人胃癌完整组织块裸鼠原位种植转移模型的建立方法和技巧

目的:建立人胃癌完整组织块裸鼠原位种植高转移模型.方法:人胃腺癌SGC-7901细胞株,裸鼠皮下注射,成瘤后反复传代至形成实体瘤,以第6代瘤源为组织材料,打开腹腔,通过"生物胶粘贴法",用OB医用生物胶将瘤块粘贴在裸鼠胃壁胃大弯血管分布稠密处;待荷瘤鼠出现衰竭体征濒临死亡时,处死解剖检查.结果:术后第3～4 w左右,上腹可触及0.1～0.4 cm结节,5～6 w时逐渐增大;8～10 w时肿块明显增大,局部包块透壁可见,直径约1.0～1.9 cm.此后动物极度消瘦,部分动物腹水形成,活动受限,逐渐衰竭,濒临死亡.解剖后原位肿瘤成瘤率100%,病理学检查胃周淋巴结转移率100%,肝脏转移率72.7%,部分动物腹膜、胰腺转移.结论:人胃癌完整组织块通过"生物胶粘贴法"原位种植于裸鼠胃壁,能较好地重现胃癌的临床转移过程,为人类胃癌生长、转移机制及抗转移治疗方面的研究提供了一种较理想的动物模型.     

Darbufelone对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的观察5-脂氧合酶/环氧合酶-2双重抑制剂Darbufelone对胃癌SGC7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并探讨其机制。方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,随机分为Darbufelone治疗组及对照组(n=7),Darbufelone治疗组给予Darbufelone,45mg/(kg·d),连续灌服4周,对照组给予等量生理盐水。测定移植瘤体积及质量并计算抑瘤率。采用RT-PCR及免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2、5-LOX、PCNA、Bcl-2及Caspase-3的表达。结果 Darbufelone对裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,Darbufelone治疗组体重及移植瘤体积均明显减低(P<0.05),抑瘤率为58.42%,且未见不良反应。Darbufelone治疗组COX-2、5-LOX、PCNA、Bc1-2的mRNA及蛋白表达均明显下降,Caspase-3 mRNA及蛋白表达则显著增加(P<0.05)。结论 Darbufelone可抑制体内胃癌生长,其机制与抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡有关。     

Immunoscintigraphy of human tumors transplanted in nude mice with radiolabeled anti-ras p21 monoclonal antibodies

Anti-ras p21 monoclonal antibody (RASK-3) was used for immunoscintigraphy of human cancer cell lines in nude mice. Iodine-125-labeled RASK-3 was injected into nude mice with either human colon cancers (FCC-1 or BM-314) or lung cancer (KNS-62). Clear images were obtained in all three cancers 7 days after the injection of antibody. No localization of 125I-labeled control monoclonal antibody was observed. The ratio of tissue/blood radioactivity and % ID/g in the tumor were significantly higher than other organs by Day 8. The specific localization index examined by 131I-RASK-3 and 125I-control monoclonal antibody was also higher in the tumor than in other tissues. In the in vitro study, binding of RASK-3 to tumor cells increased significantly by treatment of cells with either lysolecithin or periodate-lysine-paraformaldehyde, which confirmed the intracellular localization of ras p21. The mechanism by which anti-ras p21 antibodies accumulate in tumor sites could be the necrotic changes in tumor cells or changes in membrane permeability of non-necrotic cells. These results provide a strong rationale for the utilization of ras p21 as a target antigen in the imaging of a variety of human cancers.     

人原发性结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植高转移模型的建立

目的建立人结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植高转移模型,并探讨其生物学特性.方法将人原发性结直肠恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶术中新鲜瘤组织块植入裸小鼠结直肠黏膜层内,观察原位移植成瘤率、移植瘤的侵袭和转移率,并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、染色体核型和流式细胞术分析.结果依据WHO新的恶性淋巴瘤分类法,从4例结直肠淋巴瘤标本中筛选出1株人结肠（非霍奇金B细胞）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HCBL-0301）和1株人直肠（非霍奇金B细胞）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型（HRBL-0302）.移植瘤组织病理学均为非霍奇金（大B细胞性）高度恶性淋巴瘤,免疫组织化学示CD19、CD20、CD22、CD45阳性,CD3、CD7阴性.染色体众数范围55～69条.流式细胞术示DI值1.59～1.71,均为异倍体.HCBL-0301和HRBL-0302分别传至31代和27代,共移植裸鼠326只;自第3代起肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.HCBL-0301多转移肝右叶,转移率为100%,淋巴结转移率和腹腔种植转移率为67.4%;HRBL-0302多转移左右肝叶,转移率为63.7%,淋巴结转移率及腹腔种植转移率为56.4%.人结直肠恶性淋巴瘤在裸鼠结直肠内自主侵袭性生长,并发生血液转移、淋巴转移和腹腔内种植性转移.结论首次成功地建立人结直肠恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植瘤模型HCBL-0301和HRBL-0302,并具有自发性高转移特点,可用于结直肠恶性淋巴瘤的基础及实验治疗研究.     

