冷保存再灌注损伤对大鼠移植肝术后早期胆盐分泌的影响

目的 探讨大鼠移植肝脏经历冷保存再灌注损伤（CPRI）后胆盐谱的变化规律。方法 建立专门用于胆汁胆盐检测的柱前衍生反相高效液相色谱法（RP—HPLC）。大鼠被随机分为对照组（A组,n=6）、供肝冷保存1h组（B组,n=6）和供肝冷保存12h组（C组,n=6）。对各组大鼠术后14d的胆汁标本进行RP—HPLC分析。结果 共检出11种胆盐。CPRI可以显著影响大鼠移植肝胆盐的组成,主要表现为疏水性的牛磺胆酸和牛磺脱氧胆酸比重的持续增加以及亲水性的牛磺猪脱氧胆酸和牛磺熊脱氧胆酸比重的一过性升高。术后1～4d,胆盐疏水指数（HI）无显著变化;从术后5d开始,胆盐HI显著上升,术后7～10d达到高峰。且供肝冷保存时间越长,HI升高越显著。结论 经历CPRI后,移植肝胆汁疏水性胆盐比重的上升可能是导致胆汁细胞毒性增加的主要原因之一。     

移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估及其与肝移植患者预后的关系

目的探讨移植肝缺血-再灌注损伤程度的评估方法及其与肝移植患者预后的关系。方法218例良性终末期肝病患者，在移植肝恢复血液灌注后1h采取外周静脉血，测定丙氨酸转氨酶浓度（定义为基础肝功能），同时采用组织气体分析仪测定肝组织的氧分压，并取肝组织活检，计算水变性及坏死细胞百分比，分别对上述3项指标进行评分，再根据各指标得分之和将缺血-再灌注损伤程度划分为5级（0～Ⅳ级），统计围手术期（术后2周内）、术后近期（术后2周至1个月）、术后中远期（1个月以上）的患者死亡率。结果移植肝缺血再灌注损伤程度评为0级者157例（A组），死亡7例（4．5％），71．4％（5／7）死于术后3-6个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅰ级者25例（B组），死亡5例（20．0％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅱ级者23例（C组），死亡5例（21．7％），80．0％（4／5）死于术后2周至3个月；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅲ级者8例（D组），死亡7例（87．5％），85．7％（6／7）死于术后1个月内；缺血-再灌注损伤程度评为Ⅳ级者5例（E组），全部死亡，80．0％（4／5）死于术后1个月内。A组各期死亡率明显低于B组、C组（P〈0．05）和D组、E组（P〈0．01）；B组、C组间各期死亡率的差异无统计学意义（P〉0．05）；B组、C组各期死亡率均低于D组、E组（P〈0．05）。结论基础肝功能、组织氧分压以及水变性和坏死细胞百分比三项指标可基本反映移植肝缺血-再灌注损伤程度；缺血-再灌注损伤评级达Ⅲ～Ⅳ级者术后死亡率较高。     

移植肝再灌注损伤的发生机制

目的：介绍有关移植肝再灌注损伤发生机制的研究动向,方法：复习有关文献并进行综述性报告。结果：移植肝冷保存后的再灌注损伤的发生机制主要有：（1）内皮细胞损伤和Kupffer细胞激活,导致一系列细胞因子的产生,引起移植肝损伤,并引发全身炎症反应综合征。（2）白细胞,血小板与肝血窦壁的粘附而损害肝细胞,并可阻塞肝血窦造成“无复流”现象;（3）pH值的变化,再灌注后移植肝的代谢恢复正常后,组织内pH值的改变可引起肝细胞损伤,并可造成线粒体的肿胀,使肝细胞的功能降低,（4）复氧损伤,主要与白细胞释放活性氧（ROS）有关,结论：移植肝再灌注损伤是多种因素综合作用的结果,在再灌注前后提高肝细胞和内皮细胞的活性,抑制Kupffer细胞的激活,减少ROS及肿瘤坏死因子（TNF）的产生将是今后预防移植肝再灌注损伤研究的关键。     

