苦参3种方法提取液HPLC指纹图谱比较

目的:比较苦参半仿生提取法(SBE法)、醇提法(AE法)、水提法(WE法)3种方法提取液的HPLC指纹图谱。方法:以≤1000Da提取物为最终产物,比较苦参3种方法提取液指纹图谱的共有峰、峰对应关系、共有峰重叠率、特征指纹峰总峰面积、相似度。结果:SBE法、AE法、WE法≤1000Da提取物特征峰数依次为17、14、14,总峰面积依次为7230.0、6733.4、2792.1。结论:3种提取方法制得的≤1000Da提取物的HPLC指纹图谱特征峰个数及总面积以SBE液为最大,进一步验证了苦参以SBE法提取为佳。     

3种方法制备的黄连解毒汤提取液指纹图谱比较

目的 比较以半仿生提取法（SBE法）、醇提取法（AE法）、水提取法（WE法）制得黄连解毒汤方药提取液的指纹图谱,进一步验证该方药较佳的提取方法。方法 采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法,比较3种方法制备的黄连解毒汤相对分子质量≤1 000提取液的指纹图谱。结果 SBE提取液有23个特征指纹峰;与SBE提取液相比较,AE提取液缺少5个特征指纹峰（5、9、10、11、22）,WE提取液缺少3个特征指纹峰（11、22、23）;用夹角余弦法计算特征指纹峰的相似度,结果SBE提取液的数值均大于AE提取液和WE提取液,这与共有特征峰重叠率的计算结果也较相符。栀子苷、黄芩素、盐酸小檗碱3种指标成分及共有特征指纹峰总面积比较,皆是SBE提取液＞AE提取液＞WE提取液。结论 黄连解毒汤方药以SBE法提取得到的相对分子量≤1 000提取液中成分最多。     

黄精不同炮制品半仿生提取液与水提取液成分的比较

目的优选黄精不同炮制品的药效物质较佳提取方法。方法先用均匀设计,以5-羟甲基糠醛、黄精多糖、干浸膏为指标综合评判,优选黄精的半仿生提取(SBE)法工艺参数,再对黄精和酒黄精分别作SBE液与WE(水提)液的指标成分比较。结果黄精的SBE法工艺参数为:三次煎煮用水的pH依次为2.10、6.50、9.00,煎煮时间依次为2、1、0.5h;4种提取液的综合评判值为:酒黄精SBE液>酒黄精WE液>黄精SBE液>黄精WE液。结论黄精药用以酒蒸制品用SBE法提取为佳。     

半夏白术天麻汤提取液的血清指纹图谱研究

目的 比较半夏白术天麻汤4种方法提取液的血清指纹图谱。方法 取大白兔，ig半仿生-生物酶提取(SBEE)液，采集不同时刻的血样，分离含药血清，用HPLC法和UV法测定，将HPLC色谱峰数目、峰总面积以及紫外吸光度平均值标准化处理，加权求和后得综合评判Y值，以Y值大者为较佳采血时刻；然后对4种方法提取液此时刻的含药血清进行指纹图谱比较。结果 给药后2 h的含药血清综合评判Y值最大；4种方法提取液2 h含药血清以SBEE液综合评判Y值最大。结论 SBEE液含药血清较水提法、醇提法、SBE法提取液含药血清中成分量高。     

