HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的芍药苷及 其药动学研究

目的：建立HPLC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式：多反应离子监测，选择监测的离子为m/z 450~m/z 327 (芍药苷) 和m/z 388~m/z 225(栀子苷)。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为294.78 mg·kg-1。HPLC-MS/MS法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药动学参数分别为Cmax(1.55±0.53) mg·L-1，Tmax(0.9±0.3) h，t1/2(1.51±0.63) h，MRT(3.08±0.74) h，AUC0→τ(4.68±0.85) mg·h-1·L-1。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的Cmax，Tmax，t1/2，MRT，AUC0→τ分别为(0.93±0.42) mg·L-1，(1.5±0.8) h，(3.08±1.79) h，(5.19±1.95) h，(3.36±0.56) mg·h-1·L-1。两组药动学参数中，MRT，Cmax和AUC0→τ具有显著性差异(P<0.05)。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的药动学。     

盐酸左氧氟沙星在前列腺炎大鼠体内的药代动力学研究

目的研究细菌性前列腺炎病理模型下，盐酸左氧氟沙星（Levofloxacin Hydrochloride）在大鼠体内的药代动力学特征。方法36只大鼠造成细菌性前列腺炎病理模型后，单剂量一次灌胃内服盐酸左氧氟沙星[80mg／（kg&#183;bw）]；采用高效液相色谱法测定血药浓度，血药浓度最低检测限0．001μg／ml，并以DAS2．0药动学软件对所得数据进行分析。结果药物体内过程符合一级吸收二室模型（权重=1／CC），主要动力学参数及拟合方程如下：T1／2Ka为（45．294&#177;2．07）min，T1／2α为（63．963&#177;15．258）min，T1／2β为（280．535&#177;214．601）min，Tmax为（50&#177;17．321）min，Cmax为（14．905&#177;3．143）mg／L，AUC（0-1440）为（2561．219&#177;430．592）（mg&#183;min&#183;L^-1），Ka为（0．015&#177;0．001）min^-1，MRT（0→1440）为（196．865&#177;50．656）min，拟合方程为：C=66．697&#183;e^0.011t＋6．031&#183;e^-0.004t-72．728&#183;e^-0.015t。结论盐酸左氧氟沙星在细菌性前列腺炎模型大鼠体内吸收迅速，血药浓度较高，分布广泛，消除较为缓慢。     

染料木素自微乳在家兔体内的相对生物利用度研究

目的研究染料木素自微乳在家兔体内的药物动力学和相对生物利用度。方法家兔分别灌胃染料木素自微乳和染料木素CMC—Na混悬液，用HPLC法测定不同时间血浆样品中染料木素的浓度，绘制药-时曲线，计算药动学参数及相对生物利用度。结果染料木素自微乳和染料木素混悬液药-时曲线下面积（AUC0→10h）分别为（24．90&#177;1．24）和（10．71&#177;0．86）μg&#183;h&#183;mL^-1，血药峰浓度（Cmax）分别为（4．02&#177;0．20）和（0．99&#177;0．04）μ&#183;mL^-1，达峰时间（Tmax）分别为2h和4h，染料木素自微乳较染料木素混悬液的相对生物利用度为232．49％。结论染料木素自微乳可显著提高染料木素的生物利用度。     

升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对TNF-α所致大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响。方法：建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞原代培养方法，将细胞分为空白组、模型组、升麻苷组、5-O-甲基维斯阿米醇苷组，并采用细胞计数法和免疫化学方法分别对平滑肌细胞的生长特性和纯度进行测定。用MTT法观察升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷各剂量组拮抗肿瘤坏死因子（TNF—α）诱导平滑肌细胞增殖的作用，用流式细胞技术测定升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷对平滑肌细胞周期的影响。结果：升麻苷（50，100，200mg&#183;L^-1）和5-O-甲基维斯阿米醇苷（50，100，200mg&#183;L^-1）均能明显抑制TNF—α引起的平滑肌细胞增殖，与TNF—α组相比有极显著差异（P〈0．01）。升麻苷（50，100，200mg&#183;L^-1）和5-O-甲基维斯阿米醇苷（50，100，200nag&#183;L^-1）均使G1／G0期细胞比例增加，S期、G2／M期细胞比例减少，与TNF—α组相比差异极显著（P〈0．01）。结论：升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷对TNF-α引起的平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用。     

