清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者氧化应激介导的NF-κB信号通路活化的影响

目的观察清肾颗粒对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)湿热证患者氧化应激介导的NF-κB信号通路的影响,探讨清肾颗粒的作用机制。方法选择60例CRF湿热证患者,按随机数字表法随机分为治疗组和对照组各30例,实际完成57例,对照组28例,治疗组29例,并设正常组20例。治疗组和对照组均给予西医基础治疗,治疗组加用清肾颗粒,每日3次,每次1袋,疗程均为12周。观察患者临床疗效、治疗前后血肌酐(serum creatinine,Scr)、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)以及外周血中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、核转录因子-κBp65(nuclear factors-κB,NF-κBp65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(phosphonated inhibitor of nuclear factors-κB,p-IκBα)的蛋白表达情况。结果治疗组临床疗效和中医证候疗效总有效率为89.66%和86.21%,优于对照组的57.14%和53.57%(P0.05)。治疗后治疗组Scr、eGFR的水平均较治疗前改善,且优于对照组(P0.05)。治疗前治疗组与对照组的ROS、NF-κBp65、p-IκBα的表达均高于正常组(P0.01),治疗后治疗组ROS、NF-κBp65、p-IκBα表达均较治疗前降低(P0.01),且低于同期对照组(P0.01)。结论清肾颗粒可以降低CRF湿热证患者外周血中ROS、NF-κBp65、pIκBα的表达,抑制氧化应激介导NF-κB信号通路的活化,进而减轻CRF湿热证患者的临床症状,改善肾功能。     

肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响

目的观察肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NF-κB/TNF-α信号通路表达的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭微炎症状态、延缓慢性肾脏病进展的作用机制。方法采用5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法制作慢性肾功能衰竭动物模型。实验大鼠随机分为模型组、西药对照组、肾衰Ⅱ号方组,每组14只,另设假手术组14只,各给药组给予相应药物。测定大鼠血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(CCr),采用Western blot测定磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)p65、NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达,RT-PCR测定TNF-αm RNA表达。结果与假手术组比较,模型组SCr、BUN水平明显升高,CCr明显降低(P0.01),左肾质量/体质量明显增加(P0.05),肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显升高(P0.01);与模型组比较,肾衰Ⅱ号方组、西药对照组SCr、BUN水平明显降低(P0.05,P0.01),CCr明显升高(P0.01),左肾质量/体质量明显降低(P0.05),肾衰Ⅱ号方组在改善肾功能方面优于西药对照组(P0.05);肾衰Ⅱ号方组、西药对照组肾脏皮质、髓质p-NF-κB p65、NF-κB p65及TNF-α表达均明显降低(P0.01),肾衰Ⅱ号方组下调NF-κB/TNF-α信号通路表达作用优于西药对照组(P0.01)。结论肾衰Ⅱ号方可能通过下调NF-κB/TNF-α信号通路的表达,改善慢性肾功能衰竭微炎症状态,减轻肾间质纤维化,达到延缓肾功能减退的作用。     

消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成大鼠静脉壁 NF-κB,IκB表达的影响

目的:探讨中药消栓通脉颗粒治疗深静脉血栓形成的机制。方法:72只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、血栓模型组、复方丹参片组(0.23 g.kg-1,ig)、消栓通脉颗粒组(32 g.kg-1,ig)。连续给药5 d后采用下腔静脉结扎法制备血栓模型,造模后4 h连续给药,动态监测各组大鼠术后不同时间点静脉壁核因子κB mRNA(NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA),抑制因子κB mRNA(IκBαmRNA)表达水平。结果:同一时间点,中药治疗组静脉壁NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA表达水平显著低于模型组(P<0.01),而IκBαmRNA明显增高(P<0.01);各组静脉壁NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA表达随手术天数的延长呈现先增强后减弱的趋势,术后3 d达到高峰,而IκBαmRNA的表达呈先下降后升高的规律,术后3 d降到低谷;与复方丹参片组比较,在同一时间点,消栓通脉颗粒剂组NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65 mRNA表达明显降低(P<0.01),而IκBαmRNA表达显著增高(P<0.01)。结论:消栓通脉颗粒剂可能通过调控NF-κB/IκB信号传导通路,减轻其介导的静脉壁炎症反应,保护血管内皮细胞功能,发挥抗血栓作用。     