缺血后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨在体条件下缺血后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法采用SD大鼠原位肝移植模型,供肝冷保存时间100min,无肝期控制于18min以内,60只雄性健康SD大鼠随机分为3组,对照组12只,缺血再灌注损伤组和后处理组各24只。对照组开腹后仅游离肝周韧带;缺血再灌注损伤组受体大鼠供肝切除前仅以肝素化生理盐水经门静脉灌注;后处理组供肝植入后完全再灌注前,给予多次短暂复灌复停作为缺血后处理。缺血再灌注损伤组、后处理组受体一半（6只）于再灌注后2h留取血液及肝组织,另一半（6只）于再灌注后6h留取肝组织。对照组于关腹后相应时间留取血液及肝组织。各组分别检测肝功能,采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子Or．和中性粒细胞弹性蛋白酶。根据酶促反应原理,利用分光光度仪测定肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛、髓过氧化物酶、超氧化物歧化酶。肝组织HE染色后光镜下观察组织学变化。结果缺血再灌注损伤组和后处理组血清肝功能指标、炎性细胞因子水平及肝组织过氧化物含量均高于对照组（P〈0．05）,而后处理组较缺血再灌注损伤组则明显低（P〈0．05）;缺血再灌注损伤组和后处理组肝组织抗氧化酶活力显著低于对照组（P〈0．05）,而后处理组较缺血再灌注损伤组则明显高（P〈0．05）。结论缺血后处理对大鼠移植肝的缺血再灌注损伤有明显的保护作用。提高组织的抗氧化能力和降低炎性细胞因子水平可能是缺血后处理保护作用的机制之一。     

移植肝冷保存/再灌注胆管损伤的机制

肝移植术后胆道的生理及病理变化一直是众所关注的课题。胆道并发症是影响肝移植受者术后生活质量、导致移植物丧失甚至病人死亡的重要因素，总体发生率为5．8％-40.0％，而对于某些特殊类型的肝移植，如活体右半肝移植的胆道并发症发生率可高达15％-64％，儿童肝移植胆道并发症的发生率也明显为高。近年来，随着移植技术的进步和新型免疫抑制剂的使用，受者及移植物的短期存活率有了显著提高，但长期生存率依然没有明显的改善，而胆道并发症被认为是导致这一结果的最主要原因之一。     

Kupffer细胞的激活和移植肝再灌注损伤

现在原发性移植肝无功能已成为继排异反应之后第2大引起再移植的原因。同时还有10%～25%的患者移植后出现移植肝原发性功能紊乱[1]。这些都与移植肝冷保存后Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞的激活所引起的再灌注损伤有关,本文就Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞激活和移植肝再灌注损伤的关系作一综述。一、概述Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞是位于肝血窦腔内的巨噬细胞,它寄居于肝血窦内皮细胞之上或之间,并通过突入内皮细胞下Ｄｉｓｓｅ间隙的胞浆突起与肝细胞直接接触。它的粗面内质网和核周被膜呈过氧化物反应特征并富含溶酶体。Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞作为与从胃肠道内吸收的微…     

己酮可可碱预处理对大鼠供肝冷缺血损伤影响的实验研究

目的　探讨已酮可可碱预处理供者及肝脏对供肝冷缺血损伤的影响。方法　Wistar大鼠按处理方法的不同分为 4组 :对照组、供者预处理组 (实验 1组 )、供肝预处理组 (实验 2组 )、供者及供肝联合预处理组 (实验 3组 ) ,预处理使用己酮可可碱。各组动物均在供肝冷保存 6h后行原位肝移植 ,门静脉血流恢复后第 30min、3h及 2 4h取门静脉血测定肿瘤坏死因子 (TNF α)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)及谷胱甘肽S转移酶 (GST)的水平。结果　门静脉复流后 30min、3h时血清TNF α水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min及 3h时血清GST水平 ,各实验组明显低于对照组 (P <0 .0 5) ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min及 3h时血清ALT水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验1组及实验 2组 (P <0 .0 5) ;2 4h时前述各指标各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 2组 (P <0 .0 5) ;30min时血清AST水平 ,各实验组明显低于对照组 ,实验 3组显著低于实验 1组及实验 2组 (P <0 .0 5)。结论　己酮可可碱预处理对供肝的冷缺血再灌注损伤有一定的保护作用     

