酸性甘油溶血试验:诊断球形红细胞增多症的一种过筛试验

球形红细胞增多见于遗传性球形红细胞增多症(HS)和许多获得性球形红细胞增多症.作者介绍了一种新的酸性甘油溶血试验(AGLT),测定红细胞的渗透脆性.该试验简单、敏感.试剂①等渗磷酸盐缓冲盐溶液(PBS),pH6.85±0.05,于0.10M的磷酸盐缓冲液中加入9体积0.15M氯化钠溶液.此液pH必须准确,可以冰冻干燥保存.②0.3M甘油溶液,于300ml PBS(pH6.85)溶液中加入21.98ml(27.62g)甘油(试剂级),用蒸馏水稀释至1000ml.操作于5mlPBS液中(pH6.85)加入20μl     

诊疗技术

931569浅谈静脉营养液的配制方法/鲁连桂//实用护理杂志二1993,9(4)。43~44 配制方法有2种。多瓶配制法:采用50oml容器,以基础液(25%葡萄糖、0.45%氯化钠)1500ml,分装于6瓶,每瓶25Oml,紧接每瓶加入氨基酸21oml。根据每瓶含糖量计算胰岛素需要量,再分别加入。再将10%氯化钾50ml .30%氯化钠20ml分别平均加入各瓶内,在避光条件下将VitA、B:、B6、Bl:加入一瓶内,并避光输入。其他维生素类药物及微量元素任意加在一瓶中,后将硫酸镁、葡萄糖钙、磷酸盐分别加入以上任意3瓶内,轻微振荡。按瓶签要求明确填写各项,并编号后贴于瓶上。检查液体有无…     

一种敏感的红细胞内G6PD活性染色法

本文作者对以往的红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(GsPD)活性的细胞化学染色法作了若干改进,使其更加敏感、优越。方法:全血(肝素抗凝)1ml,加入9ml 新鲜的亚硝酸钠(180mM)生理盐水溶液;混匀,置宣温孵育8分钟,使所有HbO_2转变成MetHb,以防产生非特异的甲(月替)。在室温中1000rpm 离心16分钟,取75μl 压积细胞,加入125μl 20mMNADP+磷酸盐浸冲液(100mM,pH7.0)置室温10分钟,再以1000rpm 离心15分钟,加入2000μl0.025%(V/V)戊二醛磷酸盐缓冲液,在温室中用搅拌器持续旋转30分钟,以尽可能地固定,防止G6PD 丧失活性。然后在4℃环境中用磷酸盐缓冲液洗三次,每     

用于淀粉酶测定普施安黄淀粉的配制和应用

目前广泛使用的淀粉酶测定方法麻烦且欠精确。本文介绍一种新染色淀粉的配制和应用,其原理是淀粉酶水解此种淀粉后释放出可溶性色素,按产生颜色的深浅推算出酶活性的高低。作者比较了几种染色淀粉后认为,普施安黄(Procion系ICI厂活性染料商品名)淀粉最好,它具有极好的灵敏性和特异性,易于配制,所需试剂和仪器价格低廉,方法简单,可供临床检验采用。材料①普施安黄;②纯玉蜀黍淀粉;③0.5mol/L Na_2CO_3液:53g无水Na_2CO_3用蒸馏水溶解后加水至1升;④0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0):将291ml 0.1mol/L NaOH加入500ml0.1     

竞争性酶免疫法检测人布鲁氏杆菌

检测布鲁氏杆菌常用的血清学方法为凝集实验和补体结合实验 ( CFT) ,其准确性和灵敏度有待提高 ,间接酶联免疫实验灵敏度高 ,但易产生假阳性 ,且试剂的标准化较困难。本文介绍一种快速、简便 ,灵敏度高 ,特异性好的竞争性酶免疫法 ( CELISA)。方法　布鲁氏杆菌 S-LPS抗原用 0 .0 6mol/L Na H-CO3缓冲液 ( p H 9.6)稀释后 ,反应板每孔加 1 0 0μl,4℃过夜 ( 1 8h)包被。用含 0 .0 5% Tween-2 0的 0 .0 1 mol/L磷酸盐缓冲液 ( p H 7.2 )洗涤 4次 ,加入 95μl鼠单克隆抗体 (用含 0 .0 1 5mol/L EDTA-EGTA的 PBS液稀释 ) ,再加 5…     

