LC-MS/MS法研究Cocktail探针药物咖啡因、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑及其代谢产物在大鼠血浆中的药代动力学

目的建立灵敏、快速、稳定的测定大鼠血浆中CYP450探针药物/代谢产物,咖啡因/副黄嘌呤、奥美拉唑/5-羟基奥美拉唑、右美沙芬/右啡烷、咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的LC-MS/MS方法,并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。方法 100μL血浆样品加入内标地西泮及乙酸铵溶液,乙酸乙酯进行液液萃取,离心取上清挥干复溶,LC-MS/MS检测。选用Agilent Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(50 mm×2.1mm,3.5μm),乙腈和0.01%甲酸(1 mmol·L~(-1)甲酸铵)作为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 m L·min~(-1),进样量10μL。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应正离子监测模式(MRM+),咖啡因m/z:195.0/138.1;副黄嘌呤m/z:181.1/124.1;奥美拉唑m/z:346.1/198.1;5-羟基奥美拉唑m/z:362.1/214.1;右美沙芬m/z:272.2/147.1;右啡烷m/z:258.1/157.1;咪达唑仑m/z:326.1/291.1;1'-羟基咪达唑仑m/z:342.1/324.1;内标地西泮m/z:285.1/154.0。结果咖啡因、副黄嘌呤、奥美拉唑、5-羟基奥美拉唑、右美沙芬、右啡烷、咪达唑仑和1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为1.95~2 000、0.98~250、0.48~2 000、0.98~250、0.98~2 000、0.48~125、1.95~2 000和1.95~250μg·L~(-1)。RSD<15%且无基质效应。结论该方法快速、灵敏、重现性好,可用于血浆中上述探针药物/代谢产物浓度的测定,便于深入进行代谢酶CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的代谢相关研究。     

HPLC-MS/MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法学研究

目的建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因浓度的HPLC-MS/MS法。方法以茶碱为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样。用Waters symmetry C18（150 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,甲醇-0.2%醋酸=35∶65（v/v）为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,采用柱后分流,0.2 mL·min^-1进入质谱,柱温35℃。选择监测的离子为m/z152.1→109.9（对乙酰氨基酚）、m/z195.3→138.1（咖啡因）和m/z181.1→123.9（茶碱）。结果血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为0.02-4.04μg·mL^-1,5.05~1 010 ng·mL^-1;日内日间精密度RSD均〈7.94%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。     

小儿风叶咳喘平合剂3个成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的:对小儿风叶咳喘平合剂中3个主要药效成分在大鼠体内的代谢产物以及药代动力学进行研究。方法:基于超高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(UHPLC-ESI TOF MS)方法，采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.3 mL·min^-1,质谱采用电喷雾离子源(ESI),以正负离子模式采集多级质谱碎片信息，对大鼠灌胃小儿风叶咳喘平合剂后的血清、胆汁、尿液和粪便进行分析，结合离子碎片进行代谢产物鉴定分析；同时采用超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)的技术进行药代动力学研究。以格列齐特为内标物，采用ACQUITY UPLC?BEH C₁₈色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱。血浆样品采用甲醇沉淀蛋白，采用ESI及多反应监测(MRM),选择监测离子(麻黄碱m/z 166.2→148.1、甘草次酸m/z 471.2→453.2、对香豆酸m/z 162.9→119.1、内标m/z 3...     

LC-MS/MS法测定人血浆及尿液中缬沙坦的浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆及尿液中缬沙坦浓度的方法。方法:血浆样品经酸化后用乙醚提取浓度后进行分析;尿液样品直接稀释进样,均采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定,色谱柱为Aglient ZORBAX SB-C18,流动相为0.1%甲酸-乙腈(梯度洗脱),流速0.2 ml/min。电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式测定,缬沙坦定量分析的离子对为m/z 436.4→253.2,定性分析离子对为m/z 436.4→291.3;内标氯沙坦定量分析的离子对为m/z 423.4→207.1,定性分析离子对为m/z 423.4→180.2。结果:血浆和尿液中缬沙坦的线性范围分别为4~5 000 ng/ml(r=0.998 5)、20~50 000 ng/ml(r=0.998 8);最低定量限分别为4、20 ng/ml;血浆萃取回收率为61.21%~70.30%;内标归一化基质效应因子的RSD分别为3.20%、11.21%;日内和日间RSD均≤8.34%。结论:所用方法快速、灵敏度高,适用于人血浆及尿液中缬沙坦的浓度测定及药动学研究。     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆中氯吡格雷及其3种代谢产物的浓度