不同采收期对江西栀子熊果酸含量的影响

目的确定江西栀子最佳采收期，保证江西栀子的质量。方法采用高效液相色谱法，以熊果酸为化学对照品，固定相为Ultimate^TM C18键合硅胶枉（4．6mm&#215;250mm，5μm），流动相为甲醇：水：冰醋酸：三乙胺（90：10：0．03：0．06），流速0．6ml&#183;min^-1，温度25℃，波长210nm测定江西栀子熊果酸含量。结果熊果酸在0．1～3．0μg范围内峰面积A与其质量肘呈现良好的线性关系，其回归方程为：A=-12954．88＋452850．96M，r=0．9996，n=7；3批江西黄栀子中熊果酸的含量分别为（0．5910&#177;0．003944）mg&#183;g^-1药材，RSD=0．6678％，n=3；（0．5760&#177;0．005033）mg&#183;g^-1药材，RSD=0．8737％，n=4；（0．5444&#177;0．01096）mg&#183;g^-1药材，RSD=2．039％，n=3；3批江西红栀子中熊果酸的含量分别为（0．3616&#177;0．000360）mg&#183;g^-1药材，RSD=0．100％，n=3；（0．355&#177;0．006250）mg&#183;g^-1药材，RSD=1．763％，n=5；（0．3816&#177;0．002835）mg&#183;g^-1药材，RSD=0．7431％，n=3；精密度实验RSD=1．754％，仪器精密度良好；稳定性实验RSD=2．493％，在3．5h测定熊果酸的含量是稳定的；江西黄栀子重复性实验RSD=0．9411％，江西红栀子重复性实验RSD=0．7792％，平均回收率101．9％。结论江西黄栀子中熊果酸含量显著高于江西红栀子，选择合理的采收期对于江西栀子质量非常重要，可为其他产地栀子确定最佳采收期提供借鉴，具有非常重要的推广价值。     

雾化吸入银杏叶总黄酮对哮喘小鼠Th1／Th2失衡的影响

目的：研究银杏叶总黄酮（total ginkgo flavone glycosides，TFG）对哮喘小鼠辅助性T细胞1／辅助性T细胞2（Th1／Th2）失衡的影响。方法：48只BALB／e小鼠随机分为正常组、哮喘组、TGF雾化吸入组以及地塞米松组，以卵蛋白（OVA）、氢氧化铝免疫系统致敏和局部激发的方法建立哮喘模型。自实验第21天起给予TFG治疗组连续雾化吸入50g&#183;L^-1TFG溶液30min，地塞米松组腹腔注射地塞米松1mg&#183;kg^-1，连续10d。第32天酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法测定肺细胞灌洗液（bronehalveolar lavage fluid，BALF）中细胞因子γ-干扰素（interferon-γ，IFN-γ）、白介素-4（interleukin-4，IL-4）和血清中总免疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）含量，观察各组肺组织的病理变化，免疫组织化学染色技术检测肺组织中GATA连接蛋白-3（GATA binding protein-3，GATA-3）的表达情况。结果：与模型组比较，TFG组BALF中IL-4含量（49．30&#177;7．95）ng&#183;L^-1降低（P〈0．01）、IFN-γ水平升高（49．08&#177;5．46）ng&#183;L^-1（P〈0．01）、血浆总IgE水平降低（9．47&#177;1．52）μg&#183;L^-1（P〈0．01）；模型组支气管平滑肌肥厚，黏膜充血、水肿，管腔内可见黏液栓，并有大量炎性细胞浸润；而TFG组和地塞米松组小鼠的上述炎症性改变明显减轻；模型组GATA-3表达显著，TFG治疗组则明显减轻。结论：雾化吸入TFG对哮喘小鼠有明显的治疗作用，其机制可能与阻断GATA-3的表达、恢复Th1／Th2平衡有关。     