用单一偶联试剂一次孵育对细胞进行双重酯酶细胞化学染色

本文报道在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法,可在显微镜下同时观察白血病细胞对两种不同的基质的反应.甲醛丙酮缓冲溶液[磷酸氢二钠(Na_2HPO_4~-)20mg,磷酸二氢钾(KH_2PO_4)100mg,蒸馏水30ml,丙酮45ml,浓甲醛液25ml].0.1mol/l 磷酸盐缓冲液(pH8.0)50ml。在1ml 丙酮液中加入氯醋酸萘酚 AS-D(Sig-ma)2.5mg.在1ml 丙酮液中加入α-萘丁酸酯(Sigma)4mg(4μl)。固蓝 BB 盐(Gurr/BDH)80mg.方法:1.将空气干燥的涂片置于甲醛丙酮缓冲液     

肝素对嗜中性白细胞还原四唑染料的影响

作者以不同浓度的肝素作抗凝剂,用两种四唑染料〔四唑氮兰(NBT)和四唑四硝基兰(TNBT)〕作嗜中性白细胞四唑染料还原试验。其方法是将NBT或TNBT溶解于pH 7.2的0.2M磷酸盐缓冲液中,离心除去沉淀,配成的上清染液可应用1～2天。肝素用磷酸盐缓冲液稀释成不同浓度:100、50、20、10和5国际单位/ml。向微量滴定塑料板的各孔中分别加入上述不同浓度的肝素溶液0.005ml(似应改为0.003ml——译者注),使肝素最后浓度为10、5、2、1和0.5国际单位/ml血液(再设一不加肝素的对照孔)。各孔加入指端血液各0.03ml和四唑染料(NBT或TNBT)0.02ml,轻轻通气使之混匀。塑料板上覆盖以湿润玻板,置37℃孵育30分钟,然     

酶免疫法分别测定免疫球蛋白的轻链比

正常血清免疫球蛋白轻链k与λ之比为2/1,作者用ELISA方法分别测定了免疫球蛋白G、A 和M的k/λ。材料及方法:试剂有包被缓冲液(50mmol/LpH9.6碳酸盐缓冲液),PPS 缓冲液(10mmol/L磷酸氢二钾,150mmol/L 氯化钠,pH7.5,含100ml/L 小牛血清),BSA 溶液(PBS 中100g/L 牛血清白蛋白),冲洗液(PBS 中5mL/L 吐温-20),基质缓冲液(100mmol/L 柠檬酸,200mmol/L 磷酸氢二钠,pH5.0),基质液(20mg 尿素-过氧化     

污染器械的预消毒处理

<正> 医院供应室为防止感染,对由病房或科室收回的污染器械多先经消毒后再进行清洗、消毒(或灭菌)。为了解这种预消毒处理的效果,我们进行了试验。试验中,使用的消毒方法为洗消净(含表面活性剂与次氯酸钠)浸泡法。将物品浸于含500 mg/L有效氯溶液中15～20分钟。取出后,用棉拭沾0.1％硫代硫酸钠磷酸盐缓冲液作涂抹采样,并进行琼脂倾注法计数培养。结果表明,医院中用过的器械,污染     

3种方法分离培养粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的比较

小肠结肠炎耶尔森菌[简称耶(氏)菌]是近年来受到国内外重视的一种人兽共患的肠道感染病原菌,常见于不同年龄的婴幼儿腹泻和肠炎患者的粪便标本中,但不易从常规的肠道选择性培养基中直接分离。为此我们作了一些尝试。一、材料和方法1.材料　(1)标本:浙江省儿童医院门诊和住院腹泻及肠炎患者粪便标本182份;(2 )增菌液:磷酸盐缓冲液(PBS)和磷酸盐胆盐阿拉伯糖蛋白胨增菌液(PAE)按文献[1]配制;(3)DYS[1] 和NYE[2 ] 耶(氏)菌培养基、SS培养基、克(氏)三糖铁琼脂、MIU半固体琼脂(自制) ,其他必需生化反应管购自杭州天和微生物试剂有限公司;…     