目的:建立同时测定人血浆中氯吡格雷(CLP)及其中间代谢产物2-氧-氯吡格雷(2-O-CLP)、非活性代谢产物氯吡格雷羧酸代谢物(CLPCA)和活性代谢产物氯吡格雷硫醇代谢物(CLPTM)浓度的方法。方法:选取陆军军医大学第一附属医院确诊为脑卒中的90名患者,早晨空腹口服1片氯吡格雷片(75 mg/片),于服药2 h后采集血样,将CLPTM经2-溴-3’-甲氧基苯乙酮衍生形成CLPTM-D后与其余3种待测物一起通过乙腈蛋白沉淀提取后,采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定其浓度。色谱柱为Agilent poroshell 120 EC-C18,流动相为0.1%甲酸的乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液(90∶10,V/V),采用多反应监测模式进行正离子检测,检测离子对分别为CLPCA质荷比(m/z)308.1→198.1、CLP m/z 322.3→212.0、2-O-CLP m/z 338.3→155.0、CLPTM-D m/z504.4→354.1、内标噻氯吡啶m/z 264.0→154.1。结果:CLPCA、CLP、2-O-CLP、CLPTM-D和内标的保留时间分别为2.01、3.32、2.83、2.68、1.87 min,CLPCA、CLP、2-O-CLP、CLPTM-D检测质量浓度的线性范围分别为100～10 000、0.2～20、0.3～30、0.5～50ng/mL(r均≥0.999 5),日内、日间精密度试验的RSD均≤9.5%(n=5),准确度为93.5%～98.9%(n=5),提取回收率为85.4%～95.9%(n=5),基质效应的CV为2.7%～6.2%(n=5)。稳定性(-80℃放置3个月、3次冷冻-解冻循环、4℃放置8 h)试验中,CLPCA、CLP、2-O-CLP和CLPTM-D的RE均≤10.0%(n=5)。结论:建立的LC-MS/MS法特异性强,测定结果准确可靠,可用于检测人血浆中CLP及其3种代谢产物的浓度。     

用液相色谱-串联质谱法测定人血清和尿液中非那西丁及其代谢物浓度

目的:建立测定人体血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的液相色谱-串联质谱法。方法:用乙酸乙酯萃取血清和尿液中非那西丁及其代谢产物。色谱柱为Restek Allure PFPP柱(100 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(30∶70,V/V),流速0.3 mL/min。以磺胺甲氧嘧啶为内标,非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的多反应监测(MRM)离子对分别为m/z180→138、152→110和281→156。测定13名健康受试者口服非那西丁1.25 g后血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的浓度。结果:非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的保留时间分别为4.1、1.4和2.8 min。在0.2~50μg/mL范围内,非那西丁和对乙酰氨基酚的浓度与峰面积相关性良好(r>0.999 0)。非那西丁和对乙酰氨基酚的准确度分别为87.1%~101.5%和89.5%~107.3%,精密度分别为0.85%~7.83%和2.53%~8.74%,提取回收率为53.0%~76.0%,基质效应为92.0%~106.3%,均符合生物样本分析方法的有关要求。除万古霉素和甲泼尼龙外,其他临床常用药物对测定无干扰。13名健康受试者血清中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为(5.94±4.79)和(8.81±2.91)μg/mL;尿液中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为(3.25±1.10)和(570.45±187.13)μg/mL。结论:该方法简便、灵敏、特异性强,具有临床实用价值。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆和尿液中哌拉西林他唑巴坦的浓度

