CD4~+CD25~+调节性T细胞变化对慢性乙型肝炎HBeAg血清学转换的预测价值及白花香莲解毒方的干预作用

目的:探讨外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)变化对慢性乙型肝炎(CHB)HBeAg血清学转换的预测价值及白花香莲解毒方的干预作用。方法:240例HBeAg阳性CHB患者随机分为试验组和对照组,对照组患者给予阿德福韦酯胶囊10mg/次,1次/d,试验组患者在对照组基础上加用白花香莲解毒方,2次/d,疗程为48周,并招募20例健康志愿者作为正常对照组。流式细胞仪测定0、12周外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Tregs/CD4+的比率,ELISA法检测治疗24周、48周HBeAg/HBeAb滴度。结果:①HBeAg血清学转换情况:治疗48周,共有40例发生HBeAg血清学转换,其中试验组有26例(22.03%),对照组14例(11.96%),差异有统计学意义(P<0.05)。②CD4+CD25+Tregs比率变化:治疗12周,试验组平均下降(1.85±1.18)%,对照组为(1.39±1.03)%,差异有统计学意义(P<0.05)。③CD4+CD25+Tregs比率对HBeAg血清学转换的预测:48周发生HBeAg血清学转换组12周CD4+CD25+Tregs比率平均降低(3.64±1.02)%,未发生转换组为(1.23±0.78)%,差异具有统计学意义(P<0.05),以治疗12周外周血CD4+CD25+Trges比率变化预测血清学转换的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积为0.935,最佳Cutoff值为下降3.21%,预测血清学转换的敏感度为93%、特异度为85%,准确性91.7%。结论:HBeAg阳性CHB患者外周血CD4+CD25+Tregs比率显著升高,治疗12周CD4+CD25+Tregs比率的下降值可作为HBeAg血清学转换的预测性指标,壮药白花香莲解毒方能提高HBeAg血清学转换率,其机制可能与降低CD4+CD25+Treg比率,恢复机体对HBV的特异性免疫功能有关。     

替比夫定与恩替卡韦治疗e抗原阳性慢性乙型肝炎的近期疗效比较

目的 观察替比夫定与恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者近期疗效及安全性. 方法 80例患者随机分为替比夫定治疗组和恩替卡韦治疗组,分别在治疗前,治疗第12周和24周检测患者血清HBV DNA水平、ALT复常率、HBeAg阴转率和HBeAg/抗-HBe转换率,并比较不同基线血清HBV DNA水平患者治疗12周和24周时的血清HBV DNA下降值,HBV DNA低于检测值率,HBV DNA＜104拷贝/ml患者的比例.观察治疗过程中药物使用的安全性.结果 替比夫定和恩替卡韦组患者的基础人口学、临床和病毒学特征均具有可比性.治疗12周时,替比夫定组和恩替卡韦组患者HBV DNA低于检测值率均为50.0%,ALT复常率分别为52.5%和60.0%(P＞0.05),HBeAg阴转率分别为30.0%和5.0%(P＜0.01),HBeAg血清学转换率分别为20.0%和5.0%(P＜0.05);在治疗24周时,两组HBV DNA低于检测值率分别为80%和70%,(P＞0.05),ALT复常率分别为77.5%和75.0%(P＞0.05),HBeAg阴转率分别为45.0%和32.5%(P＞0.05),HBeAg血清学转换率分别为27.5%和17.5%(P＞0.05),两组均未发现明显不良反应.结论 替比夫定与恩替卡韦治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎的近期HBV DNA水平低于检测值率,ALT复常率无明显差异;12周时替比夫定HBeAg血清学转换率高于思替卡韦组,但24周时两组间差异无统计学意义.     

