紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的:研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5(DR5)在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果:在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL(100ng/ml)联合紫杉醇(3.41g/ml)引起明显的增殖抑制和细胞凋亡(P<0.05)。TRAIL单药没有改变死亡受体5(DR5)的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论:紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。     

紫杉醇提高胃癌MGC803细胞对TRAIL的敏感性

目的：研究紫杉醇对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响,探讨死亡受体5（DR5）在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测蛋白表达。结果：在MGC803细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100ng/ml）联合紫杉醇（3.41g/ml）引起明显的增殖抑制和细胞凋亡（P〈0.05）。TRAIL单药没有改变死亡受体5（DR5）的表达,而3.41g/ml紫杉醇作用MGC803细胞后明显上调了DR5的表达。结论：紫杉醇通过上调DR5的表达增强TRAIL诱导的胃癌MGC803细胞凋亡。     

卡铂联合TRAIL对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察卡铂联合TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:经20、40、80 μg/mL卡铂和100 ng/μL TRAIL单用或联用处理后,用MTS法检测A549细胞的增殖能力,在光镜下观察细胞形态学变化;并采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot法检测死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)、Survivin和X连锁凋亡抑制蛋白基因(XIAP)mRNA与蛋白表达的变化。结果:卡铂和TRAIL单用或联用均可浓度依赖性抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,两药联用比单用卡铂时抑制率和凋亡率更高(P<0.05)。单用卡铂或TRAIL可使A549细胞数减少,漂浮细胞增多,出现明显的凋亡形态变化,且明显降低Survivin和XIAP的mRNA和蛋白表达水平(P均<0.05);但对A549细胞DR4和DR5 mRNA表达均无明显影响,而单用卡铂或TRAIL却能升高A549细胞DR5蛋白的表达(P<0.05)。与单用组相比,TRAIL与卡铂联用A549细胞凋亡形态变化更明显,可明显降低A549细胞Survivin和XIAP mRNA和蛋白的表达水平及升高DR5蛋白表达水平(P<0.05)。结论:卡铂与TRAIL联用可协同抑制肺癌细胞A549细胞增殖,促进其凋亡,且与卡铂能够增加A549细胞DR5蛋白的表达和降低Survivin及XIAP的表达相关。     

香加皮杠柳苷联用TRAIL对胃癌SGC-7901和MGC-803细胞的作用及其机制

目的:探讨香加皮杠柳苷(cortex periplocae,CPP)联用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对胃癌细胞的作用及其机制.方法:人胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803培养完成后,采用50、100、200 ng/ml的CPP和1μg/ml的TRAIL单用或联合处理.MTS法检测SGC-7901和MGC-803细胞的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡率,Westcm boltting检测pro-BID、Mcl-l、cleaved caspase-3、DR4、DR5的表达水平.结果:SGC-7901和MGC-803细胞经CPP (50、100、200 ng/ml)和TRAIL(1 μg/ml)联合处理24 h后,细胞增殖率明显低于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(/＜0.05或P＜0.01).SGC-7901和MGC-803细胞凋亡率均明显高于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(P＜0.05或P＜0.01).SGC-7901和MGC-803细胞中pro-BID、Mcl-1表达水平明显降低(均P＜0.05),cleaved caspase-3表达水平明显升高(P＜0.05),DR4和DR5受体的表达水平升高(均P＜0.05).结论:CPP协同TRAIL可明显诱导人胃癌SGC-7901和MGC-803细胞凋亡,增强人胃癌细胞对TRAIL的敏感性.     

