5种淫羊藿对软骨组织生长和软骨细胞增殖影响的对比研究

目的：对比研究心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿对软骨生长和软骨细胞增殖活性的影响。方法：以鸡胚股骨组织为研究对象,采用配对试验设计,把同一鸡胚的两个股骨组织分别分入对照组或实验组,每组共10个股骨组织。对照组股骨组织在不含中药的培养液中培养,实验组股骨组织在含3％淫羊藿提取物的培养液中培养。以软骨长度、软骨重量、软骨细胞增殖(MTT法)为指标观察5个品种淫羊藿的软骨生物活性。结果：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖量指标均高于对照组(P＜0.01),而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖指标与对照组结果相近,差异无显著性。结论：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿具有明确的促进体外软骨生长和软骨细胞增殖的作用,而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿品种没有表现出这种生物活性。     

生长期巫山淫羊藿不同部位5种黄酮类成分的动态积累研究

目的 研究生长期巫山淫羊藿根、茎、叶中5种黄酮类成分朝藿定C、双藿苷A、淫羊藿苷、淫羊藿属苷A和淫羊藿属苷C的量,揭示几种活性成分的动态积累规律.方法 采用RP-HPLC方法 ,以美国Waters Sunfire~(TM_)C_(18)为色谱柱(带预柱),检测波长270 am,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1 mL/min.结果 在20 min内分离测定了5种异戊烯基黄酮,得到了这5种异戊烯基黄酮在生长期巫山淫羊藿不同部位中的分布积累规律.发现巫山淫羊藿不同部位中双藿苷A的量分别为:根1.090%～3.661%,茎0.001%～0.033%,叶0.095%～0.217%;淫羊藿属苷A的量分别为:根0.177%～0.971%,茎0.010%～0.089%,叶0.089%～0.323%;朝藿定C的量分别为:根0.223%～0.748%,茎0.024%～0.147%,叶0.905%～2.228%;淫羊藿苷的量分别为:根0.009%～0.128%,茎0.003%～0.044%,叶0.258%～0.929%;淫羊藿属苷C的量分别为:根0.080%～1.857%,茎0.002%～0.022%,叶0.004%～0.058%.结论 巫山淫羊藿叶中淫羊藿苷除4、5、7月份外,其余月份的量都低于0.5%,而朝藿定C的量平均在1.586%.巫山淫羊藿叶在其生长的任何月份都是朝藿定C的量远大于淫羊藿苷的量,积累高峰期有3个,朝藿定C是巫山淫羊藿叶中的主要成分.巫山淫羊藿根在其生长的任何月份都是双藿苷A的量远大于朝藿定C的量,质量分数平均在2.763%,双藿苷A为巫山淫羊藿根中的主要成分.     

不同遮荫条件下巫山淫羊藿生长状态及生理变化的研究

目的:通过分析不同光照条件下(100%,80%,60%,40%,20%)巫山淫羊藿的各项生长指标和生理指标,探讨巫山淫羊藿对遮荫环境的生理适应机制,为药用淫羊藿生产栽培提供理论依据。方法:以巫山淫羊藿为研究对象,测定了不同遮荫处理下巫山淫羊藿植株形态指标、光和色素含量、脯氨酸含量、丙二醛含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、抗氧化性酶活性。结果:除长宽比差异不显著外,其他形态指标都出现显著性变化,在80%~40%光强处理下的巫山淫羊藿生长良好,地上部分生物量相对较高;遮荫后叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素含量增加,叶绿素a/叶绿素b的值在100%~60%光强处理下逐渐增大,60%~20%光强处理下逐渐减小;遮荫后脯氨酸、丙二醛含量降低;可溶性糖、可溶性蛋白含量分别在100%~60%,100%~40%光强处理下逐渐增加,60%~20%,40%~20%光强处理下逐渐下降;遮荫后SOD,CAT活性值减小;POD,APX活性值在100%~40%光强处理下逐渐减小,在20%光强处理下有所增大。结论:80%~40%光强处理有利于巫山淫羊藿生长。     