替比夫定治疗慢性乙型肝炎108周的临床疗效

目的 探讨替比夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者108周的临床疗效.方法 随机选择就诊于吉林大学中日联谊医院未经过抗病毒治疗的72例CHB患者,其中包括35例肝硬化患者,给予口服替比夫定600 mg,1次/d,连续治疗108周.观察患者治疗前、后血清HBV DNA水平,肝功能及HBV标志物.根据12周和24周时的HBV DNA水平将患者分为＜3 log_(10)拷贝/ml和≥3 log_(10)拷贝/ml两组,比较其在治疗108周时的疗效.疗效比较采用χ~2检验.结果 替比夫定治疗4周时,HBV DNA不可测率及ALT复常率分别为37.5%和33.3%,至108周时达到87.5%和91.7%.46例HBeAg阳性患者治疗108周时HBeAg消失率及血清学转换率分别为39.1%和23.9%.12周时HBV DNA水平＜3 log_(10)拷贝/ml的患者,108周时的HBV DNA不可测率及HBeAg血清学转换率明显高于HBV DNA≥3 log_(10)拷贝/ml的患者(χ~2值分别为7.96和3.94,P值均＜0.05).24周时HBV DNA＜3log_(10)拷贝/ml的患者,108周时的HBV DNA不可测率高于HBVDNA≥3 log_(10)拷贝/ml的患者(χ~2=10.13,P＜0.05),耐药发生率低于HBV DNA≥3 log_(10)拷贝/ml的患者(χ~2=4.82,P＜0.05).替比夫定抗病毒治疗108周时肝硬化患者Child-Pugh分级较治疗前明显改善,其中Child A级患者比例明显增加(χ~2=5.83,P＜0.05).结论 替比夫定可强效、快速抑制HBV DNA复制,HBeAg血清学转换率高,长期治疗可明显改善肝硬化患者Child-Pugh评分,获得早期病毒学应答者的耐药发生率低.     

替比夫定联合双环醇治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的疗效分析

目的研究替比夫定联合双环醇片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效和安全性。方法选择133例未应用其他抗病毒药物的HBeAg阳性CHB患者,随机分两组接受治疗。试验组67例,每日口服替比夫定600 mg,同时每日服用双环醇片75 mg;对照组66例,仅给予每日口服替比夫定600 mg,两组均连续用药104周。观察治疗前后血清ALT水平及病毒学指标方面的改变。结果两组血清均明显下降,试验组更为显著(P<0.01)。治疗12周时,两组患者在HBeAg转阴率及血清学转换方面比较,差异均无统计学意义,随治疗时间延长,在治疗24、52、104周各时间点,实验组HBeAg转阴率及血清学转换均高于对照组,差异均有统计学意义。两组HBV DNA水平均出现明显下降,但各治疗时间点HBV DNA下降水平及检测不到比率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗52周时,治疗组和对照组各出现2例和3例耐药,耐药率分别为4.69%和7.81%,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗104周时,治疗组耐药5例,对照组耐药13例,耐药率分别为7.81%和20.31%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组均未发生与研究药物相关的不良反应。结论替比夫定与双环醇片联合应用治疗HBeAg阳性CHB在肝功能及病毒学方面取得较好疗效且安全。     

干扰素治疗慢性乙型肝炎患者HBeAg转阴率和CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞水平的关系

目的 观察干扰素抗病毒治疗前后慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)表达水平的变化和HBeAg转阴的关系.方法 选择用干扰素α-2b治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎56例,分别于治疗前、48周时检测外周静脉血CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例,同时检测HBeAg、ALT和HBVdNA载量.结果 抗病毒治疗48周后HBeAg转阴组CD4+CD25+rreg水平[(9.12±2.45)％]较治疗前[(11.99±3.25)％]明显下降(P＜0.01);而HBeAg未转阴组较治疗前无明显下降(P＞0.05).结论 慢性乙型肝炎患者经干扰素α-2b抗病毒治疗,HBeAg血清转换者CD4+CD25+Treg水平降低,而未转阴者Treg下降不明显.     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者替比夫定相关耐药的临床特点

