脱钙骨泥塑形剂的研究进展

脱钙骨基质(demingeralized bone matrix,DBM)是目前常用骨移植材料之一,Urist[1]等在1965年首次提出DBM具有诱导成骨能力,随后证明DBM主要含有Ⅰ型胶原、非胶原蛋白及骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)和一些生长因子的脱钙骨基质颗粒,BMP可诱导间充质细胞分化为软骨细胞及成骨细胞,最终形成软骨组织和骨组织,     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)—乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组，即MW—EDTA(15℃)，Jenkins脱钙-固定液(20℃)，10％EDTA(20℃)和10％硝酸(20℃)，其中Mw—EDTA方法中EDTA的浓度分别是4％、7％、10％、13％和16％。应用免疫组织化学路AB染色，光镜观察免疫组织化学染色结果。结果MW—EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙—固定液(20℃)、10％ED—TA(20℃)及10％硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法，其时间明显缩短。其中用10％和13％浓度的EDTA脱钙的组织，其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4％、7％和16％者。结论以Mw—10％EDTA技术进行组织脱钙，其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好。     

胎儿脱钙骨的制作及临床应用

胎儿脱钙骨 (以下简称脱钙骨 )是指利用一定的技术处理使胎儿的躯干及四肢骨脱钙 ,并降低抗原性 ,成为可被利用的同种异体骨 ,用以替代自体骨移植。我们自 1995年起初步建立了脱钙骨骨库并在临床上应用了 15例 ,疗效满意 ,现报告如下。材料与方法一、脱钙骨的来源　全部脱钙骨取自于本院产科引产的胎儿 ,选择胎儿的标准是 :(1)胎儿必须在孕 6个月以上 ,且引产时间均在 12小时以内。 (2 )采用水囊或米索引产法。 (3)母体必须没有感染病史。 (4 )母体没有肝炎、结核、梅毒、艾滋病、肿瘤及代谢病病史。 (5 )母体没有药物中毒史。自 1995年以来…     

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。结论 14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长,对骨组织的损伤最小。     

骨组织脱钙的超声处理

骨组织中的主要成分是无机盐和胶原,应用超声处理及Plang K-Rycho氏法对骨组织进行脱钙,不仅具有较好的脱钙作用,且组织结构完整,切片染色清晰,现介绍如下: 1资料与方法 1.1应用原理:将组织放入溶剂介质或熔融石蜡中,使之伴随80万次/s的高速超声振荡而产生周期性的缩涨运动,这样既能使组织中的水份自然地被有机溶剂替代出来,又能加速熔融石蜡液渗至组织内,使脱钙标本40min之内即可完成. 1.2仪器和设备:DCSK-Ⅲ型多功能组织处理仪(江苏常州中威电子仪器厂产)输出功率1200w、频率50MHz;80ml烧杯,针灸针.     

同种异体半脱钙骨修复骨缺损27例报告

为评价同种异体半脱钙骨修复骨缺损的效果，对27例骨肿瘤或瘤样病变手术后骨缺损用同种异体半脱钙骨修复进行1～13年随访观察，其中5例缺损长度超过5cm。结果证实其骨诱导能力较强，充填后支架作用好，无排异现象。本文认为半脱钙骨是一种较理想的骨缺损充填修复生物材料。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

一种改良脱钙液在骨组织制片中的临床应用

目的：介绍一种既能缩短脱钙时间又能提升骨组织制片质量的改良脱钙方法。方法选取68例手术骨标本使用改良脱钙液进行脱钙,观察其脱钙情况及染色效果。结果此方法处理的标本脱钙效果完全,组织切片质量好,无明显刀痕,厚薄均匀,颜色鲜艳,对比清晰。结论改良脱钙液有利于临床骨组织及钙化组织的脱钙处理。     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)-乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响.方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组,即MW-EDTA(15℃),Jenkins脱钙-固定液(20℃),10%EDTA(20℃)和10%硝酸(20℃),其中MW-EDTA方法中EDTA的浓度分别是4%、7%、10%、13%和16%.应用免疫组织化学LSAB染色,光镜观察免疫组织化学染色结果.结果MW-EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙-固定液(20℃)、10%ED-TA(20℃)及10%硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法,其时间明显缩短.其中用10%和13%浓度的EDTA脱钙的组织,其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4%、7%和16%者.结论以MW-10%EDTA技术进行组织脱钙,其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好.     