重组人TRAIL蛋白联合顺铂对人卵巢癌细胞生长及凋亡的影响

背景与目的：研究发现肿瘤坏死因子的相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)可以增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用。本研究旨在探讨TRAIL与顺铂联合应用对体外培养的卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3生长凋亡的影响及可能的诱导机制。方法：利用MTT法和流式细胞仪检测在顺铂和重组人TRAIL蛋白共同作用下,SKOV3和OVCAR3细胞的增殖抑制效应及细胞凋亡程度;并应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测药物处理后TRAIL死亡受体DR4、DR5的mRNA表达水平;同时用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测DR4、DR5的蛋白表达水平。结果：SKOV3和OVCAR3细胞均对TRAIL蛋白敏感,随着TRAIL蛋白浓度的升高,细胞的生长抑制率可达64%;而TRAIL与顺铂联合用药对两种细胞的抑制率均达到92%以上,对细胞的增殖抑制呈现高效协同作用,与单独用药组比较差异有统计学意义(P<0.05);TRAIL和顺铂联合组两种细胞凋亡率分别为(31.50±0.79)%和(36.60±1.31)%,显著高于单独用药组;RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示,SKOV3和OVCAR3细胞在TRAIL与顺铂联合用药后,死亡受体DR4、DR5表达水平均显著上调。结论：在体外,TRAIL与化疗药物顺铂联用能明显抑制卵巢癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。TRAIL能明显增强顺铂对卵巢癌细胞的敏感性,其诱导机制可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。     

表阿霉素提高胃癌BGC823细胞对TRAIL的敏感性

目的：研究表阿霉素对TRAIL诱导胃癌细胞BGC823细胞凋亡的影响,探讨脂筏和死亡受体4（DR4）在TRAIL诱导细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫荧光显微技术检测脂筏和DR4在细胞膜的分布。结果：（0.1-50）μg/ml表阿霉素处理BGC823细胞24h,抑制细胞增殖50%的药物浓度（IC50）为（4.61±0.62）μg/ml。在BGC823细胞中,100ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100ng/ml）联合表阿霉素（4.61μg/ml）引起明显的增殖抑制和细胞凋亡（P〈0.05）。与对照组相比,100ng/ml的TRAIL作用BGC823细胞24 h,没有引起明显的脂筏聚集或DR4聚集。表阿霉素（4.61μg/ml）明显促进脂筏聚集和DR4聚集,同时观察到DR4和脂筏的共定位。表阿霉素和TRAIL联合作用24 h,同样观察到DR4定位在聚集的脂筏内。结论：表阿霉素通过促进DR4在脂筏聚集增强TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡。     

TRAIL与卡铂联合诱导卵巢癌细胞凋亡的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与卡铂（CBP）联合应用对体外培养的卵巢A2780细胞的生物学效应及其作用机制。方法采用MTT法、流式细胞术，检测体外培养的A2780细胞在卡铂和TRAIL共同作用下的细胞增殖抑制效应以及细胞凋亡程度，应用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测TRAIL受体的mRNA表达水平。结果A2780细胞对TRAIL敏感，TRAIL与卡铂联合用药对细胞的增殖抑制呈现高效协同作用，与单独用药组比较有显著性差异（P〈0．05）；流式细胞术分析协同性杀伤作用主要由于TRAIL和CBP联合诱导细胞凋亡引起；RT—PCR法检测结果显示A2780细胞在TRAIL与卡铂联合用药后均表现死亡受体DR4、DR5表达水平上调和诱骗受体DcR1、DcR2表达水平下调。结论在体外TRAIL与化疗药物联用能明显抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，卡铂能明显增强TRAIL对肿瘤细胞的敏感性，其诱导机制可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调和诱骗受体DcR1、DcR2表达水平下调相关。     

TRAIL联合紫杉醇对人脑胶质瘤U87细胞的抑制效应及其可能的机制

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)联合紫杉醇处理对人脑胶质瘤U87细胞的抑制效应及其可能的机制。方法:MTT法检测紫杉醇组、TRAIL组和TRAIL/紫杉醇组对U87细胞增殖的抑制率;流式细胞术检测不同给药方案对U87细胞凋亡的影响;Western blotting检测不同处理后U87细胞TRAIL死亡受体(death receptor,DR)4、DR5以及caspase-8和caspase-3的表达水平。结果:MTT结果显示,单独应用TRAIL或紫杉醇可有效抑制U87细胞的增殖,并呈浓度依赖性。TRAIL(500 ng/ml)/紫杉醇(0.5μmol/L)联合给药组可协同抑制U87细胞的增殖,相互作用指数(coefficient of drug interaction,CDI)为0.59;且联合用药组对U87细胞增殖的抑制率明显高于TRAIL和紫杉醇单独用药组[(70.24±3.68)%vs(27.01±2.36)%,(21.31±4.85)%,P<0.01];TRAIL/紫杉醇联合用药组U87细胞凋亡率明显高于对照组、TRAIL组及紫杉醇组[(67.67±2.46)%vs(1.80±1.13)%、(22.13±2.18)%、(35.90±2.53)%,P<0.01]。TRAI与紫杉醇联合用药组U87细胞中DR4、caspase-8及caspase-3的表达比TRAIL组或紫杉醇组显著增加(P<0.05),而DR5表达则无明显变化(P>0.05)。结论:TRAIL联合紫杉醇处理通过上调DR4、caspase-8及caspase-3的表达,抑制U87细胞的增殖,诱导U87细胞凋亡。     