电针对肥胖大鼠肠道Toll样受体4和核转录因子κB的影响

目的:观察电针对肥胖大鼠肠道组织Toll样受体4(TLR4)和核转录因子κB(NF-κB)的影响,探讨针灸减肥的作用机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组和模型组,高脂饲料喂养建立肥胖大鼠模型,造模成功的24只大鼠随机分为模型组、抑制剂组和电针组,每组8只。电针治疗选取"关元""中脘""足三里"和"丰隆",每次治疗10 min,抑制剂组采用TAK-242腹腔注射,每周3次,共干预8周。每2周测量1次体质量和血糖,免疫共沉淀法测定肠道组织TLR4和NF-κB p65相互作用,凝胶迁移实验法测定肠道组织NF-κB p65活性,Western blot法测定肠道组织TLR4、NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达,实时荧光定量PCR测定肠道组织TLR4、NF-κB p65和IκBαmRNA表达。结果:与对照组比较,模型组体质量、血糖水平、TLR4、NF-κB p65、p-IκBα的蛋白和mRNA水平均显著升高(P0.01,P0.05),TLR4与NF-κB p65结合能力及NF-κB p65活性显著增强(P0.05,P0.01)。与模型组比较,电针组大鼠体质量显著降低(P0.05),电针组和抑制剂组干预后餐后血糖水平、TLR4、NF-κB p65、p-IκBα的蛋白和mRNA水平显著降低(P0.05,P0.01),NF-κB p65活性显著减弱(P0.01)。结论:电针能够有效调控肠道TLR4,抑制其与NF-κB p65相互作用,降低NF-κB p65活性,这可能是电针降低肥胖大鼠体质量和血糖水平,从而改善其肥胖状态的潜在机制之一。     

化纤煎冻干粉溶液对TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的:观察化纤煎冻干粉溶液对人胚肺成纤维细胞增殖、活化、分泌细胞外基质的影响,并观察其对TNF-α细胞因子和NF-κB信号通路的调控,探讨化纤煎治疗特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法:采用TGF-β_1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖、活化,化纤煎冻干粉溶液进行干预,CCK8法检测化纤煎冻干粉溶液对MRC-5细胞增殖的影响。qRT-PCR法检测α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA,观察成纤维细胞向肌成纤维细胞转化、分泌细胞外基质情况。qRT-PCR法检测TNF-αmRNA、NF-κB p65 mRNA、IκBαmRNA、IKKβmRNA,Western Blot检测NF-κB p65蛋白,观察化纤煎对炎症反应因子TNF-α与炎症信号通路NF-κB的作用。结果:与空白对照组比较,模型对照组的细胞增殖水平显著增加(P0.01),与模型对照组比较,化纤煎中、高剂量组MRC-5细胞增殖水平均明显下降(P0.01)。模型对照组α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA、TNF-αmRNA和NF-κB p65 mRNA表达水平显著高于空白对照组(P0.05或P0.01),IκBαmRNA、IKKβmRNA表达水平显著低于空白对照组(P0.01)。与模型对照组比较,化纤煎低、中、高剂量组α-SMA mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA、TNF-αmRNA和NF-κB p65 mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),IκBαmRNA、IKKβmRNA表达水平均上升(P0.05或P0.01)。模型对照组NF-κB p65蛋白表达水平显著高于空白对照组(P0.01),与模型对照组比较,化纤煎低、中、高剂量组NF-κB p65蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:化纤煎冻干粉溶液可能通过抑制炎症因子TNF-α分泌和NF-κB炎症信号通路活化,从而发挥抗纤维化作用。     

