脂联素对高糖环境下人心肌细胞增殖及VEGF表达的影响

目的通过体外高糖培养人心肌细胞(HCM)及运用脂联素(ADPN)干预以探讨HCM增殖及VEGF表达的影响,以揭示脂联素对高糖环境中的心肌细胞的可能保护机制。方法将HCM分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(30.0mmol/L葡萄糖)、脂联素组(30.0mmol/L+2.5μg/mLADPN),分别培养24h、48h、72h,运用MTT测定HCM的增殖情况;通过实时荧光定量PCR(real time PCR)技术测定在脂联素干预和高糖作用下相应时间HCM中VEGF mRNA的含量。结果①高糖组抑制细胞增殖,加入脂联素后促进细胞增殖,且呈时间依赖性;②VEGF mRNA在高糖组表达较高,加入生理浓度脂联素对于VEGF mRNA表达有抑制作用,并随时间的延长VEGF表达逐渐减少。各时间段脂联素组和高糖组相比,VEGF的表达有统计学差异,亦呈时间依赖性。结论脂联素可以促进HCM增殖,对高糖环境下心肌细胞有保护作用。     

脂联素对高糖环境下RPE细胞氧化应激及凋亡的影响

目的 通过高糖环境下培养人RPE细胞建立RPE细胞的氧化应激模型,观察脂联素对RPE细胞各氧化应激指标及凋亡的影响,从而揭示脂联素对RPE细胞可能的保护机制.方法 将体外培养的人RPE细胞分为3组:正常对照组、高糖组、高糖+脂联素组,分别干预24、48、72 h.在倒置显微镜下观察RPE细胞形态变化,采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD含量和活性,用荧光定量RT-PCR法测定p66Shc、Ho-1在各个时间点上的表达,通过流式细胞术检测RPE细胞的凋亡率.结果 与正常对照组相比,高糖组MDA含量显著上升,SOD含量显著下降(P<0.05),与高糖组相比,脂联素组MDA含量显著下降,SOD含量显著上升(P<0.05),并且呈时间依赖性.与正常对照组相比,高糖组Ho-1 mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达亦增高(P<0.05).与正常对照组相比,高糖组p66Shc mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达降低(P<0.05),呈时间依赖性.流式细胞术RPE细胞凋亡高糖组细胞凋亡率较正常对照组明显增加,而脂联素组细胞凋亡率较高糖组显著下降.结论 脂联素可通过减少p66Shc表达,从而减少线粒体ROS产生、增加Ho-1表达,增加抗氧化能力,减少氧化应激反应,减少细胞凋亡,对糖尿病RPE细胞起保护作用.     

脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞分泌VEGF及PEDF的影响

目的研究脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）的影响。方法hRPE细胞分为3组：①正常对照组;②高糖组;③高糖＋不同浓度的脂联素组（2.5,5,10,20μg/ml）,分别在48h后,用ELISA法测定上清液中VEGF及PEDF的含量。结果与正常对照组相比,高糖组VEGF水平明显升高,PEDF水平明显下降,加入2.5μg/ml脂联素对VEGF及PEDF水平影响不大,脂联素浓度达到5～20μg/ml时和高糖组相比,结果相反,VEGF水平显著降低、PEDF水平显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论5～20μg/ml脂联素可以使hRPE细胞VEGF分泌减少和PEDF分泌增多。提示脂联素可以纠正高糖诱导的hRPE细胞功能紊乱,通过调节VEGF与PEDF的平衡来抑制糖尿病视网膜病变（DR）中病理性新生血管的形成。     