人参皂苷Rg3 协同TRAIL促进肺癌H358 细胞凋亡的机制

[摘要] 目的：探讨人参皂苷Rg3 联用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对肺癌H358 细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:肺癌H358 细胞培养完成后，0、50、100、200 ng/ml TRAIL 或0、25、50、100 μmol/L Rg3 作用H358 细胞48 h，按照实验方法分为对照组、50 μmol/L Rg3 组、100 ng/ml TRAIL 组及50 μmol/L Rg3+100 ng/ml TRAIL 组。MTT法检测Rg3 和/或TRAIL 对肺癌H358 细胞增殖的影响，DAPI 染色荧光倒置显微镜观察Rg3 和/或TRAIL 对肺癌H358 细胞形态学变化的影响，流式细胞术检测Rg3 和/或TRAIL 对肺癌H358 细胞凋亡的影响,WB实验检测Rg3 和/或TRAIL 对各组肺癌H358 细胞内死亡受体（DR5）及caspase-8 表达的影响。结果：50 μmol/L Rg3+100 ng/ml TRAIL 组与其他各组比较，肺癌H358 细胞的增殖抑制最明显（P<0.05）；DAPI染色后显示，50 μmol/L Rg3+100 ng/ml TRAIL组多数胞核皱缩，染色质凝集，荧光强度增加，并出现饱和碎裂等晚期凋亡形态学改变；50 μmol/L Rg3+100 ng/ml TRAIL组与其他各组比较，细胞凋亡率升高最明显，细胞内DR5 及caspase-8 表达增强最明显（均P<0.05）。结论：人参皂苷Rg3 联合TRAIL能够协同抑制肺癌H358 细胞的增殖及诱导细胞凋亡，其作用机制可能与人参皂苷Rg3 协同促进DR5 及caspase-8 的表达上调有关。     

死亡受体5与肝癌细胞凋亡的相关性

目的探讨人死亡受体5(DR5)及其配体(TRAIL)和竞争性单克隆抗体(DR5mAb)对肝癌细胞凋亡的影响。方法采用半定量RT-PCR及Western blot法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC7721和正常人肝细胞株LO2的DR5在mRNA和蛋白水平的表达含量。应用四甲基偶氮唑盐法测试细胞的生长曲线,以观察TRAIL和DR5mAb对肝癌细胞生长的抑制作用,并用流式细胞仪测定细胞的凋亡率。结果肝癌细胞株HepG2、SMMC7721的DR5高表达,正常人肝细胞株LO2的DR5低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌细胞的增殖率随着TRAIL浓度的增加而逐渐降低,但当TRAIL超过1000ng/ml时,肝癌细胞株的增殖率就不再下降;而肝癌细胞的增殖率随着DR5mAb浓度的增加而逐渐降低,呈现明显的剂量依赖关系。1000ng/ml TRAIL处理24h时,HepG2的凋亡率在14.74%±0.48%,继续增加TRAIL浓度,其凋亡率无显著改变;而同样剂量的DR5mAb处理24h时,HepG2的凋亡率高达52.45%±0.57%,明显高于前者(P<0.05)。同时发现,正常人肝细胞株LO2的增殖率随着TRAIL浓度的增加呈下降趋势,与PBS阴性对照组差异有统计学意义(P<0.05);而DR5mAb的浓度变化对人正常肝细胞株LO2无明显影响。结论死亡受体DR5在诱导肝癌细胞凋亡中起重要的作用;DR5mAb选择性地诱导肝癌细胞凋亡,对人正常肝细胞无诱导凋亡作用。