冬瓜皮炭对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用

目的探讨冬瓜皮炭对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用。方法 72只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(爱西特,450 mg/kg)及冬瓜皮炭低、中、高剂量组(300、450、600 mg/kg)。腺嘌呤灌胃给药30 d后,ELISA法检测血清BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1水平,HE染色、Masson染色观察肾组织病理形态变化,RT-PCR检测NF-κB p65、I-κB mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65蛋白表达。结果与模型组比较,冬瓜皮炭高剂量组BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1水平,NF-κB p65、I-κB mRNA表达,NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),肾小管轻度扩张、肾小管上皮细胞轻度空泡样变性、肾间质纤维化、炎细胞浸润明显缓解。结论冬瓜皮炭(600 mg/kg)能降低慢性肾功能衰竭大鼠肾脏有害指标,改善肾功能,其机制可能与干预NF-κB信号通路有关。     

消栓通脉颗粒对深静脉血栓形成大鼠静脉壁NF-κB,ⅠκB表达的影响

目的:探讨中药消栓通脉颗粒治疗深静脉血栓形成的机制.方法:72只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、血栓模型组、复方丹参片组(0.23 g·kg-1,ig)、消栓通脉颗粒组(32g·kg-1,ig).连续给药5d后采用下腔静脉结扎法制备血栓模型,造模后4h连续给药,动态监测各组大鼠术后不同时间点静脉壁核因子κB mRNA(NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA),抑制因子κB mRNA(ⅠκBα mRNA)表达水平.结果:同一时间点,中药治疗组静脉壁NF-κB p50 mRNA,NF-κB p65mRNA表达水平显著低于模型组(P＜0.01),而IκBα mRNA明显增高(P＜0.01);各组静脉壁NF-κB pS0 mRNA,NF-κB p65mRNA表达随手术天数的延长呈现先增强后减弱的趋势,术后3d达到高峰,而IκBα mRNA的表达呈先下降后升高的规律,术后3d降到低谷;与复方丹参片组比较,在同一时间点,消栓通脉颗粒剂组NF-κB p50 mRNA,NF-κB#5 mRNA表达明显降低(P＜0.01),而IκBα mRNA表达显著增高(P＜0.01).结论:消栓通脉颗粒剂可能通过调控NF-κB/IκB信号传导通路,减轻其介导的静脉壁炎症反应,保护血管内皮细胞功能,发挥抗血栓作用.     

生血合剂干预下免疫介导再障小鼠骨髓核因子κB表达变化

目的:进一步探讨获得性再生障碍性贫血(AA)发病机制及健脾补肾活血方生血合剂治疗AA的疗效机制。方法:以环孢素为对照,免疫介导AA小鼠为研究对象,采用定量PCR(Q-PCR)、免疫组织化学等方法分析生血合剂干预前后AA小鼠骨髓核因子κB(NF-κB)mRNA水平、蛋白表达及活性变化。结果:AA小鼠骨髓单个核细胞NF-κBmRNA水平未见明显改变,与正常对照比无显著差异(P>0.05);骨髓细胞NF-κB/p65蛋白表达较正常组增加,p-IκBα表达明显下降,生血合剂干预后NF-κB/p65蛋白表达减少,而p-IκBα表达明显提高;与之相比,环孢素作用后NF-κB/p65蛋白及p-IκBα均急剧下降。结论:NF-κB蛋白表达异常及活性改变可能参与了免疫介导AA小鼠模型的形成;生血合剂可能通过调节NF-κB的表达及活性发挥改善免疫介导AA小鼠造血功能的作用。     

