亚硒酸钠对UVB损伤人角质形成细胞的保护作用

目的:研究亚硒酸钠(Na2Se O3)对中波紫外线(UVB)损伤人角质形成细胞的保护作用。方法:培养永生化人角质形成细胞(Ha Ca T细胞),实验分为4组处理:(1)正常对照组;(2)Na2Se O3组:分别加入1 nmol/L、10 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L、200 nmol/L和1μmol/L的Na2Se O3预孵育24 h;(3)UVB组:300、600和900 J/m2UVB照射;(4)Na2Se O3+UVB组:Na2Se O3预孵育24 h后进行UVB照射。采用MTT法检测细胞增殖活性,采用流式细胞仪检测300 J/m2UVB照射后细胞的凋亡率。结果:(1)UVB组与正常对照组比较,细胞增殖活性显著降低(P0.05),细胞活性与UVB照射剂量呈负相关;(2)Na2Se O3组与正常对照组比较,细胞增殖活性无明显差异;(3)不同浓度Na2Se O3+UVB组与UVB组比较,细胞增殖活性增加,差异显著(P0.05),其中100 nmol/L组促进细胞增殖作用最强;(4)300 J/m2UVB照射后,不同浓度Na2Se O3+UVB组与UVB组比较,凋亡率下降,差异显著(P0.05),其中100 nmol/L组抑制凋亡作用最强。结论:UVB对角质形成细胞有损伤作用,且与照射剂量呈正相关;Na2Se O3具有光保护性能,可减轻UVB辐射损伤人角质形成细胞。     

UVA及UVB诱导人皮肤光生物学反应差异的研究进展

紫外线刺激皮肤后,表皮黑素细胞通过合成黑素,转移至临近的角质形成细胞,对皮肤起光保护作用.皮肤遭受过量紫外线刺激后出现一系列损伤反应,包括晒黑及炎症反应、细胞DNA损伤、光致癌作用等,UVA及UVB因波长不同,照射皮肤后出现的生物学反应存在差异.目前有关UVA及UVB刺激表皮细胞后的损伤反应机制一直是研究热点,研究两种紫外线所引起的光损伤机制之间的差异有益于预防一系列光损伤性疾病.     

红景天苷对中波紫外线诱导HaCaT细胞凋亡的影响

目的:探讨红景天苷对中波紫外线(UVB)诱导HaCaT细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将HaCaT细胞分为正常对照组、红景天苷处理组、UVB组和UVB+红景天苷组,先用UVB照射细胞,再用红景天苷处理HaCaT细胞24h,Real-time PCR和免疫印迹分别检测caspase 3、caspase 12、前细胞凋亡因子(CHOP)的mRNA及蛋白表达;MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:UVB处理组caspase 3、caspase 12、CHOP的mRNA和蛋白表达明显增加,红景天苷处理后明显降低。UVB+红景天苷组较UVB组细胞增殖显著增加,凋亡率减少23.22%。结论:红景天苷可通过抑制caspase 12、CHOP的表达,减少UVB引起的HaCaT细胞凋亡。     

P38丝裂原活化蛋白激酶在紫外线诱导角质形成细胞凋亡中的作用

目的 探讨中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞凋亡机制.方法 使用0、20、30、40、60、70、90 mJ/cm2 UVB辐射人角质形成细胞(HaCaT),辐射后0、1、2、3、4、6、24、48 h收集细胞和上清.流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;ELISA检测上清液中TNF-α水平;Western blot检测P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(p-P38MAPK)的表达.结果 UVB(30 mJ/cm2)辐射后,HaCaT细胞分泌TNF-α逐渐增加,24 h达高峰;P38抑制剂SB203580完全抑制TNF-α的分泌,部分阻止了细胞凋亡;以不同剂量UVB辐射HacaT细胞,在30 mJ/cm2时p-P38 MAPK表达量最高,且辐射后即可检测到p-P38 MAPK的表达,1 h时达高峰,以后逐渐下降,而P38MAPK表达量没有明显变化.结论 紫外线可通过激活P38 MAPK途经,促进TNF-α分泌来诱导角质形成细胞凋亡.     

