应用逆转录套式PCR检测血清丙型肝炎病毒RNA

应用逆转录套式PCR检测了经ELISA检测抗－HCV的86份血清，抗－HCV阳性血清66份，用PCR检测有37份是阳性，阳性符合率为56．1％，抗－HCV阴性血清20份，用PCR检测有8份是阳性，两种方法检测结果总符合率为57．0％。单项ALT升高、HB、HC和血液病患者HCV、RNA阳性率分别为37．5％，55．6％，62．5％和53．8％。用PCR检出HCV－RNA时间早于抗－HCV阳转时间，而且敏感性高于后者，是一种早期、灵敏及特异的HCV感染诊断方法。检测HCV－RNA有助于发现抗－HCV阴性的急、慢性丙型肝炎，根据HCV－RNA的连续检测，结合抗－HCV的消长状态，可用于丙型肝炎的预后判断和干扰素等药物疗效评价指标。     

聚合酶链反应检测献血者血清中的丙型肝炎病毒

聚合酶链反应检测献血者血清中的丙型肝炎病毒３６２０００福建省泉州市中心血站陈惠民泉州市皮肤病性病防治院吴丽惠目前主要用ＥＬＩＳＡ法检测献血者的抗－ＨＣＶ，作为其是否感染上丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的指标，但这不能完全反映献血者的ＨＣＶ感染情况。笔者选用Ｈ...     

逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA

逆转录ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ王捷，杨太成，江悦华，王晓怀（广州军区总医院医学实验科，５１００１０）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是单股正链ＲＮＡ病毒，流行病学研究表明，大约９０％的输血后肝炎均由ＨＣＶ引起，原发性肝癌的发生也与ＨＣＶ感染相关［１］。目前...     

血液透析患者丙型肝炎病毒型特异性PCR基因分型

目的 建立一种丙型肝炎病毒型特异性PCR基因分型方法。方法 对47份血液透析患者HCV RNA阳性的标本,用5’非编码区(5'-NCR)1、2、3、1b型特异性引物,进行逆转录巢式PCR扩增分型。结果 47份HCV RNA样本43例可以分型;优势株为1b亚型,1b及1b相关型占总样本数的87．23％(41／47);7例为混合感染,占可分型数的16．27％(7／43)。结论 本组血液透析患者感染的HCV基因型的分布可能与地区流行及医源性传播有关,其同源性有待核苷酸序列分析加以印证。     

丙型肝炎病毒检测技术的研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）的实验室检测技术主要包括抗体、核酸以及抗原检测。随着对感染过程的研究和临床诊断的需求,这些技术也日趋成熟。新的检测技术灵敏度和特异性更高,并且基因型的影响逐渐被克服。新兴的核酸配体技术将使传统的HCV检测方法发生巨大的改变。     

两种核酸提取方法检测血清丙型肝炎病毒核糖核酸的比较

目的比较两种不同核酸提取方法检测血清丙型肝炎病毒核糖核酸（HcuRNA）对临床诊断的应用价值。方法对128份HcV抗体阳性的患者血清,同时用两种实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测HCV—RNA并检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平,这两种方法分别是用二氧化硅微粒法提取RNA和纯化柱法提取RNA。结果128份HCV抗体阳性的血清中二氧化硅微粒法HCV—RNA阳性率41．41％,纯化柱法HcV—RNA阳性率59．38％,纯化枉法优于二氧化硅微粒法,差异有统计学意义（x2=8．27,P〈0．05）。49份HCV抗体阳性的血清中ALT异常,且ALT浓度变化与纯化柱法HCV—RNA水平呈正相关性（r=0．95,P〈0．05）。结论血清HCV—RNA检测对丙型肝炎诊断和病情监测均有重要的临床意义,采用纯化柱法提取RNA具有更优的临床价值。     

用逆转录—多聚酶链反应检测白血病患者多药耐药基因的表达

作者应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测２５例急性白血病患者骨髓细胞中ｍｄｒ１基因的表达。以Ｋ５６２敏感细胞和体外诱导的耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２分别作为阴性和阳性对照，发现复发和未缓解患者中ｍｄｒ１表达增高者占９０．０％（１０／１１），而初治患者中仅为２１．４％（３／１４），ｍｄｒ１表达增高化疗效果差。应用单克隆抗体ＪＳＢ－１检测Ｐ－１７０结果与ＲＴ－ＰＣＲ一致。此ＲＴ－ＰＣＲ具有高度敏     