参地颗粒对慢性肾炎脾肾亏虚证患者NF-κB信号通路的干预作用

目的探讨氧化应激介导的NF-κB信号通路对慢性肾炎脾肾亏虚证患者的影响及参地颗粒(茯苓、熟地、五味子、桑螵蛸、川芎)对其的干预作用。方法 50例慢性肾炎脾肾亏虚证患者随机分为贝那普利片组(对照组)和参地颗粒组(治疗组),实际完成对照组24例,治疗组22例,并选取20名健康体检者作为正常组,疗程12周。检测两组临床疗效、治疗前后24 h尿蛋白定量及血清活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和核因子-κB p65(NF-κB p65)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)的变化情况。结果治疗组临床疾病总有效率和中医证候疗效总有效率分别为81.82%和77.27%,优于对照组的66.67%和37.50%(P0.05或P0.01)。治疗组和对照组治疗后,24 h尿蛋白定量较治疗前降低,且治疗组的下降幅度大于对照组(P0.05)。两组患者治疗前血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平高于正常组,血清SOD水平和FN水平低于正常组(P0.05);治疗后两组血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平均较治疗前降低,血清SOD水平和FN水平较治疗前升高,治疗组优于对照组(P0.05)。结论参地颗粒能改善患者临床症状,降低24 h尿蛋白定量,其机理与通过抑制CGN脾肾亏虚证患者的氧化应激,增强机体的抗氧化能力,抑制NF-κB信号活化,下调MCP-1表达有关。     

基于miR-155/NF-κB信号通路探讨类风湿关节炎患者血瘀状态与肺功能的关系

目的基于miR-155/核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨类风湿关节炎(RA)患者血瘀状态与肺功能的关系。方法选择RA患者60例,另设健康对照组(NC)20名。采用德国Jager Master Screen自动肺功能检测仪检测肺功能参数。ELISA检测两组血清中白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-4、IL-17、NF-κB激活子1(Act1)、p50、p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、血小板激活因子(PAF)、PAF-乙酰水解酶(PAF-AH)水平,全自动血细胞分析仪检测血小板(PLT),全自动凝血仪检测D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FBG)水平;Western blot法检测Act1、p65、p50、IκBα蛋白表达水平。一步法荧光定量PCR检测外周血miR-155。采用Spearman分析RA患者外周血中血瘀指标、细胞因子、NF-κB、miR-155及肺功能参数之间的相关性。结果与NC组比较,RA组患者IL-6、IL-17、miR-155、PAF水平明显升高,Act1、p50、p65、IκBα蛋白表达水平明显升高,而PAF-AH、IL-10、IL-4水平明显降低(P0.05,P0.01)。与轻度血瘀证组比较,重度血瘀证组的FEV1/FVC、FEF50、FEF75明显降低,miR-155明显升高,p65蛋白表达水平明显升高。且Spearman分析发现血瘀指标、细胞因子、NF-κB、miR-155及肺功能参数之间存在相关性。结论 RA患者体内的血瘀状态与肺功能异常密切相关,这可能与其体内miR-155的高表达、NF-κB的异常活化以及细胞因子网络的失衡有关。     

肾康灵对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞增殖后 MAPK 信号通路的影响

目的探讨肾康灵干预小儿原发性肾病综合征(PPNS)的作用机制。方法将诱导系膜细胞(MCs)随机分为正常对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、ox-LDL+CXCR6(CXCL16受体CXCR6)组、肾康灵低浓度组(1.5g/ml)、肾康灵高浓度组(3.0g/ml)、阿托伐他汀低浓度组(50μmol/L)、阿托伐他汀高浓度组(100μmol/L),观察各组MCs的CXCL16、CD36蛋白含量、MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)及核因子-κB p65(NF-κB p65)的磷酸化水平。结果 ox-LDL+CXCR6组较正常对照组CXCL16、CD36蛋白含量、MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)及NF-κB p65的磷酸化水平显著升高(P0.01);与ox-LDL组及ox-LDL+CXCR6组比较,肾康灵低、高浓度组及阿托伐他汀低、高浓度组的CXCL16、CD36蛋白含量、p38、SAPK/JNK、NF-κB p65的磷酸化水平显著降低(P0.01),肾康灵低、高浓度组及阿托伐他汀高浓度组的ERK1/2的磷酸化水平显著降低(P0.05或P0.01);肾康灵高浓度组CXCL16、CD13蛋白含量、SAPK/JNK、NF-κB p65的磷酸化水平明显低于阿托伐他汀低浓度组(P0.05)。结论肾康灵可能通过抑制MAPK信号通路相关蛋白(p38、ERK1/2、SAPK/JNK)、NF-κB p65及CXCL16、CD36,有效抑制MCs的增殖,从而实现减轻或延缓肾小球纤维化的作用。     