常规HE染色中蓝化方法的改进

HE染色是病理技术人员的基本功,是生物学尤其是病理学及细胞学诊断工作中必不可少的染色方法。病理组织学的基本知识,绝大部分都是从观察HE染色标本中得来,其染色是否成功直接影响其他方法的选择与进行。但是在临床工作中我们发现,一些前期处理均好的切片,一旦进入氨水中进行蓝化时会出现个别脱片现象,尤其像脱钙后的骨组织、冷冻切片中的脂肪组织、平滑肌组织及甲状腺等纤维成分或脂肪成分多的组织更甚。为了克服其影响因素,减少或不出现脱片现象,我们对常规应用的1%氨水进行了改进,选用免疫组化染色常用的PBS(即磷酸盐缓冲液)替代氨水…     

缺铁性贫血患儿尿中铁的测定

试剂(全用双蒸水配制)①pH4.5醋酸盐缓冲液:取醋酸钠(CH_3COONa·3H_2O)68克溶于蒸馏水中,加入冰醋酸60ml,并加蒸馏水至1000ml。②储存铁标准液(1ml(?)100μg铁):取莫尔氏盐(NH_4)_2·Fe(SO_4)_2·6H_2O 0.7032克溶于蒸馏水中,加入0.1N硫酸1ml使之酸化,加蒸馏水至1000ml。③应用铁标准液(1ml(?)2μg铁):取储存铁标准液2ml,加蒸馏水至100m1。④10%抗坏血酸。⑤分析纯氯磺酸(HSO_3Cl,分子量116.52)。⑥邻二氮杂菲溶液:在100毫克4,7-二苯-1,10-邻二氮杂菲中加入0.5ml氯磺酸,在通气柜中煮沸30秒,迅速冷却,逐滴加入蒸馏水10ml,仔细混匀,置沸水浴中5分钟以溶解沉淀,将溶液转入200ml容量瓶中,加醋酸盐缓冲液至刻度。此试剂可保存、应用一年。     

FCM对单采血小板悬液活化程度的检测

我们利用流式细胞仪(FlowCytometer,FCM)检测了血细胞分离仪(机采法)单采血小板和手工分离血小板(手工法)CD62p的表达,并作两者的比较。材料和方法一、检测对象　男性献血员46名,20～36岁,血小板计数(plt)均大于150×109/L,一周内未服用阿司匹林等药物。其中机采法30名,手工法16名。二、试剂　CD62p-PE单克隆抗体(美国Bec-ton-Dickinsin,B-D公司)。IgG1FITC/IgG2aPE(B-D公司)。用pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)配制的1%多聚甲醛(Sigma公司)。三、仪器　流式细胞仪FACSCalbur(B-D公司)。血细胞分离仪COBESpectra(美国COBE公司)…     

曲克芦丁配制过程中出现红色块状物1例的报告

资料报告:2005年1月5日,我们应用诺氏制药(吉林)有限公司生产的曲克芦丁10ml(500mg)加入5%葡萄糖注射液稀释后准备给病人滴注.结果发现配制瓶中出现许多红色块状物.该配制液未给病人使用,并留置观察.     

介绍一种快速实用瑞—姬氏染色法

本文参考Mc Donald 法(Med Lab Sci 1987;44:88)并加以改进。使之既保证常规瑞氏染色的色泽效果,配制又简便,配法介绍如下.1.染液配制A 液:Na_2HPO_4·2H_2O 1.0g,KH_2PO_4 2.0g,甘油(A·R)75ml,溶解后贮有塞瓶中,置室温备用.B 液:瑞氏染粉1.5g,姬姆萨染粉0.15g,溶于500ml 甲醇中,另加入少许聚乙烯吡咯烷酮(PVP),不时振荡助溶,贮24小时后即可备用.2.应用染液配制取A 液1.5ml,B 液50ml     