紫外线诱导人皮肤成纤维细胞形态改变及对基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究紫外线(UVB)诱导人皮肤成纤维细胞中端粒长度及基质金属蛋白酶(MMPs)的变化,及其在UVB诱导光老化中的作用。方法原代培养人成纤维细胞,用第5代细胞进行UVB照射处理。观察细胞形态,实时定量PCR检测COL1a1和h TERT的mRNA表达细胞端粒长度,Western blot检测MMP-3和MMP-1蛋白。结果 30 m J/cm2UVB照射人成纤维细胞24 h后,细胞逐渐变圆、皱缩和排列紊乱;COL1a1和TERT的mRNA水平表达显著升高,基质金属蛋白酶MMP-3和MMP-1蛋白水平也显著升高,端粒长度显著缩短。结论 UVB可能诱导人皮肤成纤维细胞形态改变,及MMP-3和MMP-1的表达明显升高,启动了光老化的早期进程。     

冬凌草甲素调节高糖诱导的人肾小球系膜细胞异常增殖、炎症和纤维化北大核心CSCD

目的:探讨冬凌草甲素对高糖诱导的人肾小球系膜细胞(HGMCs)增殖、炎症和纤维化的影响,并初步探究其作用机制。方法:高糖联合冬凌草甲素培养HGMCs,CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和ELISA检测细胞上清液炎症因子水平,免疫荧光检测活性氧(ROS)含量,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,RTPCR联合Western blot检测TGF-β、纤维粘连蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平,Western blot检测TLR4/MyD88和p-P65蛋白水平。结果:与健康对照组相比,模型组细胞增殖、免疫应答和纤维化水平均显著提高(P<0.05)。与模型组相比,10μg/ml和20μg/ml冬凌草甲素组细胞增殖倍数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低(P<0.05),ROS和SOD含量升高,MDA含量显著降低(P<0.05),TGF-β、FN和α-SMA水平显著降低(P<0.05),TLR4/MyD88和p-P65蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:冬凌草甲素对高糖诱导的HGMCs增殖、炎症反应、纤维化和氧化应激水平具有调节作用,其作用机制可能与下调TLR4、MyD88和p-P65水平有关。     

抑制抗增殖蛋白2增强非小细胞肺癌细胞系A549对厄洛替尼敏感性

目的 探讨抗增殖蛋白2(PHB2)在非小细胞肺癌细胞系A549对厄洛替尼(Erl)敏感性中的作用及其机制。方法 在A549细胞中转染PHB2小干扰RNA(siPHB2),观察抑制PHB2表达对Erl诱导的细胞增殖和凋亡的影响。利用MitoTracker染色和感染绿色荧光蛋白-微管相关蛋白(GFP-LC3)观察微管相关蛋白(LC3)和线粒体共定位,EdU实验检测细胞增殖,平板集落检测细胞集落形成能力,TUNEL实验检测细胞凋亡,Western blot检测PHB2和LC3Ⅱ蛋白表达水平,用相应试剂盒检测线粒体膜电位、细胞色素c含量和呼吸链复合物Ⅰ/Ⅱ/Ⅴ活性。结果 与siPHB2组和siCtrl+Erl组相比,siPHB2+Erl组EdU阳性的细胞数显著减少(P<0.05),集落形成数显著减少(P<0.05),TUNEL阳性的细胞数显著增加(P<0.05),线粒体膜电位显著降低(P<0.05),线粒体呼吸链复合物Ⅰ/Ⅱ/Ⅴ活性均显著降低(P<0.05),线粒体内细胞色素c减少(P<0.05),而细胞质内细胞色素c的增加(P<0.05)。结论 抑制...     