补脾益气方药对脾虚哮喘大鼠肺组织IκB/NF-κB信号途径的影响

目的探讨脾虚型哮喘大鼠气道炎症,血液和支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞百分比,肺组织核因子-κB抑制蛋白α（IκBα）表达和核因子-κB（NF-κB）活性的变化及补脾益气方药对其的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）、脾虚型哮喘组（B组）、补脾益气方药组（C组）,采用HE染色检测肺组织病理变化,采用免疫组织化学方法检测肺组织IκBα表达水平和NF-κB p65的活性变化。结果B组与A组比较,肺组织IκBα表达显著降低,而NF-κB p65的活性显著增高（P〈0.01）;C组与B组比较,肺组织IκBα表达显著增高,而NF-κB p65的活性显著降低（P〈0.01）。结论补脾益气方药能有效增加脾虚型哮喘大鼠肺组织IκBα的表达,抑制其肺组织NF-κBp65的活性,减轻哮喘时的气道炎症变化,从而对脾虚型哮喘起到治疗作用。     

苓桂术甘汤含药血清对脂多糖诱导大鼠心肌细胞IKK/IκB/NF-κB信号通路蛋白表达的影响

目的观察苓桂术甘汤含药血清对脂多糖诱导的大鼠原代心肌细胞IKK/IκB/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其保护心肌细胞的分子机制。方法采用差速贴壁法和化学抑制法分离大鼠原代心肌细胞,分别设正常对照组、模型组、正常血清对照组、苓桂术甘汤含药血清(5%、10%、20%)组。通过脂多糖诱导复制心肌细胞损伤模型,检测含药血清预处理后心肌细胞NF-κBp65、IKK-β、IκB-α和p-IκBα蛋白表达,NF-κBp65核移位情况,TNF-α、IL-1β和IL-6的含量变化。结果与正常对照组比较,模型组和正常血清对照组心肌细胞NF-κBp65、p-IκBα和心肌细胞核内NF-κBp65蛋白表达增加(P0.01),心肌细胞IKK-β、IκB-α蛋白表达降低(P0.01),细胞上清液IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P0.01);与模型组比较,苓桂术甘汤5%、10%、20%浓度含药血清组心肌细胞NF-κBp65、p-IκBα和心肌细胞核内NF-κBp65蛋白表达降低(P0.05),心肌细胞IKK-β、IκB-α蛋白表达增加(P0.05),细胞上清液IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P0.05),且干预效应与苓桂术甘汤含药血清呈浓度依赖趋势。结论苓桂术甘汤可调节IKK/IκB/NF-κB信号通路相关蛋白表达,干预下游靶分子的转录调控,有效抑制细胞因子的过度激活。     

高血压前期中医辨证分型与血清NF-κB及热休克蛋白70相关性研究

目的：探讨高血压前期中医辨证分型对NF-κB炎症信号通路、应激状态的影响。方法：以151例不同中医证型的高血压前期受试者(高血压前期组)和30例正常血压健康体检者(对照组)为研究对象,检测受试者外周血清NK-κB p 65的磷酸化水平、热休克蛋白70(HSP 70)水平,分析中医辨证分型对二者的作用。结果：高血压前期组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平显著高于对照组(P<0.01),高血压前期组组内比较,痰湿壅盛组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平高于其他3组(P<0.05),其他3组两两比较无统计学差异(P>0.05)。结论：(1)高血压前期组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平显著高于对照组,说明在高血压病的早期阶段(高血压前期)即出现了NF-κB炎症信号通路的激活和应激反应;(2)痰湿壅盛型高血压前期NF-κB p65磷酸化活性及血清HSP 70水平均高于其他3个证型,或可说明NF-κB炎症信号通路的激活程度和应激反应状态与中医辨证分型有关,或可作为对高血压前期进行中医辨证分型的客观指标;(3)对NF-κB炎症...     