熊去氧胆酸减轻移植肝缺血再灌注损伤的临床前瞻性随机对照研究

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)减轻移植肝缺血再灌注损伤(IRI)的临床效果.方法 将80例终末期肝病成人患者随机分为两组,一组42例,肝移植术后第1天起给予UDCA 10～15 mg·kg-1·d-1,维持治疗3个月,为UDCA组;另一组38例肝移植患者不使用UDCA,作为对照.分析两组术后3周内的肝生化指标、"严重IRI致移植物功能恢复延迟"、急性细胞性排斥反应(ACR)及药物性肝损伤的发生情况,以及术后3个月内血管及胆管并发症、患者死亡率、病毒性肝炎和原发性肝病复发情况.结果 UDCA组供肝热缺血时间和冷缺血时间分别为(3.33±0.92)min和(10.3±1.9)h,对照组分别为(3.68±1.16)min和(9.8±2.4)h,两组间的差异无统计学意义.UDCA组术后第7、14及21天的血清丙氨酸转氨酶显著低于对照组(P＜0.05),第7天的天冬氨酸转氨酶(AST)和γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)也显著低于对照组(P＜0.05);两组其它时段AST、γ-GT及各时段胆红素总量、直接胆红素及碱性磷酸酶水平的差异均无统计学意义.UDCA组"严重IRI致移植物功能恢复延迟"发生率为9.5%(4/42),对照组为26.3%(10/38),两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组术后3周内ACR发生率和严重程度、药物性肝损伤发生率及术后3个月内胆管和血管并发症发生率的差异无统计学意义,患者死亡率的差异也无统计学意义.结论 UDCA可有效减轻移植肝的缺血再灌注损伤,降低"严重IRI致移植物功能恢复延迟"的发生率;但在冷缺血时间＜12 h的情况下,未能显示出保护胆管的临床效果.     

钙蛋白酶与肝移植缺血再灌注损伤关系的实验研究

目的 探讨大鼠肝在不同冷缺血期、复温期及再灌注期钙蛋白酶活性变化，以及钙蛋白酶抑制剂对离体灌注肝功能及原位肝移植大鼠生存的影响。方法 SD大鼠。共5个实验部分：（1）冷缺血实验；（2）冷缺血后复温实验；（3）冷缺血后再灌注实验；（4）钙蛋白酶抑制剂实验；（5）原位肝移植实验。结果 冷缺血12h始，肝组织中钙蛋白酶活力明显增加，并随着冷缺血时间的延长而逐渐明显增加（P＜0.01）。冷缺血复温30min始，肝组织中钙蛋白酶活力明显增加，并随着复温时间延长而逐渐明显增加（P＜0.01）。肝组织冷缺血0和12h再灌注60min钙蛋白酶明显增加（P＜0.05）。钙蛋白酶抑制剂明显增加（P＜0.05）。而冷缺血24h再灌注30min钙蛋白酶便明显增加（P＜0.05）。钙蛋白酶抑制剂可明显地降低离体灌注肝AST水平及增加胆汁量（分别P＜0.01）。结论 肝移植冷缺血期、复温期及再灌注期钙蛋白酶均明显增高，钙蛋白酶抑制剂可明显地改善移植肝功能。     

基质金属蛋白酶-9 与小体积移植肝早期损伤的相关性研究

目的 观察不同体积肝移植术后早期移植肝内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及活化特点,探讨MMP-2和MMP-9在小体积移植肝早期损伤中的作用机制. 方法 随机将108只SD大鼠分成3组,每组36只.分别为:全肝(100%肝体积)移植组、半肝(50%肝体积)移植组和小体积肝(25%肝体积)移植组.分别检测移植肝再灌注后0.5、6、12、24、48、72 h的肝功能及移植肝组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)浓度,观察移植肝组织病理学特征,并运用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量聚合酶链反应(PCR)、明胶酶谱和免疫组织化学方法检查移植肝中MMP-2和MMP-9的表达情况. 结果 与全肝和半肝移植组比较,小体积肝移植组再灌注后6～24 h MMP-9表达明显升高;而且MMP-9活化和表达增高伴随着移植肝功能损害和严重的缺血再灌注损伤.MMP-9早期表达都集中在移植肝门静脉周围,与门静脉高灌注密切相关. 结论 MMP-9表达升高是小体积移植肝早期重要的致损伤因素;肝移植术后门静脉高灌注可能是触发MMP-9活化和表达的重要原因.     

