高效液相色谱法测定Hb F的临床实验评价

目的就高效液相色谱法(HPLC)测定HbF进行临床实验评价。方法用全自动糖化血红蛋白分析仪G7(分析原理为HPLC)的β-模式测定HbF,与抗碱变试验法测得HbF含量进行比较;并对该方法精密度、线性、抗干扰等指标进行实验。结果共测定标本77份,其中成人及儿童(除新生儿外)42份,用本法检出HbF高于正常值(含量>3.1%)共17例。该方法精密度CV1.9%~3.2%之间;与碱变性试验的相关性良好γ=0.9900;回归方程为y=0.9915x-0.03704,HbF的线性范围可达35.8%;胆红素在250μmol/L,三酰甘油22.0mmol/L以下时对测定结果无影响。但是对35例新生儿标本的检测表明,HbF在HPLC法与碱变性试验结果不符,HPLC法测定结果均为0,碱变性试验结果为65.02±11.69%。结论全自动糖化血红蛋白分析仪G7测定HbF,对成人及一般儿童能很好检测,且检测速度快。但G7对新生儿HbF的测定需对仪器分析软件进行调整,才可以正确定量。     

高效液相色谱法检测血红蛋白 Constant Spring 的可行性分析

目的：探讨应用高效液相色谱法（HPLC）检测血红蛋白 Constant Spring（Hb CS）的可行性。方法回顾分析1372例患者的地中海贫血筛查和基因诊断结果,以反向斑点杂交法（RDB）为金标准,比对应用 HPLC 法检测血红蛋白 Hb CS 的结果。结果HPLC 法检测 Hb CS 的敏感性为98．1％,特异性为98．0％,阳性预测值为97．3％,阴性预测值为98．6％,诊断准确度为98．0％。结论HPLC 用于检测 Hb CS 具有简便、快速、准确性高等优点,可以用 HPLC 法对 Hb CS 进行筛查。     

高效液相色谱法检测血红蛋白A2诊断β-地中海贫血携带者的最佳阈值

目的确定高效液相色谱法（HPLC）检测血红蛋白A2（HbA2）诊断β-地中海贫血（β地贫）携带者的最佳阈值,以提高HbA2作为β地贫携带者诊断指标的应用价值,减少漏诊与误诊。方法以反向点杂交技术（RDB）为金标准方法,将近两年来已确诊的1007例β地贫携带者和606例正常对照采用HPLC检测HbA2的结果按不同阈值界定的范围分为真阳性、假阳性、真阴性和假阴性,并评估出敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、尤登（Youden脂数等评价指标,同时绘制受试者工作特征曲线（ROC）,确定HPLC诊断β地贫携带者HbA2的最佳阈值。结果以HbA2≥4．0％作为HPLC诊断β地贫携带者的阈值时,其敏感度为99．21％,特异度为99．34％,阳性似然比为150．30,阴性似然比为0．008,尤登指数为0．99,其中尤登指数优于其它阈值,且对应的切点在ROC曲线上最靠近左上方。结论HbA：≥4．0％为HPLC诊断D地贫携带者的最佳阈值,其敏感度与特异度的综合评价陛能最理想,诊断试验的真实性最好。     

高效液相色谱法测定血浆肝素含量

为探讨高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法直接测定血浆游离肝素含量的可行性及其意义，用ＨＰＬＣ分离血浆普通肝素（ｕｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｈｅｐａｒｉｎ）钠，肝素钙以及低分子量肝素（ＬＭＷＨ），探讨ＨＰＬＣ法所选色谱方法为Ｃ－１８反相柱分离，流动相为甲醇与醋酸铵，外标法定量，紫外肖吸收波长为２１５ｎｍ，回收率为９０．４％～９６．８％，血浆肝素含量在１００～６５００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限为３０     