何首乌提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的治疗作用及对NF-κB 表达的影响

目的:探讨何首乌提取物对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠的治疗作用及对肾组织中核转录因子κB(NF-κB表达的影响。方法:将40只Wistar大鼠按体质量随机分为对照组、模型组、何首乌提取物组、洛汀新组4组,每组10只。除对照组外,其余各组进行单侧肾脏切除,连续多次注射OX7抗体诱导MsPGN大鼠模型,何首乌提取物组与洛丁新组于注射抗体4周后分别灌胃何首乌提取物和洛丁新治疗,对照组和模型组给予同等体积的生理盐水灌胃,治疗6周后处死大鼠。测定模型制备前、注射抗体4周后、治疗6周后大鼠的24 h尿蛋白定量水平;收集大鼠血清,测定血清中肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)含量;肾脏切片后HE染色观察组织病理学改变;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测NF-κB p65和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达水平。结果:治疗6周后,与对照组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量水平及血清中SCr、BUN含量显著升高,肾组织可见明显的系膜基质增生和系膜细胞增殖,NF-κB p65和MCP-1 mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,洛汀新组和何首乌提取物组大鼠24 h尿蛋白定量水平及血清中SCr、BUN含量显著降低,肾脏组织病理病变程度减轻,NF-κB p65和MCP-1 mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:何首乌提取物对MsPGN大鼠有一定的治疗作用,阻断NF-κB信号活化可能是其机制之一。     

参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织NF-κB p65，IκBα，IκKβ蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IκK)/NF-κB抑制蛋白(IκB)/NF-κB信号通路的影响,探讨参苓白术散改善UC的作用机制。方法:将48只Wistar大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、参苓白术散(15.6 g·kg-1)组、奥沙拉嗪钠(0.68 g·kg-1)组,每组12只,脾虚湿困型UC大鼠模型采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠结合环境与饮食干预法复制,给药组连续灌胃14 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫组化和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织中NF-κB p65,IκBα,IκKβ蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠结肠组织NF-κB p65,IκBα,IκKβmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6及IL-1β含量均显著升高(P0.01),结肠组织NF-κB p65,IκKβ蛋白和mRNA表达显著升高(P0.01),IκBα蛋白和mRNA表达显著降低(P0.01);与模型组比较,参苓白术散组和奥沙拉嗪钠组大鼠血清TNF-α,IL-6及IL-1β水平均显著下降(P0.01),结肠组织NF-κB p65,IκKβ蛋白和mRNA均显著下降(P0.01),IκBα蛋白和mRNA表达显著升高(P0.01)。结论:参苓白术散能明显下调脾虚湿困型UC大鼠结肠组织NF-κB p65,IκKβ,蛋白和mRNA表达,上调IκBα蛋白和mRNA表达;参苓白术散抑制UC大鼠IκK/IκB/NF-κB信号通路活化是其发挥肠黏膜保护作用的重要机制。     

益母草水苏碱对肥大心肌细胞活性氧信号的影响

目的:观察益母草水苏碱对心肌细胞肥大的作用,探讨其对活性氧(ROS)及其下游NF-κB信号的影响。方法:原代培养乳鼠的心肌细胞,用血管紧张素Ⅱ建立细胞肥大模型,观察10-7～10-4mol/L浓度的益母草水苏碱对细胞肥大的影响(测定细胞体表面积及Protein/DNA比值),同时利用流式细胞仪检测ROS阳性细胞比例,West-ern Blot法测定细胞浆内p-IκBα(ser32)及核内NF-κB(p65)蛋白表达。结果:一定浓度的益母草水苏碱可以降低肥大心肌细胞的体表面积、Protein/DNA比值以及ROS阳性细胞比例(P0.05);益母草水苏碱干预降低了肥大心肌细胞浆内p-IκBα(ser32)及核内NF-κB(p65)蛋白的表达水平(P0.05)。结论:对ROS及其下游NF-κB信号的抑制可能涉及益母草水苏碱对抗心肌细胞肥大的作用机制。     