巫山淫羊藿药材及饮片中朝藿定C含量测定

2005年版《中国药典》一部淫羊藿项下规定了总黄酮及淫羊藿苷的含量限度,但作者在实际临床应用中发现,巫山淫羊藿中淫羊藿苷含量极低,达不到药典要求,不足以全面反映此种饮片质量。文献报道[1-3]巫山淫羊藿含有大量的化学结构与淫羊藿苷相似的黄酮苷类成分朝藿定C,它的药理活性     

巫山淫羊藿的资源分布及形态特征研究

目的：掌握巫山淫羊藿基原植物资源分布及形态特征,为巫山淫羊藿物种分类鉴定、资源保护和持续利用提供依据。方法：查阅共享平台数据及其他标本,获取巫山淫羊藿的鉴定和地理分布等信息,于花期开展野外实地观测并比较巫山淫羊藿各居群的形态特征。结果：在检索获取到的90号144份巫山淫羊藿标本中,仅15号35份标本为巫山淫羊藿,其余物种包括金城山淫羊藿、拟巫山淫羊藿、粗毛淫羊藿、镇坪淫羊藿和川鄂淫羊藿,疑似黔岭淫羊藿1号,不确定种17号。巫山淫羊藿狭域分布于重庆市巫山县和巫溪县,湖北省巴东县、兴山县和神农架林区,集中分布区仅为巫山县和巴东县,同域分布有形态相似种木鱼坪淫羊藿。植株和花的形态特征存在变异,且在居群内和居群间的变异呈现出连续性,但巫山淫羊藿与6个形态相似种仍具有可资鉴别的性状特征。结论：巫山淫羊藿腊叶标本的鉴定错误突出,狭域分布加之过度采收已导致其资源严重破坏,须引起高度重视并应加强保护力度。     

巫山淫羊藿根的化学成分研究

巫山淫羊藿Ep im ed ium w ushanense T. S.Y ing是小檗科淫羊藿属植物,与同属植物淫羊藿E. brev icornum M ax im.、柔毛淫羊藿E. pubescensM ax im.、箭叶淫羊藿E. sag ittatum M ax im.和朝鲜淫羊藿E. koreanum N akai作为淫羊藿药材原植物收载于2000版《中华人民共和国药典[》1],入药部位地上干燥部分。巫山淫羊藿分布于四川、陕西、贵州、广西[2],资源丰富,地上部分的化学成分已有报道[3,4],但地下部分尚未见报道。本文对其根中黄酮类有效成分进行了初步研究,从乙醇提取物的正丁醇萃取部分中分得了3种黄酮化合物,淫羊藿次苷Ⅰ( ic…     

大孔树脂-梯度高速逆流色谱分离巫山淫羊藿中双藿苷A和朝藿定C

目的 研究大孔树脂结合梯度高速逆流色谱法从巫山淫羊藿粗提物中制备双藿苷A和朝藿定C的分离纯化方法.方法 采用大孔树脂法预处理得到巫山淫羊藿粗提物,以二氯乙烷-甲醇-水(4∶4.5∶2,V/V)体系的上相做固定相,下相做流动相,用梯度高速逆流色谱法分离纯化其主要成分双藿苷A和朝藿定C,检测波长为270 nm.结果 从1.5g巫山淫羊藿提取物中分离得到双藿苷A (458 mg)和朝藿定C(321mg),经HPLC法分析,其纯度分别为95.2％和93.8％.结论 该法简单有效,可提高淫羊藿黄酮的分离效率.     