高效液相色谱法测定血清甘油三脂的研究

本文研究用高效液相色谱测定血清甘油三脂含量的方法。结果表明 ,用 1,2 ,4 丁三醇作内标 ,2 30nm为测定波长 ,在本文色谱条件下 ,测定血清甘油三脂的含量 ,其结果准确、灵敏、回收率高、操作较简便 ,是测定血清甘油三脂含量较理想的方法     

高效液相色谱法测定血浆肝素含量

为探讨高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法直接测定血浆游离肝素含量的可行性及其意义。用ＨＰＬＣ分离血浆普通肝素（ｕｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｈｅｐａｒｉｎ）钠、肝素钙以及低分子量肝素（ＬＭＷＨ），探讨ＨＰＬＣ法所选色谱方法为Ｃ－１８反相柱分离，流动相为甲醇与醋酸铵，外标法定量，紫外光吸收波长为２１５ｎｍ。回收率为９０．４％～９６．８％，血浆肝素含量在１００～６５００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限为３０Ｕ／Ｌ批内与批间变异系数分别小于３．０％和４．７％。同时用ＨＰＬＣ法和凝血酶法检测一批血样（ｎ＝２９），结果相似。此法适宜于肝素含量高的血样检测。     

高效液相色谱法测定糖化血红蛋白的建立与评价

目的探讨高效液相色谱法测定糖化血红蛋白(HbA1c)的价值及意义。方法选取2015年6~8月于该院就诊的30例健康体检者的全血标本为健康组,30例糖尿病患者的全血标本为糖尿病组,利用美国BIO-RAD VARIANTⅡ糖化血红蛋白仪的高效液相色谱法测定HbA1c。结果高效液相色谱法检测HbA1c水平的相关系数为0.9852,线性结果良好。百分偏倚值小于3.00%,准确度良好。不同保存时间的HbA1c结果显示,在4℃保存条件下,30例健康体检者的全血标本和30例糖尿病患者的全血标本在10d、30d和50d检测结果均未超出可接受范围x±3s,说明VARIANTⅡ糖化血红蛋白仪,检测HbAlc至少稳定50d。选取健康组和糖尿病组标本各1例,VARIANTⅡ糖化血红蛋白仪连续测定20次计算批内精密度,连续测定20d计算批间精密度,CV均在5%以内。结论高效液相色谱法检测糖化血红蛋白具有操作简单,快速,准确的特点,对于长期保存的标本依然具有很好的稳定性。     

高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸

目的 建立测定血浆同型半胱氨酸的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方法。方法 血浆同型半胱氨酸经巯基乙醇还原后用碘乙酸封闭巯基,。再与邻苯二甲醛（ＯＰＡ）反应完成衍生化,以磺在同型半胱氨酸为内标,经Ｃ１８反相柱进行色谱分离,荧光检测器测定结果。结果测定线性范围达１５０μｍｏｌ／Ｌ,最低检测限为１．０μｍｏｌ／Ｌ日内不精密度３．７－４．２％,日间不精密度３．８－４．３％;方法回收率９３－１０２％。结论本方法     

高效液相色谱分析血红蛋白组分和血常规分析在地中海贫血筛查中的应用

目的浅析地中海贫血筛查中采取高效液相色谱分析血红蛋白组分与血常规分析的应用价值。方法纳入2017年1月-2019年6月在本院行地中海贫血检测的患者共347例,采取高效液相色谱法分析血红蛋白组分和血常规分析对患者进行筛查,分析两种检测方式的应用价值。结果高效液相色谱分析血红蛋白组分针对β型地中海贫血检出率相较血常规分析更高,但α型地中海贫血检出率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高效液相色谱分析血红蛋白组分对β型地中海贫血检出率更高,血常规分析对α型检出率更高,因此两种检测方式联合检测对于地中海贫血的患者具有更高的应用价值。     