豨桐丸对尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化的影响

目的探讨豨桐丸对尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化的影响。方法巨噬细胞RAW264.7随机分为对照组、模型组(200μg/mL)、秋水仙碱组(0.4μg/mL)及豨桐丸低、中、高剂量组(100、200、400μg/mL)。预给药2 h后,加入尿酸钠晶体诱导RAW264.7细胞,ELISA法检测IL-1β水平,Western blot法检测IκBα、p65表达,试剂盒法检测NF-κB与DNA的结合活性。结果尿酸钠晶体刺激RAW264.7细胞18 h后,IL-1β水平显著升高,30 min后细胞内IκBα表达显著降低,2 h后细胞核中p65表达、NF-κB与DNA的结合活性显著升高(P0.01);200、400μg/mL豨桐丸作用后,IL-1β水平、p65表达、NF-κB与DNA的结合活性显著降低,IκBα表达显著升高(P0.05,P0.01)。结论豨桐丸通过抑制尿酸钠晶体诱导巨噬细胞NF-κB活化,从而降低IL-1β水平。     

清肾颗粒治疗慢性肾衰竭急剧加重湿热证患者36例临床研究

目的:观察慢性肾衰竭(CRF)急剧加重湿热证患者血清白介素-10水平及清肾颗粒干预治疗后的临床疗效.方法:选择71例CRF急剧加重湿热证患者随机分为治疗组和对照组,并设正常组20例.治疗组与对照组均用解毒泄浊Ⅱ号保留灌肠,并根据导致CRF急剧加重的诱因,分别以相应西药抗感染、降压、纠正电解质紊乱及酸碱失衡等治疗.治疗组服用清肾颗粒,对照组不服用清肾颗粒.2组疗程均为1月.分别于治疗前和治疗1月后取静脉血栓测血肌酐(Scr)、血清白介素-10(IL-10)水平并观察治疗前后中医证候积分值变化情况.结果:临床疗效总有效率治疗组为88.89%,对照组为57.14%;中医证候总有效率治疗组为86.11%,时照组为60.00%,经Ridit分析,治疗组临床疗效及中医证候疗效均明显优于对照组(P＜0.05).治疗组治疗后Scr、肾小球滤过率(GFR)水平均有明显改善,与治疗前比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01);2组治疗后Scr、GFR比较,差异有显著性或非常显著性意义(P＜0.05,P＜0.01).治疗组、对照组治疗前血清IL-10浓度明显高于正常组(P＜0.01);治疗组治疗后血清IL-10水平较治疗前有显著升高(P＜0.01);而对照组治疗前后血清IL-10水平无明显变化(P＞0.05).2组治疗后比较,治疗组血清IL-10水平较对照组有明显升高(P＜0.05).治疗前CKD各期患者GFR水平与中医证候积分和血清IL-10浓度均呈明显负相关,与血清IL-10浓度呈明显正相关(P＜0.01).结论:CRF急剧加重湿热证患者血清IL-10水平升高,清肾颗粒可提高患者IL-10水平,改善肾功能,减轻临床症状,其机理之一可能与其提高患者IL-10水平有关.     

香连丸对化疗相关性腹泻裸鼠模型的作用观察

目的观察香连丸对化疗相关性腹泻(CID)裸鼠腹泻程度、肠道损伤、炎症细胞因子、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法腹腔注射法制备CID裸鼠模型,裸鼠随机分成正常组、模型组、香连丸组,香连丸组灌胃给予香连丸,正常组、模型组均灌胃给予生理盐水。给药4 d后,观察裸鼠腹泻情况、小肠病理改变、血清中细胞因子含有量及小肠组织中NF-κB表达情况。结果模型组2~3分腹泻发生率、腹泻评分及小肠病理损伤程度均较正常组明显升高(P0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的含有量均显著升高,IL-4含有量显著降低(P0.05,P0.01),小肠组织NF-κB p65表达显著升高(P0.01)。香连丸组上述指标均较模型组明显改善(P0.05,P0.01)。结论香连丸对CID具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制NF-κB p65通路活化,进而下调促炎细胞因子TNF-α、IFN-γ,并上调抑炎细胞因子IL-4的表达有关。