不同胆道灌洗方法对大鼠肝内胆管冷保存再灌注损伤的影响

目的观察不同胆道灌洗方法对大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的影响。方法应用大鼠原位肝移植模型，将88只SD大鼠随机分为假手术组、胆道非灌洗组、UW液胆道灌洗组、生理盐水（NS）胆道灌洗＋UW液肝内胆道灌注保存组、HTK液胆道灌洗＋UW液肝内胆道灌注保存组、HTK液胆道灌洗＋HTK液肝内胆道灌注保存组。移植肝置于4℃林格液中保存2h后行原位肝移植。移植肝再灌注后24h，检测血清总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）、碱性磷酸酶（AKP）、γ-谷酰转肽酶（GGT）及胆汁中GGT、葡萄糖（Glu）含量。在光镜及电镜下观察肝内胆管上皮细胞的形态学变化。结果与非灌洗组比较，胆道灌洗组术后各项指标明显改善（P〈0．01）；HTK液及NS灌洗组较UW液灌洗组术后指标改善明显（P〈0．05）。病理检测发现非灌洗组胆道损伤明显，各灌洗组胆道损伤程度明显改善，HTK液灌洗＋UW或HTK液灌注组对胆管上皮细胞的损伤较轻。结论移植肝冷保存前进行胆道灌洗可以明显减轻胆管上皮细胞的损伤，4℃HTK液灌洗＋4℃UW或HTK液灌注保存效果比较理想。     

胆道损伤经手术修复后再次胆道狭窄的外科处理

目的 胆道损伤经修复手术后发生再次胆道狭窄是外科处理的难点,该文探讨此类病例的手术时机和手术方法 .方法 回顾性分析了自2005年11月至2007年10月间,上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的胆道损伤经一次或二次修复手术后发生再次胆道狭窄的病例16例,对这些病例的临床资料进行分析.结果 胆道损伤绝大多数是由胆囊切除所造成,其中14例为腹腔镜胆囊切除术.1例为小切口胆囊切除术,另1例为腹部外伤.初次胆道损伤按Strasberg分型,E1 1例、E2 7例、E3 5例和E43例,其中2例E4类型的病人合并动脉损伤.末次修复手术方式分别为11例胆肠Roux-en-Y吻合,3例胆总管端端吻合并放置T管,1例左肝管T管引流,另1例胆道外引流术.该次入院12例病人接受了胆肠Roux-en-Y吻合,其中1例接受了二期右半肝切除术(E4类型合并右肝动脉损伤);1例病人接受了胆总管端端吻合;1例病人(E4类型合并肝固有动脉损伤)接受了尸肝移植;1例病人(腹部外伤所致)接受了活体右半肝移植;另1例病人接受了胆道外引流术.经初步随访,病人恢复基本良好.结论 尽管再次手术时因炎症瘢痕等因素使得胆道狭窄平面高于初次损伤平面,但胆肠Roux-en-Y吻合依然是修复胆道损伤的主要治疗方法 .术前评估应尤其重视是否合并血管损伤,并根据情况考虑是否需要行半肝切除或肝移植术;而对于全身条件较差者,可先行胆道外引流治疗.     

亲水性胆盐对减轻大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的作用

目的 探讨亲水性胆盐对减轻大鼠移植肝肝内胆管冷保存再灌注损伤的作用.方法 应用大鼠原位肝移植胆道外引流模型,将192只SD大鼠随机分为4组,每组供、受者各24只.各组供者在供肝切取前30 min经阴茎背静脉注射不同的试剂,对照组注射1 ml生理盐水;疏水性胆盐(TDC)组注射牛磺脱氧胆酸钠40/μmol/kg;高、低浓度亲水性胆盐(TUDC)组分别注射牛磺熊去氧胆酸钠80和40μmol/kg.供肝取出后置于4℃的平衡液中保存2 h再植入受者.移植肝再灌注后1、3、7和(或)14 d时,采用全自动生化分析仪分别检测受者血清中碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、胆红素总量、直接胆红素和胆汁中γ-谷氨酰转移酶和葡萄糖的含量.移植肝再灌注后1 d时,在光镜下观察肝内胆管上皮细胞的病理学改变,在荧光显微镜下观察肝内胆管上皮细胞的凋亡情况.结果 高、低浓度TUDC组各项观察指标均低于对照组和TDC组(P＜0.05),且肝内胆管炎症细胞的浸润、上皮细胞的损伤以及细胞的凋亡等程度均轻于对照组和TDC组(P＜0.05);与低浓度TUDC组比较,高浓度亲水性胆盐组短期内可见各项观察指标均有所降低,但远期各指标的比较,差异无统计学意义(P＞0.05).TDC组术后各项观察指标均高于对照组(P＜0.05).结论 在供肝获取前,供者静脉注射亲水性胆盐能减轻大鼠移植肝肝内胆管的冷保存再灌注损伤.     

