原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞亚群分析

目的:了解原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞中CD4+及CD8+的表达特点。方法:收集30例原发性肝癌患者(均有乙型肝炎病毒感染背景)的癌组织(乙肝肝癌组)和癌旁组织(乙肝癌旁组)以及30例因良性病变而行肝切除的患者的新鲜肝组织(对照组),分离组织浸润淋巴细胞,用抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体同时荧光染色,用流式细胞仪检测各表面标志的表达情况。结果:1)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD4+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(22.31±3.68)%、(10.69±2.47)%及(4.21±4.26)%。乙肝肝癌组显著高于乙肝癌旁组及对照组,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.001),乙肝癌旁组高于对照组,差异亦有统计学意义(P=0.019)。2)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD8+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(26.10±5.82)%、(21.82±2.70)%及(41.31±14.01)%,乙肝肝癌组及乙肝癌旁组显著低于对照组,差异有统计学意义(P=0.014,P=0.004),而乙肝肝癌组与乙肝癌旁组之间差异无统计学意义(P=0.651)。3)乙肝肝癌组组织浸润淋巴细胞中CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞的比值为0.91±0.30,显著高于乙肝癌旁组(0.47±0.11,P=0.003)及对照组(0.11±0.13,P=0.000),CD3+CD4+与CD3+CD8+T细胞的比值出现失衡。结论:原发性肝癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中T细胞亚群失调,表现为CD3+CD4+T细胞所占比例升高,CD3+CD8+T细胞所占的比例下降,CD3+CD4+/CD3+CD8+明显升高。     

胃癌患者外周血调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞比例的变化及其临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞玎分比,对照组为30例慢件胃炎患者.结果 胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为8.7%±1.3%,与胃炎患者相比差异无统计学意义.胃癌患者外周血中CD8+CD28-调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为30.3%±3.3%,明显高于胃炎患者的20.3%±2.7%.外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞百分比与胃癌淋巴结转移、病理分型无明显相关性.结论 外周血中调节性T细胞在胃癌发展中可能发挥一定作用.     

铜绿假单胞菌注射液治疗乳腺癌术后顽固性皮下积液的疗效观察

目的探讨铜绿假单胞菌注射液治疗乳腺癌术后顽固性皮下积液的有效性和安全性。方法前瞻性收集2018年10月至2019年8月期间四川大学华西医院收治的76例乳腺癌术后发生顽固性皮下积液的患者,随机分为2组,对照组(n=36)在积液腔低位安置留置针接负压引流器,试验组(n=40)在对照组基础上将铜绿假单胞菌注射液注入积液腔,比较2组患者的引流时间、总引流量、皮下积液复发率和并发症发生率。结果试验组有4例、对照组有3例失访,共69例患者的临床资料纳入分析。试验组患者的引流时间较对照组短,总引流量较对照组少,皮下积液复发率较对照组低,差异均有统计学意义(P<0.05),但2组患者的各并发症发生率(包括发热、积液区皮肤红肿和切口感染)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论铜绿假单胞菌注射液治疗乳腺癌术后顽固性皮下积液的疗效确切,能缩短引流时间,促进伤口愈合。     

类风湿性关节炎患者外周血环瓜氨酸肽抗体与CD4+CD25+调节性T细胞检测的意义

目的 探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血环瓜氨酸肽(CCP)抗体、CD4+ CD25+调节性T细胞检测的意义.方法 54名符合1987年美国风湿病协会(ACR)修订的RA诊断标准的患者为实验组,20名正常体检健康人员做为对照组.用酶联免疫吸附试验(EUSA)检测血清CCP抗体,用流式细胞仪测定外周血CD4+ CD25+调节性T细胞水平,RA组患者均行双手和双足X线检查评价骨关节侵蚀情况.结果 RA组CCP抗体的阳性率为66.7％,较对照组明显增高(P＜0.01);RA组及对照组CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平分别为(3.41±1.83)％、(4.23±2.16)％,两组差异有统计学意义(P＜0.05);RA患者CCP抗体阳性组与阴性组CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平分别为(3.17±1.57)％、(3.59±1.84)％,差异无统计学意义(P＞0.05),两组骨关节侵蚀发生率分别为72.2％、16.7％,差异有统计学意义(P＜0.05),CCP抗体阳性组骨关节侵蚀率与CD4+ CD25+调节性细胞水平无明显相关(r=-0.126,P＞0.05).结论 CCP抗体可以作为RA的重要实验室检测指标;CCP抗体阳性RA患者较阴性患者更易发生骨关节侵蚀,但骨关节侵蚀的发生可能与CD4+ CD25+调节性T细胞的表达水平降低无关.     

