的正相关（r＝0．297,P＝0．024）,与Th17细胞表达率没有明显相关性（r＝0．091,P＝0．659）。结论 Th17和Treg细胞可能参与了结核性胸膜炎的免疫病理机制,有关细胞因子的变化可能参与了Th17和Treg细胞变化的调控以及炎症反应, Th17和Treg细胞以及有关细胞因子的变化可能是结核性胸膜炎重要的免疫病理机制。     

CCK-8对KLH免疫小鼠脾细胞Th1/Th2平衡的影响

目的： 探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对Th1/Th2平衡的调节作用。方法: 给予BALB/c小鼠钥孔戚血蓝蛋白（KLH）免疫同时体内给予不同剂量的CCK-8,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其脾细胞培养上清中Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2（IL-2）和Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾细胞中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5 mRNA表达;ELISA法检测血清中Th1型抗KLH抗体IgG2a和Th2型抗KLH抗体IgG1水平。结果: ①KLH免疫使小鼠脾细胞分泌Th1/Th2型细胞因子水平明显增高,mRNA表达增高,KLH免疫同时给予CCK-8可使脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2含量进一步增加和IFN-γ、IL-2mRNA表达增高,而使IL-4、IL-5含量降低,IL-4、IL-5 mRNA表达减低和降低IL-4/IFN-γ比值。②KLH免疫小鼠血清中IgG2a、IgG1发生不同程度增高,CCK-8可使其血清中IgG1水平减低而使IgG2a水平增高。结论: CCK-8可促进KLH免疫小鼠体内Th1反应,使Th2优势反应向Th1方向转变。     

β2 GP1诱导的EAPS小鼠Treg/Th17细胞比率变化的研究

目的:观察EAPS疾病进展过程中小鼠外周血Th17细胞与CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的比率变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立EAPS模型,免疫12周后检测外周血浆抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)、抗心磷脂抗体(a CA)、IL-17、IL-2、IL-6、TGF-β、活化部分凝血活酶时间(APTT)和血小板计数(PLT)及流产率。流式细胞术(FCM)检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg及Th17细胞的比率。结果:与对照组相比,模型小鼠anti-β2GP1、a CA、IL-17、IL-2、IL-6水平明显升高,APTT延长,TGF-β降低,PLT升高,流产率提高,差异有统计学意义(P<0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P<0.05);Th17细胞频率逐渐升高,明显高于对照组(P<0.05);CD4+CD25+Treg/Th17比值明显低于对照组(P<0.05)。结论:EAPS小鼠外周血Th17/Treg细胞比率失衡可能在EAPS的发生发展中起重要作用。     

基于PD-1/PD-L1信号通路探讨妇炎汤对慢性盆腔炎小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的 探究妇炎汤通过PD-1/PD-L1信号通路对慢性盆腔炎小鼠体内Treg/Th17免疫平衡的作用机制。方法取60只SPF级雌性ICR小鼠随机分为四组,其中三组于经阴道-宫颈口注入病原体混合液制备慢性盆腔炎模型,对照组注入等量生盐水处理。造模前后对小鼠全血细胞进行检测,并对小鼠进行脸谱疼痛评分。妇炎汤组小鼠每天灌胃给药16g/kg,阿司匹林组20g/kg,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。实验结束后取四组小鼠子宫组织进行H-E染色观察,流式细胞仪检测血液中Treg和Th17细胞的所占比例,ELISA检测血清中IL-17、IL-10、TGF-β1的浓度,RT-qPCR检测IL-17、IL-10 mRNA的表达,Western blotting检测PD-1和PD-L1蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠子宫出现水肿,组织发生病理结构改变,血液中Treg细胞比例、IL-10和TGF-β1表达、IL-10 mRNA、PD-1和PD-L1蛋白表达明显降低(P<0.05),Th17细胞比例、IL-17、子宫组织中IL-17 mRNA表达明显上升(P<0.05);与模型组比较...