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目的 了解我国当前对医源性胆管损伤外科治疗概况及胆管损伤治疗效果。方法 通过检索解放军医学图书馆中文生物医学期刊数据库（CMCC）从1995年1月至2000年1月全国各级期刊关于胆管损伤的论文,统计来自165个医疗单位2742例医源性胆管损伤。结果 统计显示胆管损伤的94％来自与胆囊有关的手术,以胆管横断伤为多（47％）,损伤类型时要为胆总管（44％）和肝总管（36％）,有40％为术中及时发现处理,胆管损伤修复手术因狭窄再手术占总数的23％,术中发现和术后发现及胆管修复的方式有明显的差异。结论 胆管损伤后期的修复防止狭窄是较困难的,调查修复方式显示术中发现的作胆管修补＋T管支撑引流,术后发现手术作胆管空肠吻合＋长期支撑的手术方式效果较好。     

Right hemihepatectomy for bile duct injury following laparoscopic cholecystectomy

Laparoscopic cholecystectomy (LC) has become the treatment of choice for patients with symptomatic cholecystolithiasis. But with the introduction of this technique, the incidence of bile duct injuries has increased. We report the case of a 33-year-old man who was transferred from an affiliated hospital to our department for the treatment of a bile duct injury 2 weeks after LC. Prior to transfer, a laparotomy had been performed, with insertion of a T-tube and a Robinson drain on day 5 after LC. Endoscopic retrograde cholangiography (ERC) on admission day revealed an extensive defect of the right biliary system, which could not be treated endoscopically. An emergency laparotomy had to be performed at night for acute bleeding from the portal vein. Due to massive inflammation in the porta hepatis and intraparenchymal destruction of the right bile duct, liver resection was performed 2 days later, after the patient had stabilized in the intensive care unit (ICU). The patient had a prolonged postoperative course, but he finally recovered well from these operations. In conclusion, the management of bile duct injuries should include ultrasound to detect and drain fluid collections and ERC to classify the injury. Emergency laparotomy should never be performed without these examinations, since the majority of bile duct injuries can be treated endoscopically. Surgery for this serious complication should always be performed at specialized centers for hepatobiliary surgery.     

Pushing the boundaries in liver graft utilisation in transplantation: Case report of a donor with previous bile duct injury repair

IntroductionLiver transplantation is a recognised treatment for extensive bile duct injuries with secondary biliary cirrhosis or recurring sepsis. However, there have been no reports of successful liver transplantation from a donor who sustained a previous bile duct injury.Presentation of caseHere we discuss the case of a liver transplant from a 51-year-old brain dead donor who had suffered a Strasberg E1 bile duct injury and had undergone a Roux-en-Y hepaticojejunostomy 24 years prior to donation. The liver was successfully recovered and transplanted into a 56-year-old male recipient with end stage liver disease consequent to alpha 1 antitrypsin deficiency. The graft continues to function well 36 months post-transplant, with normal liver function tests and imaging revealing a patent hepaticojejunostomy.DiscussionThe potential associated vascular injuries should be identified during bench preparation whilst the management of biliary reconstruction at the time of transplant should follow the principles of biliary reconstruction in cases with biliary injuries, extending the hilar opening into the left duct.ConclusionThis case highlights the successful utilisation of a post bile duct injury repair liver, employing an experienced procurement team and careful bench assessment and reconstruction.     

外伤性胆道损伤的处理

目的 探讨外伤性胆道损伤的处理方法.方法 回顾性分析2009年7月至2014年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的26例外伤性胆道损伤患者的临床资料.26例患者均有外伤史.根据损伤控制原则,行剖腹探查术明确诊断后,根据术中探查情况,采用Mattox损伤分型标准对患者进行分型.在抗休克治疗的同时,根据损伤部位和程度,选择胆囊切除术、胆管修补术、胆管对端吻合术、胆肠吻合术和肝方叶切除＋肝门部胆管整形＋肝肠吻合术等手术方式.合并其他脏器的损伤者均行相应的手术治疗.术后辅以抗炎、补液等对症支持治疗.记录患者院内死亡情况.出院患者定期门诊或电话随访,随访时间截至2014年10月.结果 26例患者行剖腹探查术,术中发现胆囊损伤15例、胆总管损伤5例、肝总管损伤3例、左肝管损伤2例、右肝管损伤1例;合并肝破裂11例、脾破裂1例、肾破裂5例、小肠破裂4例.Mattox损伤分型：Ⅰ型11例,Ⅱ型4例,Ⅲ型0例,Ⅳ型8例,Ⅴ型3例.15例胆囊损伤患者中,5例Ⅰ型胆囊挫伤较轻者未行胆囊切除术,6例Ⅰ型胆囊挫伤较重者和4例Ⅱ型患者行胆囊切除术;11例肝胆管损伤患者中,5例Ⅳ型较轻者行胆管修补＋T管引流术,3例Ⅳ型较重者根据损伤部位采用不同手术方案（1例行胆管对端吻合术＋T管引流术、1例行胆肠吻合术、1例行肝方叶切除＋肝门部胆管整形＋肝肠吻合术）,3例Ⅴ型患者均行胆肠吻合术.合并其他脏器损伤的患者均行相应的手术治疗：11例联合肝破裂修补术或肝段切除术,1例联合脾切除术,5例联合肾切除术,4例联合小肠部分切除＋端端吻合术.26例患者中,术后1例因失血性休克经抢救无效于住院期间死亡;3例出现胆汁漏,1例出现伤口感染,经对症支持治疗后痊愈.25例患者治愈出院.25例患者获得随访,随访时间为术后1、3、6、12个月,无一例患者发生迟发性胆?     