脂肪源性血管基质成分对皮肤光老化的影响

 目的:观察人脂肪源性血管基质成分 (stromal vascular fractions, SVF) 对中波紫外线(ultraviolet B, UVB) 诱导的裸大鼠皮肤光老化的影响。方法:6周龄裸大鼠随机分为正常对照组及实验组,实验组持续UVB照射8周建立皮肤光老化模型并随机分为模型组,以及SVF低剂量 (low-dose, LD)、中剂量(middle-dose, MD) 和高剂量 (high-dose, HD) (100 μL悬液中的细胞数分别为10⁴、10⁵和10⁶) 治疗组;采用酶消化法提取健康女性脂肪组织中的SVF,分别取低、中、高剂量的SVF悬液注射于裸大鼠背部皮下;模型组注射相同剂量的生理盐水,正常对照组不做任何处理;7 d后取材,观察注射部位表皮厚度及结构的改变;28 d后取材观察注射部位真皮厚度及结构的改变。结果:SVF治疗7 d后,中、高剂量治疗组裸大鼠皮肤较实验对照组表皮层厚度减小、角质层比例下降、基底层处于异常增殖状态的细胞核减少(P<0.05)。治疗28 d后,中剂量及高剂量治疗组I型胶原蛋白mRNA相对表达量增加,III型胶原蛋白及基质金属蛋白酶-3 (matrix metalloproteinases-3, MMP-3) mRNA相对表达量下降(P<0.05),高剂量治疗组皮肤真皮层厚度增加(P<0.05)。结论:SVF具有抗皮肤光老化的潜能,有潜在的临床应用价值。     

中波紫外线对皮肤免疫细胞的作用研究

紫外线诱导皮肤免疫抑制一直是光学免疫领域的研究热点,而中波紫外线(UVB)是引起皮肤免疫抑制作用的主要光谱,其对皮肤免疫细胞的作用是紫外线诱导皮肤免疫抑制的关键,皮肤中主要的免疫细胞大致也可分为固有免疫细胞和非固有免疫细胞,固有免疫细胞包括皮肤朗格汉斯细胞(LC)、肥大细胞、单核巨噬细胞、角质形成细胞(KC)、NK细胞;非固有免疫细胞主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞.研究UVB对皮肤固有免疫细胞和非固有免疫细胞的影响很有意义.     

细菌超抗原SEB抑制小鼠角质形成细胞糖皮质激素受体核转移的实验研究

目的探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对小鼠角质形成细胞糖皮质激素受体GRα核转移的影响。方法 1%二硝基氯苯重复刺激Balb/c小鼠背部皮肤构建变应性接触性皮炎动物模型,分别用SEB、地塞米松、SEB+地塞米松处理该模型鼠背部局部皮肤,处理48 h后HE染色计数真皮内炎性细胞数量,免疫荧光和Western blot法观察GRα在各组角质形成细胞的胞浆和核浆分布,ELISA法观察IL-2、4、13和TNF-α等炎症因子在各组的表达变化。结果 SEB处理后真皮内炎性细胞显著增加。地塞米松可显著减少炎性细胞数目,而SEB可部分拮抗地塞米松的抗炎作用;激光共聚焦显示正常角质形成细胞GRα主要存在于细胞浆,少量存在于胞核。地塞米松可显著增加GRα核/浆阳性比值,而SEB可显著减弱地塞米松诱导的GRα核/浆阳性比值;Western blot检测也显示地塞米松处理后GRα蛋白入核量显著增多,而SEB可显著抑制地塞米松诱导的GRα蛋白入核量,并增加GRα蛋白胞浆滞留;与正常组相比,皮炎组IL-2、4、13和TNF-α表达均显著升高,地塞米松可显著抑制各炎症因子增多,而SEB可显著拮抗地塞米松对炎性因子的抑制作用。结论 SEB在局部皮炎诱导的激素减敏与其抑制角质形成细胞GRα核转移障碍有关。     

TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用

目的:探讨TF-1细胞凋亡相关基因19(TFAR19)在系统性红斑狼疮(SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法:应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Western blotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线(UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR19的表达及其与SLE患者病情的关系。结果:在剂量为30mJ/cm²的UVB照射24h后,HaCaT细胞开始凋亡,TFAR19在此过程中有表达,发现活动期SLE患者血清中TFAR19的抗体值高于稳定期和正常对照组的值(P≤0.05)。结论:在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中,有TFAR19的参与并发挥了作用,提示TFAR19可能和SLE的发病和病情有关。     

人参皂苷对衰老小鼠皮肤和人角质形成细胞的抗衰老研究

目的:观察人参皂苷在体内和体外抗皮肤衰老的作用。在体外实验中,观察HaCaT细胞在不同剂量的中波紫外线(UVB)照射下的存活率、损伤情况,并探讨人参皂苷Rg1Rb1对人角质形成细胞(HaCaT)的保护作用;在体内实验中,观察人参茎叶总皂甙口服对小鼠皮肤的抗衰老作用。方法:采用MTT法分析剂量为30,60,90,120mJ.cm2的UVB照射后细胞存活率的变化,用Hoechst33258核染色法和单个细胞凝胶电泳(彗星电泳)技术观察细胞核的损伤情况以及20μg.ml-1人参皂苷Rg1、Rb的保护作用。小鼠被随机分为四组:正常对照组;D-半乳糖衰老模型组;人参茎叶总皂甙低剂…     

蕨麻多糖通过调控miR-421表达对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响北大核心CSCD

目的:探讨蕨麻多糖(PAP)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:采用LPS诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,用浓度为0.05、0.1、0.2 mg/ml蕨麻多糖处理细胞,anti-miR-NC、antimiR-421分别转染至心肌细胞后用LPS处理细胞,miR-NC、miR-421 mimics分别转染至心肌细胞后用蕨麻多糖与LPS共同处理细胞;ELISA法检测细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miR-421的表达量。结果:蕨麻多糖呈浓度依赖性降低LPS诱导的心肌细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平(P<0.05),并可降低细胞凋亡率(P<0.05),还可降低miR-421的表达量(P<0.05);转染anti-miR-421后LPS诱导的心肌细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平降低(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05);转染miR-421 mimics能够逆转蕨麻多糖对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的作用。结论:蕨麻多糖可通过抑制miR-421的表达抑制心肌细胞炎症反应及细胞凋亡,进而减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。     

miR-21通过NF-κB信号通路影响血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞炎症因子表达

目的探讨miR-21对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导肾小球系膜细胞增殖和炎症因子的影响。方法以AngⅡ诱导体外培养人肾小球系膜细胞HMC,在AngⅡ诱导的HMC细胞中转染miR-21模拟物。采用实时荧光定量PCR检测miR-21表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,Western blot检测NF-κB信号通路核心分子IκBα和p65蛋白及磷酸化水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症相关因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。采用NF-κB信号通路激活剂PMA处理,检测对炎症因子表达的影响。结果 AngⅡ组HMC细胞中miR-21表达水平较Control组降低(P<0.05),细胞增殖能力明显升高(P<0.05),炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达升高(P<0.05)。进一步在AngⅡ组过表达miR-21后,IκBα和p65蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),细胞增殖能力明显降低(P<0.05),IL-6、IL-1β和TNF-α的表达亦降低(P<0.05)。NF-κ...     