目的：建立同时测定人血浆和尿液中哌拉西林他唑巴坦浓度的高效液相色谱-质谱联用方法。方法：采用Waters C18柱（4.6mm×50mm,5μm）,流动相为乙腈-0.5%甲酸,兰索拉唑为内标,以多反应监测（MRM）扫描方式进行检测,监测离子质荷比哌拉西林m/z516.2→233.1,他唑巴坦m/z299.0→138.1,兰索拉唑m/z368.1→163.9。血浆样品经乙腈沉淀蛋白后取上清液进样,尿液样品稀释后经乙腈沉淀蛋白进样。结果：血浆和尿液中哌拉西林、他唑巴坦的线性范围均为0.10～100.00μg·mL-1,低、中、高3个浓度日内、日间精密度均小于10%。结论：本方法灵敏度高,重现性好,操作简便快捷,可用于生物样本中哌拉西林、他唑巴坦钠的浓度测定。     

HPLC-MS/MS法测定人血清中达托霉素的方法研究及临床应用

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人血清中达托霉素浓度,并应用于临床患者达托霉素血药浓度监测。方法:以达托霉素-d5为内标,甲醇、乙腈沉淀蛋白法处理样品。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC C₈柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)柱;流动相为A相：水+0.1%甲酸、B相：1∶1甲醇∶乙腈+0.1%甲酸;流速0.4 ml·min^-1;柱温45℃;电喷雾离子化正离子模式,多反应离子监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别是达托霉素m/z 810.70→m/z 159.05、m/z 810.70→m/z 313.30、m/z 810.70→m/z 341.05,达托霉素-d5(内标物)m/z 813.50→m/z 163.2、m/z 813.50→m/z 317.2;进样量2μl;分析时间为4 min。结果:人血清中达托霉素浓度在1～200μg·ml^-1线性关系良好(r=0.999 5),定量下限为0.05μg·ml^-1。低、中、高浓度达托霉素的提取回收率均>...     

液-质联用法同时测定人血浆伊潘立酮及其两个代谢产物浓度

目的:建立LC-MS/MS法同时测定血浆伊潘立酮(iloperidone,ILP)及其两个代谢产物羟基伊潘立酮(hydroxy iloperidone,P88)和伊潘立酮羧酸(iloperidone carboxylic acid,P95)的药浓度。方法:色谱柱为Agilent C8(100 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为乙腈-2 mmol·L-1醋酸铵水溶液(含1.5%甲酸)=28∶72,流速为600μL·min-1,采用ESI源正离子模式,多反应监测方式测定。ILP,P88,P95的监测离子对分别为:m/z 427.2→233.2,m/z 429.2→261.2,m/z 429.2→233.2,内标氘代伊潘立酮(iloperidone-D3,ILP-D3)的监测离子对为m/z 430.2→233.1。结果:血浆ILP,P88和P95浓度分别在0.01~15 ng·m L-1,0.01~15ng·m L-1和0.02~20 ng·m L-1范围内线性均良好,日间、日内精密度均在可接受范围内,提取回收率较高,均大于75%。结论:该方法准确、灵敏度高、重现性好,能够较好地应用于ILP及其两个代谢产物的人体药动学研究。     

低剂量甲氨蝶呤给药类风湿性关节炎病人血浆浓度的测定

目的 建立一种快速、灵敏地测定类风湿性关节炎病人血浆中低浓度甲氨蝶呤(MTX)的方法.方法 采用高效液相色谱(HLPC)串联质谱电喷雾检测(LC/MS/MS)法,色谱柱为Ultimate XB-C18柱,流动相为乙腈(1%甲酸):甲酸铵水溶液(20 mmol/L)＝30 ︰ 70,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃.样品提取采用液-液萃取的方法,即先用三氟乙酸沉淀蛋白,再用乙酸乙酯提取.提取的样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甲氨蝶呤(m/z 455.2→308.2)和内标多索茶碱(m/z 267.1→181.1)进行测定.结果 甲氨蝶呤血药浓度在1～100 ng/ml范围内线性关系良好(r =0.9998),分析方法的最低检测限为0.5 ng/ml,其高、中、低(50、10、2 ng/ml)3 个浓度的平均提取回收率分别为41.2%、49.2%和43.4%, 日内(n = 5)、日间(n = 3)相对标准偏差值(RSD)均<15 %.结论 本方法简单快捷、灵敏、准确、重现性好,可用于低剂量给药的类风湿性关节炎病人的临床血药浓度监测和药动学研究.     