栀子柏皮汤与阿苯达唑对肝吸虫感染大鼠肝胆管的保护作用

【立论依据】 肝吸虫可引起宿主肝胆管炎症,严重感染导致门脉区肝纤维组织增生和肝细胞萎缩变性。阿苯达唑广泛应用于肝吸虫病治疗,但存在与成虫寄生部位隔离、副作用大、患者依从性不佳等不足。栀子柏皮汤具有消炎、抗菌、解热、护肝、利胆等作用。 【设计思路】 本研究拟用栀子柏皮汤和阿苯达唑按析因设计治疗肝吸虫感染模型大鼠,通过观察各组大鼠的胆汁分泌量、肝功能血清学指标及肝胆管组织病理学改变,初步探讨栀子柏皮汤和阿苯达唑对肝胆管的影响及其相互作用,为其临床应用提供实验依据。 【实验内容】 (1)建立肝吸虫感染大鼠模型;(2)动物分组及处理:动物按2×2析因设计分组,各治疗组接受相应药物治疗,模型组取等量生理盐水灌胃,平行操作;(3)胆汁引流术测胆汁流量;(4)腹主动脉取血,检测血清谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、总胆红素(TBIL) 、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平;(5)大鼠肝胆管组织病理学检查。 【材料】 (1)含肝吸虫囊蚴的麦穗鱼;(2)180~220 g SD大鼠50只;(3)栀子、黄柏、甘草;(4)透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)试剂盒。 【可行性】 (1)栀子柏皮汤具有护肝利胆、消炎抗菌的作用,阿苯达唑可杀灭肝吸虫成虫,本研究从消灭病原体和保护宿主两方面联合用药以增强疗效,在理论上具备可行性;(2)本课题预实验中已成功建立肝吸虫囊蚴感染大鼠模型;(3)课题组成员已掌握动物实验技术;(4)实验室具备相应的实验设备和器材。 【创新性】 本实验首次采用析因设计的方法来研究栀子柏皮汤与阿苯达唑对肝吸虫感染大鼠肝胆管的影响,既探讨栀子柏皮汤对肝吸虫感染大鼠的保肝利胆作用,又探讨阿苯达唑对肝吸虫的直接杀灭效果,并分析栀子柏皮汤与阿苯达唑之间的交互作用。实验结果可为栀子柏皮汤临床应用于肝吸虫病的治疗提供科学依据。     

栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用

目的探讨栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积大鼠的保护作用及可能机制。方法实验组大鼠灌胃给予栀子柏皮汤7 d,第7天给药后4 h给ANIT造模。48 h后,测血清总胆红素(TBIL)含量、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性及肝匀浆组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。RT-PCR法及Western blot法检测胆汁代谢相关的转运体胆盐输出泵(BSEP)、钠-牛磺酸共转运体(NTCP)及氧化应激相关酶细胞色素CYP2E1的表达。结果栀子柏皮汤能够呈剂量依赖性的降低血清TBIL、ALP、ALT、AST、GGT及肝组织中MDA、GSH含量;提高肝组织中SOD、GSH-Px活性;增加肝组织中BSEP的表达,降低NTCP及CYP2E1的表达。结论栀子柏皮汤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控胆汁代谢相关转运体及抗氧化损伤有关。     

用均匀设计优选栀子柏皮汤半仿生法提取的工艺条件

[目的]优选栀子柏皮汤半仿生提取工艺条件。[方法]采用均匀设计法,在方药规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以分子量≤1 000 u提取物、栀子苷、小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,综合评判,优选该方药半仿生提取的工艺条件。[结果]3煎用水的pH值依次为2.031 1、7.495 5、8.419 3,3煎总计时间为4.016 2 h。[结论]结合实际生产,确定3煎用水的pH值依次为2.0、7.5、8.5;提取时间依次为2、1、1 h。     

苦参5种提取方法的比较研究

目的:比较苦参5种提取方法的优劣。方法:以苦参碱、氧化苦参碱、苦参总碱、HPLC总面积、干浸膏为指标综合评判,对半仿生提取液(SBE液)、水提取液(WE液)、半仿生提取醇沉液(SBAE液)、水提醇沉液(WAE液)、醇提液(AE液)进行比较,确定最佳提取方法。结果:综合评价Y值由大到小的顺序为:YSBE>YWE>YAE>YSBAE>YWAE。结论:苦参以SBE法提取为佳。     