巫山淫羊藿不同部位的高效液相色谱指纹图谱测定

目的：研究巫山淫羊藿不同部位的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法：采用反相高效液相色谱法．梯度洗脱测定巫山淫羊藿黄酮类成分指纹图谱。结果：巫山淫羊藿根、茎及叶中黄酮类成分的种类和含量差异显著。结论：该方法能够用于比较研究巫山淫羊藿的不同部位。     

拟巫山淫羊藿种子质量标准研究与制订

目的:研究和制订拟巫山淫羊藿种子质量标准。方法:通过对不同来源的14份拟巫山淫羊藿种子扦样、瘪壳率、千粒重、发芽率、含水量和生活力的研究,建立相应的检验方法,并对7份不同来源拟巫山淫羊藿种子进行检验,各项数据进行聚类分析作为分级依据的参考。结果与结论:拟巫山淫羊藿种子质量等级可以分2个,影响拟巫山淫羊藿种子品质的主要因素有:发芽率、千粒重、生活力和瘪壳率。     

影响巫山淫羊藿品质的施肥指标体系构建

目的建立N、P、K施肥量与巫山淫羊藿Epimedium wushanense品质的回归模型,探索巫山淫羊藿的最佳施肥方案。方法采用3因素4水平设计施肥方案,布置巫山淫羊藿N、P、K肥料效应实验,并对实验数据进行整理与统计分析。结果建立了N、P、K肥配施效应模型与巫山淫羊藿产量和质量之间的关系,并对各因子之间的交互作用进行了分析,对模型进行了优化。在不同施肥措施中N_2P_2K_2处理效果最佳,不施或者少施N、P、K中的任何一种养分均不同程度导致巫山淫羊藿减产和质量下降;单因子效应分析表明,随着N、P和K施肥量的提高,产量和有效成分的量呈先升后降的趋势;双因素交互效应分析表明,以巫山淫羊藿产量为考察对象,N、P、K肥间相互作用都存在一个值域,低于这个值域时都表现为协同促进作用,高于这个值域时则都表现为拮抗作用;以淫羊藿苷和朝藿定C的量为考察对象,N、K和P、K肥间相互作用存在一个值域,有效成分的量表现出与产量相同的趋势。结论模型优化结果表明,大阳实验适宜的N、P、K肥施用量分别为224.154~269.461、176.324~214.651、152.624~197.354 kg/m~2。     

高效液相色谱-质谱联用法研究巫山淫羊藿黄酮类成分

目的:采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MSn)研究巫山淫羊藿中的黄酮类成分。方法:70%乙醇提取,大孔树脂柱纯化得到总黄酮;运用HPLC-MSn联用技术得到各化合物的总离子流图和多级质谱图。结果:从巫山淫羊藿药效部位中鉴定出12个化合物,其中有3对化合物互为同分异构体。结论:HPLC-MSn法可用于巫山淫羊藿中黄酮类成分的结构鉴定,为建立快速、准确的质量评价方法和分析炮制前后成分变化提供了参考。     

不同理化因子对野葛悬浮培养细胞生长及异黄酮合成的影响

目的：探讨几种理化因子对野葛悬浮培养细胞的生长和异黄酮化合物生成的影响。方法：采用高效液相色谱法和植物细胞培养的方法。结果与结论：随着蔗糖质量浓度的提高,野葛培养细胞生长量和异黄酮的累积均逐步增高；野葛细胞培养体系中pH维持在5.4～5.8,对异黄酮的形成最为有利；随着活性炭处理用量的增加,野葛培养细胞的干重和异黄酮积累急剧下降；与此相反,XAD-4处理促进野葛细胞的干重增长和异黄酮的积累。     

凹叶厚朴细胞悬浮培养的研究

目的研究凹叶厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etils.Subsp.biloba（Rehd.etwils.）Law的细胞悬浮培养。方法以凹叶厚朴茎段诱导的愈伤组织为材料,应用L9（34）正交设计研究植物生长调节剂对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响,通过单因素试验,考察初始接种量、蔗糖浓度、pH值对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响。结果植物生长调节剂6-BA是影响凹叶厚朴悬浮细胞生长的主要因素;最佳初始接种量为8ml;最佳蔗糖浓度为30g/L;最佳pH值为6.5时。结论初步建立了适合凹叶厚朴悬浮细胞培养的体系。     