HPLC法测定奈韦拉平的血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定奈韦拉平血药浓度的方法。方法:采用Hypersil C18柱(150 mm×4.6 mm,0.5μm);流动相∶乙腈:0.01 mol/L磷酸二氢钠(含0.01 mol/L三乙胺,磷酸调pH至5.0)=18∶82;流量:1.0mL/min;检测波长:240nm。结果:线性范围0.1~5.0 mg/L(r=0.9996);最低检测浓度为0.1 mg/L;日内、日间相对标准差(RSD%)均小于10%;低、中、高三个浓度的提取回收率分别为99.98%、99.41%和100.53%。结论:该法简便、快速、准确,专属性高,适用于奈韦拉平药动学和生物等效性研究。     

高压液相色谱法检测肠道通透性及临床应用

目的用高压液相色谱的方法检测肠道通透性和60例健康志愿者和烧伤患者尿中乳果糖和甘露醇的排出率（L／M）。方法选取60例健康志愿者,平均年龄36．5岁（21～60岁）;病人12例烧伤面积大于30％,Ⅲ度面积大于20％的患者,测定伤后1,3,6,12d尿中乳果糖和甘露醇溶液的排出率。健康志愿者和烧伤患者在前1天晚10时起禁食;早8时口服10ml乳果糖和甘露醇溶液（含2．0g乳果糖和1．0g甘露醇）,收集口服溶液后6h内的全部尿液。尿样经离心和预处理后,用带脉冲电化学检测器的高压液相离子色谱仪测定,样本分析时间为10min。结果甘露醇和乳果糖标准曲线线性良好,线形的相关系数r^2分别为0．998823和0．999943;方法学的重复性误差（CV％,n=10）：乳果糖（L）3．52,甘露醇（M）1．61;回收率：乳果糖（L）98．4&#177;3％,甘露醇（M）101．1&#177;3（n=10）。60例健康人6h尿中的孔果糖（L）和甘露醇（M）排出率（％）的比值（L／M）是0．036&#177;0．0008。12例烧伤患者第1d的L／M值显著增加（0．221&#177;0．169,P〈0．05）,到12d时基本恢复正常（0．036&#177;0．051）。结论带脉冲电化学检测器的高压液相离子色谱仪测定尿中乳果糖和甘露醇的排出率,方法准确、重复性和回收率满意。烧伤患者L／M比值的测定可反映肠黏膜的通透性和肠道屏障功能。     

高效液相色谱法测定人血浆中同型半胱氨酸浓度

目的建立柱前衍生化反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy)浓度的方法。方法以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine hydrochloride(TCEP)为还原剂,以7-fluorbenzo-2-oxa-1,3-diazole-4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂,色谱柱为Xterra RP18柱,柱温35℃,流动相为甲醇︰磷酸二氢钠缓冲液(pH值3.0)=3︰97,激发波长380 nm,发射波长510 nm,外标法定量。结果 Hcy浓度在1.95～125μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 8)。日内和日间相对标准偏差均<7%,方法回收率为103.2%～111.9%。结论此方法准确、灵敏、快速,是一种适合于实验室研究和临床检测血浆中Hcy浓度的方法。     

高效液相色谱法测定猴耳环消炎胶囊中没食子酸的含量

目的:建立一种高效液相色谱法直接测定猴耳环消炎胶囊中没食子酸的含量。方法:色谱柱为alltimaC18 (250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(0.1%磷酸)=6:94,流速为0.9mL/min,检测波长为273nm。结果:没食子酸在15.2～152μg/mL范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.8%(RSD =0.73%)。结论:本法操作简便,重现性好,结果准确,快速,可作为猴耳环消炎胶囊的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定疲王按摩乳中阿魏酸的含量

目的建立疲王按摩乳中阿魏酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Diamonsil C18（150mm×4．6mm，5μm，北京迪马科技有限公司）；流动相为甲醇．2％冰醋酸（32：68）；柱温为30℃；检测波长为320nm。结果阿魏酸在4．55～91．00μg／mL范围内呈良好的线性关系（R2=0．9998），其平均加样回收率分别为98．78％（相对标准偏差为2．668％）。结论该测定方法简便、快速、重现性好，可作为疲王按摩乳的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度