CD8+T细胞在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 观察胃癌组织中浸润性淋巴细胞CD8+T的表达及临床作用.方法 应用免疫组织化学染色检测102例胃癌患者手术标本中浸润淋巴细胞CD8+T的表达.结果 在胃癌、胃炎及胃息肉组织中均可见浸润淋巴细胞CD8+T的表达,但胃癌组浸润淋巴细胞CD8+T的表达[(29.53±14.71)个/HPF]明显高于慢性胃炎组[(19.54±8.10)个/HPF]和胃息肉组[(14.26±6.83)个/HPF],差异有统计学意义(P＜0.05).CD8+T细胞的表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、复发、病理分级和TNM分期无明显相关(P＞0.05);但与组织学类型和浸润深度有关,其中分化型胃癌患者CD8+T细胞的表达[(33.9±18.4)个/HPF]高于低分化型患者的表达[(27.6±12.0)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.04,P＜0.05);未侵入肌层组的CD8+T细胞表达[(38.8±13.8)个/HPF]明显高于侵入肌层组[(27.7±14.1)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.45,P＜0.05).与CD8+T细胞低表达组比较,CD8+T细胞高表达组胃癌患者中位生存时间延长5个月,但差异无统计学意义(χ2=1.0274,P＞0.05).多因素COX模型分析显示,与浸润淋巴细胞CD8+T低表达组比较,高表达组有降低胃癌死亡风险的趋势(RR=0.82,95%CI=0.41～1.65).结论 浸润性淋巴细胞CD8+T的表达与胃癌的预后有关.

Abstract：

Objective To study the expression and clinical significance of infiltrating lymphocytes CD8 + T in gastric carcinoma tissues.Methods The expression of infiltrating lymphocytes CD8 + T in 102surgically resected specimens of gastric cancer tissues was detected by using immunohistochemistry.Results CD8+ T cells were expressed both in gastric carcinoma,gastritis and gastric polyp tissues,but the number of CD8 + T cells in gastric carcinoma tissues [(29.53 ± 14.71 )/high powered field (HPF)]wassignificantly greater than in gastritis tissues [( 19.54 ±8.10)/HPF]and polyp tissues [( 14.26 ±6.83)/HPF](P ＜0.05).No correlation was found between CD8 + T lymphocyte count and gender,age,tumor location,tumor size,lymph node metastasis,tumor relapse,pathological grade or TNM stage ( P ＞ 0.05 ).However,there was a statistically significant correlation between the number of CD8 + T cells and the histological type,invasive depth.The CD8 + T cell count was obviously higher in the differentiated group [(33.9 ± 18.4)/HPF]than in the undifferentiated group [(27.6 ± 12.0)/HPF]( t = 2.04,P＜0.05 ).And the number of CD8 + T cells was greater in the non-invasive group [(38.8 ± 13.8)/HPF]than in the invasive group [(27.7 ± 14.1 )/HPF]( t = 2.45,P＜0.05 ).The median survival time of gastric cancer patients with high expression of CD8 + T cells was 5 months longer than in those with low expression,but there was no significant difference.Multi-factor COX model analysis demonstrated that the risk of death in gastric cancer patients was lower in the CD8 + T cells high expression group than in the low expression group ( RR = 0.82,95%,CI = 0.41-1.65 ).Conclusion Detection of infiltrating lymphocytes CD8 + T expression in gastric carcinoma tissues will be beneficial to the judgment of the prognosis.     