巫山淫羊藿叶中挥发油成分的气相色谱-质谱分析

目的研究巫山淫羊藿叶中挥发油的化学成分。方法水蒸气蒸馏法提取巫山淫羊藿中的挥发油,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析,鉴定挥发油的化学成分。结果共鉴定出34个化合物,占挥发油总成分的90.36%。结论巫山淫羊藿叶中挥发油的化学成分主要为羧酸类(33.36%)、酮类(21.79%)、烷类(19.03%)、醇类(12.92%)、炔类(1.2%)等。     

内生真菌诱导子对茅苍术细胞生长及苍术素积累的影响

目的:研究内生真菌诱导子对茅苍术细胞生长以及苍术素积累的影响.方法:采用细胞悬浮培养方法研究内生真菌诱导子不同浓度、不同加入时间对茅苍术细胞生长、苍术素合成以及相关酶活性的影响.结果:低浓度诱导子对细胞生长没有明显的影响,但高浓度诱导子显著抑制细胞生长,当诱导子质量浓度达到100 mg·L-1时,细胞生长抑制率达到46.7%;此外,从茅苍术内生真菌中筛选获得6株具有较强诱导作用的内生真菌,其中Rhizoctonia SP1诱导子的作用较强,20～60 mg·L-1 Rhizoctonia SP1诱导子显著促进苍术素的生物合成.在细胞培养至12 d时,添加40 mg·L-1 Rhizoctonia SP1诱导子,苍术素的含量在第21天达到最大值28.06μg·L-1,比对照提高了48.3%;且细胞多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性出现了显著提高.结论:内生真菌诱导子能有效提高茅苍术细胞悬浮培养体系中苍术素的产量.     

罗汉果细胞悬浮培养体系的建立与优化

目的:研究6-BA,萘乙酸(NAA),碳源,pH对罗汉果悬浮培养细胞生长的影响,探讨罗汉果细胞悬浮培养的最适条件.方法:考察1个培养周期内罗汉果悬浮细胞的鲜重和干重,绘制生长曲线和生长速率曲线;采用正交试验设计对6-BA,NAA,碳源,pH 4因素3水平的组合进行优化.结果:罗汉果悬浮细胞培养的生长周期约为21 d,0～6 d为细胞的延滞期,7～21 d为对数期,稳定期较短,第22天进入到衰亡期,在第21天时细胞鲜、干质量达到最大,分别为693.0,416.0 g、L-1,最大生长速率为0.040 g·L-1·d-1.NAA是影响罗汉果悬浮细胞生长的关键因素,其影响效应依次为NAA＞6-BA＞pH＞碳源.悬浮细胞生长的适宜培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA +0.02 mg·L-1 NAA,4.0％蔗糖为碳源,初始培养基pH5.5～6.0.结论:通过组织培养方式可以成功建立罗汉果细胞悬浮培养体系.     

川贝母细胞团块悬浮培养生产生物碱的研究

目的:建立川贝母细胞团块悬浮培养体系,筛选出快速获取细胞团块增殖的最佳培养条件和激素配比。方法:以MS培养基为基本培养基,比较了接种量、激素配比和生长调节物质等对川贝母细胞团块悬浮培养的影响,并比较了细胞团块在不同培养条件下的生长情况,测定了增殖细胞团块中总生物碱含量。结果与结论:用川贝母细胞团块进行悬浮培养,其生长速度明显快于固体培养;细胞团块中总生物碱含量均高于市售川贝母和野生川贝母鳞茎;川贝母细胞团块悬浮培养最适的接种量为30 g/L,最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。     

长鞭红景天细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件.方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响,建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系.结果 MS培养基+BA5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件.结论 对培养条件进行优化,为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础,为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径.