高糖环境下脂联素对人心肌细胞增殖的影响

目的 体外高糖培养人心肌细胞(HCM)及运用脂联素(ADPN)干预以探讨HCM增殖的影响,以揭示脂联素对高糖环境中的心肌细胞的可能保护作用.方法 将HCM分为正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol/L葡萄糖)、脂联素组 (30.0 mmol/L+2.5 μg/mlADPN),分别培养24 h、48 h、72 h,运用MTT测定HCM的增殖情况.结果 ①在24 h高糖组与正常组比较人心肌细胞增殖有促进作用(P<0.05),而高糖组与脂联素组比较没有统计学差异(P>0.05).48、72 h高糖组与正常对照组比较细胞增殖受抑制(P<0.05).在加入脂联素后48、72 h脂联素组与高糖组比较细胞增殖增加,随时间的延长细胞增殖增加明显,有统计学差异(P<0.05).结论 脂联素可以促进HCM增殖,对高糖环境下心肌细胞有保护作用.     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞凋亡率及Bax Bcl-2表达的影响

<正>目前糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)属于糖尿病常见的微血管并发症,由于其患病率逐年升高和较高的病死率,越来越被人们所重视。DN可以使肾小管基底膜增厚、动脉硬化等,这些改变严重影响肾小管的营养供应,     

脂联素及TNF-α与2型糖尿病视网膜病变的关系

目的探讨脂联素(adiponectin)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)在2型糖尿病(DM)视网膜病变(DR)发病中的作用。方法应用酶联免疫吸附方法(ELISA)对90例2型糖尿病患者(再分为无DR组、背景组DR组和增殖期DR组)及40名健康人血清中的脂联素及TNF-α进行测定。结果①DM组血清脂联素及TNF-α的含量低于对照组(P<0.05);②BDR组的脂联素及TNF-α含量低于NDR组(P<0.05);③PDR组的脂联素及TNF-α含量低于NDR组(P<0.01);④PDR组的脂联素含量及TNF-α低于BDR组(P<0.05);⑤DR的严重程度与脂联素水平呈负相关(r=-0.428,P<0.01)。结论脂联素及TNF-α的降低在DM的发病机制中起重要作用,而2型糖尿病合并视网膜病变时,血中脂联素及TNF-α水平更低,脂联素及TNF-α可能参与了DR的发生和发展。     

脂联素对高糖环境下人肾小球系膜细胞增殖及氧化应激水平的影响

目的 探讨脂联素(Adiponectin,ADPN)对高糖环境下人肾小球系膜细胞(HMCs,human Mesangial Cells) 增殖及氧化应激水平的影响,揭示脂联素在糖尿病肾病中的保护作用.方法 ①体外培养HMCs:①将HMCs随机分为正常对照组(5.5 mmol/L 葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol/L葡萄糖)、脂联素组(30.0 mmol/L葡萄糖+2.5 μg/ml脂联素),分别培养24、48、72 h后,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定3组不同时间点HMCs的增殖情况.②将HMCs随机分为上述3组细胞,分别培养24、48、72 后运用硫代巴比妥酸法(TBA法)测定细胞上清液中MDA及SOD的含量.③再将HMCs随机分为上述3组细胞,分别培养24、48、72 h,运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定HO-1 mRNA的表达,观察细胞氧化应激指标变化.结果 ①24 h高糖组与正常对照组比较细胞增殖无统计学差异(P>0.05),48、72 h两组比较,高糖组细胞增殖明显受抑制(P<0.05).加入脂联素促进细胞增殖,与高糖组比较差异有统计学意义(P<0.05);②24、48、72 h高糖组MDA含量均升高,SOD含量及HO-1 mRNA的表达均下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05).加入脂联素后,观察上述氧化应激指标均得到明显改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论长期高糖刺激抑制人肾小球系膜细胞增殖,外源性加入脂联素可促进细胞增殖.高糖组均引起氧化应激指标升高,加入脂联素可降低系膜细胞氧化应激水平,提示其对细胞起保护作用.     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞增殖及T钙黏蛋白表达的影响

<正>脂联素(adiponectin,ADPN)是近年发现的对糖尿病肾病(DN)有保护作用的细胞因子,主要由脂肪细胞分泌,通过与其受体结合发挥抗炎、抗动脉粥样硬化、调节糖脂代谢、抗纤维化等多种保护作用[1]。其中T钙黏蛋白是2004年Hug等[2]     