液相色谱-大气压化学电离-串联质谱法同时测定人血浆中氯苯那敏和咖啡因的含量

目的建立同时测定人血浆中氯苯那敏和咖啡因含量的液相色谱-大气压化学电离-串联质谱(LC-APCI-MS-MS)法。方法血浆样品经乙酸乙酯提取后,采用Diamonsil C18柱分离,流动相为甲醇-水-甲酸(体积比80∶20∶0.5),采用大气压化学电离(APCI)源,以选择反应监测(SRM)方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z275→m/z230(氯苯那敏)、m/z195→m/z138(咖啡因)、m/z256→m/z167(内标,苯海拉明)。结果血浆中氯苯那敏和咖啡因的线性范围分别为0.2~40.0μg.L-1和20.0~4 000μg.L-1;日内和日间精密度均小于13.4%,相对误差在±8.2%以内。结论该法适用于人血浆中氯苯那敏和咖啡因的同时测定。     

HPLC-MS/MS快速测定精神障碍患者血清中鲁拉西酮的浓度

目的 建立一种简便快捷的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)测定人血清中鲁拉西酮浓度的方法。方法 内标选用鲁拉西酮-d₈,血清样品处理采用乙腈蛋白沉淀法,色谱柱为Agilent XDB-C₁₈(4.6 mm×50.0 mm, 1.8μm),流动相为甲醇(含5 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸)-水-乙腈=66.67∶16.67∶16.67,等度洗脱,流速：0.5 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：2μL。应用电喷雾离子化,正离子模式下进行多反应监测：对照品鲁拉西酮(m/z 493.10→166.00)和内标鲁拉西酮-d₈(m/z 501.10→166.00)。结果 鲁拉西酮在1～200 ng·mL^-1范围内线性关系良好,准确度在96.57%～99.34%,提取回收率在96.02%～98.39%,日内及日间RSD均小于15%,稳定性考察结果良好。结论 本方法简便快捷,灵敏度高,专属性强,适用于测定临床精神障碍患者中鲁拉西酮的血药浓度监测。     

LC-MS/MS法测定红景天胶囊中红景天苷含量的方法

目的 建立LC-MS/MS测定红景天胶囊中红景天苷的方法.方法 通过电喷雾离子源(ESI),采用多反应检测方式进行负离子检测,以茶碱为内标,用于定量分析的红景天苷、茶碱的检测离子分别为m/z 299.0→119.0和m/z 178.8→164.0.采用Shim-pack XR-ODS柱(3.0 mm×75 mm,2.0...     