C-myc反义寡核苷酸对胃癌荷瘤裸鼠抑瘤作用的研究

目的:探讨C-myc反义寡核苷酸(ASODN)对胃癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法:将21只裸鼠建立人胃癌MKN-45细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机平均分为3组,分别由皮下瘤体内注射脂质体(lipofectin,Lip)、C-mycSODN/Lip、C-mycASODN/Lip,每周1次,共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和动物存活情况。免疫组化ABC法检测各组肿瘤的C-myc蛋白表达情况。结果:ASODN/Lip组肿瘤体积明显减少,肿瘤生长抑制,抑瘤率达41.5%;ASODN/Lip组裸鼠生存期较SODN/Lip组和Lip对照组延长明显(P<0.05);ASODN/Lip组肿瘤的C-myc蛋白表达明显降低。结论:C-myc反义寡核苷酸可以有效抑制人胃癌裸鼠皮下肿瘤的生长,延长动物生存期,为胃癌的治疗提供新的思路。     

DCE-MRI对裸鼠胃癌原位移植瘤的可行性研究

目的 评估动态增强磁共振成像(DCE-MRI)用于裸鼠胃癌原位移植瘤模型研究的可行性.方法 建立裸鼠胃癌原位移植瘤模型,15只采用钆喷酸葡胺注射液为对比剂行DCE-MRI,扫描后取出移植瘤瘤体检测微血管密度(MVD).并对比裸鼠胃癌原位移植瘤模型MVD与正常胃黏膜组织MVD的差异.结果 15只裸鼠胃癌原位移植瘤模型成功行MRI平扫及DCE-MRI,裸鼠胃癌原位移植瘤微血管转运常数(Ktrans)值为(2.11±0.44) min-1,反流速率常数(Kep)值为(4.59±0.93) min-1, 血管外细胞外容积分数(Ve)值为0.46±0.06.裸鼠胃癌原位移植瘤中MVD显著高于正常胃黏膜组织(χ2=16.205,P<0.001).结论 DCE-MRI可以无创定量评估胃恶性肿瘤血管参数.     

电离辐射对小鼠移植性肝癌作用的实验研究

目的研究不同剂量γ射线照射对小鼠移植性肝癌形成的影响。方法γ射线照射后６小时，给予小鼠右肩胛尾侧部皮下接种Ｈ２２肝癌细胞，观察各组小鼠的肿瘤形成及生长情况。另外，观察了γ射线对小鼠足垫迟发性超敏反应（ＤＴＨ）、ＮＫ细胞活性及血清ＳＯＤ含量的影响。结果０．３及０．６Ｇｙγ射线照射后，小鼠肿瘤潜伏期延长，０．１５及０．３Ｇｙ照射后，小鼠ＮＫ细胞活性及ＤＴＨ反应增强，０．１５～１．２Ｇｙ照射后，小鼠血清总ＳＯＤ及Ｍｎ－ＳＯＤ含量均显著升高。结论电离辐射对小鼠移植性肝癌的作用与照射对小鼠免疫功能及ＳＯＤ水平的影响密切相关。     

青蒿琥酯逆转裸鼠种植食管癌耐药作用研究

目的 探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)与食管癌多药耐药的关系以及青蒿琥酯(Art)逆转食管癌多药耐药的作用机制.方法 将食管癌多药耐药细胞Eta109/ABCG2接种于裸鼠皮下,建立荷瘤裸鼠动物模型.裸鼠皮下成瘤后用药,经腹腔给予Art和(或)阿霉素(ADM),分为Art高、低剂量组(50、25mg/kg ...     

羟基乙酸局部注射治疗裸鼠移植性肝癌

目的：观察局部注射羟基乙酸对裸鼠移植性肝癌的治疗作用,为临床应用此方法治疗肝癌提供实验依据。方法：建立裸鼠移植性肝癌模型,分别注入不同浓度的羟基乙酸及无水乙醇,观察治疗后裸鼠肿瘤体积及器官组织超微结构的变化。结果：羟基乙酸对裸鼠移植瘤治疗效果显著,治疗组裸鼠肿瘤体积明显小于无水乙醇组（P＆lt;0.05）,光镜与电镜观察结果进一步证实羟基乙酸对裸鼠肿瘤产生了更强大的坏死作用。结论：羟基乙酸的肿瘤灭活效应明显大于无水乙醇,有望作为一种新的化学灭活剂代替无水乙醇局部注射治疗肝癌。     

沙利度胺联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长和肿瘤血管生成的影响

目的 观察沙利度胺（thalidomide,TLD）联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立人食管鳞癌裸鼠移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠标号,按随机数字表随机分为健康对照组、TLD组、20 Gy组、20 Gy+TLD组,每组6只。计算肿瘤抑制率,并用免疫组织化学法检测移植瘤瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）、乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、微血管密度（MVD）的表达水平。结果 20 Gy+TLD组荷瘤鼠瘤体积及瘤重均小于20 Gy组,差异具有统计学意义（t=3.68、4.60,P<0.05）。20 Gy+TLD组的抑瘤率高于其他各实验组,达到60.61%。与20 Gy组相比较,20 Gy+TLD组中裸鼠移植瘤组织中VEGF、HIF-1α蛋白表达均有所降低（t=11.82、6.63,P<0.01）;20 Gy组MVD值高于20 Gy+TLD组（t=5.92,P<0.01）。结论 沙利度胺联合照射对移植瘤的抑瘤作用较单独照射增强,可能是沙利度胺通过调控VEGF的表达,从而影响了食管癌组织的放疗敏感性。