脱钙人牙基质修复骨节段性缺损的疗效学评价研究

目的：评价脱钙人牙基质修复骨节段性缺损的疗效。方法：采用脱钙人牙基质为观察材料，建立试验家兔桡骨节段性缺损动物模型，用完全随机同期对照方法，对脱钙人牙基质材料(DDM)进行7日的疗效学观察。结果：经组织学观察，发现用DDM修复的骨缺损区6只动物均有不同程度地以肥大间充质细胞为主的新骨生长趋势；对照组5只动物，其中3只动物未见软骨细胞生长趋势．2只动物可见以软骨细胞为主的新骨生长趋势。从细胞生长的形态和数量来观察，对照组与DDM组相比．对照组的细胞形态和生长趋势比DDM组略好。结论：基于本次试验的结果，未发现脱钙人牙基质材料(DDM)有明显的疗效作用。     

EDTA Na2滴定血清钙方法的改进

EDTA Na2滴定血清钙试剂中各成份含量及血清镁对滴定结果观察均有不同程度的影响。血清钙测定在临床上具有重要意义,特别是对孕、产妇、小儿缺钙和甲状旁腺机能观察等尤为重要。原法ED-TA Na_2滴定血清钙终点不易观察,波动范围也较大,改进后可起到不同程度的弥补作用,适合中小型医院使用。现将改后方法报道如下。     

人成骨细胞与异体脱钙松质骨成骨作用的实验研究

目的 观察人成骨细胞体外培养和接种于异体脱钙松质骨的成骨过程及特点。方法 采用正常人骨膜分离提取成骨细胞在体外进行培养，扩增，观察成骨细胞形态和生长情况，然后将其接种于异体脱钙松质骨支架上，植入裸鼠体内进行培养，8周后对大体标本进行扫描电镜的组织学检查，观察成骨情况。结果人骨膜分离、培养一、扩增的成骨细胞在体外生长良好，增殖旺盛。成骨细胞接种于异体脱钙松质骨植入裸鼠体内培养。8周后组织学观察支架有块状断层吸收．有岛状新生成骨。结论 成骨细胞接种于异体脱钙骨松质骨能钙化成骨，为骨缺损的修复提供骨源成为可能。     

测定卡巴匹林钙含量的两种方法比较

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定卡巴匹林钙的含量,并和容量滴定法进行对比研究。方法色谱柱为美国热电C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸-乙腈-水(2∶300∶600)溶液,进样量20μL,检测波长为228 nm;对两种测定方法分别进行了方法学验证研究。结果两种含量测定方法在考察浓度范围内均具有良好线性关系。结论采用高效液相色谱法测定卡巴匹林钙的含量,该法操作简便,专属性强,结果准确。     

3种不同脱钙液对牙齿标本切片免疫组化染色效果的研究

在口腔组织病理的研究中,常常需要通过切片对牙齿组织相关细胞进行观察和对比分析,由于牙釉质是体内硬度最高的组织,如果不能很好地进行脱钙处理,就很难制得优良的切片并获得满意的染色结果.目前尚无公认的用于牙齿组织的理想方法,因此进行了两种配方的酸类脱钙液和EDTA螫合剂脱钙液的脱钙时间和染色效果的研究.     

Von Ebner氏脱钙液利用超声微波技术在骨组织脱钙中的研究与分析

用氯化钠75g加入500ml蒸馏水中,再加入浓盐酸15ml,最后加蒸馏水至1000ml配制成Von Ebner脱钙液,此脱钙液与超声微波技术相结合运用到骨组织脱钙中,此方法操作简单易行,脱钙时间缩短,脱钙程度很容易掌控,脱钙效果良好,可以制出优质切片,不易落片,不褪色,组织结构清晰,染色鲜明,为病理诊断提供优质切片。此方法容易被广大病理工作者所掌握,同时所需试剂及设备易得,经济方便,特别适用于基层医院的推广。     

两种制剂BMP-7的骨诱导活性比较

目的通过试验评价选用不同载体的骨形成蛋白-7(BMP-7)的骨诱导活性。方法选择成年雄性昆明小鼠随机分为三组,其中实验组选用的BMP-7载体为PLA(聚乳酸)和PLA/明胶和对照组为只采用PLA。通过异位成骨实验,对不同制剂BMP-7的骨诱导活性进行分析评价。结果及结论从试验小鼠骨骼Ca含量测定结果可以看出,BMP-7/PLA/明胶组可较早的出现骨诱导活性,且BMP-7/PLA/明胶组比BMP-7/PLA组效价高。     

抗原修复脱钙组织石蜡切片抗原性后免疫组织化学染色效果的比较

目的 探讨抗原修复方法对脱钙组织石蜡切片抗原性的恢复作用。方法 将“低温微波-硝酸快速脱钙方法”处理的骨及其软组织分为5组:Ⅰ对照组、Ⅱ盐酸组、Ⅲ胰蛋白酶组、Ⅳ微波-枸橼酸组和V微波-Triton X-100组。应用LSAB技术检测ANP,5-HT,S-100,NF,GFAP等7种抗体在Ⅰ～V组的表达,图像分析各组阳性细胞的平均光密度值(OD)。结果进行统计学处理。结果 Ⅱ一Ⅴ的OD值(分别为.097±0.35、1.03±0.38、1.96±0.49和1.89±0.43)明显高于Ⅰ组(0.26±0.34),Ⅳ、Ⅴ组明显高于Ⅱ、Ⅲ组,有非常显著差异P<0.01;Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ与Ⅴ组间无显著差异P>0.05。结论 微波缓冲液和表面活性剂恢复脱钙组织石蜡切片抗原明显好于胰蛋白酶和盐酸,能显著提高免疫组化染色的敏感性。