大鼠脂联素和脂联素受体R2 mRNA表达水平和与胰岛素抵抗

目的 研究脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平与胰岛素抵抗的关系.方法 普通级雄性Wistar大鼠24只,随机分为高糖高脂组(A组)、罗格列酮组(B组)和正常对照组(C组).检测空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);应用RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素受体R2 mRNA的表达;ELISA法测定血浆脂联素水平.结果 与C组相比,A组脂联素及脂联素受体R2 mRNA水平均显著降低(P<0.05);B组的脂联素及其受体水平较高糖高脂组有所升高,但仅脂联素的升高差异有显著性(P<0.05);脂联素受体R2 mRNA与HOMA-IR负相关(r=-0.652,P<0.01).结论 脂联素参与胰岛素抵抗的发生,脂联素受体R2可能介导了该效应.     

脂联素干预TNF-α作用后的巨噬细胞脂联素受体mRNA表达水平及其吞噬脂质变化

目的探讨脂联素干预TNF-α作用后的巨噬细胞表面脂联素受体mRNA表达水平及其吞噬脂质的变化。方法单核巨噬细胞系用佛波酯诱导,使之分化为巨噬细胞;进而采用不同浓度的TNF-α(0、0.1、1、10、100ng/ml)作用24h(以TNF-α0ng/ml为空白对照组),采用RT-PCR技术观察巨噬细胞表面脂联素受体R1、R2mRNA表达水平。选择0、10ng/ml浓度TNF-α作用后的巨噬细胞,用0.2mg/ml低密度脂蛋白混悬生长液作用24h,油红O染色和比色定量检测巨噬细胞吞噬脂质变化;同时TNF-α作用后的巨噬细胞,进一步用人重组脂联素20μg/ml干预24h,再次观察巨噬细胞表达脂联素受体mRNA水平及吞噬脂质变化。结果巨噬细胞用不同浓度的TNF-α作用后,随着TNF-α浓度梯度增加,脂联素受体R1、R2mRNA表达水平逐渐下降(P<0.05)。TNF-α10ng/ml作用后的巨噬细胞吞噬脂质的量明显高于TNF-α空白对照组(P<0.05);同时10ng/mlTNF-α作用后的巨噬细胞,进一步用脂联素干预,巨噬细胞表达脂联素受体R1、R2mRNA水平均较干预前上调(P<0.05),吞噬脂质的量较干预前减少(P<0.05)。结论脂联素及其受体在调节巨噬细胞吞噬脂质过程中产生重要作用,该作用可能成为预防和治疗动脉粥样硬化发生发展的新靶标。     

缬沙坦对肝纤维化大鼠脂联素及脂联素受体2表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂缬沙坦对肝纤维化大鼠脂联素(ADN)及ADN受体2(AND-R2)表达的影响。方法选36只雄性Wistar大鼠分为对照组、模型组、药物组,用四氯化碳(CCl4)背部皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型,药物组于造模开始每只大鼠缬沙坦灌胃(30 mg·kg-1·d-1),8周末处死。肝组织苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色,进行肝纤维化分期。酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清ADN、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子-β1(TGF-β1)的浓度,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肝组织中ADNm RNA(ADN-R2)m RNA水平,蛋白印迹法检测肝脏ADN、ADN-R2、Ⅰ型胶原表达水平。结果 (1)模型组大鼠造模成功,药物组肝组织纤维化程度较模型组明显减轻;(2)模型组较对照组血清脂联素水平降低,TNF-α、TGF-β1水平增高(P<0.01),药物组较模型组ADN增高(P<0.01)、TNF-α和TGF-β1水平下降(P<0.01或<0.05);(3)肝脏ADN和ADN-R2m RNA水平模型组较对照组明显下降(P<0.01),药物组较模型组增高(P<0.05);(4)模型组较对照组ADN、ADN-R2蛋白表达减少,Ⅰ型胶原蛋白增高(P<0.01),药物组较模型组ADN蛋白表达增高(P<0.01),ADNR2蛋白表达增高(P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白下降(P<0.05)。结论血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦可能通过增高大鼠ADN、ADN-R2的表达,减少TNF-α、TGF-β1水平,减轻肝脏炎症,发挥抗肝纤维化作用。     