UHPLC-MS/MS测定大鼠尿液中环磷酰胺及其代谢产物浓度

目的 基于超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）,建立测定给予高剂量环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）后大鼠尿液中CTX及其代谢产物脱氯乙基环磷酰胺（dechloroethylcyclophosphamide,DCCTX）、4-酮基环磷酰胺（4-Ketocyclophosphamide ,4-KetoCTX）、羧基磷酰胺（Carboxyphosphamide ,CEPM）浓度的方法。方法 大鼠尿液样品经10%甲醇水溶液直接稀释,离心后取上清液,采用UHPLC-MS/MS法进行检测分析。色谱柱：Agilent poroshell SB-C18 (2.1 mm × 75 mm,2.7 μm);流动相：甲醇-10 mmol?L-1乙酸铵水溶液,进行梯度洗脱,流速0.25 mL?min-1,柱温25 °C。采用电喷雾离子源,以多重反应监测模式进行正离子检测。用于定量检测分析的离子对分别为：CTX：m/z 261.10→140.10;DCCTX：m/z 199.20→78.00;4-KetoCTX：m/z 275.10→142.00;CEPM：m/z 293.10→221.10;替硝唑（tinidazole,TNZ）：m/z 248.10→121.10。结果 CTX及其代谢产物尿中浓度在40~2000 ng?mL-1范围内线性关系良好（CTX、DCCTX、4-KetoCTX、CEPM的r2分别为：0.9915,0.9910,0.9956,0.9918）,最低定量限均为40 ng?mL-1;日内、日间RSD分别为0.67%~12.76%、1.30%~11.92%;由内标归一化的基质因子计算RSD,结果在0.52%~7.60%之间;该方法的提取回收率为74.00%~102.70% （n=6）,方法回收率为85.89%-110.69% （n=5）;测定成分和内标的稳定性均良好。结论 该方法快捷、准确可靠、重复性好,适用于大鼠高剂量CTX给药后CTX及其代谢产物尿药浓度的测定及排泄研究。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆和尿液中罗通定的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的测定人体血浆和尿液中罗通定浓度的高效液相色谱串联质谱( HPLC-MS/MS)方法.方法 血浆、尿液样品分别采用乙腈沉淀处理后,进样分析.采用Agilent-ECLIPSE-C18柱(2.1mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.2％甲酸溶液=85∶15为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品浓度.检测离子为m/z356.3→192.3(罗通定)和m/z 285.0→193.0(地西泮,内标).结果 罗通定血浆及尿样均在2.5～1000 ng· mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 4);最低定量浓度均为2.5 ng·mL-1.日内与日间RSD均＜10％,血浆样品回收率在91.4％～109.2％,尿样回收率在88.63％～115.8％.结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于罗通定在人体内的药物动力学研究.     

LC-MS/MS法测定人尿液中乳清酸的浓度及临床应用

目的：建立测定人尿液中乳清酸浓度的方法,并应用于临床。方法：尿液样本加水稀释100倍,经0.22μm滤膜过滤后,取滤液100μL加入甲醇400μL沉淀蛋白,以卡马西平(0.50μg·mL^-1)2μL为内标,经涡旋1 min,13 000 r·min^-1离心5 min,取上清液100μL采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。色谱柱为Waters Atlantis dC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为5 mmol·L^-1甲酸铵溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.50 mL·min^-1,柱温为4℃,进样量为3μL。采用电喷雾离子源以正离子及负离子模式,检测方式为Full MS,Full MS分辨率为70 000,质量扫描范围m/z130～360。乳清酸和内标卡马西平的检测离子分别为m/z (-)155.009 82、(+)237.102 24。结果：乳清酸尿液浓度在0.016～1.0μg·mL^-1范围内线性关系良好(r2=0.996...     

液相色谱-质谱联用法测定癫痫患者血浆中丙戊酸及其代谢产物2-丙基-4-戊烯酸浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法同时测定丙戊酸(VPA)及其毒性代谢产物2-丙基-4-戊烯酸(4-ene-VPA)浓度。方法人血浆样品用乙腈直接沉淀蛋白后,色谱柱:Agilent Eclipse Plus-C₁₈(2. 1 mm×10. 0 mm,3. 5μm),流动相:乙腈-10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(均含0. 1%甲酸),梯度洗脱,用电喷雾离子化源,负离子方式,扫描方式为多反应监测(MRM),用于监测的离子反应分别为m/z 143. 2→143. 2(丙戊酸)、m/z 140. 8→140. 8(2-丙基-4-戊烯酸)和m/z 373. 0→329. 1(内标银杏酸(C17:1))。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果 VPA和4-eneVPA分别在0. 50～200. 00μg·m L^-1和0. 05～12. 50μg·m L^-1内线性关系良好(r分别为0. 998 4和0. 997 5),定量下限分别为0. 50和0. 05μg·m L^-1批内、批间RSD均小于8. 59%,提取回收率分别为76. 45%～86. 78%和78. 44%～83. 46%,内标归一化基质效应因子分别为93. 67%～97. 82%和92. 04%～104. 35%。结论本方法简洁、灵敏、专属性好,适用于人血浆中同时测定VPA和4-eneVPA浓度,可用于丙戊酸钠的血药浓度监测。     