经典退黄三方抗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的方证比较研究

目的：通过观察经典退黄三方茵陈蒿汤、茵陈五苓散和栀子柏皮汤对二甲基亚硝胺（dimeth—ylnitrosamine,DMN）诱导的大鼠肝纤维化模型的效应,探讨该模型的病机。方法：48只大鼠按体质量分层随机分为正常对照组、模型组、茵陈蒿汤组、茵陈五苓散组和栀子柏皮汤组,采用DMN腹腔注射4周的方法诱导大鼠肝纤维化模型。从造模第3周开始,各药物组在继续造模的同时予以相应的药物干预,正常对照组和模型组给以等量生理盐水。4周末结束实验,杀鼠取材,观察各组大鼠一般情况、肝组织病理学、羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量及肝功能变化。结果：与正常对照组相比,模型组大鼠出现显著的肝损伤和肝纤维化,肝组织Hyp含量显著升高（P〈0．01）,肝功能显著异常（P〈0．01）。与模型组比较,茵陈蒿汤可显著改善肝功能（P〈0．05或P〈0．01）,显著改善肝组织病理改变,降低肝组织Hyp含量及肝脏胶原增生程度（P〈0．01）;茵陈五苓散可显著降低血清总胆红素含量（P〈0．01）,对肝组织病理影响不明显;而栀子柏皮汤显著改变肝脏病理,并对肝组织Hyp含量有降低作用。结论：茵陈蒿汤对DMN诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果优于茵陈五苓散和栀子柏皮汤;DMN诱导的大鼠肝纤维化模型在其形成期的病机以“湿（瘀）热内蕴”为主,且湿（瘀）热并重,与茵陈蒿汤方证高度相关。     

栀子柏皮汤对胆酸饲料诱导胆汁淤积症小鼠肝保护机制研究

目的：研究栀子柏皮汤对含1%胆酸（CA）饲料诱导胆汁淤积症小鼠的肝保护作用及其机制。方法：C57BL/6雄性小鼠随机分为3组,即正常对照组、1%CA模型组、栀子柏皮汤组,每组5只。栀子柏皮汤组灌胃给予栀子柏皮汤（6 g/kg,每10 g小鼠体质量0.1 ml）,每日1次,连续10 d。正常对照组和1%CA模型组分别灌胃等体积0.9%NaCl溶液。所有组前3 d喂食正常饲料,于第4天灌胃后将1%CA模型组及栀子柏皮汤组换为含1%CA饲料饲养,直至实验结束,正常对照组仍继续用普通饲料饲养。干预结束后,检测小鼠血浆碱性磷酸酶（ALP）和丙氨酸转氨酶（ALT）活性;HE染色观察小鼠肝脏病理改变;LC-MS/MS检测小鼠肝脏胆汁酸含量;Western blot法测定小鼠肝脏Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性小体、衔接子（ASC）和消皮素D的N端剪切体（GSDMD-N）蛋白表达。结果：与1%CA模型组比较,栀子柏皮汤组显著降低血浆ALT和ALP活性,缓解肝脏坏死及汇管区炎性细胞浸润,显著减少肝内总胆汁酸、牛磺胆酸（TCA）和牛磺脱氧胆酸（TDCA）的含量,并能下调NLRP3...     

交泰丸方药4种提取方法的比较研究

目的　优选交泰丸方药的提取工艺。方法　以小檗碱、肉桂酸、总生物碱、挥发油、干浸膏为指标 ,在药材粒度、溶剂量、煎提温度、滤过、浓缩等条件相同的前提下 ,对半仿生提取法 ( SBE法 )、水提取法 ( WE法 )、半仿生提取醇沉法 ( SBAE法 )、水提取醇沉法 ( WAE法 )进行比较研究。结果　 5个指标综合评价 Y值为 :SBE法 >WE法 >SBAE法 >WAE法。结论　交泰丸方药的提取法以 SBE法为佳     

黄芩半仿生提取法工艺条件的优选

目的以黄芩为模型中药,采用均匀设计优选黄芩的半仿生提取工艺条件。方法采用U9（91×33）均匀设计表,在饮片规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以3煎用水的pH值及总煎提时间为考察因素,以分子量≤1 000 Da提取物、黄芩苷、黄芩素、总黄酮、HPLC峰总面积为指标,将各指标测得值进行标准化处理,并经加权求和后得到综合评判指标Y值,并用JYSYSJ数据分析模块处理,优选黄芩半仿生提取法的工艺条件。结果按照实验设计得出,黄芩半仿生提取法工艺的最佳条件为：3煎用水的pH值依次为5.136 8、6.974 1、8.941 3;3煎总煎提时间为3.931 7 h。结论结合生产实际,确定3煎用水的pH值依次为5.0、7.0、9.0;提取时间依次为2h、1 h、1 h。验证性试验提取液的综合评价Y＇值略高于预测值,表明黄芩用均匀设计优选出的SBE工艺参数可供在生产中试行。     