咖啡豆提取物对肥胖大鼠血清瘦素、脂联素水平及脂联素受体表达水平的影响

目的 研究咖啡豆提取物对高脂饮食肥胖大鼠的瘦素(Leptin,LP)、脂联素(APN)及脂联素受体表达的影响。方法 给予高脂饲料建立SD大鼠肥胖模型,灌胃给予咖啡豆提取物(800,267,133 mg·kg^-1),连续6周。测量大鼠体质量及脂体比,测定大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血清LP、APN;检测肝组织脂联素受体表达。结果 与正常对照组相比,给予高脂饲料6周的大鼠体质量明显增加(P<0.01),提示SD大鼠肥胖模型建立。与模型组比较,咖啡豆提取物给药后大鼠体质量、脂体比和LP水平下降(P<0.01或P<0.05),血清APN水平、APN受体的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论 咖啡豆提取物对高脂饮食肥胖大鼠的体质量具有改善作用,作用机制可能是升高血清APN水平,降低LP水平及上调肝脏脂联素受体的mRNA和蛋白表达。     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞增殖和Caspase-3的影响

目的探讨脂联素（Adiponectin,ADPN）对高糖环境下人近曲肾小管上皮细胞增殖、凋亡及T-钙黏蛋白（T-cadherin）表达的影响,揭示脂联素在糖尿病肾病中的保护作用。方法将人近曲肾小管上皮细胞用5.5mmol/L葡萄糖（正常对照组）、30.0mmol/L葡萄糖（高糖组）、30.0mmol/L＋2.5μg/ml ADPN（脂联素组）分别培养24h,48h,72h后,运用MTT法测定细胞增殖,运用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清液中Caspase-3的含量,观察细胞凋亡。结果①高糖组人近曲肾小管上皮细胞增殖被抑制（P〈0.05）,加入脂联素（2.5μg/ml）后促进了细胞增殖（P〈0.05）,并呈时间依赖性。②高糖组人近曲肾小管上皮细胞凋亡增加（P〈0.05）,加入脂联素（2.5μg/ml）后延缓了细胞凋亡。结论高糖环境下随着时间的延长,可引起肾小管上皮细胞增生肥大,诱导其凋亡;脂联素可促进细胞增殖,延缓细胞凋亡。     

脂联素对高糖环境下人心肌细胞增殖和凋亡的干预作用

目的探讨脂联素（Adiponectin,ADPN）对高糖环境下人心肌细胞增殖、凋亡的影响,揭示脂联素在糖尿病心肌病变中的保护作用。方法将人心肌细胞用5.5mmol/L葡萄糖（正常对照组）、30.0mmol/L葡萄糖（高糖组）、30.0mmol/L＋2.5μg/mlADPN（脂联素组）分别培养24h,48h,72h后,运用MTT方法检测细胞增殖,Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达,用荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平,观察细胞凋亡。结果①高糖组人心肌细胞增殖被抑制（P〈0.05）,ROS水平、细胞凋亡增加,并呈时间依赖性。②高糖组人心肌细胞,脂联素（2.5μg/ml）干预后,细胞增殖接近正常对照组,ROS水平下降,延缓了细胞凋亡。高糖环境下随着时间的延长,可引起心肌细胞增生肥大,诱导其凋亡;脂联素可促进细胞增殖,延缓细胞凋亡。     

脂联素的研究进展

本文综述了脂联素的结构、生理功能、影响因素，以及与脂联素功能失调相关的疾病。     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞转化生长因子-β1表达的影响

目的:探讨脂联素(ADPN)对体外高糖培养的人肾小管上皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,以揭示ADPN对高糖环境中的肾小管上皮细胞的可能保护作用机制.方法:人肾小管上皮细胞分别培养于不同的培养基中,在高糖环境中加入脂联素,分别培育48 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中TGF-β1的含量.结果:TGF-β1在高糖组表达较高,加入中等浓度(ADPN浓度为10.0,15.0,20.0μg/mL)TGF-β1的表达减少,和高糖组相比,两者的差异有统计学意义.结论:中等浓度ADPN可以抑制TGF-β1在人肾小管上皮细胞的表达.     