芦丁在不同介质中平衡溶解度的测定

目的测定芦丁在水、0．1mol&#183;L^-1 HCl和不同pH值磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度。方法，采用紫外分光光度法测定芦丁在水、0．1mol&#183;L^-1 HCl和磷酸盐缓冲液中的浓度。结果37℃下，芦丁在水中的平衡溶解度为194．57mg.L^-1;在0．1mol．L^-1 HCl中的平衡溶解度为173．08mg&#183;L^-1；在磷酸盐缓冲溶液中随缓冲液pH值增加（2．5—7．8），其溶解度由55．48mg&#183;L^-1递增到521．08mg&#183;L^-1。结论芦丁极微溶于水；芦丁的溶解度受介质的pH值影响大。     

小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α（HNF4α）表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶（GK）活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱（0，1，3，10，30，100μmol&#183;L^-1）和1mmol&#183;L^-1二甲双胍干预24h后，采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达；采用Westernblot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100μmol&#183;L^-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达，二者同时在30μmol&#183;L^-1时达到最大值（HNF4αmRNA相对吸光度为0．48&#177;0．20，蛋白相对吸光度为3．47&#177;0．86，P〈0．01）；在10，30μmol&#183;L^-1时明显上调GK活性，同时在30μmol&#183;L^-1时达到最大值（0．080&#177;0．073，P〈0．05）；而二甲双胍对HNF4α mRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4仅的表达进而调节GK活性有关。     

小鼠经鼻腔给药醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳后体内栀子苷的动力学比较研究

该实验建立了小鼠体内醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳鼻腔给药后测定血浆栀子苷浓度的高效液相色谱法,探讨2种制剂经鼻腔给药后栀子苷在小鼠体内的药动学过程。将80只小鼠分为2组,分别鼻腔给药醒脑静微乳和mPEG2000-PLA修饰醒脑静微乳后,于不同时间点摘眼球取血,HPLC测定血浆中栀子苷的量,以Kinetica软件非房室模型拟合药动学参数。结果显示小鼠鼻腔给药醒脑静微乳后,血药主要药动学参数为C_max（4.36±2.69）mg·L^-1,t_max1 min,MRT（29.73±4.54）min,AUC（53.63±14.03）mg·L^-1·min;小鼠鼻腔给药共聚物修饰醒脑静微乳后,血药主要药动学参数为C_max（9.75±4.14）mg·L^-1,t_max 1 min,MRT（22.34±2.90）min,AUC（131.87±40.13）mg·L^-1·min。与醒脑静微乳相比,共聚物修饰醒脑静微乳经小鼠鼻腔给药后,栀子苷入血程度更高,可能与其刺激性较小而吸收较多有关。     

黄连解毒汤的组合树脂精制物在脑缺血模型大鼠体内的整合药动学研究

目的: 研究黄连解毒汤有效部位（Huanglian Jiedu Tang active fraction,HLJDTAF）在脑缺血模型大鼠体内的整合药动学。 方法: 采用电凝法阻断大鼠大脑中动脉（MCA）,建立脑缺血模型（MCAO）,假手术组及模型组灌胃给予黄连解毒汤有效部位（HLJDTAF）后按不同时间点采血,用高效液相色谱法测定小檗碱、巴马汀、黄芩苷、栀子苷在大鼠体内的血药浓度,绘制药-时曲线,建立整合药动学模型。比较单一成分的药动学参数与整合药动学参数的差异。 结果: 假手术组血浆药物浓度-时间曲线下面积（AUC）_（0-t）,C_max分别为（17.95±3.18）mg·L^-1·h,（1.37±0.51） mg·L^-1,平均驻留时间（MRT）_（0-t）,t_1/2z分别为（11.19±0.59） h,（68.28±44.56） h;模型组AUC_（0-t）,C_max分别为（18.65±1.00） mg·L^-1·h,（1.61±0.12） mg·L^-1,MRT_（0-t）;t_1/2z分别为（9.61±0.39）h,（15.04±3.73）h。可知,相对于假手术组,模型组AUC_（0-t）,C_max较高,MRT_（0-t）,t_1/2z较小。说明黄连解毒汤有效部位在脑缺血模型大鼠体内吸收较好,达峰浓度更高;同时代谢加快,在体内停留时间较短。 结论: 黄连解毒汤有效部位（HLJDTAF）的整合药动学特征与单个成分的药动学特征基本一致。所获参数能够最大程度上表征中药复方多效应成分整体的体内处置规律,为建立中药复方药代动力学研究提供了一种研究方法。