曲克芦丁配制过程中出现红色块状物1例的报告

资料报告:2005年1月5日,我们应用诺氏制药(吉林)有限公司生产的曲克芦丁10ml(500mg)加入5%葡萄糖注射液稀释后准备给病人滴注。结果发现配制瓶中出现许多红色块状物。该配制液未给病人使用,并留置观察。讨论:在整个护理操作过程中严格执行操作规程。配制该药的注射器未接触过其他任何药液。用碘酒消毒瓶盖后直接将曲克芦丁注入5%葡萄糖液瓶中。此外,除瓶中出现红色斑块外,瓶盖颜色呈深红色,疑该药液反应是由于消毒液引起的。遂取曲克芦丁一滴,加入2%碘酒一滴,药液立刻呈深红色。取曲克芦丁一滴,加入75%酒精一滴,肉眼未见反应。故建议在药液…     

测量注射器乳头及针头所含药液的方法

肌肉注射中 ,注射器乳头及针头中含有药液已被护理同行所公认 ,但准确的含量各家众说纷纭。陈惠云认为 ,肌注时加入 0 .2～ 0 .3ml空气 ,于药液注完后空气最后推入乳头及针头 ,可防止药液浪费。焦学兰认为 ,加入 0 .2ml空气可防止药液浪费 ,但这些方法都只是一种大概的估计 ,并没有根据注射器的大小而分别对待 ,现介绍一种测量方法。材料与方法　 (1)材料。一次性 5ml注射器 1副、0 9%生理盐水 10ml(或肌注时的药液代替 )、碘酒、酒精、砂轮、棉签。 (2 )方法。按《基础护理学》中肌肉注射操作方法抽取生理盐水 1ml,针头向上排尽针头及乳头…     

血友病治疗药口服化的研究

按Abuchweki等人的方法,使用氯化氰尿活性化的甲氧聚乙烯二醇(PEG)处理Ⅷ和Ⅸ因子,其制备方法是:将Ⅷ因子制剂(500U/瓶)和Ⅸ因子制剂(400U/瓶)在20ml的0.05M磷酸缓冲液(pH7.2)中溶解,添加抑肽酶(在各凝血因子800U中加1.66U),再在各溶液中添加PEG100mg,溶解后置于0度环境中反应3小时,在0.05M磷酸缓冲液中1小时,生理盐水中30分钟,透析后使其冻结干燥即得。     

用NaN_3作腺苷脱氨酶测定底物缓冲液的防腐剂

我们发现,根据《全国临床检验操作规程》(简称《规程》)推荐的方法配制腺苷脱氨酶(ＡＤＡ)测定的底物缓冲液,即使保存于4℃冰箱,空白吸光度亦不断上升。为此,笔者试用多种防腐剂进行防腐效果和测定结果的观察,现报告如下。1　材料与方法11　试剂按《规程》配制。四种腺苷底物缓冲液具体配制方法如下:①不加防腐剂的腺苷底物缓冲液:在90ｍｌ蒸馏水中,加入1ｍｏｌ/ＬＮａＯＨ96ｍｌ,煮沸除氨,加入ＫＨ2ＰＯ42722ｇ,冷却至70℃左右,加入腺苷2672ｍｇ。冷却至室温并加去离子水至100ｍｌ。②含1ｇ/ＬＮａＮ3的腺苷底物缓冲液:配制方法同上,冷却至…     

长期饮酒者红细胞变形指数的改变及意义

长期酗酒对人体许多系统均有很大损害。本文报道应用国产LBY-BX2型激光衍射仪测定长期饮酒者和非饮酒正常人红细胞变形指数的最高值(DImax),同时测定了红细胞的平均体积(MCV)。材料和方法一、对象　(1)长期饮酒组　长期饮酒者男性32例,38～59岁,每周饮酒4次以上,每次饮白酒200ml以上,酒精浓度在35～60度,饮酒史10年以上。(2)对照组　本院男性健康查体者30名,29～48岁,无饮酒习惯者。二、检测方法1.悬浮介质　pH7.4的等渗磷酸盐缓冲液(PBS)[1]。2.样品制备　空腹采血1mlEDTA抗凝,用库尔特-JT全血细胞分析仪计数RBC及MCV,取5μl全…