目的探究HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者替比夫定治疗导致耐药变异的临床特点。方法对62例接受单一替比夫定抗病毒治疗出现相关耐药的HBeAg阳性CHB患者的抗病毒治疗基线、治疗过程和发生病毒学突破时的资料进行分析,探究替比夫定耐药突变的临床特点。结果替比夫定耐药患者病毒学突破的中位时间为78周,其血清HBV DNA、ALT水平在发生病毒学突破时与基线水平相比,差异有统计学意义;单一位点耐药突变和多位点耐药突变血清HBV DNA水平在发生病毒学突破时相比,差异有统计学意义(u=315.50,P=0.03);检测到8个耐药突变位点、11种组合模式,均含有M204I位点突变。替比夫定耐药组较对照组,年龄、性别、HBeAg、ALT基线水平,差异有统计学意义;替比夫定耐药组12周、24周的HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率、HBeAg转换率换均低于对照组患者,差异有统计学意义。结论高龄、男性、HBeAg、ALT基线水平低患者易出现替比夫定耐药;早期实现病毒学转阴及血清学转阴、转换的患者不易耐药。     

替比夫定和恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者早期疗效分析

目的比较替比夫定与恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者24周疗效及安全性。方法将60例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为替比夫定组和恩替卡韦组,比较两组治疗第12周和24周的疗效。结果在治疗12周时,两组患者HBV DNA低于检测水平和ALT复常率相比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,替比夫定治疗组HBeAg阴转率和HBeAg血清学转换率高于恩替卡韦组（36.7%对14.3%,26.7%对6.7%,P〈0.05）;在治疗24周时,两组HBV DNA低于检测水平、ALT复常率、HBeAg血清学转换率相比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）,而替比夫定组HBeAg阴转率高于恩替卡韦组（P〈0.05）;多因素Logistic回归分析发现仅基线ALT水平高的患者更易出现HBeAg血清学转换。结论替比夫定和恩替卡韦治疗CHB患者疗效相当,但替比夫定治疗患者HBeAg阴转率稍高于恩替卡韦治疗。     

替比夫定治疗对慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清可溶性红细胞补体受体1的影响

目的观察慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化患者经替比夫定抗病毒治疗3、6个月后血清可溶性红细胞补体受体1(s CR1)的变化,探讨替比夫定治疗对于s CR1水平的的影响。方法选择2013年1-6月在兰州军区兰州总医院安宁分院就诊的HBe Ag阳性CHB、肝硬化患者57例,给予替比夫定抗病毒治疗,于治疗前和治疗后3、6个月抽静脉血,采用ELISA法检测s CR1。组内比较采用配对t检验。两组间比较采用独立样本t检验。结果替比夫定抗病毒治疗后,全部患者在治疗3、6个月时s CR1与对应的基线水平相比差异有统计学意义(t值分别为4.864、6.238,P值均0.05)。CHB患者和肝硬化患者s CR1水平在治疗3、6个月时与对应的基线相比差异均有统计学意义(t值分别为3.425、5.468、4.047、7.378,P值均0.05)。CHB患者血清s CR1水平在基线、治疗3、6个月均较肝硬化患者低,但两组间各时间点相比差异均无统计学意义(P值均0.05)。结论 HBe Ag阳性CHB、肝硬化患者经替比夫定抗病毒治疗后血清s CR1水平显著下降。     