目的建立测定胎盘灌流液中格列苯脲浓度的高效液相色谱(HPLC)检测方法。方法采用的色谱柱为Symmetry Shield RP C18(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,流动相为NaH2PO4缓冲盐(25 mmol/L,pH值5.2)︰乙腈=1︰1;内标为格列齐特,流速1.0 mL/min,检测波长228 nm,采用液-液萃取预处理方法测定胎盘灌流液中格列苯脲的浓度。结果格列苯脲浓度线性范围为2.0～25.0μg/mL,线性方程为:y=0.226x+0.002,r=0.999 9(n=6),日内相对标准偏差(RSD)<3.1%,日间RSD<9.5%,方法学回收率为95.32%～103.35%。结论 HPLC检测方法灵敏、简便,可用于胎盘灌流液中格列苯脲浓度的检测。     

变性高效液相色谱检测少突胶质细胞瘤1p杂合性缺失

目的 建立临床检测少突胶质细胞瘤1p杂合性缺失的手段.方法 提取肿瘤组织及患者外周血DNA,利用聚合酶链式反应扩增微卫星位点后行变性高效液相色谱检测.结果 以患者外周血作对照,可明确显示肿瘤标本微卫星位点杂合性缺失情况,从而判断患者1p杂合性缺失情况.结论 该方法能直观便捷分析出患者1p杂合性缺失情况.     

Useful Sample Handlings for Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography in Emergency Toxicology

Abstract

Some physicochemical treatments of biological samples, before being injected into a liquid chromatograph, are discussed. The advantages of dilution, liquid and solid extraction are compared referring mainly to unpublished results. Assays of antiepileptic drugs, caffeine, theophylline, tricyclic antidepressants, valproic acid, and meprobamate are used to demonstrate the importance of sample handlings in toxicological analyses in which reversed phase high performance liquid chromatographies are applied.     

高效液相色谱法测定健胃消食片的有关物质

健胃消食片收载于卫生部药品标准。其组成分为太子参、陈皮、山药、麦芽（炒）、山楂．具有健胃消食的功能，用于脾胃虚弱，消化不良等症。然而其含量测定无标准，为了有效控制其质量，用高效液相色谱法测定该制剂的橙皮苷含量，操作方法简便、准确，重复性好，其回收率98．7％（RSD=1．3％）．重复性的RSD为1．3％。     

阴离子固相萃取结合高效液相色谱技术检测尿儿茶酚胺

目的 对阴离子固相萃取技术在尿儿茶酚胺(包括NE,E,DA)提取过程中的应用进行了研究,并在临床标本中应用.方法 收集14例嗜铬细胞瘤患者和15例正常人24 h尿液,利用强阴离子固相萃取柱萃取样本中的儿茶酚胺,用高效液相色谱与电化学检测仪联用测定其含量,对两组结果进行对比分析.结果 NE,E和DA的回收率分别为93%～105%,94%～104%和89%～112%;批内变异系数分别为8.9%,8.4%和9.3%;批间变异系数分别为9.3%,9.6%和10.7%.在0.01～100 mg/L的浓度范围内,线性良好(r=0.999 9).正常对照组的结果为NE28.67±11.98 μg/24h,E4.08±2.34 μg/24h,DA225.76±104.83 μg/24h.嗜铬细胞瘤组的结果为NE300.29±212.79 μg/24h,E11.76±7.58 μg/24h,DA235.49±79.85 μg/24h.嗜铬细胞瘤组的NE高于正常对照组(t=5.402,P<0.01),嗜铬细胞瘤组的E高于正常对照组(t=3.998,P<0.01),嗜铬细胞瘤组的DA与正常对照组差异无统计学显著性意义(t=0.283,P=0.779).结论 该方法操作简便,结果可靠,优于酸性氧化铝提取儿茶酚胺方法,适合临床应用.