Notch2基因在大鼠肝移植术后胆管损伤中的表达及其意义

目的 探讨大鼠肝移植术后损伤胆管中Notch 2基因的表达及其意义.方法 将96只健康雄性SD大鼠随机分为3组,A组:未手术组;B组:假手术组;C组:采用改良"二袖套"法建立大鼠肝移植.于术后1、7、14、28 d检测总胆红素(TBIL)、γ-GT、谷丙转氨酶(ALT),同时处死大鼠取肝组织,苏木素-伊红(HE)染色观察病理改变,免疫组织化学、Western blot检测Notch 2基因的表达.结果 大鼠肝移植术后TBIL(32.05±3.28)μmol/L,γ-GT(118.30±17.40)μmol/L明显升高(P＜0.05),HE染色显示损伤胆管增生(14 d),部分胆管破坏、消失(28 d).免疫组织化学显示,A和B组胆管细胞Notch 2染色阴性,C组胆管细胞Notch 2染色强阳性,Western blot检测显示Notch 2蛋白在C组肝组织中呈逐渐升高的强表达(P＜0.05).结论 大鼠肝移植术后随胆管损伤加重,Notch 2基因表达显著升高,该基因可能参与了胆管损伤.

Abstract：

Objective To investigate the expression and clinical significance of Notch 2 expression in postoperative injured bile duct of rat liver transplantation. Methods Ninety-six healthy male SD rats were divided into three groups randomly: un-operation group (A), Sham operation group ( B), and group of liver transplantation model by modified "two-muff" techniques (C). Total bilirubin (TBIL), γ-GT and alanine aminotransferase (ALT) were determined at 1st, 7th, 14th, 28th day after transplantation and the expression of Notch 2 in the liver was detected by immunohistochemisty and Western blotting at the same time. Results TBIL (32. 05 ±3. 28) μmol/L, and γ-GT ( 118.30 ± 17.40) μmol/L were increased obviously after liver transplantation ( P ＜ 0. 05 ). Hematoxylin-eosin ( HE ) staining showed the injured bile ducts obviously proliferated after 14 days, and partly posttransplanted bile ducts were destructed and vanished after 28 days. Immunohistochemisty revealed that Notch 2 staining in bile ducts was negative in groups A and B, but Notch 2 staining in hyperplasitic bile ducts was strong positive in group C. Western blotting confirmed that Notch 2 protein was upregulated gradually in the damaged bile ducts after rat liver transplantation (P ＜ 0. 05 ). Conclusion Bile duct injury is aggravated after rat liver transplantation, and Notch 2 gene expression is up-regulated remarkably.     

胆道变异与腹腔镜胆囊切除致胆管损伤——单中心17例的经验与体会

目的探讨胆道变异时腹腔镜胆囊切除致胆管损伤的特点与防治方法。方法对我院2005.1.1～2013.1共进行腹腔镜胆囊切除术29881例,其中因胆道变异引起的胆管损伤17例,对其进行总结分析。结果损伤部位:肝门部副肝管损伤完全横断4例;副肝管部分损伤5例;胆囊床迷走胆管损伤4例;胆囊管开口在右肝管4例;损伤后处理:术中胆管发现13例:给予腔镜下处理3例、中转开腹修补+外引流10例;术后发现胆管4例,3例再次腹腔镜探查;1例右肝管完全横断伤,给予行内引流手术;术后胆漏2例,经过引流后治愈。结论胆道变异是导致腹腔镜下胆囊切除胆管损伤的重要原因,提高警惕,掌握合适的手术方法技巧,充分认清胆道变异的形式,掌握胆管损伤表现的各种形式,可以将这种损伤有效避免或将损伤的引起的严重后果降低到最低程度。