circRNA_103809对结肠癌SW480细胞线粒体功能和炎症因子水平的调节作用北大核心CSCD

目的:探究环状RNA(circRNA)_103809对结肠癌SW480细胞作用。方法:qRT-PCR检测结肠癌组织及细胞、正常组织及细胞中circRNA_103809表达。将SW480细胞分为对照组(Control),过表达circRNA_103809组(LV-circRNA_103809)及其阴性对照组(LV-scramble)。除对照组外,按分组分别转染LV-circRNA_103809和LV-scramble质粒。qRT-PCR检测各转染组SW480细胞中circRNA_103809、Ki67和p21表达;CCK8检测各组细胞增殖倍数;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;线粒体膜电位的变化;试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测各组细胞上清液中IL-1β、IL-6和IL-4炎症因子水平,免疫荧光检测p65的核转移;Western blot检测Bax/Bcl-2,活化胱天蛋白酶(cleaved cas)-9/cas-9,cleaved cas-3/cas-3相对表达量及细胞核中p65蛋白的表达。结果:结肠癌组织及细胞中circRNA_103809表达显著下调,p21的表达显著上调(P<0.05)。与对照组相比,过表达circRNA_103809组SW480细胞中circRNA_103809的表达显著上调,Ki67的表达显著下调(P<0.05),细胞增殖倍数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),线粒体膜电位降低,Bax/Bcl-2、cleaved cas-9/cas-9和cleaved cas-3/cas-3显著升高(P<0.05),SOD含量减少,MDA含量增加(P<0.05),促炎因子IL-1β和IL-6水平显著降低,抗炎因子IL-4水平显著升高(P<0.05),细胞核中p65蛋白表达显著下调,核定位显著减少(P<0.05)。结论:circRNA_103809在结肠癌SW480细胞中发挥抑癌作用,抑制细胞增殖,通过增强氧化应激促进细胞凋亡,抑制炎症反应阻止癌细胞发展进程。     

观察不同模式的Q-开关红宝石激光对UVB诱导的色素沉着斑的影响

目的：观察不同模式的Q-开关红宝石激光对中波紫外线(UVB)诱导的豚鼠皮肤色素沉着斑的影响。方法：10只豚鼠分为4组,即对照组(不行激光治疗)、低剂量组、高剂量组和点阵组。用UVB照射豚鼠背部皮肤诱导色素沉着后,使用低、高剂量及点阵模式的Q-开关红宝石激光分别照射色素沉着区,能量分别为1.5,6.0,3.0 J/cm2,分别照射4,1,2次,每次间隔1周。治疗前及治疗后即刻、2周,采用拍照、Fontana-Masson组织染色、电镜等方法观察色斑的颜色及色斑皮肤组织中的黑素颗粒、黑素小体的变化。结果：低剂量组、点阵组治疗后2周色素完全消退,观察8周未见复发,色度值(L*值)较治疗前增加,黑素颗粒及黑素小体明显减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组皮肤色素沉着出现不同程度地复发。结论：Q-开关红宝石激光可以有效治疗豚鼠皮肤色素沉着,点阵模式治疗的疗效较好。     

双氢青蒿素通过抑制角质形成细胞的增殖和促炎因子的产生改善小鼠银屑病样皮肤炎症

目的:明确双氢青蒿素抑制银屑病样小鼠皮肤炎症反应,并初步探讨其可能的作用机制。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、双氢青蒿素低剂量组和高剂量组。将5%咪喹莫特乳膏涂抹小鼠背部皮肤诱导银屑病样小鼠模型,双氢青蒿素于咪喹莫特处理前1 h灌胃处理。结果:PASI临床评分和小鼠背部皮肤大体变化结果显示,双氢青蒿素可以明显抑制小鼠红斑、银屑和皮肤厚度,呈剂量依赖性,且PASI临床评分具有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,双氢青蒿素明显抑制表皮增厚,钉状突起明显缩短,炎症细胞浸润减少;免疫组织化学染色结果显示,双氢青蒿素可以使小鼠皮肤中Ki67阳性细胞数量明显减少;相对于模型组,双氢青蒿素处理小鼠在银屑病诱导后的第3天和第6天小鼠皮损组织中的IL-1β、IL-18、IL-6以及CXCL-1表达显著下降,但并未表现出明显的计量依赖性(P<0.05);免疫印迹试验结果显示,双氢青蒿素明显抑制银屑病小鼠皮损中NF-κB(p65)和p-p38的表达,呈剂量依赖性(P<0.05),磷酸化ERK的表达在双氢青蒿素高剂量组表现有统计学差异(P<0.05)。结论:双氢...     