RT—PCR检测白血病融合基因的临床意义

本文综述应用逆转录－多聚酶链反应检测白血病融合基因ＡＭＬ１－ＥＴＯ、ＰＭＬ－ＲＡＲα和ＢＣＲ－ＡＢＬ的临床意义。     

探针杂交捕获法检测丙型肝炎病毒核糖核酸

探针杂交捕获法检测丙型肝炎病毒核糖核酸李向阳金嵘李东（温州医学院检验系，浙江温州３２５００３）王升启（军事医学科学院二所）关键词聚合酶链反应丙型肝炎病毒探针丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是ＲＮＡ病毒，引起人类的丙型病毒性肝炎。由于感染后的抗－ＨＣＶ产生缓慢，...     

复合PCR检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，建立了复合ＰＣＲ，并对临床标本进行检测，５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；１０例慢性ＮＡＮＢ抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶ－ＲＮＡ，１例ＨＢＶ－ＤＮＡ和     

固相法分离RAN用于丙型肝炎病毒聚合酶链反应检测

寻找一种简便，稳定，敏感性高，特异性强，且易于推广的ＲＮＡ分离纯化方法，用于丙型肝炎的逆转录０聚合酶链反应检测。应用双功能交联剂在乳胶颗粒上交联１段与ＨＣＶ核酸５‘端非结构区序列互补的探针，制备对ＨＣＶ特异的活化乳胶颗粒。将这种活化微粒混悬在６ｍｏｌ／Ｌ硫氰酸胍中，当待测血清与之混合后，病毒ＲＮＡ释放并与微粒上的探针杂交，极易被分离出来。     

金标渗透法快速检测血清中丙型肝炎病毒抗体

采用基因工程技术克隆表达了丙型肝炎病毒（HCV）－Core-Ns3-Ns4优势表位嵌合抗原，研制出金标渗透法快速检测丙型肝炎病毒抗体试剂，与抗丙型肝炎病毒抗体酶联免疫检测试剂（HCV－ELISA）和重组免疫印迹分析检测试剂（HCV－RIBA3.0)进行了比较，其特异性、敏感性均达到了ELISA试剂水平。     

小儿急性淋巴细胞白血病微量残留病T细胞受体δ基因重排的PCR检测

白血病是造血系统的恶性肿瘤,其中急性淋巴细胞白血病(ＡＬＬ)是儿童最常见的白血病。患儿经初治后,体内仍有少量的残留白血病细胞(108-1010)称微量残留病(ｍｉｎｉｍａｌｒｅｓｉｄｕａｌｄｉｓｅａｓｅ,ＭＲＤ)。这是白血病复发的主要根源,大多数出现于复发期的肿瘤细胞,且与初诊时的肿瘤细胞来源同一克隆。目前普遍认为提高白血病治愈率的关键之一是要彻底地根除ＭＲＤ,但ＭＲＤ用一般形态学检测很难发现。应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术检测急性淋巴细胞性白血病Ｔ细胞受体(ＴＣＲ)克隆性基因重排的研究已有不少报道[1,2]。ＴＣＲ由四条…     

血清与血浆定量检测丙型肝炎病毒的对照研究

目的探讨采用血清和血浆两种标本同时检测丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）感染者HCV病毒含量的差异性。方法同时收集256例HCV感染者血清和血浆标本,采用PCR-荧光探针法（RT-PCR）进行HCV-RNA的定量检测。结果血清HCV-RNA检出率为69.92%（179/256）,血浆的检出率为85.16%（218/256）,差异有统计学意义（χ2=5.25,P〈0.05）。同时对两种标本检测大于103IU/ml的定量结果进行统计分析,差异有统计学意义（P=0.032）。结论采用血浆标本测定HCV-RNA检出率明显高于血清标本,并且分离标本快速,避免溶血和RNaes的影响,值得推广应用。     