中长链脂肪乳营养在改善胃癌手术患者免疫功能和营养状况的研究

目的探讨中长链脂肪乳营养在改善胃癌手术患者细胞免疫功能和营养状况的作用。 方法选取本院2012年1月至2015年1月期间进行胃癌手术的患者96例,按照术后应用不同脂肪乳剂将患者分为两组,观察组50例,采用中长链脂肪乳注射液;对照组46例,采用长链脂肪乳注射液。观察并对比两组患者手术前后胃肠道功能恢复情况、细胞免疫功能、营养状况以及不良反应发生情况等。 结果两组患者胃肠道功能恢复时间、肛门排气时间和住院时间比较差异无统计学意义,手术前两组营养免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)、T淋巴细胞亚群和营养指标等水平比较差异无统计学意义,手术后7 d全部患者营养免疫球蛋白、CD4+/CD8+比值、营养指标(血浆白蛋白ALB、前白蛋白PA和转铁蛋白TF)水平均明显高于手术前,T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)和血红蛋白(Hb)明显低于手术前,手术前后比较差异具有统计学意义(P<0.05)。组间比较发现,观察组营养免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、营养指标(ALB、PA、Hb和TF)均明显高于对照组,而CD4+/CD8+比值明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应率比较差异无统计学意义(14.00% vs 15.22%,χ²=0.028,P=0.866)。 结论与长链脂肪乳相比,中长链脂肪乳营养在改善胃癌患者术后免疫功能抑制和营养不良状况中的效果更佳,值得临床推广应用。     

腹腔热灌注化疗对结直肠癌患者细胞免疫功能的影响

观察腹腔热灌注化疗对结直肠癌患者术后细胞免疫功能的影响。选择2013年1月—2015年12月我院结直肠癌患者50例,随机分为实验组和对照组,每组各25例。对照组患者常规行开腹结直肠癌根治术,实验组在常规开腹根治术基础上行腹腔热灌注化疗。两组病例均在手术前1天、手术后第3、5、7天分别抽取静脉血,以流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+和NK细胞数量,并计算CD4~+/CD8~+比值。术后第3天两组患者外周血CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+及NK细胞活性较术前均明显下降(P0.05),实验组与对照组比较无明显差异(P0.05)。实验组术后第5天上述指标迅速恢复,至第7天接近术前水平,而对照组术后7 d内仍持续处于低水平。两组比较差异有统计学意义(P0.05)。腹腔热灌注化疗可以提高结直肠癌患者术后细胞免疫功能。     

中央记忆T细胞和效应记忆T细胞亚群在肝癌患者外周血中分布特点分析

【摘要】 目的 研究肝癌患者外周血中CD45RO+记忆T细胞(memory T cells, Tm)表面标志CD45RO、CD62L和CCR7的表达,以了解CD45RO+CD62L+CCR7+T细胞(中央型记忆T细胞, central memory T cells,TCM)和CD45RO+CD62L-CCR7-T细胞(效应型记忆T细胞,effector memory T cells, TEM)亚群在肝癌患者外周血中的分布特点。方法〓获取正常人健康志愿者(正常对照组)28例和2011年8月至2013年8月的初诊慢性乙型病毒性肝炎患者(乙肝对照组)28例以及同期患有乙肝的肝癌患者(乙肝肝癌组)30例的外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC)。用多色流式细胞仪检测技术(polychromatic flow cytometry, PFC)检测外周血PBMC中记忆T淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD45RO、CD62L、CCR7的表达情况。结果〓乙肝肝癌组外周血PBMC中,CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞分别占外周血PBMC的比例显著高于乙肝对照组(28.15±12.32 VS 11.56±5.78,29.33±15.54 VS 13.11±6.64)(P<0.001,P=0.019);而较正常对照组无明显差异。乙肝肝癌组外周血PBMC的T淋巴细胞中CD4+TEM占CD4+T记忆淋巴细胞比例显著高于乙肝对照组、正常对照组(93.78±5.63 VS 75.82±19.74,93.78±5.63 VS 68.25±15.65)(P=0.001, P=0.018),而CD4+TCM则显著低于乙肝对照组、正常对照组(0.55±1.02 VS 4.87±6.28,0.55±1.02 VS 4.16±3.49)(P均小于<0.001)。三组的CD4+TEM记忆细胞占外周血PBMC中CD4+T记忆淋巴细胞的比例显著高于CD4+TCM记忆细胞占外周血PBMC中CD4+T记忆淋巴细胞的比例(91.78±5.63 VS 0.55±1.02,75.82±19.74 VS 4.87±6.28,68.25±15.65 VS 4.16±3.49)(P值均小于0.001)。乙肝肝癌组外周血PBMC的T淋巴细胞中CD8+TEM和CD8+TCM占CD8+T记忆淋巴细胞比例与乙肝对照组、正常对照组相比,差异均无显著意义。三组的CD8+TEM记忆细胞占外周血PBMC中CD8+T记忆淋巴细胞的比例显著高于CD8+TCM记忆细胞占外周血PBMC中CD8+T记忆淋巴细胞的比例(80.12±13.56 VS 3.25±2.47,79.21±11.34 VS 4.44±7.19,73.33±16.88 VS 2.66±3.10)(P值均小于0.001)。结论〓在乙肝肝癌组、乙肝对照组和正常对照组中,无论是CD4+T记忆淋巴细胞,还是CD8+T记忆淋巴细胞,均以TEM占绝大多数,而TCM比例很小。乙肝肝癌组中,CD4+TEM显著高于乙肝对照组和正常对照组,CD4+TCM显著低于乙肝对照组和正常对照组,而CD8+TEM和CD8+TCM则与乙肝对照组、正常对照组均无明显差异。     