替比夫定初治慢性乙型肝炎患者疗效与安全性观察

目的分析HBeAg阳性、阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者初次使用替比夫定的疗效及安全性。方法 73例CHB患者(HBeAg阳性50例,阴性23例),接受替比夫定治疗至少1年,于治疗基线、病毒学应答前每个月、病毒学应答后每3个月检测HBV DNA、ALT、HBV血清标志物,观察治疗期间累计病毒学应答率、血清学转换率和耐药率;分析12、24周HBeAg下降幅度对预测血清学转换的价值;根据患者的情况不定期检测肌酸激酶(CK)。结果 (1)HBeAg阳性、阴性累计病毒学应答率1年分别为96%、100%,2年分别为96%、100%,其中90%HBeAg阳性、95%阴性患者在24周获得病毒学应答;(2)HBeAg阳性者1、2年累计血清学转换率分别为48%、61%;(3)HBeAg阳性、阴性累计耐药率1年分别为2%、4%,2年分别为24%、11%;(4)12、24周HBeAg下降幅度预测血清学转换的cut-off值分别为0.2557、0.3844log PEIU/ml,12周HBeAg下降幅度≥0.2557log PEIU/ml、24周≥0.3844log PEIU/ml的患者较低于该值者2年累计血清学转换率高,χ2值分别为28.996、15.036,P均=0.000(log-rank);(5)186人次查CK,78.8%数值超过参考范围(>140 IU/L),其中95.6%升高值在2级内,3级以上仅占4.4%。CK升高者无明显肌痛、肌炎,3～6个月内能自行下降至正常,无因CK升高而停药者。结论替比夫定对初治HBeAg阳性、阴性CHB患者疗效佳、安全性好。12、24周HBeAg下降幅度可作为2年血清学转换预测指标。     

恩替卡韦分散片对HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响

目的探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者接受恩替卡韦抗病毒治疗前后细胞免疫功能的变化。方法纳入HBeAg阴性CHB患者62例,接受恩替卡韦抗病毒治疗24周。通过流式细胞术检测患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果在治疗24周结束时,患者肝功能ALT、HBV DNA水平较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P0.05);患者外周血CD3~+、CD4~+和CD8~+细胞计数较治疗前升高,CD4~+/CD8~+比值也显著高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05)。结论恩替卡韦可能通过抑制HBV复制、降低CHB患者体内病毒载量,间接引起机体细胞免疫功能的改善。     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞表达程序性死亡分子-1及其配体与血清乙型肝炎病毒DNA水平的相关性

目的 研究程序性死亡分子-1(PD-1)及其配体(PD-L1)表达水平与慢性HBV感染者HBV DNA水平的相关性及抗病毒治疗对其表达的影响.方法 检测137例慢性HBV感染者的外周血单个核细胞(PBMC)表面PD-1和PD-L1,并检测其中64例人类白细胞抗原(HLA)-A2阳性者HBV特异性CTL数量.ELlSA法检测PBMC体外培养上清液中IFN-γ浓度.比较10例HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者予替比夫定抗病毒治疗24周前后上述指标的变化.两组间均数比较采用两独立样本的t检验,多组间的差异采用单因素方差分析,相关分析采用Pearson相关分析.结果 HBV DNA＜3 lg、3～6 lg和＞6 lg拷贝/mL组问PBMC表面PD-1和PD-L1表达均明显高于健康对照组,但差异无统计学意义;3组HBV特异性CTL表面PD-1表达分别为(69.3±11.2)%、(76.5±9.1)%和(78.0±11.7)%,HBV DNA＞6 lg拷贝/mL 组PD-1表达明显高于＜3 lg拷贝/mL组,而HBV特异性CTL数量明显低于＜3 lg拷贝/mL组;3组PBMC体外培养上清液中IFN-γ水平差异无统计学意义.HBeAg阳性组和阴性组间上述指标差异无统计学意义.替比夫定抗病毒治疗12周和24周时,PD-1、PD-L1表达较治疗前明显下降,伴有HBV特异性CTL数量逐渐增加和IFN-γ水平升高.结论 慢性HBV感染者PBMC表面PD-1的表达较健康者明显上调,且HBV特异性CTL表面表达PD-1水平与血清HBV DNA水平相关,但与HBeAg状态无关.抑制HBV复制能降低PD-1、PD-L1表达,并增加HBV特异性CTL的数量和功能.