二黄汤方药半仿生提取法工艺条件的优选

目的用均匀设计优选二黄汤方药半仿生提取的工艺条件。方法采用均匀设计U9（91×33）表,在方药规格、煎提温度、煎提用水量、滤过、浓缩等条件相同的情况下,以3煎用水的pH值及总煎煮时间为考察因素,分子量≤1 000 Da提取物、黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草次酸、总生物碱为指标,将各指标测得值进行标准化处理,并经加权求和后得到综合评判指标Y值,用JYSYSJ软件处理,优化该方药半仿生提取的工艺条件。结果经综合分析评判,优选出二黄汤方药SBE法较佳的工艺条件为：3煎用水的pH值依次为A=3.603 2、B=6.503 9、C=8.765 6,3煎总提取时间为D=4.947 3。结论结合生产实际,确定3煎用水的pH值依次为3.5、6.5、8.8,提取时间依次为2.0 h、1.5 h、1.5 h。验证性试验提取液的综合评价Y′值接近预测值,表明该方药用均匀设计优选出的SBE工艺参数可供在生产中试行。     

苦参半仿生提取液醇沉浓度的优选

目的：优选苦参半仿生提取液的最佳醇沉浓度。方法：采用比例分割法,以苦参碱、氧化苦参碱、苦参总碱、HPLC总面积、干浸膏为指标综合评判,在含醇量30%～80%之间优选半仿生提取液醇沉浓度。结果：醇沉浓度为80%时,综合评价值最大。结论：苦参半仿生提取液的最佳醇沉浓度为80%。     

维生素B12混合液灌胃对放射性肠炎模型大鼠的治疗作用及机制

目的：探讨维生素B12灌胃对放射性肠炎大鼠的治疗作用及机制.方法：将30只雄性SD大鼠随机分为3组,正常对照组（A组）、10Gy剂量照射后给予蒸馏水灌胃处理组（B组）,10Gy剂量照射后给予维生素B12混合液灌胃处理组（C组）,B、C两组连续灌胃5d,采用免疫组织化学SP法染色,在光镜下观察肠腺上皮细胞增殖核抗原（PCNA）的表达,ELISA检测肠组织TNF-α的表达,硝酸还原酶法检测肠组织NO的表达.结果：C组大鼠的肠上皮PCNA阳性细胞数明显多于B组大鼠（P＜0.05）,少于A组大鼠,C组大鼠肠组织的TNF-α、NO的含量明显少于B组模型大鼠（P＜0.05）,多于A组大鼠.结论：VB12混合液可促进急性放射肠炎大鼠直肠上皮细胞的增殖,降低肠组织TNF-α、NO的含量.     

单剂量丙种球蛋白治疗川崎病33例疗效分析

目的：评价单次静脉注射大剂量丙种球蛋白（IVIG）治疗川崎病的临床效果。方法：将65例确诊的川崎病患儿随机分为2组,Ⅰ组予静滴丙种球蛋白400mg/kg·d,连用5天;Ⅱ组予单剂量静滴丙种球蛋白1g/kg,并观察临床疗效及副作用。结果：Ⅱ组的疗效优于Ⅰ组（P〈0.05）,两组的副作用无显著性差异。结论：早期大剂量丙种球蛋白对川崎病患儿临床疗效显著,采用单剂静滴丙种球蛋白1g/kg是一种更为有效、经济、简便的治疗方案。     

正交设计试验法优化“金圣香”中药复方的提取工艺研究

目的：优化“金圣香”中药复方的提取工艺条件。方法：采用正交设计试验法。结果：影响浸提效果的因素主次为混合溶剂（种类）（A）（回流温度（C）（回流时间（B）,混合溶剂（种类）（A）因素有极显著影响,回流温度（C）因素有显著影响,最佳提取条件为A3C3B1,即采用20倍量混合溶剂AⅢ,65℃回流提取2次,每次4h。结论：按正交设计试验法优化的工艺条件提取“金圣香”中药复方,工艺可行,浸膏质量稳定。