泡状棘球蚴感染诱导免疫耐受的研究

目的 观察泡状棘球蚴感染对纯系大鼠异位移植心脏存活时间的影响并探讨发生机制.方法 建立Brwon norway(BN)大鼠到Lewis (LEW)大鼠的颈部异位心脏移植模型.对照组(n=12)以健康的LEW大鼠为受者;实验组(n=12)以感染泡状棘球蚴的LEW大鼠为受者.术后观察移植心的存活时间、组织病理学变化,测定血清内白细胞介素-4(IL-4)和y-干扰素(IFN-γ)水平.FACS 流式检测实验组和对照组大鼠脾内CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg细胞)的数量水平.结果 实验组与对照组移植心的存活时间分别为(16.17±3.19)d及(7.92±1.93)d,两组差异有统计学意义(P＜0.05).实验组移植心的组织病理学分级(平均分级为3.38级)与对照组(平均分级为3.79级)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).发生排斥反应后,实验组血清内IL-4水平为(152.21 ±45.62) ng/L高于对照组(50.85±22.15) ng/L,而实验组血清内IFN-γ水平为(12.35±1.02) ng/L水平低于对照组(42.63±4.15) ng/L,两组差异均有统计学意义(P ＜0.05);FACS流式检测结果提示实验组大鼠脾内CD4+ CD25+ Treg细胞数量为10.8％,高于对照组的6.1％,两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 泡状棘球蚴感染造成Th1/Th2向Th2类细胞因子偏移,通过介导CD4+ CD25+ Treg细胞数量增加而导致大鼠异位移植心脏存活时间延长,它可能是诱导移植免疫耐受的原因之一.     

铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注预防非肌层浸润性膀胱癌术后复发的有效性及对患者生活质量和血清VEGF的影响

目的:观察分析铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注预防非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)术后复发的有效性及对患者生活质量和血清VEGF的影响。方法:选取我院2014年6月～2017年2月收治的124例行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)治疗且病理检查确诊为NMIBC的患者进行研究。按照膀胱灌注方式将其分为两组,将铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗的62例患者设为观察组,表柔比星膀胱灌注治疗的62例患者设为对照组。比较观察组和对照组患者复发率、不良反应、生活质量及血清VEGF水平。结果:观察组患者术后随访时间和对照组比较差异无统计学意义[(14.72±4.61)个月vs.(14.68±5.94)个月,P0.05];治疗后0.5、1年观察组患者复发率和对照组比较差异均无统计学意义(3.23%vs.4.84%,6.45%vs.11.29%,P0.05);治疗后1.5、2年观察组患者复发率均明显低于对照组(8.06%vs.20.97%,16.13%vs.30.65%,P0.05)。两组患者不良反应比较差异无统计学意义(P0.05)。治疗后1、2年观察组和对照组患者KPS评分均较治疗前明显升高,且治疗后2年观察组和对照组患者KPS评分较治疗后1年均明显升高,同时观察组患者治疗后1年及治疗后2年KPS评分均明显高于对照组(P0.05)。治疗后1、2年观察组和对照组患者血清VEGF均较治疗前明显降低,且治疗后2年观察组和对照组患者血清VEGF较治疗后1年明显降低,同时观察组患者治疗后1、2年血清VEGF均明显低于对照组(P0.05)。结论:应用铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗NMIBC患者,患者耐受性好,可以有效减少肿瘤的复发与进展,提高治疗的安全性及有效性,改善患者生存质量,降低血清VEGF,延长患者的生存时间。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。