Abstract：

Objective To study the relationship between programmed death-1 (PD-1)/programmed death-1 ligand (PD-L1) expressions and serum hepatitis B virus (HBV) DNA levels in chronic hepatitis B (CHB) patients. Methods A total of 137 CHB patients and 10 healthy controls were enrolled in the study. The peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated from fresh blood samples. HBV-specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) was expanded in vitro in 64 human leucocyte antigen (HLA)-A2 positive patients. Flow cytometry was used to detect HLA-A2 type,expressions of PD-1/PD-L1 on PBMCs and PD-1 on HBV specific CTL. Interferon gamma (IFN-γ)was measured by commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. PD-1/PD-L1expressions on PBMCs, HBV-specific CTL and IFN-γ level in PBMC culture medium were compared among patients with different baseline HBV DNA levels. Ten hepatitis B e antigen (HBeAg) positive patients were treated with telbivudine for 24 weeks. The above mentioned parameters were determined and compared before and after the antiviral treatment. Independent-samples t test were used to compare means between two groups and one-way A NOVA were used to compare means among multigroups. We used the pearson corretation test to assess corretation significance. Results The PD-1 and PD-L1 expressions on PBMCs in patients with baseline HBV DNA＜3 lg copy/mL, 3-6 lg copy/mL and ＞6 lg copy/mL were all significant higher than those in healthy control group, but no statistical differences were found. PD-1 expressions on HBV-specific CTL in the three CHB patient groups were (69.3±11.2)%, (76.5±9. 1)% and (78.0±11.7)%, respectively. However, PD-1 expression on HBV-specific CTL was higher, while the frequency of HBV-specific CTL cells was lower in HBV DNA ＞6 lg copy/mL group compared to HBV DNA＜3 lg copy/mL group. The above parameters, including expressions of PD-1 and PD-L1, the frequency of HBV-specific CTL and its PD-1 expression were not significantly different between HBeAg-positive group and HBeAg-negative group. Compared with baseline, PD-1 and PD-L1 expression decreased obviously accompanying with increase of HBV-specific CTL cells frequency and IFN-γ level after 12 weeks and 24 weeks of telbivudine treatment. Conclusions PD-1 expression on HBV-specific CTL correlates with serum HBV DNA level, but not HBeAg status in CHB patients. Suppression of HBV replication can reduce PD-1/PD-L1 expressions and partially restore HBV specific CTL function.     

替比夫定对HBeAg+慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞及淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨替比夫定抗病毒治疗对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能的影响与HBeAg阴转的相关性.方法:治疗组,30例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者应用替比夫定抗病毒治疗48wk,30例健康体检者为对照组.在治疗前、治疗后12、24、48wk,对外周血DCs进行体外培养,流式细胞仪检测分析DC表面分子及淋巴细胞亚群水平.结果:30例患者抗病毒治疗48wk,26例HBVDNA阴转(86.7%HBVDNA<500copies/mL),有8例发生HBeAg阴转(26.7%).与治疗前比较,治疗12wk时DCs表面分子CD1a、CD40、CD83、CD86、MHC-D的表达无明显变化;治疗24、48wk时上调,与治疗前相比较有显著性差异(P<0.05),但均低于健康对照组.淋巴细胞亚群12wk时无明显变化;治疗24、48wk时,CD4+及CD4+/CD8+比值明显提高,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05);CD3+T、CD8+T和CD19+B细胞未见明显改变.48wk时,HBeAg阴转患者与HBeAg未阴转患者比较,DCs表面分子CD1a、CD40、CD86,MHC-DR的表达,CD4+水平及CD4+/CD...     