Apelin/APJ在人支气管上皮细胞炎症反应中的作用及地胆头对其影响的研究北大核心CSCD

目的:探讨Apelin/APJ系统在急性肺损伤(ALI)细胞模型的作用,研究中药地胆头(草)对支气管上皮细胞Apelin/APJ系统及炎症介质的影响。方法:依据对人支气管上皮细胞(16HBE)施加条件不同(n=8),分为正常对照组(阴性对照组),模型组(LPS组),阳性对照组(LPS+Apelin-13组),低、中、高地胆头组[LPS+ESE(20μg/ml)组、LPS+ESE(40μg/ml)组、LPS+ESE(80μg/ml)组]。激光共聚焦扫描显微镜法检测16HBE细胞及炎症模型Apelin/APJ表达与定位;CCK8法检测地胆头对LPS诱导的细胞损伤的影响;ELISA法测定各组支气管上皮细胞上清液炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平;RT-PCR及Western blot法检测16HBE中Apelin/APJ的转录及表达。结果:Apelin、APJ均在16HBE细胞膜上表达;10μg/ml LPS干预后Apelin/APJ细胞膜表达明显增多(P<0.05),IL-1β、IL-6和TNF-α细胞因子水平明显升高(P<0.05),Apelin-13+LPS组中16HBE的Apelin/APJ表达上调,支气管上皮细胞炎症反应减轻(P<0.05),地胆头预处理可明显提高Apelin/APJ表达,抑制LPS诱导的炎症细胞因子的产生(P<0.05)。结论:Apelin/APJ系统在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)过程中被激活,对抗炎症反应。地胆头通过上调16HBE细胞Apelin/APJ系统,减轻炎症反应,从而发挥抗炎作用。     

调控γδT细胞受体对脑缺血再灌注小鼠Treg及细胞因子的影响北大核心CSCD

目的:探索γδT细胞受体对心脏骤停-心肺复苏(CPCR)后脑缺血再灌注小鼠体内Treg及相关细胞因子的影响。方法:90只雄性C57BL/6小鼠随机分为CPCR组、对照组和CPCR+γδT细胞受体拮抗组(CPCR后注射γδT细胞受体拮抗剂),每组30只。收集小鼠脑组织,TUNEL检测神经元凋亡,HE染色观察神经元损伤情况,Western blot检测脑组织Foxp3蛋白表达,ELISA检测血清中MPO活性、TNF-α、IL-6和IL-1β浓度。结果:与对照组相比,CPCR组小鼠神经元凋亡显著增加(P<0.05),脑组织损伤严重,MPO活性、TNF-α、IL-6和IL-1β浓度显著上升(P<0.05),Foxp3表达显著下调。与CPCR组相比,CPCR+γδT细胞受体拮抗组大鼠神经元凋亡减少(P<0.05),脑组织损伤减轻,MPO活性、TNF-α、IL-6和IL-1β浓度明显降低(P<0.05),Foxp3表达显著上调。结论:γδT细胞受体拮抗剂可通过抑制炎症反应缓解CPCR后脑缺血再灌注损伤。     

甜叶悬钩子苷通过NF-κB和MAPK信号通路抑制小鼠神经炎症细胞模型炎症反应

目的：通过体外实验探究甜叶悬钩子苷(RUB)对脂多糖(LPS)诱导小鼠BV-2小胶质细胞神经炎症反应的影响及改善机制。方法：采用CCK-8法检测RUB对BV-2细胞活力的影响;使用LPS诱导BV-2小胶质细胞建立神经炎症细胞模型,用不同浓度RUB进行干预,将BV-2细胞分为对照组、LPS模型组及LPS+RUB(25、50和100μmol/L)干预组,采用ELISA法检测细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;RTqPCR法检测促炎细胞因子环加氧酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平;Western blot法检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白的表达;免疫荧光染色观察细胞中p65的表达情况。结果：与对照组相比,LPS诱导后细胞上清液中IL-1β和TNF-α的分泌量增加(P<0.01),促炎细胞因子COX-2、iNOS、IL-1β和TNF-α的mRNA水平显著增加(P<0.01),NF-κB和MAPK信号通路蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01),且p65出现荧光...