2型糖尿病患者血清脂联素与视网膜病变的关系探讨

目的探讨2型糖尿病患者血清脂朕素与视网膜病变的关系。方法对本院2008年3月～2011年6月收治的64例2型糖尿病患者,将无视网膜病变2型糖尿病患者(NDR组)和视网膜病变2型糖尿病患者(DR组)各32例作为观察组;34例糖耐量正常患者作为对照组,均采用放射免疫法对其进行血清脂联素检测,分析每组各项指标及血清脂联素的差异性。结果 NDR组和DR组的血清脂联素明显低于对照组(P<0.05),其中DR组的血清脂肪联素又低于NDR组(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论血清脂联素在2型糖尿病患者浓度明显降低,与视网膜病变有一定的关联性,可作为判断糖尿病患者的一个指标。     

2型糖尿病患者脂联素与视网膜病变的相关性研究

目的研究2型糖尿病（T2DM）患者血浆脂联素（APN）水平及脂联素基因启动子区-11377位点单核苷酸多态性（SNP）与糖尿病视网膜病变（DR）之间的关系。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术,对200例T2DM患者[无DR（NDR）组82例、非增殖型DR（NP-DR）组72例、增殖型DR（PDR）组46例],检测APN基因启动子SNP-11377C→G多态性,同时检测血浆APN浓度、血脂、血糖、空腹胰岛素,比较各组基因型和等位基因频率,并分析各指标间的相关性。结果①APN水平随视网膜病变程度呈递增趋势NDR、NPDR、PDR各分别为（6.11±2.77）,（7.49±3.84）,（9.83±4.97）mg/L,其中PDR组显著高于NDR和NPDR组（P〈0.01）,NPDR组显著高于NDR组（P〈0.05）;②APN水平与HOMA-IR呈负相关（r=-0.203,P〈0.01）;③APN基因启动子SNP-11377C→G的基因型和等位基因频率分布在NDR组、DR组间差异无统计学意义（P〉0.05）。基因型（CC型、CG型和GG型）的血清APN水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论T2DM患者血APN水平随糖尿病视网膜病变进展而增高。未发现福建地区T2DM患者APN基因启动子区-11377C→G多态性与DR明显相关。     

吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞脂联素受体表达的影响

目的探讨吡格列酮对波动性高糖处理的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)脂联素受体(AdipoR1和AdipoR2)表达的影响。方法将HUVEC在波动性高糖培养液(5.5、20mmol.L-1每隔8h轮换1次)中培养5d后,随机分为阴性对照组、吡格列酮处理组(10、1与0.1μmol.L-1)和阳性对照组。应用实时定量PCR方法检测脂联素受体mRNA表达的改变。结果与波动性高糖组比较,吡格列酮处理后HU-VECAdipoR1表达增高。当吡格列酮浓度增至1μmol.L-1以上时,AdipoR1mRNA表达增加呈现差异。各组细胞Adi-poR2表达量间差别无显著性。结论AdipoR1很可能是胰岛素增敏剂吡格列酮改善内皮胰岛素敏感性的作用机制之     

缬沙坦对高血压并糖尿病血清脂联素的影响

目的探讨缬沙坦治疗高血压合并糖尿病患者血清脂联素的变化。方法将高血压合并糖尿病患者80例随机分为两组进行对比分析。结果与治疗前相比缬沙坦组显著降低了血清脂联素（P〈0．01）,氨氯地平组治疗前、后的脂联素改变异异无统计学意义。结论缬沙坦是一种新型的ARB,与其他ARBs比较,它具有药物浓度达峰快、半衰期长、生物利用度高等优点。因其分子结构与PPAR-γ激动剂吡格列酮相似,能部分激动PPAR-γ,是目前唯一可同时激动PPAR-γ又阻断AT1R的ARB,尤其适合高血压合并糖尿病患者的治疗。