替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效及相关预测因子的Logistic回归分析

目的观察替比夫定（LdT）治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）患者3年的疗效,应用Logistic回归探讨HBeAg血清学转换的预测因子。方法收集58例采用LdT治疗的HBeAg阳性CHB患者,分析其性别、年龄、基线ALT水平、基线HBV DNA载量、基线HBeAg和HBsAg滴度与治疗3年时ALT复常率、HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率和HBeAg血清转换率的相关性;采用Logistic回归分析HBeAg血清转换的相关因素。结果治疗3年时ALT复常率为84.48%,HBV DNA阴转率为70.69%,HBeAg阴转率为50.00%,HBeAg血清转换率为43.10%。与ALT≤2倍正常值上限（2×ULN）相比,基线ALT〉5×ULN的患者HBeAg转换率显著增高（P〈0.05）;与HBeAg≤100（S/CO）组相比,基线HBeAg〉200 S/CO的患者HBeAg的阴转率和血清转换率均显著下降（P〈0.05）;与HBV DNA≤6 log拷贝/ml组相比,HBV DNA〉7 log拷贝/ml的患者HBV DNA转阴率、HBeAg转阴率和HBeAg转换率下降显著（P〈0.05）;患者性别、年龄及基线HBsAg滴度对以上疗效指标无影响（P〉0.05）。多因素Logistic回归分析发现仅基线HBeAg滴度低的患者更易出现HBeAg血清学转换。结论 LdT能有效恢复肝功能,抑制HBV复制和提高HBeAg血清转换;基线HBeAg滴度可预测LdT治疗HBeAg阳性CHB患者的HBeAg血清转换率。     

替比夫定治疗慢性乙型肝炎37例近期疗效观察

目的研究替比夫定（LdT）对慢性乙型肝炎治疗近期疗效和安全性。方法慢性乙型肝炎患者口服替比夫定。患者包括初次使用替比夫定患者21例和阿德福韦酯原发治疗失败后换用替比夫定患者16例两组。治疗前后测定基线HBVDNA水平、HBVM、肝肾功能、肌酸肌酶。结果两组患者治疗1月、3月、6月后ALT较治疗前明显下降（P〈0.05）,两组之间治疗前后ALT比较没有显著性差异（P〉0.05）。两组患者治疗1月log值下降幅度无明显差异（P〉0.05）,治疗3月、6月后log值下降幅度差异有统计学意义（P〈0.05）。初次用药与更换用药在HBVDNA转阴和HBeAg血清转换方面在治疗6月内差异无统计意义（P〉0.05）。结论替比夫定治疗慢性乙型肝炎,可迅速减少肝损伤和降低HBVDNA病毒载量,3、6月时初次用药降低病毒载量优于阿德福韦酯原发治疗失败后更换用药者。     

慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞的表达及意义

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL在慢性乙型肝炎患者外周血和肝组织中的表达和临床意义.方法 流式细胞分析技术和流式细胞术细胞因子测定法(CFC)检测157例HBV感染者(包括急性乙型肝炎20例、慢性乙型肝炎115例、乙型肝炎肝硬化22例)和20例健康对照组外周血和部分肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达.组间分析采用t检验.结果急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎轻、中、重度患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞分别为(2.87±0.94)%、(3.53±1.56)%、(4.59±2.98)%和(3.65±1.73)%,明显高于对照组的(2.36±0.60)%(t值分别为2.04、5.97、3.30和3.17,P<0.01);慢性乙型肝炎轻、中、重度和乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV特异性CTL为(0.189土0.152)%、(0.103±0.110)%、(0.118±0.120)%和(0.098±0.101)%,明显低于急性乙型肝炎患者的(0.815±0.360)%(t值分别为10.09、11.87、9.17和8.96,P<0.01).肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达高于外周血.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要作用.     

原发性肝细胞癌患者CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的频率、表型及功能

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）在HCC患者外周血及肿瘤组织中的频率、抑制功能及临床意义。方法收集18例原发性HCC患者的PBMC、肝癌组织及相应的癌旁组织标本,以及10例CHB患者和15名健康对照的外周血标本,以三色与四色流式分析法分析PBMC以及肿瘤浸润的淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋Treg的频率及表型,并同时分析其与HBV持续感染、肿瘤TNM分期和其他临床指标的关系,用BrdU掺入法评价CD4^＋CD25^＋Treg的免疫抑制功能。结果与健康对照组相比HCC患者、慢性HBV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg频率明显上升（P＜0．01）,且HCC患者肿瘤浸润的淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋Treg的频率也明显上调（P＜0．01）;随着肿瘤的进展HCC患者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg呈上升趋势（P＜0．05）; HCC患者CD4^＋CD25^＋Treg可非特异性地抑制自身活化的CD4^＋CD25^- T淋巴细胞,并呈剂量依赖性,且抑制能力与健康对照组相比差异无统计学意义。结论HCC患者外周血中及肿瘤组织中CD4^＋CD25^＋Treg的频率升高,增多的CD4^＋CD25^＋Treg可能参与抑制抗HCC的免疫应答,从而使肝癌细胞逃脱机体的“免疫监视”作用。     