LC-MS/MS法测定SD大鼠血浆中紫杉醇前药含量及其在临床前药代动力学研究中的应用

本实验建立了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速、灵敏测定Sprague-Dawley (SD)大鼠血浆中紫杉醇前药(Pro-PTX)及紫杉醇(PTX)的浓度。血浆样本以乙腈(0.1%甲酸)沉淀蛋白后,选用Ultimate AQ-C18色谱柱(50 mm×3.0 mm, 3μm),以乙腈-1 mmol·L^-1甲酸铵(含0.1%甲酸)为流动相,选用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,选择监测离子反应分别为m/z 983.4→415.2 (Pro-PTX)、m/z 854.4→286.1(PTX)和m/z 808.3→527.2 (多西他赛,内标)。方法验证结果表明,血浆中Pro-PTX和PTX的线性范围分别为2.00～500 ng·mL^-1(r> 0.99)和4.00～1 000 ng·mL^-1(r> 0.99),定量下限分别为2.00和4.00 ng·mL^-1; Pro-PTX和PTX低、中、高三浓度的质控样本批内、批间相对标准差(RSD)均小于9%...     

LC-MS/MS法测定骨肉瘤患者血清中甲氨蝶呤及其 代谢产物7-羟基甲氨蝶呤的浓度

目的:建立测定人血清中甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤浓度的LC-MS/MS法,并应用于骨肉瘤患者大剂量甲氨蝶呤化疗后的治疗药物监测,为临床合理用药提供依据.方法:以氨基蝶呤作为内标,血清样品经含内标甲醇沉淀蛋白处理.色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C18;柱温35℃;流速0.4 mL· min-1;流动相为含0.1％甲酸的水溶液和含0.1％甲酸的乙腈溶液,梯度洗脱.质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测甲氨蝶呤m/z 455.098→308.000,7-羟基甲氨喋呤m/z 471.187→324.100,氨基蝶呤m/z 441.198→294.100.结果:甲氨蝶呤浓度在2～1000 ng·mL-1 (r=0.9985),7-羟基甲氨蝶呤浓度在20～10000 ng·mL-1(r=0.9984)与峰面积线性关系良好.甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤日内及日间RSD≤6.21％.甲氨蝶呤、7-羟基甲氨蝶呤的平均回收率分别为102.83％～119.34％、88.41％～95.37％.结论:本方法简便、准确、快速,适用于甲氨喋呤及其代谢产物7-羟基甲氨喋呤的血药浓度测定.     

LC-MS/MS法同时测定拉考沙胺和吡仑帕奈的血浆药物浓度

目的 建立同时测定人血浆中2种第三代抗癫痫药拉考沙胺和吡仑帕奈血浆药物浓度的方法并应用于临床。方法 10例癫痫患者的血浆样品经乙腈沉淀蛋白并以乙腈-水(20∶80,V/V)稀释后，以氯氮平为内标，采用液相色谱-串联质谱法测定拉考沙胺、吡仑帕奈的质量浓度，再通过稀释倍数换算得血浆药物谷浓度。以Welch Ultimate XB-C₁₈为色谱柱，以10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相A、甲醇-乙腈-异丙醇(0.2%甲酸)混合溶液(7∶1.5∶1.5,V/V/V)为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.4 mL/min，柱温为40℃，进样量为5μL；采用电喷雾离子源以多反应监测模式进行正离子扫描，用于定量分析的离子对分别为m/z 251.2→144.1(拉考沙胺)、m/z 350.2→219.2(吡仑帕奈)、m/z 327.2→270.0(内标)。结果 拉考沙胺、吡仑帕奈检测质量浓度的线性范围分别为0.001 25～0.125μg/mL(r>0.99)、0.037 5～3.75 ng/mL(r>0.99)，定量下限分别为0.001 25μg/mL、0.037 5 ...