逆转录-半套式-聚合酶链反应单管法检测血清中HCV RNA

目的探讨建立一种更简便,更特异灵敏的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)单管法.方法采用蜡隔将RT和PCR扩增2个独立的反应体系在1个Eppendoff(Ep)管中分隔开来,设计内外引物,优化反应体系及条件,使整个检测反应经高温启动继而连续封闭地完成.结果在60例血透析患者血清中,33例(55%)抗-HCV-IgG阳性和27例抗-HCV-IgG阴性血清用单管RT-PCR分别检出28例(85%)和3例(9%)HCV RNA阳性,并对3份阳性PCR产物作核酸序列测定.本方法的检测灵敏度为102拷贝/ml.结论 RT-PCR单管法在保持高灵敏度的前提下,提高了特异性,具有简单高效,杜绝外源性污染等优点.     

丙型肝炎病毒血症与临床关系的研究

丙型肝炎抗体(抗-HCV)及丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)是目前丙型肝炎(HC)诊断的病原学指标，前者在血清中出现较晚且常出现非特异性反应，是间接反映丙型肝炎病毒(HCV)感染或既往感染，而后者可以直接反映患者血清中有无HCV，判断患者是否存在病毒血症．且与患者临床有一定关系。我们运用逆转录套式聚合酶链反应(PCR)检测抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎(CHC)患者血清HCV-RNA．目的是探讨病毒血症与患者临床的关系。     

研究ELISA联合荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒的效果

目的 评估丙型肝炎病毒检测应用酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA）联合荧光定量聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）检测的应用价值。方法 选取2022年8月—2023年8月滕州市疾病预防控制中心接诊的90例疑似丙型肝炎病毒患者为研究对象,采用ELISA联合荧光定量PCR检测,以丙型肝炎病毒（Hepatitis Virus C, HCV）RNA检测结果作为“金标准”,分析检测方式的应用价值。结果 HCV RNA检测结果显示,阳性率为47.78%,ELISA检测的阳性率40.00%,荧光定量PCR检测发现阳性量率42.22%,联合检测的阳性率46.67%。ELISA检测与荧光定量PCR检测在灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值方面比较,差异无统计学意义（P均>0.05）。联合检测的灵敏度为93.02%、准确度为94.44%、阳性预测值为95.24%以及阴性预测值为93.75%,显著高于ELISA检测的67.44%、76.67%、80.56%、74.07%,联合检测的灵敏...     

两种方法对丙型肝炎病毒检测的对比研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）在检测丙型肝炎病毒（HCV）方面的差异。方法 60例确诊为丙型肝炎的住院患者样本作观察组,80例健康体检人群样本作健康对照组,应用FQ-PCR和ELISA分别对这两组样本进行HCV-RNA和抗HCV抗体（抗-HCV）检测。结果 60例观察组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阳性54例和49例,阳性率分别为90%和81.67%,80例健康对照组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阴性80例和77例,阴性率分别为100%和96.25%。结论在检测HCV方面,FQ-PCR比ELISA更具灵敏性和特异性,其结果更加符合患者真实情况,且FQ-PCR检测HCV具有更好的临床应用价值,若两种方法同时使用,则可大大提高临床对丙型肝炎的准确诊断。     

丙型肝炎病毒的结构,检测及献血者丙型肝炎病毒检测的意义

丙型肝炎病毒的检测自１９８９以来有了长足的发展，本文简述了丙型肝炎病毒基因的结构和功能，系统地介绍了丙型肝炎病毒检测手段的发展历程及各种检测方法的优点和局限性，并阐述了对健康献血者进行丙型肝炎病毒检测的意义。     

滴金免疫法检测丙型肝炎病毒抗体

用自行制备的直径１５ｍｍ的胶体金标记ＳＰＡ，建立了检测血清丙型肝炎病毒抗体的滴金免疫测定法。Ａｂｂｏｔｔ抗－ＨＣＶ ＥＩＡ试剂盒对比检测临床标本，符合为９５％。该法简便、快速，整个检测过程只需５分钟，阳性结果在膜上出现红色斑点，易于用肉眼判断。