Cellular immune responses in hepatitis B virus e antigen negative chronic hepatitis B

The immunopathogenesis of hepatitis B e antigen (HBeAg) negative chronic hepatitis B (CHB) virus (HBV) infection has not been adequately investigated. We studied the cellular immune responses of peripheral lymphocytes using proliferating assays, intracellular cytokine staining (ICS) and ELISPOT interferon-gamma (IFN-gamma) assays after non-specific and specific stimulation with whole HBV proteins and synthetic peptides. Thirty patients with HBeAg negative CHB, eleven HBsAg inactive carriers, nine patients with acute hepatitis B and 22 healthy controls were included in the study. Patients with HBeAg negative CHB demonstrated an increased number of peripheral CD8+ T cells while their peripheral blood mononuclear cells showed increased proliferation after in vitro stimulation with overlapping hepatitis B core derived peptides and an envelope derived epitope (HBs 182-191 aa), similar to those observed in acute hepatitis B. Using ICS, we found an expanded population of IFN-gamma producing T lymphocytes, CD4+ and CD8+, after non-specific stimulation, in HBeAg negative CHB compared to all other groups. HBeAg negative CHB and acute hepatitis B patients had a similarly increased number of core specific T cells measured by the IFN-gamma assays. Inactive HBsAg carriers showed minimal proliferative responses overall while they exhibited an increased number of envelope specific effector T cells (measured by ICS). In conclusion, we showed that overall CD4+ T cell responses from patients with HBeAg negative CHB were comparable to those of acute hepatitis B, while inactive HBsAg carriers despite their limited proliferative capacity the effector activity of their peripheral T cells was maintained.     

替比夫定治疗慢性乙肝血清Th1/Th2亚群细胞因子的水平变化

目的探讨慢性乙肝患者接受替比夫定抗病毒治疗后血清T淋巴细胞亚群Th1/Th2细胞因子水平的变化及与肝功能ALT恢复、HBVDNA含量变化及血清HBeAg转换的关系。方法64例HBeAg（＋）慢性乙肝患者接受替比夫定抗病毒治疗,ELISA法检测治疗前及治疗24W后Th1细胞因子IL-2、IL-12及Th2细胞因子IL-4、IL-10的血清浓度变化,并同时检测肝功能ALT、HBVDNA含量的变化及HBeAg血清转换率。结果64例HBeAg（＋）慢性乙肝患者接受替比夫定治疗24W后,有55例患者ALT恢复正常,占85.9%,有34例HBVDNA〈5×10^2copies/ml,HBeAg（-）,占53.1%,治疗52W,有15例发生HBeAg血清学转换,比例为23.4%。治疗组患者血清Th1细胞因子水平低于对照组,Th2细胞因子水平高于对照组,替比夫定治疗后,HBeAg阴转及血清转换患者血清Th1细胞因子浓度比治疗前升高,Th2细胞因子浓度比治疗前降低均有统计学意义（P〈0.05）,ALT恢复正常,HB-VDNA含量下降显著（P〈0.01）。结论T细胞亚群Th1/Th2细胞因子与慢性乙肝替比夫定抗病毒治疗后血清ALT复常,HBVDNA含量下降及HBeAg阴转及血清学转换相关,Th1/Th2亚群细胞因子平衡是促进肝功能ALT恢复、HBVDNA含量下降的重要因素之一,HBeAg高阴转及血清学转换率可能与替比夫定能上调Th1细胞因子水平有关。